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文檔簡介

實驗一、生物化學實驗規(guī)則及基本知識一、實驗基本知識與操作規(guī)則二、實驗目的三、實驗室規(guī)則四、實驗記錄與實驗報告五、實驗成績評分辦法量器的認識和使用一、移液管的使用

移液管是一種量出式儀器,只用來測量它所放出溶液的體積。它是一根中間有一膨大部分的細長玻璃管。其下端為尖嘴狀,上端管頸處刻有一條標線,是所移取的準確體積的標志。常用的移液管有5,10,25,和50mL等規(guī)格。通常又把具有刻度的直形玻璃管稱為吸量管。常用的吸量管有1,2,5,和10mL等規(guī)格。移液管和吸量管所移取的體積通??蓽蚀_到0.01mL。

一、實驗基本知識與操作規(guī)則量器的認識和使用移液管的使用方法移取溶液時,用右手的大拇指和小指捏著移液管頸的上方,將其末端插入溶液中,左手拿洗耳球,先把球中空氣壓出,再將球的尖嘴接在移液管上口,慢慢松開壓扁的洗耳球使溶液吸入管內(nèi)。當液面升高到刻線以上時,移去洗耳球,立即用右手食指堵住上口。將移液管提出液面,使其保持垂直,同時末端靠在容器的內(nèi)壁上,為此可使容器略傾斜。然后略為放松食指,并輕輕捻動管身,使液面緩慢下降,當溶液的彎月面下沿恰與刻線相切時,立即用食指壓緊上口,使溶液不再流出。將移液管取出并插入承接容器中。為保持其垂直并使末端靠在容器內(nèi)壁,可使承接容器略傾斜。松開食指,讓管內(nèi)溶液自然地全部沿容器壁流下。全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管,以便使附著在管壁的部分溶液得以流出。如果移液管未標明“吹”字,則殘留在管尖末端內(nèi)的溶液不可吹出,因為移液管所標定的量出容積中并未包括這部分殘留溶液。量器的認識和使用移液管的洗滌使用移液管前,應先用鉻酸洗液潤洗,以除去管內(nèi)壁的油污。然后用自來水沖洗殘留的洗液,再用蒸餾水洗凈。洗凈后的移液管內(nèi)壁應不掛水珠。移取溶液前,應先用濾紙將移液管末端內(nèi)外的水吸干,然后用欲移取的溶液涮洗管壁2至3次,以確保所移取溶液的濃度不變。

二、微量加樣器的使用微量加樣器又稱微量移液器、微量進樣器。其下端為可裝卸、可更換的尖管形移液嘴(吸頭),上方是控制采樣的推進按鈕。

有固定式和可調(diào)式兩種類型,規(guī)格有μl級、ml級。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,微量移液器已成為生物化學實驗中的重要工具。這類移液器有準確、可連續(xù)操作和方便等特點。量器的認識和使用工作原理微量加樣器利用排代原理由活塞的定程運動形成負壓吸入定量的液體,其吸液量由活塞在活塞套內(nèi)移動的距離來確定,再按下按鈕使活塞向下移動,排出活塞腔內(nèi)的氣體而將吸頭內(nèi)的液體排出。1.選擇在移液范圍內(nèi)的加樣器,若為可調(diào)式則先將容量調(diào)節(jié)到所需的容量上。2.將吸頭套在加樣器的下端,輕輕轉(zhuǎn)動后牢固地套上,確保密封。3.正式使用前需連續(xù)按動數(shù)次(不吸液體),以保持腔內(nèi)外氣壓一致。4.用手垂直握住加樣器,拇指將按鈕壓至第一停點(第一檔位),并將吸頭浸入到液面下1~3mm,再緩慢地放松按鈕使之復位,等待1~2s后從液體中取出時拖靠掉吸頭外部殘液于被取出的容器內(nèi)壁中。注意避免吸頭與其他任何東西碰撞。5.將吸頭移到加樣容器內(nèi)壁上,輕輕地將按鈕壓至第一停點將液體排出,等待1~2s,再把按鈕壓至第二停點(第二檔位),排盡全部液體后,吸頭應沿容器壁向上滑動取出,此時拖靠吸頭內(nèi)部殘液于加樣容器內(nèi)壁中。再放松按鈕使之復位,卸下吸頭,完成一次操作過程。操作方法量器的認識和使用微量移液器的使用注意事項⑴吸取液體時,只推至第1檔,釋放液體時,推至第1檔后停1~2秒后推至第2檔。⑵使用完之后,一定要把移液器調(diào)回最大量程,以免壓縮彈簧導致彈簧不能回復。⑶移液器必須卸掉槍頭后才能放到移液器架上。常用玻璃儀器的洗滌與干燥1.初用玻璃儀器的清洗新購買的玻璃儀器表面常附著有堿性物質(zhì),可先用洗滌靈稀釋液,肥皂水或去污粉等洗刷,再用自來水洗凈,然后浸泡在1%-2%鹽酸溶液中過夜,再用自來水沖洗,最后用蒸餾水沖洗3次,80℃烤干備用。

常用玻璃儀器的洗滌與干燥2.使用過的玻璃儀器的清洗

(1)一般玻璃儀器如試管,燒杯,錐形瓶等,先用自來水洗刷去凈污物,再用毛刷沾取洗衣粉,洗滌靈稀釋液或去污粉刷洗器皿內(nèi)外壁,自來水多次沖洗去除洗滌劑,并洗至容器內(nèi)壁不掛水珠,最后用蒸餾水洗3次,烤干或倒置控干備用。

(2)量器如吸量管,量瓶等,使用后立即用自來水沖洗,直至不掛水珠,再用蒸餾水沖洗3次,風干備用。若沖洗后的器皿仍掛水珠,則將其晾干后,泡在鉻酸洗液中4-6小時,再用自來水沖洗,最后用蒸餾水洗3次控干。

一、722型分光光度計的使用①通電預熱約20分鐘,打開比色皿暗廂蓋。②選擇波長。③清洗比色皿(拿粗糙面,一次拿一個……)④測裝試液:約2/3–4/5。⑤擦凈比色皿外部;粗糙面無明“水”,光面無水跡,無指紋,無紙纖維。⑥調(diào)零測試操作及讀數(shù)正確。⑦測完清洗比色皿,放回原處。⑧儀器恢復原樣。常用儀器的操作要點二、低速離心機的使用①檢查離心機的基本狀態(tài)(調(diào)速旋鈕等處于零位,離心室內(nèi)無異物等)。②將離心樣品倒入離心管,液面離管口不少于1cm。③對稱平衡(天平稱重)放置,蓋妥離心室蓋。④通電,慢慢加速至所需速度。⑤離心時間到后切斷電源,待轉(zhuǎn)頭自動停止轉(zhuǎn)動。取出離心管。⑥清理實驗臺面,(洗滌離心管,必要時擦凈離心室內(nèi)外等)。常用儀器的操作要點三、電子天平的使用要點①根據(jù)稱量物多少及精確度選擇適宜的天平,并作必要的調(diào)校。②稱量紙去皮。③將稱量物品放在托盤的稱量紙上。④讀數(shù)正確。⑤恢復天平原狀(關(guān)閉天平,清潔稱重盤,等)。常用儀器的操作要點

四、恒溫水浴鍋的使用要點:①通電之前先確認水箱有水且浸沒加熱管。②懂得溫控旋鈕的使用及恒溫設置方法。③用后切斷電源,放空水箱中的水并擦干凈。常用儀器的操作要點二、實驗目的掌握生物化學的基本知識、基本理論及基本實驗技能,訓練實驗的動手能力,學會熟練地使用各種生物化學實驗儀器;學會準確詳實地記錄實驗現(xiàn)象和數(shù)據(jù)的技能,提高實驗報告的寫作能力;培養(yǎng)分析和解決問題能力以及嚴謹細致的科學作風、創(chuàng)新能力等綜合素質(zhì)。

1.實驗前的準備工作實驗前,要明確實驗目的和要求。必須認真預習實驗的原理、操作步驟及注意事項,做到實驗目的明確:操作步驟及注意事項清楚。2.實驗中注重培養(yǎng)科學的思維方法、牢固的質(zhì)量觀念和良好的工作習慣,學生進入實驗室必須穿工作服。實驗操作時,不能大聲喧嘩,來回走動,如有問題,舉手請示老師解決。實驗操作過程應有條不紊,實驗器具、試劑應擺放整齊有序。三、實驗室規(guī)則認真對待實驗過程中的每一項基本技能訓練:樣品的制備及取樣,試劑的定量移取及加注,溶液的混勻、沉淀、過濾、離心、保溫、加熱、冷卻,各種儀器的正確:操作等,均應在實驗中反復多次訓練,體會和掌握操作要點,力求做到熟練、準確、規(guī)范。愛護公物,不管是易損的試管、吸管,還是精密分析儀器,均要按操作規(guī)程,細心、認真操作。要注意節(jié)約,避免不必要的人為浪費。3.實驗后的結(jié)束工作實驗完畢后,對實驗所得結(jié)果和數(shù)據(jù),進行整理、分析和計算。重視總結(jié)實驗中的經(jīng)驗、教訓。認真完成實驗報告,使用過的器皿應清洗干凈,放回原處,并安排勞動值日生打掃實驗室。注意實驗室衛(wèi)生、整潔。廢棄液體應倒入水槽,放水沖走,實驗用過的棉花、廢紙、沉淀廢渣及其他廢棄物品等均應放入指定容器,不得隨意亂扔或丟進水槽。值日生職責:規(guī)整物品,打掃桌面和地面,并將垃圾倒掉;離開實驗室前檢查水、電、門窗是否關(guān)好,經(jīng)老師同意后方能離開。四、實驗記錄與實驗報告實驗記錄實驗前寫好實驗預習報告。實驗中應及時準確地記錄所觀察到的現(xiàn)象和測量的數(shù)據(jù)。實驗記錄要注意有效數(shù)字,如吸光度值應為“0.050”,而不能記成“0.05”。每個結(jié)果都要盡可能重復觀測二次以上,即使觀測的數(shù)據(jù)相同或偏差很大,也都應如實記錄,不得涂改。實驗中要詳細記錄實驗條件,如使用的儀器型號、編號、生產(chǎn)廠等;生物材料的來源、試劑的規(guī)格、試劑的濃度等。

實驗報告實驗報告的格式應為:⑴實驗目的;⑵實驗原理;⑶儀器、

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