第10章 吸光光度法3_第1頁
第10章 吸光光度法3_第2頁
第10章 吸光光度法3_第3頁
第10章 吸光光度法3_第4頁
第10章 吸光光度法3_第5頁
已閱讀5頁,還剩26頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

10.5其它吸光光度分析法10.5.1目視比色法用眼睛觀察比較溶液顏色深淺,以確定物質(zhì)的含量。優(yōu)點(diǎn):簡便,靈敏度高。缺點(diǎn):準(zhǔn)確度差未知樣品標(biāo)準(zhǔn)系列c1c2c3c4c5觀察方向空白pH試紙、糖試紙、蛋白試紙10.5.2示差光度法高濃度示差光度法(測高含量組分)A>0.8√低濃度示差光度法(測低含量組分)A<0.2高濃度示差光度法的原理:用濃度稍低于待測液的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比(c0<cx),調(diào)A=0,測量試液的吸光度A相對(duì),求cxAx=εbcxA0=εbc00A△cCx=C0+△cA相對(duì)=△A=Ax-A0=εb(cx-c0)=εb△c

(10-8)思考:

A<0.2時(shí),如何測定例2.用硅鉬藍(lán)法測SiO2,以一含SiO20.016mg.mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比,測定另一含有0.100mg.mL-1SiO2的溶液,得T=14.4%,現(xiàn)有一未知濃度的SiO2試液,在相同條件下,測得T=31.38%,求試液中SiO2含量。解:設(shè)試液中SiO2的含量為xmg.mL-1A1=εb(0.100-0.016)=-lgT1=-lg14.4%A2=εb(x-0.016)=-lgT2=-lg31.8%兩式相除:X=0.066mg.mL-110.5.2示差光度法思考:示差法為什么能提高測量結(jié)果的準(zhǔn)確度?常規(guī)法示差法TxT051050100

落在測量誤差較大的范圍T051050100Tx/TS

落在測量誤差較小的范圍結(jié)論:示差法測量的吸光度A落在測量誤差較小的范圍內(nèi),因而準(zhǔn)確度提高。示差法的測定誤差<0.5%標(biāo)尺擴(kuò)大倍數(shù)作業(yè):P3388,9,1310.5其它吸光光度分析法10.5.3

雙波長吸光光度法1、基本原理只用一個(gè)樣品池光源單色器1單色器2檢測器切光器狹縫吸收池設(shè)測量波長λ1和參比波長λ2的光強(qiáng)度相等,則:當(dāng)λ1和λ2接近時(shí),則:背景吸收Ab1≈Ab2(10-10)∴△A∝c定量分析依據(jù)λ1λ22、雙波長吸光光度法的優(yōu)點(diǎn)以試液本身對(duì)某波長光的吸收作參比,消除了背景吸收、光散射及兩個(gè)吸收池不匹配引起的誤差,提高了測量的選擇性和準(zhǔn)確度。3、雙波長吸光光度法的應(yīng)用渾濁試液中組分的測定(2)單組分的測定(3)兩組分共存時(shí)的分別測定10.5其它吸光光度分析法A21XY例:Y

共存時(shí),測定X干擾組分有等吸收λ1和λ2的選擇:是關(guān)鍵要求:待測組分的△A足夠大,△λ要盡量小,以提高精密度。

測量波長-λmaxMR等吸收點(diǎn)法消除了y對(duì)x的干擾10.5其它吸光光度分析法XY122/A/nmX-苯酚;Y—2,4,6三氯苯酚例:測定苯酚兩個(gè)等吸收點(diǎn):λ2

,λ2/λ2更接近λ1→精密度好測量波長—λ1參比波長—λ210.5其它吸光光度分析法練習(xí):P33915T分別測x、y測x:測量波長λ1,參比波長λ2測y:測量波長λ1/,參比波長λ2/要求:干擾組分必須有吸收峰A0YX…1/………………2/….………………......1……………..210.5其它吸光光度分析法10.5.4

導(dǎo)數(shù)光度分析法在雙波長分光光度計(jì)上,將不同波長的兩束單色光λ1和λ2同時(shí)快速交替掃描,并保持Δλ不變,可獲得一階導(dǎo)數(shù)光譜:1、導(dǎo)數(shù)分光光度法的原理—吸收曲線的斜率10.5其它吸光光度分析法將A=εbc對(duì)λ進(jìn)行n次求導(dǎo),得:A和ε與λ有關(guān)A的各階導(dǎo)數(shù)值∝C待測,且在ε的n階導(dǎo)數(shù)值最大時(shí)靈敏度最高——導(dǎo)數(shù)光譜法定量分析的基礎(chǔ)。10.5其它吸光光度分析法n階導(dǎo)數(shù)光譜:an=0bc二階導(dǎo)數(shù)d三階導(dǎo)數(shù)一階導(dǎo)數(shù)…………......……….….....e四階導(dǎo)數(shù)特點(diǎn):(1)吸收曲線上的最大吸收對(duì)應(yīng)于奇數(shù)階導(dǎo)數(shù)光譜中的零,對(duì)應(yīng)于偶數(shù)階導(dǎo)數(shù)光譜中的極值(極大或極?。?。

(2)隨著n增大,峰形變尖銳,峰數(shù)和谷數(shù)增加。使分辨率提高,信噪比減小。常用二階導(dǎo)數(shù)光譜10.5其它吸光光度分析法2、導(dǎo)數(shù)光譜法的優(yōu)點(diǎn)將吸光度看作一個(gè)冪函數(shù),有干擾組分時(shí),據(jù)吸光度的加和性:

A=C0+C1λ+C2λ2+C3λ3+…+Uλn(1)(C為常數(shù))對(duì)λ求導(dǎo):A′=C1+2C2λ+3C3λ2+…+U′λn-1

(2)

即一個(gè)線性背景干擾被消除了。A〞=2C2+6C3λ+U〞λn-2

(3)

則C0+C1λ項(xiàng)消失了,余類推。

即較高階的導(dǎo)數(shù)消除了階次較低的背景干擾。(1)消除背景干擾有渾濁背景時(shí),用一階導(dǎo)數(shù)消除干擾。高渾濁樣品,用二階以上導(dǎo)數(shù)消除干擾。10.5其它吸光光度分析法(2)提高靈敏度及放大弱吸收峰

經(jīng)過求導(dǎo)后,微弱吸收帶被顯著地放大。(3)提高選擇性

對(duì)相互重疊的吸收峰,求導(dǎo)后各峰的半峰寬減小,相互之間的差別增大,大大提高了選擇性。(4)能確認(rèn)寬闊吸收帶的λmax

導(dǎo)數(shù)階數(shù)越高,吸收峰越尖銳,帶寬減小,故能準(zhǔn)確的找到λmax。導(dǎo)數(shù)光度法能解決干擾物質(zhì)的吸收光譜重疊、消除膠體和懸浮散射影響及背景吸收,提高了光譜的分辨率。10.5其它吸光光度分析法3、導(dǎo)數(shù)光譜法峰值的測量

dA/dλ∝C待測,從導(dǎo)數(shù)光譜上測出峰值,即可定量。ptz(1)峰谷法:測量兩相鄰峰與谷之間的距離p,作為峰值進(jìn)行定量(常用)。

(2)基線法(正切法):對(duì)相鄰兩個(gè)極大峰或極小峰作公切線,測量中間極值至切線的距離t。(3)峰零法:極值到基線間的距離Z(適于對(duì)稱的導(dǎo)數(shù)光譜)。10.5其它吸光光度分析法特別適合于化學(xué)性質(zhì)相似的無機(jī)元素的測定、渾濁樣品分析(不受波長范圍的限制)、痕量組分的分析等。4、導(dǎo)數(shù)光譜法的應(yīng)用10.5其它吸光光度分析法10.6吸光光度法的應(yīng)用10.6.1試樣中微量組分的測定微量鐵的測定鄰二氮菲法總磷的測定在HNO3介質(zhì)中,與鉬酸銨生成磷鉬藍(lán)法蛋白質(zhì)的測定考馬斯亮藍(lán)法氨基酸的測定茚三酮法(紫色化合物)1、單組分測定

A-c曲線法AC………..………CxAx2、多組分的測定AABAB利用吸光度的加和性:解聯(lián)立方程得cA、cB分別由純A、純B在λA和λB處測A后計(jì)算求出。10.6吸光光度法的應(yīng)用10.6.2弱酸和弱堿離解常數(shù)的測定HA?H++A-HAAAAHAAA=AHA+AA-AHA和AA-分別為有機(jī)弱酸HA在強(qiáng)酸和強(qiáng)堿性時(shí)的吸光度,它們此時(shí)分別全部以[HA]或[A-]形式存在。pKa=pH+lg

AA--AA-AHAlg

AA--AA-AHA對(duì)pH作圖即可求得pKa

配制一系列不同pH,濃度C相同的溶液1、半中和法在HA

處測吸光度pH<pKa-1C≈[HA]pH>pKa+1C≈[A-]pH=pKa[HA]/[A-]=1時(shí)測得A2測得A1A′ApHA2A1pKa

b=1cm令HA在高酸度時(shí)吸光度為AHA,則cHA≈[HA]2、截距法P335為HA在強(qiáng)堿性時(shí)的吸光度,則cHA≈[A-](10-9)代入上式整理得:先配制一系列總濃度c相同而pH不同的HA溶液,分別用酸度計(jì)精確測出pH,再用光度計(jì)在酸式HAor堿式A-有最大吸收處的波長處測出各溶液ApH直線截距為pKa10.6吸光光度法的應(yīng)用10.6.3絡(luò)合物組成的測定1、摩爾比法(飽和法)M+nR?MRn1:13:1c(R)/c(M)A1.02.03.0

MR3MR固定cM,從0開始增大cR測A,求絡(luò)合比。固定cM+cR=C(常數(shù)),連續(xù)改變cR/cM,測A。2、等摩爾連續(xù)變化法(Job)00.51.0ACM/CMR01.0ACM/C0.33MR2兩曲線外推交于一點(diǎn),對(duì)應(yīng)cR/cM=n10.6.3絡(luò)合物組成的測定3、絡(luò)合物穩(wěn)定常數(shù)的測定絡(luò)合物離解使A<A000.51.0ACM/CA0實(shí)測M+R?MR離解度練習(xí):P33914T解:ZrO2++2R?ZrOR2(注:如顯色劑總濃度是2.5×10-5,則c=1.25×10-5)10.6吸光光度法的應(yīng)用作業(yè):P3386第10章吸光光度法小結(jié)1、了解物質(zhì)顏色產(chǎn)生的原因及吸收光譜。λ與C無關(guān)2、吸光光度法的基本原理-光電效應(yīng),檢測透過光的強(qiáng)度掌握朗伯-比爾定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式及有關(guān)計(jì)算A=εbc=-lgT靈敏度:摩爾吸光系數(shù)

εL.mol-1.cm-1

;吸光系數(shù)aL.g-1.cm-1

;S;與λ有關(guān)3、顯色條件的選擇:酸度、濃度、溫度、時(shí)間4、掌握光度測量條件的選擇

波長:吸收最大,干擾最小;A=0.2-0.8

;參比溶液5、理解偏離朗伯-比爾定律的原因。當(dāng)T=36.8%orA=0.434時(shí),濃度測量相對(duì)誤差最小6、掌握示差法的原理、計(jì)算。理解示差法能提高測量結(jié)果準(zhǔn)確度的原因。7、理解光度法測定弱酸、弱堿離解常數(shù)和絡(luò)合物穩(wěn)定常數(shù)的原理和方法。8、了解雙波長、導(dǎo)數(shù)光度法的原理。第10章吸光光度法小結(jié)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論