第七章 確認(rèn)與驗(yàn)證

第七章確認(rèn)與驗(yàn)證確認(rèn)—證明廠房、設(shè)施、設(shè)備和檢驗(yàn)儀器能正確運(yùn)行并可達(dá)到預(yù)期結(jié)果的一系列活動(dòng)。驗(yàn)證—證明任何操作規(guī)程（或方法）、檢驗(yàn)方法、生產(chǎn)工藝或系統(tǒng)能達(dá)到預(yù)期結(jié)果的一系列活動(dòng)。驗(yàn)證與確認(rèn)的關(guān)系驗(yàn)證和確認(rèn)本質(zhì)上是相同的概念確認(rèn)通常用于廠房、設(shè)施、設(shè)備和檢驗(yàn)儀器驗(yàn)證則用于操作規(guī)程（或方法）、生產(chǎn)工藝或系統(tǒng)第一節(jié)驗(yàn)證的概念和分類(lèi)一、驗(yàn)證的概念20世紀(jì)50年代，美國(guó)出現(xiàn)輸液導(dǎo)致敗血癥的事故，到了70年代，該類(lèi)案件進(jìn)一步增多。1972年，英國(guó)發(fā)生德旺波特事故。美國(guó)FDA檢查后發(fā)現(xiàn)，藥廠在生產(chǎn)過(guò)程中和質(zhì)量控制過(guò)程中明顯達(dá)不到GMP規(guī)定。70年代，美國(guó)友FDA現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)發(fā)展成為過(guò)程驗(yàn)證，并逐步在制藥業(yè)中得到了共識(shí)。早期驗(yàn)證主要強(qiáng)調(diào)對(duì)滅菌工序的驗(yàn)證，1978年美國(guó)FDA公布《藥品工藝檢查驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)》，提出工藝驗(yàn)證概念。1987年，美國(guó)FDA發(fā)布《藥品生產(chǎn)工藝驗(yàn)證總則指南》。驗(yàn)證就是證明任何程序、生產(chǎn)過(guò)程、設(shè)備、物料、活動(dòng)或系統(tǒng)確實(shí)能“達(dá)到預(yù)期”效果的有“文件證明”的一系列活動(dòng)。驗(yàn)證的是GMP的理論基礎(chǔ)，驗(yàn)證的思想與GMP的中心思想是一致的。預(yù)期效果預(yù)期的效果是一個(gè)定量值，而且是符合規(guī)定的通用標(biāo)準(zhǔn)值，而不是企業(yè)自己的標(biāo)準(zhǔn)。形成文件驗(yàn)證過(guò)程中的各項(xiàng)活動(dòng)要形成文件，包括驗(yàn)證計(jì)劃、驗(yàn)證方案、測(cè)試記錄、驗(yàn)證報(bào)告等。驗(yàn)證的意義驗(yàn)證是藥品生產(chǎn)企業(yè)實(shí)施GMP的基礎(chǔ)。驗(yàn)證可提高企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。及時(shí)糾正偏差，提高人員的安全保障減少對(duì)半成品和成品的檢驗(yàn)依賴性減少?gòu)U品、返工和投訴二、驗(yàn)證的分類(lèi)按驗(yàn)證方式（實(shí)施時(shí)間）：前驗(yàn)證、同步驗(yàn)證、回顧性驗(yàn)證、再驗(yàn)證。按驗(yàn)證對(duì)象：廠房設(shè)施與設(shè)備的驗(yàn)證、產(chǎn)品工藝驗(yàn)證、分析方法驗(yàn)證、清潔驗(yàn)證。（一）前驗(yàn)證1．設(shè)計(jì)確認(rèn)2．安裝確認(rèn)3．運(yùn)行確認(rèn)4．性能確認(rèn)（二）同步驗(yàn)證同步驗(yàn)證系指在系統(tǒng)或工藝等常規(guī)運(yùn)行的同時(shí)進(jìn)行的驗(yàn)證。也就是從活動(dòng)進(jìn)行過(guò)程中獲得的數(shù)據(jù)作為分析和評(píng)價(jià)的依據(jù)，以證明系統(tǒng)或活動(dòng)達(dá)到預(yù)計(jì)要求的活動(dòng)。采用這種驗(yàn)證方式的先決條件為：應(yīng)有完善的取樣計(jì)劃，生產(chǎn)及工藝條件的監(jiān)控比較充分，有經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法，方法的靈敏度及選樣性等比較好，對(duì)所驗(yàn)證的產(chǎn)品或工藝已有相當(dāng)?shù)慕?jīng)驗(yàn)及把握。（三）回顧性驗(yàn)證回顧驗(yàn)證系指利用對(duì)現(xiàn)有的歷史數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，收集證據(jù)，以證明程序、生產(chǎn)過(guò)程、設(shè)備、物料、活動(dòng)或系統(tǒng)達(dá)到預(yù)期要求的行為。適用情況：①關(guān)鍵質(zhì)量屬性和關(guān)鍵工藝參數(shù)均已確定；②已確立了合適的中間控制和認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)；③從來(lái)沒(méi)有因?yàn)槌瞬僮魅藛T失誤或設(shè)備故障這些與設(shè)備適應(yīng)性無(wú)關(guān)的因素之外的原因而造成值得注意的生產(chǎn)過(guò)程或產(chǎn)品的不合格；④現(xiàn)有成品的雜質(zhì)情況已確定。（四）再驗(yàn)證再驗(yàn)證是指指工藝、程序、系統(tǒng)、設(shè)備經(jīng)過(guò)驗(yàn)證并在使用一個(gè)階段以后，以及某些要素發(fā)生改變時(shí)所進(jìn)行的驗(yàn)證。目的在于證實(shí)已驗(yàn)證狀態(tài)沒(méi)有發(fā)生飄移而進(jìn)行的驗(yàn)證。第二節(jié)廠房設(shè)施與設(shè)備的驗(yàn)證一、設(shè)計(jì)確認(rèn)企業(yè)根據(jù)藥品生產(chǎn)的實(shí)際情況，對(duì)生產(chǎn)所用的設(shè)備設(shè)計(jì)和選型，從設(shè)備的價(jià)格、性能及設(shè)定的參數(shù)等方面加以考查，寫(xiě)出論證報(bào)告，經(jīng)審核批準(zhǔn)，選定供應(yīng)廠商。二、安裝確認(rèn)對(duì)設(shè)備性能參數(shù)、安裝環(huán)境和安裝過(guò)程進(jìn)行確認(rèn)，在設(shè)備安裝后進(jìn)行各種系統(tǒng)檢查及技術(shù)資料的文件化工作。三、運(yùn)行確認(rèn)通過(guò)單機(jī)試車(chē)和系統(tǒng)試車(chē)確定設(shè)備的運(yùn)行是否符合設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。主要考察：SOP草案的適用性設(shè)備運(yùn)行參數(shù)的波動(dòng)性儀表可靠性設(shè)備運(yùn)行的穩(wěn)定性四、性能確認(rèn)模擬實(shí)際生產(chǎn)情況，一般先用空白料進(jìn)行試車(chē)，以確定設(shè)備的適用性。第三節(jié)分析方法的驗(yàn)證一、分析方法驗(yàn)證的概念是指對(duì)藥品生產(chǎn)過(guò)程中所使用的檢測(cè)方與分析方法進(jìn)行驗(yàn)證，證明這些方法確實(shí)能達(dá)到預(yù)期檢驗(yàn)?zāi)康?。二、分析方法?yàn)證的內(nèi)容1、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度指用該方法檢測(cè)結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以百分回收率表示。2、精密度精密度指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。 重復(fù)性中間精密度重現(xiàn)性3、專屬性專屬性指在其他成分可能存在的情況下，對(duì)被分析物進(jìn)行準(zhǔn)確可靠測(cè)定的能力。如何排除雜質(zhì)干擾？4、檢測(cè)限度：樣品中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。5、定量限度：樣品中被測(cè)物能被測(cè)定的最低量。6、線性性：指在給定范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與樣品中被測(cè)物濃度呈正比的程度。7、范圍：測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。第四節(jié)無(wú)菌工藝驗(yàn)證注射劑的風(fēng)險(xiǎn)風(fēng)險(xiǎn)1-微生物污染風(fēng)險(xiǎn)2-熱原的污染風(fēng)險(xiǎn)3-不溶性微粒風(fēng)險(xiǎn)4-純度其他風(fēng)險(xiǎn)：安全性（組織的刺激性，毒性發(fā)應(yīng)）、滲透壓、pH。一、無(wú)菌工藝驗(yàn)證概述最終滅菌工藝先將藥品的各個(gè)部件（產(chǎn)品，容器和密封件）在符合要求的環(huán)境下組成最終的包裝形式，最后讓產(chǎn)品在其最終容器中進(jìn)行滅菌處理。無(wú)菌生產(chǎn)工藝藥品的各個(gè)部件（產(chǎn)品，容器和密封件）分別經(jīng)過(guò)滅菌處理，再在高潔凈度的環(huán)境中組裝最終產(chǎn)品，但產(chǎn)品裝入其最終容器后不再進(jìn)行滅菌處理。相對(duì)于最終滅菌工藝，無(wú)菌生產(chǎn)工藝易受到多方面因素的影響，產(chǎn)品的無(wú)菌性非常脆弱，生產(chǎn)難度更高，且需承擔(dān)的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)也更大。無(wú)菌工藝驗(yàn)證是實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品無(wú)菌保證的關(guān)鍵。無(wú)菌生產(chǎn)系統(tǒng)28消毒劑滅菌設(shè)備清洗設(shè)備蒸汽滅菌干熱滅菌水預(yù)處理純蒸汽發(fā)生器高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)域混合灌裝其他VHP,EO發(fā)生器凍干機(jī)最終滅菌壓縮空氣無(wú)菌檢測(cè)無(wú)菌工藝驗(yàn)證是指證明按照預(yù)定的工藝規(guī)程使用的設(shè)備和包裝材料能夠始終如一的生產(chǎn)出符合要求的無(wú)菌產(chǎn)品，從而確認(rèn)無(wú)菌生產(chǎn)工藝系統(tǒng)的可靠性和適用性。最為常用的無(wú)菌工藝驗(yàn)證方法是培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)，即采用正常生產(chǎn)的灌裝程序，用培養(yǎng)基代替產(chǎn)品灌封來(lái)模擬無(wú)菌灌裝操作的無(wú)菌性。二、無(wú)菌工藝驗(yàn)證要點(diǎn)1、培養(yǎng)基選擇無(wú)抑菌作用較好的澄明度易于滅菌2、最劣工況理念最劣工況的目的是有意對(duì)工藝、系統(tǒng)、設(shè)備在更高的挑戰(zhàn)條件下進(jìn)行驗(yàn)證。儲(chǔ)存時(shí)間灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲(chǔ)罐、無(wú)菌物料、藥液在實(shí)際灌裝前能夠放置的最長(zhǎng)時(shí)間例1:用需要再滅菌前的灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲(chǔ)罐、無(wú)菌物料參與培養(yǎng)基灌裝例2:無(wú)菌過(guò)濾后存放在儲(chǔ)罐內(nèi)的培養(yǎng)基到實(shí)際生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)品的最大儲(chǔ)存時(shí)間后再灌裝無(wú)菌灌裝時(shí)間在培養(yǎng)基灌裝中模擬用時(shí)最長(zhǎng)的瓶子滿批量生產(chǎn)需要的時(shí)間，其中包括正常的干擾時(shí)間（換班、設(shè)備維修）。灌裝速度和瓶子規(guī)格最慢的速度，最大的瓶子規(guī)格最小的瓶子規(guī)格，最快的速度人員培養(yǎng)基灌裝時(shí)模擬無(wú)菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)無(wú)菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝操作干擾正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測(cè)）。非正常的（設(shè)備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）。干擾的次數(shù)應(yīng)該不少于正常生產(chǎn)時(shí)發(fā)生的次數(shù)。工藝氣體使用氮?dú)獾?，因考慮其不利于微生物生長(zhǎng)，以壓縮空氣代替。3、驗(yàn)證規(guī)模污染率低于0.1%計(jì)算公式：實(shí)際污染率=(95%置信限值)/(灌封容器數(shù))×100%污染瓶數(shù)與95%置信限值間的關(guān)系污染瓶數(shù)01234567891095%置信限值34.746.37.759.1510.5111.8413.1514.4315.7116.964、驗(yàn)證次數(shù)初次驗(yàn)證，至少要連續(xù)成功灌封3個(gè)批次。再驗(yàn)證，至少需要成功灌封1個(gè)批次。5、培養(yǎng)基罐裝試驗(yàn)流程將培養(yǎng)基暴露于設(shè)備、容器膠塞密封系統(tǒng)的表面和關(guān)鍵環(huán)境條件中，并模擬實(shí)際生產(chǎn)完成工藝操作。對(duì)裝有培養(yǎng)基的密閉容器進(jìn)行培養(yǎng)以檢查微生物的生長(zhǎng)。評(píng)價(jià)結(jié)果，確定實(shí)際生產(chǎn)中（如灌裝前的調(diào)試、加入無(wú)菌原輔材料、無(wú)菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的可能性。

6、環(huán)境監(jiān)測(cè)空氣凈化系統(tǒng)的驗(yàn)證（溫濕度，壓差，空氣流向，風(fēng)速，高效過(guò)濾器泄漏測(cè)試）環(huán)境性能測(cè)試（靜態(tài)＋動(dòng)態(tài)）懸浮粒子和恢復(fù)速率測(cè)試

微生物測(cè)試：空氣浮游菌，沉降菌，表面微生物人員監(jiān)測(cè)7、樣品收集與培養(yǎng)微生物浸泡法：將鋁蓋去除;倒置于菌懸液中4小時(shí);取出后消毒外表面;20-25℃和30-35℃分別培養(yǎng)7天，共14天，每天觀察生長(zhǎng)情況。菌液待確認(rèn)密封口支架培養(yǎng)基容器8、結(jié)果評(píng)價(jià)與失敗調(diào)查灌封量<5000瓶時(shí)，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查，并重新驗(yàn)證(3批)。灌封量為5000-10000瓶時(shí)，若有1瓶污染，視調(diào)查結(jié)果決定是否需要重新進(jìn)行1批培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)；若有兩瓶污染，必須重新驗(yàn)證（3批），同時(shí)進(jìn)行徹底調(diào)查。灌封量>10000瓶時(shí)，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查；若有兩瓶污染，必須進(jìn)行徹底調(diào)查，并重新驗(yàn)證（3批）。第五節(jié)清潔驗(yàn)證清潔驗(yàn)證就是指對(duì)廠房設(shè)施、設(shè)備儀器和容器具清潔所使用的規(guī)程，也稱為清潔規(guī)程進(jìn)行驗(yàn)證，確認(rèn)其效果有效、穩(wěn)定。建立清潔標(biāo)準(zhǔn)建立取樣方法建立檢驗(yàn)方法建立數(shù)據(jù)分析方法一、清潔驗(yàn)證工作階段開(kāi)發(fā)階段—制定清潔規(guī)程；方案準(zhǔn)備階段—確定最難清除物質(zhì)、取樣點(diǎn)、最大殘留量標(biāo)準(zhǔn)等；方案實(shí)施階段—開(kāi)展試驗(yàn)、獲得數(shù)據(jù)、評(píng)價(jià)結(jié)果、得出結(jié)論、確立規(guī)章；監(jiān)控及在驗(yàn)證階段—投入運(yùn)行的清潔方法監(jiān)控，有變更的實(shí)行表更管理，并確定在驗(yàn)證的周期。二、清潔方法的選定1、清潔方式手工清潔：人工持清潔工具，按預(yù)定的要求清洗設(shè)備，根據(jù)目測(cè)清潔的程度，直至清潔完成。自動(dòng)清潔：由自動(dòng)化的專門(mén)設(shè)備按一定的程序自動(dòng)完成整個(gè)清潔過(guò)程的方式。清潔方式選用自動(dòng)清潔：設(shè)備體積龐大、內(nèi)表面光滑無(wú)死角，生產(chǎn)使用的物料或產(chǎn)品易溶，如大容量注射劑的配制系統(tǒng)。手工清潔：設(shè)備死角較多，產(chǎn)品易粘結(jié)、易結(jié)塊注射劑的罐裝機(jī)、膠囊填充機(jī)及制粒機(jī)、壓片機(jī)。2、清潔規(guī)程清潔規(guī)程規(guī)定每臺(tái)設(shè)備的清洗程序，從而保證每個(gè)操作人員都能以可重復(fù)的方式對(duì)其進(jìn)行清洗，并獲得相同的清潔效果。清潔規(guī)程要點(diǎn)拆卸應(yīng)規(guī)定清潔一臺(tái)設(shè)備需要拆卸的程度。如大容量注射劑的灌裝機(jī)、一步制粒機(jī)在清潔前需要預(yù)先拆卸到一定程度。小針的灌裝機(jī)可以完全拆卸。預(yù)洗預(yù)洗的目的是除去大量的（可見(jiàn)的）殘余產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個(gè)基本一致的起始條件。水質(zhì)要求：飲用水清洗用清潔劑以一定的程序除去設(shè)備上看不到的產(chǎn)品。為提高清洗效率，可采用多步清洗的方式。水質(zhì)要求：飲用水、純化水淋洗用水淋洗設(shè)備表面，以除去設(shè)備上看不到的清潔劑。水質(zhì)要求：純化水、注射用水。干燥對(duì)于須暴露保存的設(shè)備，應(yīng)進(jìn)行干燥；對(duì)于經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的清潔程序，如果設(shè)備淋洗后要進(jìn)行滅菌處理，或是高溫?zé)o菌的注射用水淋洗并保持密閉的設(shè)備可不進(jìn)行干燥。檢查經(jīng)清潔驗(yàn)證程序的清洗的設(shè)備，可通過(guò)目檢方式進(jìn)行檢查，如目檢發(fā)現(xiàn)殘留物，向負(fù)責(zé)人匯報(bào)以采取糾偏措施。儲(chǔ)存、裝配規(guī)定已清潔設(shè)備和部件的儲(chǔ)存條件和最長(zhǎng)儲(chǔ)存時(shí)間，防止再次污染。規(guī)定被拆卸部件重新裝配的各步操作。3、選用清潔劑原則安全、無(wú)危害性、無(wú)毒性溶解性好，易被純水去除低發(fā)泡的經(jīng)濟(jì)實(shí)惠成份明確符合食品標(biāo)準(zhǔn)或相關(guān)法規(guī)清潔劑水溶性清潔劑水:水溶性制劑堿性清潔劑，如NaOH溶液、表面活性劑:油性制劑弱堿溶液，如Na2CO3、NaHCO3:弱酸性制劑弱酸溶液:弱堿性制劑清潔劑有機(jī)溶劑清潔劑乙醇易揮發(fā)的溶劑三、清潔驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)1、最難清潔物質(zhì)通常以各組分中最難溶解的物質(zhì)作為最難清潔物質(zhì)?；钚猿煞秩芙舛确浅Ｐ〉妮o料溶解度最小的活性成分2、最難清潔部位和取樣點(diǎn)取樣點(diǎn)選擇原則：最難清潔的部位流動(dòng)為層流部位設(shè)備內(nèi)部死角清潔劑不易接觸的部位容易吸附殘留物的部位壓力、流速迅速變化處3、殘留物限度的確定確立殘留物限度時(shí)隔復(fù)雜的問(wèn)題，由于設(shè)備和產(chǎn)品差別太大，F(xiàn)DA無(wú)通用標(biāo)準(zhǔn)，但是，驗(yàn)證過(guò)程必須要求有明確的殘留物限度。濃度限度（10ppm）上一批產(chǎn)品的殘留質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中所致的濃度不得高于10ppm合理性：一般分析方法能檢測(cè)，非高活性產(chǎn)品足夠安全，適用于液體制劑、原料。生物學(xué)活性限度MTDD/1000MTDD為藥品注冊(cè)必備數(shù)據(jù)，經(jīng)過(guò)多期臨床驗(yàn)證充分考慮了個(gè)體差異符合GMP足夠安全的理念適用于各種復(fù)雜情況如特殊表面特別適用于高活性物質(zhì)舉例A產(chǎn)品B產(chǎn)品備注每日使用1-5片每片5mg最低日治療劑量：5mgx1片=5mg每日使用2-6片每片重0.5g每日最多使用制劑數(shù)為6片，即3g最低日劑量1/1000計(jì)算：5mgx1片x1/1000=5μgA產(chǎn)品為先加工產(chǎn)品，5mg是成品中主藥的含量B產(chǎn)品為后續(xù)加工產(chǎn)品應(yīng)控制的限度：5μg(A)/3g(B)=1.7μg(A)/g(B)肉眼觀察限度經(jīng)驗(yàn)定性標(biāo)準(zhǔn)用于已驗(yàn)證設(shè)備的日常監(jiān)控4、微生物含量限度以滿足生產(chǎn)和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)為出發(fā)點(diǎn)。以大輸液滅菌前帶菌量限度100CFU/100ml為例：最終淋洗液樣品10CFU/100ml設(shè)備表面微生物限度Lm計(jì)算Lm=殘留微生物總量M/總表面積S/安全因子FM=100cfu/100mlX最小批量B（kg