NY/T 572-2002兔出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法

TCs.11.220NYB41中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T572-2002免出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法Haemagglutinationandhaemagglutinationinhibitiontestsforrabbithaemorrhagicdisease2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T572-2002可免出血病(曾稱免病毒性出血癥）是兔的毀滅性疫病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織World（rganizationforAnimalHealth(英），fficeinternationaldesEpizooties(法）,IE和我國(guó)分別將之列為B類和二類動(dòng)物疫病本標(biāo)準(zhǔn)采用了（）E《診斷試驗(yàn)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》（2000版）ManualofStandnrdsforDiagnosticTests“ndVaccincs)第2.8.3章規(guī)定的常規(guī)診斷方法（該方法最早系由我國(guó)建立).該章的規(guī)定相比，本杯準(zhǔn)特點(diǎn)：根據(jù)本國(guó)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)·將其具體化，成為操作程序。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸門本標(biāo)準(zhǔn)起點(diǎn)單位：江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主嬰起草人：王啟明、童亞芳。

NY/T572-2002免出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了免出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于免出血病的診斷和流行病學(xué)調(diào)查。血凝試驗(yàn)（HA）和血凝抑制試驗(yàn)（HI）2.1材料和試劑2.1.1可疑兔及正常免肝懸液的制備：分別將肝臟剪碎.按1：10加入生理鹽水后勾漿，再以4000r/min離心30min,取上清液做血凝試驗(yàn)。2.1.2生理鹽水。2.1.3阿氏液(Alscvcrs)成分：葡韻糖(化學(xué)純)2.05g氨化鈉0.428檸檬酸鈉(NaaC.H:(），·2H:))化學(xué)純)0.8g檸酸(H.C.Hl()，·H.O）化學(xué)純)0.0558100ml制法：將以上藥品混合加熱溶解、過濾.68.94kPa15min滅菌.4C保存?zhèn)溆谩?.1.41%人"O"型紅細(xì)胞懸液的制備:取新鮮人"）"型紅細(xì)胞于阿氏液中保存（置4C可保存一周)用時(shí)取人"O"型紅細(xì)胞以20倍最生理鹽水混勾洗滌紅細(xì)胞,2000『/min離心15min,奔上清，重復(fù)洗徐“次，最后一次離心前.計(jì)算紅細(xì)胞懸液體積(在離心后扣減棄去上清液的體積,即為紅細(xì)胞的體積）洗滌后的紅細(xì)胞用生理鹽水配成1%懸液，置4（備用。2.1.5陽(yáng)性血清。2.2微量血凝試驗(yàn)2.2.1在96孔V型微景滴定板上,從第2孔至第11孔，每孔加入生理鹽水0.025ml..2.2.2然后在第1、2孔加入1：10的可疑兔肝懸液0.025mL.2.2.3從第2孔開始,充分混合后用0.025ml.移液管作等量倍比稀釋至第10孔，最后1孔奔去0.025ml.。2.2.4第11孔是生理鹽水對(duì)照，第12孔加1：10的正常兔肝懸液對(duì)照。2.2.5每孔各加1%人"O"型紅細(xì)胞0.025mL.立即在徽型振蕩器上搖勾，暨4C冰箱45min待對(duì)照孔的紅細(xì)胞完全沉積后觀察結(jié)果。2.2.6結(jié)果判定和紅細(xì)胞凝集效價(jià)表示方法：a）“"++++"符號(hào)為100%凝集，無(wú)紅細(xì)胞沉積;“+++"符號(hào)為75%以上凝集，有少于