生物選修1專(zhuān)題三

專(zhuān)題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1菊花的組織培養(yǎng)課題2月季的花藥培養(yǎng)課題1菊花的組織培養(yǎng)課題1學(xué)習(xí)目標(biāo)、重難點(diǎn)學(xué)習(xí)目標(biāo)：

1、掌握植物組織培養(yǎng)的原理

2、學(xué)會(huì)菊花或其他植物的組織培養(yǎng)重難點(diǎn)：植物組織培養(yǎng)過(guò)程中使用的

無(wú)菌技術(shù)指植物的離體部分（包括任何器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體），在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件（溫度及光照）下，得以生長(zhǎng)和分化成完整植株的一種無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)。又稱(chēng)：植物離體培養(yǎng)一、植物組織培養(yǎng)的概念概念：細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。原因：是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)植物組織培養(yǎng)原理：植物細(xì)胞的全能性什么叫分化？其實(shí)質(zhì)是什么?什么叫脫（去）分化、再分化？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？閱讀資料解決下列問(wèn)題：二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程我就是愈傷組織哦！二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：1、外植體的選取

不同植物的組織培養(yǎng)難度不同同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基)

大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S

微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co

有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等未開(kāi)花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝3、不同植物激素使用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化

同時(shí)使用分化頻率提高4、不同植物激素使用量生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)促根分化，抑芽形成比值低時(shí)促芽分化，抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)5、pH、溫度、光照（菊花組培）

pH=5.8

溫度控制在18—22℃

每日光照12h6、消毒在培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程中，都需要是一個(gè)無(wú)菌環(huán)境植物組織培養(yǎng)過(guò)程:離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素≈生長(zhǎng)素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素>生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素<生長(zhǎng)素再分化不需要光需要光制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培四、實(shí)驗(yàn)操作移栽沖洗—酒精—無(wú)菌水沖洗—氯化汞—無(wú)菌水沖洗至少三次之上配制各種母液配制培養(yǎng)基滅菌1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無(wú)菌操作（酒精、酒精燈——灼燒）4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌環(huán)境的？菊花的組織培養(yǎng)再分化材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件外植體的消毒接種基本原理:細(xì)胞的全能性基本過(guò)程:脫分化愈傷組織影響因素：操作流程：配制MS固體培養(yǎng)基培養(yǎng)移栽栽培課題2月季的花藥培養(yǎng)主要知識(shí)：（一）、被子植物的花粉發(fā)育和產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑（二）、月季花藥離體培養(yǎng)的操作過(guò)程（三）、影響花藥培養(yǎng)的因素植物的花藥培養(yǎng)在育種上有什么意義？花粉粒（1N）單倍體植株（1N）二倍體純合子植株（2N）縮短了育種周期，為新品種的培育開(kāi)辟了新途徑?；ǖ慕Y(jié)構(gòu)花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉

花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細(xì)胞?；ǚ鄣陌l(fā)育要經(jīng)歷：四分體時(shí)期、單核期、雙核期等階段。（一）被子植物的花粉發(fā)育雄蕊基礎(chǔ)知識(shí)（一）被子植物的花粉發(fā)育1花粉母細(xì)胞（2n）4個(gè)小孢子(小孢子四分體)（n）減數(shù)分裂有絲分裂1個(gè)花粉管細(xì)胞核（n）1個(gè)生殖細(xì)胞核（n）有絲分裂2個(gè)精子單核居中期（n）單核靠邊期（n）花粉發(fā)育過(guò)程：（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑形成原因：主要取決于培養(yǎng)基中的激素的種類(lèi)及其濃度的配比（三）影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇不同植物同一植物的不同生理狀況（花期早期－初花期、花蕾）合適的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間）此外，植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2、培養(yǎng)基的組成實(shí)驗(yàn)操作材料選取材料和消毒接種和培養(yǎng)材料的選擇選擇花藥時(shí)，一般要通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。最常用的方法有醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采用焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。材料的消毒：花蕾（70％酒精）大約30s（無(wú)菌水）清洗（無(wú)菌吸水紙）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（無(wú)菌水）沖洗

月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？

在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難？答：花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來(lái)困難。三、接種和培養(yǎng)剝?nèi)』ㄋ幗臃N花藥培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定和篩選不要損傷花藥？要徹底除去花絲？常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化？每個(gè)培養(yǎng)瓶接種（7～10）個(gè)花藥花藥長(zhǎng)出愈傷組織還要轉(zhuǎn)移到哪？溫度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。主要原因是營(yíng)養(yǎng)核和生殖核融合造成的植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較項(xiàng)目相同點(diǎn)不同點(diǎn)植物組織培養(yǎng)技術(shù)離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再分化成叢芽，誘導(dǎo)出根，然后進(jìn)行移栽。外植體為體細(xì)胞，染色體數(shù)無(wú)需加倍?；ㄋ幣囵B(yǎng)技術(shù)取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗，植株弱小，高度不育，必須用秋水仙素處理