GB/T 5009.192-2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定

ICS67.040C53中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.192-2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定Determinationof4-amino-3,5-dichloro-aC(tert-butylamino)methyl-benzylalcohol(clenbuterol）residuesinanimalfoods2003-08-11發(fā)布2004-01-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T5009.192一2003前本標(biāo)準(zhǔn)修改采用了EUR15127-EN《獸藥殘留.動物性食品及制品參考物質(zhì)和分析方法.2ndEd.Sg2.1、Cg2.3、Sg2.4和Cy2.3歐盟獸藥殘留方法：動物性食品中魯藥殘留的測定方法》1994年英文第二版）。本標(biāo)準(zhǔn)與歐盟《動物性食品中獸藥殘留的測定方法》Sg2.1、Sg2.3、Sg2.4和Cy2.3不同之處為：-Sg2.1、Sg2.3、Sg2.4和Cy2.3為動物性食品中B興奮劑的多組分殘留檢測方法。本標(biāo)準(zhǔn)僅提出動物性食品中克倫特羅單一組分殘留的檢測方法。Sg2.1為牛尿液中B興奮劑的GC-MS篩選方法.Sg2.3為牛尿液中B興布劑的ELISA篩進方法,Sg2.4為牛肝、腎和肉中子興奮劑的GC-MS篩選方法.Cy2.3為牛尿液中子興奮劑的GC-MS確證方法。本標(biāo)準(zhǔn)則提出從酶聯(lián)免疫法（ELISA)篩選、高效液相色譜法(HPLC)定量到氣質(zhì)聯(lián)機法(GC-MS)確證和定量的一套方法，以滿足我國動物性食品中克倫特羅殘留監(jiān)控的需要。本標(biāo)準(zhǔn)中酶聯(lián)免疫法(ELISA)篩選和氣質(zhì)聯(lián)機法（GC-MS)的測定原理、操作過程和要求、主要技術(shù)參數(shù)及檢測靈敏度與歐盟方法一致。本標(biāo)準(zhǔn)中的高效液相色譜法(HPLC)是根據(jù)實驗資料及驗證結(jié)果提出的。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所、中國肉類食品綜合研究中心、北京市疾病預(yù)防控制中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：吳永寧、苗虹、趙云峰、趙京玲、趙榕、吳國華、王凌瓏

GB/T5009.192-2003克倫特羅.為強效選擇性β-受體激動劑，有強而持久的松弛支氣管平滑肌的作用.用于治療哮嘴克倫特羅可促進動物生長·改善動物體內(nèi)脂肪分配·并增加瘦肉率。20世紀(jì)90年代·我國錯誤地將其作為科研成果開始以飼料添加劑引人并推廣.被俗稱為“瘦肉精”。一連串因食用含克倫特羅的食物而引起的中毒事件發(fā)生后.使克倫特羅成了世界上普遍禁用的飼料添加劑。1997年以來·我國有關(guān)行政部門多次明令禁止畜牧行業(yè)生產(chǎn)、銷售和使用鹽酸克倫特羅。但我國各地克倫特羅中毒事件仍然頻繁發(fā)生，說明非法使用克倫特羅現(xiàn)象依然存在。為了對畜禽產(chǎn)品中的克倫特羅開展監(jiān)測.加強市場監(jiān)督檢驗力度，預(yù)防中毒事件的發(fā)生，必須建立有效的檢測方法。我國在這方面的檢測工作起步較晚，伴隨著國際和國內(nèi)對克倫特羅的禁用和監(jiān)控要求.迫切需要發(fā)展適合我國國情的從篩選到確證的一套檢測方法。為此，本標(biāo)準(zhǔn)提出了從酶聯(lián)免疫法（ELISA)篩選、高效液相色譜法（HPLC)定量到氣質(zhì)聯(lián)機法(GC-MS)確證和定量這一套方法來滿足我國動物性食品中克倫特羅殘留監(jiān)控的需要

GB/T5009.192一2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動物性食品中克倫特羅的測定方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于新鮮或冷凍的畜、禽肉與內(nèi)臟及其制品中克倫特羅殘留的測定。本標(biāo)準(zhǔn)也適用于生物材料(人或動物血液、尿液)中克倫特羅的測定。本方法檢出限：第一法氣相色譜-質(zhì)譜法為0.5g/ke:第二法高效液相色譜法為0.5g/kg;第三法酶聯(lián)免疫法為0.5g/kg。線性范圍：第一法氣相色譜-質(zhì)譜法為0.025ng～2.5ng;第二法高效液相色譜法為0.5g～4ng;第三法酶聯(lián)免疫法為0.004ng～0.054ng.第一法氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)2原理固體試樣剪碎,用高氯酸溶液勻漿。液體試樣加人高氯酸溶液，進行超聲加熱提取，用異丙醇士乙酸乙酯(40+60)萃取,有機相濃縮,經(jīng)弱陽離子交換柱進行分離,用乙醇十濃氨水(98+2)溶液洗脫,洗脫液濃縮，經(jīng)N,O-雙三甲基硅烷三氟乙酰胺（BSTFA)衍生后于氣質(zhì)聯(lián)用儀上進行測定。以美托洛爾為內(nèi)標(biāo)·定量3試劑3.1克倫特羅(clenbuterolhydrochloride),純度>99.5%3.2美托洛爾(metoprolol）.純度二99%3.3磷酸二氫鈉.3.4氫氧化鈉。3.5氯化鈉。3.6高氣酸307依氨水、3.8異丙醇。3.9乙酸乙酯。3.10甲醇：HPLC級3.11甲苯：色譜純。3.123.13衍生劑：N.O-雙三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA）3.14高氯酸溶液(0.1mol/L)。3.15氯氧化鈉溶液(1mol/L）。3.16磷酸二氫鈉緩沖液(0.1mol/L.pH=6.0).3.17異丙醇十乙酸乙酯(40+60)。3.18乙醇十濃氨水(98+2）3.19美托洛爾內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取美托洛爾標(biāo)準(zhǔn)品·用甲醇溶解配成濃度為240mg/L的內(nèi)標(biāo)儲備液·貼于