抗原抗體反應(yīng)

抗原抗體反應(yīng)Antigen-AntibodyReaction

Injectmicrobe/exotoxinserumagglutinin/antitoxin？？antibody，Ab！antigen，Ag！

1890年，德國(guó)學(xué)者EvonBehring和日本學(xué)者北里（SKitasato）在Koch研究所應(yīng)用白喉外毒素給馬免疫制抗血清一、Antigen,Ag

抗原是指能與相應(yīng)克隆的淋巴細(xì)胞上獨(dú)特的抗原受體特異性結(jié)合，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)。

免疫原性

免疫反應(yīng)性

1Immunogenicity指引起應(yīng)答的性能，包括誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體及效應(yīng)T淋巴細(xì)胞具有免疫原性的物質(zhì)稱為免疫原（immunogen）抗原的免疫原性取決于：

抗原的理化性質(zhì)

宿主反應(yīng)性

免疫方式2Immunoreactivity指能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物相互作用起反應(yīng)的性能主要決定于抗原分子的化學(xué)性質(zhì)AntigenAntibodyTCellReceptoror3半抗原（hapten）/不完全

抗原（incompleteantigen）只具有免疫反應(yīng)性而無(wú)免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原

半抗原與抗體結(jié)合抗原決定簇

（antigenicdeterminant）又稱表位（epitope），是指抗原性物質(zhì)表面決定該抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)，是免疫應(yīng)答和免疫反應(yīng)具有特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)抗原決定簇5抗原結(jié)合價(jià)

（Antigenicvalence）指抗原物質(zhì)所具有的能與抗體分子結(jié)合的抗原決定簇的總數(shù)每一種半抗原可理解為單一的抗原決定簇，而天然抗原含有很多不同的抗原決定簇Importantmedicalantigen各種微生物及其代謝產(chǎn)物

各種微生物經(jīng)免疫動(dòng)物的抗血清

抗毒素作用機(jī)理異嗜性抗原

不同種屬動(dòng)物組織間共同存在的抗原抗原同種異型抗原

ABObloodgroupsystemHLAantigensystemTransplant（graft）免疫學(xué)研究中常用的抗原

二、Antibody能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。抗體Antibody，Ab免疫球蛋白immunoglobulin，Ig免疫血清？？1StructureofImmunoglobulin四肽鏈結(jié)構(gòu)：lightchain（L鏈）：Kappa（κ）與lambda（λ）heavychain（H鏈）：μ、γ、α、δ、ε鏈，IgM，IgG，IgA，IgD和IgE鏈與鏈之間由二硫鍵連接可變區(qū)（Variableregion）：VLVH超變區(qū)（hypervariableregion,HVR）：互補(bǔ)決定區(qū)

antigenbindingsite恒定區(qū)（constantregion）：CLCH

同一種屬動(dòng)物中比較恒定,是制備第二抗體的重要基礎(chǔ)

木瓜蛋白酶Fab，F(xiàn)c胃蛋白酶F(ab’)2，F(xiàn)cFragmentantigenbindingFragmentcrystallizabledomainAntigenicityofimmunoglubin對(duì)異種動(dòng)物或同種異體來(lái)說(shuō)，免疫球蛋白有抗原性BiologicalEffectsofAntibody特異性結(jié)合抗原活化補(bǔ)體親細(xì)胞性（Fc受體）：介導(dǎo)I型變態(tài)反應(yīng)調(diào)理吞噬作用抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用通過(guò)胎盤BACK

補(bǔ)體介導(dǎo)的溶菌反應(yīng)

細(xì)胞膜表面抗原抗體的特異性結(jié)合NeutralizationOpsonization免疫球蛋白IgGIgAIgMIgDIgE重鏈名稱γαμδε重鏈功能區(qū)數(shù)目44545主要存在形式單體單體、雙體五聚體單體單體分子量(KD)146-170160，400970175188碳水化合物（%）410121812血清濃度(mg/dl)1150±300210±501500.3-40.002血清總Ig(%)75105-10<1<0.001外分泌液-++++--經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體++-+++--代替途徑活化補(bǔ)體++?++半衰期（天）20-235.85.12.82.5合成部位脾、淋巴結(jié)漿細(xì)胞粘膜相關(guān)淋巴樣組織脾、淋巴結(jié)漿細(xì)胞扁桃體、脾漿細(xì)胞粘膜固有層漿細(xì)胞通過(guò)胎盤+----免疫作用抗菌、抗病毒、抗毒素、自身抗體粘膜局部免疫作用，抗菌、抗病毒，免疫排除功能早期防御作用，溶菌，溶血，SmIgM，天然血型抗體，類風(fēng)濕因子SmIgM＋SmIgD＋正應(yīng)答抗寄生蟲感染，I型超敏反應(yīng)抗原與抗體間的特異性結(jié)合反應(yīng)體內(nèi)

體液免疫應(yīng)答的效應(yīng)作用——溶菌、殺菌、促進(jìn)吞噬、中和毒素等，或免疫病理?yè)p傷體外

抗原抗體結(jié)合反應(yīng)——沉淀、凝集、細(xì)胞溶解、補(bǔ)體結(jié)合、中和毒素等(又稱血清學(xué)反應(yīng))三、Principle（原理）ofAntigenandAntibodyReaction抗原抗體特異性結(jié)合的基礎(chǔ)：抗原決定簇與抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性，決定于抗原抗體分子空間構(gòu)型抗原抗體結(jié)合過(guò)程示意圖分兩個(gè)階段：抗原抗體特異性結(jié)合階段

可見(jiàn)反應(yīng)階段抗原抗體結(jié)合力

靜電引力：帶相反電荷的氨基和羧基，與距離有關(guān)范德華力：原子與原子、分子與分子相互接近時(shí)分子極化發(fā)生的引力氫鍵結(jié)合力：氫原子與氫受體原子間的引力疏水作用力：兩個(gè)疏水基團(tuán)對(duì)水排斥而趨向聚集抗原抗體的親和性和親和力親和性（affinity）：抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原決定簇間相適應(yīng)而存在著的引力。親和性越高，與抗原結(jié)合越牢固?？贵w的親和力（avidity）：抗體結(jié)合部位與抗原決定簇間結(jié)合的強(qiáng)度。分子空間構(gòu)型的吻合程度越高，親和力越高，結(jié)合越牢固3親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體蛋白質(zhì)分子帶電荷的殘基由于靜電作用，在蛋白分子周圍形成相反電荷的電子云，PH7.4下帶負(fù)電的蛋白分子周圍形成水化層，加上電荷相斥，避免了蛋白分子聚集。為親水膠體?？乖贵w結(jié)合后，水化層表面電荷減少，水化層變薄，電子云消失，變?yōu)槭杷z體。四、抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

CharacteristicsofAntigenandAntibodyReaction1特異性specificity：一把鎖只愛(ài)一把鑰匙，一把鑰匙永遠(yuǎn)忠于一把鎖！指物質(zhì)之間的相互吻合的針對(duì)性

抗體超變區(qū)

抗原決定簇決定于兩者空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性交叉反應(yīng)（Crossreaction）

抗原除與其相應(yīng)的抗體發(fā)生特異性反應(yīng)外，還與其他抗體發(fā)生反應(yīng)稱為交叉反應(yīng)引起交叉反應(yīng)的原因：抗原異質(zhì)性（用于免疫動(dòng)物的抗原性物質(zhì)中含有多種抗原分子，任何其他物質(zhì)只要含有一種或多種與上述物質(zhì)相同的抗原分子，必將與上述多特異性的抗血清發(fā)生交叉反應(yīng)）共同決定簇決定簇相似

交叉反應(yīng)2比例性proportionality抗原抗體反應(yīng)的等價(jià)帶（zoneofequivalence）：曲線的高峰部分，抗原抗體分子比例合適的范圍。在此范圍內(nèi)，抗原抗體充分結(jié)合，沉淀物形成快而多。最適比（optimalratio）：其中有一管反應(yīng)最快，沉淀物形成最多，上清液中幾乎無(wú)游離抗原或抗體存在，表明抗原與抗體濃度的比例最為合適。帶現(xiàn)象（zonephenomenon）：等價(jià)帶前后分別為抗體或抗原過(guò)剩則無(wú)沉淀物形成。前帶（prezone）：抗體過(guò)量后帶（postzone）：抗原過(guò)剩。Marrack（1934）網(wǎng)絡(luò)學(xué)說(shuō)3可逆性reversibilityAg+AbAg-Ab抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親和力環(huán)境因素五、抗原抗體反應(yīng)的影響因素

FactorsInfluencingofAntigen-AntibodyReaction

1抗原抗體自身因素（AntigenandAntibody）

抗原：理化性狀決定簇種類和數(shù)量抗體：來(lái)源：兔等，馬、人單克隆抗體濃度特異性和親和力2環(huán)境因素（Condition）電解質(zhì)Na+和C1－，可分別中和膠體粒子上的電荷，使膠體粒子的電勢(shì)下降，促使抗原抗體復(fù)合物從溶液中析出，形成可見(jiàn)的沉淀物或凝集物。酸堿度抗原抗體反應(yīng)一般在pH為6～8進(jìn)行。PH過(guò)高或過(guò)低都將影響抗原與抗體的理化性質(zhì)，例如pH達(dá)到或接近抗原的等電點(diǎn)時(shí)，即使無(wú)相應(yīng)抗體存在，也會(huì)引起顆粒性抗原非特異性的凝集，造成假陽(yáng)性反應(yīng)。溫度溫度升高可加速分子運(yùn)動(dòng)，抗原與抗體碰撞機(jī)會(huì)增多，使反應(yīng)加速。但若溫度高于56℃時(shí)，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞；在40℃時(shí)，結(jié)合速度慢，但結(jié)合牢固，更易于觀察。常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃。適當(dāng)振蕩/攪拌可促進(jìn)抗原抗體分子的接觸，加速反應(yīng)對(duì)照設(shè)置（Control）

對(duì)照是實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制的手段之一，目的在于消除無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。陽(yáng)性positivecontrol陰性negativecontrol空白blankcontrol標(biāo)準(zhǔn)品standardcontrol（定量基礎(chǔ)）六、抗原抗體反應(yīng)的經(jīng)典類型

TypesofAntigen-AntibodyClassic