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酶定向進(jìn)化的應(yīng)用一.酶定向進(jìn)化的特點
適應(yīng)面廣;目的性強;效果顯著二.酶定向進(jìn)化的應(yīng)用
提高酶的催化效率
增加酶的穩(wěn)定性
改變酶的底物特異性
改變對應(yīng)體特異性
適應(yīng)特定催化環(huán)境的能力
創(chuàng)造新的酶活性一.酶定向進(jìn)化的特點1.適應(yīng)面廣定點突變:需要事先知道酶的結(jié)構(gòu),功能或結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系
定向進(jìn)化:不需要知道這些信息,所以可以廣泛的應(yīng)用于各類酶的改造2.目的性強定向進(jìn)化:隨機突變+定向選擇定向選擇時,可以人為控制特殊的環(huán)境條件,進(jìn)化方向明確3.效果顯著自然進(jìn)化:幾萬年~幾百萬年
定向進(jìn)化:幾天~幾年一.提高酶的催化效率可以顯著提高酶的催化效率,是定向進(jìn)化的主要目標(biāo)之一例如:1994年斯田沫等通過DNA重排技術(shù)進(jìn)行定向進(jìn)化,使Bate-內(nèi)酰胺酶催化活性提高32000倍1993年陳等人提高枯草桿菌蛋白酶E在有機溶劑中的催化效率(157倍)提高酶的穩(wěn)定性提高酶穩(wěn)定性的方法:
分子修飾
固定化
非水相介質(zhì)催化
定向進(jìn)化三.改變酶的底物特異性底物特異性是酶催化的最重要特性,通過酶定向進(jìn)化可以改變酶催化作用的底物特異性,使酶對某種底物的特異性提高或降低,甚至呈現(xiàn)出另一種酶的催化活性。例如:2000年,阿哈若尼將大腸桿菌堿性磷酸酶對有機磷酸脂的特異性提高2000倍四.改變對應(yīng)體特異性手性藥物合成;例如:Arnold使傾向于催化D型底物的乙內(nèi)酰脲酶變成傾向于L型底物五.適應(yīng)特定催化環(huán)境的能力例1:枯草桿菌蛋白酶E在有機溶劑中的催化效率;例2:酶應(yīng)用到洗滌劑工業(yè),
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