生物監(jiān)測(cè)葉綠素a

葉綠素a的測(cè)定生命組作品

成員：靳麗、陽(yáng)樂(lè)怡、何淑紅、左柯凡2015年5月10日葉綠素a是什么?葉綠素a是有機(jī)物，不溶于水，但能溶于丙酮、乙醇等有機(jī)溶劑。究竟是什么?葉綠素a的分子結(jié)構(gòu)由4個(gè)吡咯環(huán)通過(guò)4個(gè)甲烯基（=CH—）連接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為卟啉（環(huán)上有側(cè)鏈）。卟啉環(huán)中央結(jié)合著1個(gè)鎂原子，并有一環(huán)戊酮（Ⅴ），在環(huán)Ⅳ上的丙酸被葉綠醇（C20H39OH，分子量893）酯化、皂化后形成鉀鹽具水溶性。二、測(cè)定原理

葉綠素a是有機(jī)物，不溶于水，但能溶于有機(jī)溶劑。先用醋酸纖維濾膜抽濾水樣，然后破碎細(xì)胞，用90%丙硐提取葉綠素a，再用分光光度計(jì)測(cè)葉綠素a的吸光度，最后利用公式計(jì)算葉綠素a的含量。一、測(cè)定意義1.是指示浮游植物生物量的一個(gè)重要指標(biāo)2.是研究水體富營(yíng)養(yǎng)化的一種有效方法三、測(cè)定方法和步驟

1.水樣的采集與保存

湖泊、水庫(kù)：采樣500mL；池塘：300mL

2、

濃縮水樣抽濾3、取出濾膜在冰箱內(nèi)低溫干燥6～8h→研磨器（加入少量碳酸鎂粉末及2～3mL90%的丙酮），充分研磨，離心（3000～4000轉(zhuǎn)/分）10分鐘上清液倒入容量瓶。再研磨離心，上清液再轉(zhuǎn)入容量瓶中，重復(fù)l～2次，用90%的丙酮定容

4.將上清液在分光光度計(jì)上，用1cm光程的比色皿，分別讀取750nm、663nm、645nm、630nm波長(zhǎng)的吸光度，并以90%的丙酮作空白吸光度測(cè)定。四、計(jì)算方法

葉綠素a=V--水樣體積（L）V1--定容體積（mL）D

--吸光度δ--比色皿厚度（cm）五、環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)

葉綠索a含量（mg/m3）

營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型

<4貧營(yíng)養(yǎng)型

4～10中營(yíng)養(yǎng)型

10～50富營(yíng)養(yǎng)型

>50高度富營(yíng)養(yǎng)型

湖泊富營(yíng)養(yǎng)化葉綠素a的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)六、思考

1.測(cè)定葉綠素a有何意義？2、試述葉綠素a測(cè)定的原理。3、繪制葉