NY/T 573-2002弓形蟲病診斷技術(shù)

TCs.11.220B41NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T573-2002弓形蟲病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesfortoxoplasmosis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T573-2002弓形蟲病是由剛第弓形蟲(toxoplasmagondi)引起的一種人畜共患寄生蟲病。該病皇世界性分布，各種家畜，包括豬、牛、羊、犬、貓和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，包括小白鼠、天竺鼠、家兔等,以及人類,都能感染弓形蟲。弓形蟲病可使孕畜流產(chǎn)死胎，急性弓形蟲病可造成家畜的死亡。弓形蟲感染孕婦后可引起流產(chǎn)，胎兒畸形或產(chǎn)出弱智兒。弓形蟲感染成人后，可侵害神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心臟、淋巴內(nèi)皮系統(tǒng)等多種器官或系統(tǒng)，并造成損傷，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成死亡。因此，弓形蟲病具有重要的公共衛(wèi)生意義。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)門口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：汪明、杜重波、潘保良、劉群。

NY/T573-2002弓形蟲病診斷技術(shù)）范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了弓形蟲病的診斷技術(shù)要求本標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定弓形蟲的分離鑒定適用于本病的確診：間接血凝試驗(yàn)適用于大批量樣品的普查。形蟲的分離鑒定2.1材料準(zhǔn)備2.1.1器材：玻璃組織研缽，無菌砂子,5mL注射器及針頭。2.1.20.8%生理鹽水:加入青霉素和鏈霉素·使其終濃度分別為100IU/ml.和10g/mL2.1.3蛋白酶。2.1.4健康實(shí)驗(yàn)小白鼠27只。2.2待檢樣品的采集及處理無菌采取病畜的腦組織、心、肝、肺、腎、骨酪肌各2g,以及3mL腹腔液，所取組織或器官材料分別放入玻璃組織研缽中，加入無菌砂子和0.8%的無菌鹽水進(jìn)行研磨，研磨成組織廉。研磨好的組織(器官),用0.8%的鹽水配制成10%～20%的組織懸浮液。肺組織和肌肉組織懸浮液加入蛋白酶消化。消化后的組織懸浮液用于接種，腹腔液不用處理可直接接種。2.3操作方法接種:選取27只健康試驗(yàn)用小白鼠，分為9組，每組3只，作如下處理；空白對照組(1組)：不作任何處理；生理鹽水接種組(1組)：每只小鼠腹腔接種生理鹽水1mL;病料接種組(共7組)：每只小鼠分別腹腔接種2.2所制備的待檢樣品1ml.2.4檢查與判定小鼠接種待檢樣品后，如在2d～14d內(nèi)發(fā)生死亡，則應(yīng)抽取腹腔滲出液涂片鏡檢。同時(shí)另采集腦、肝、肺、牌涂片.涂片進(jìn)行姬姆薩染色后用顯微鏡鏡檢。若小鼠未發(fā)生死亡，則應(yīng)在接種后的6～8周對小鼠進(jìn)行捕殺，并按上述方法取樣鏡檢。若在小鼠腹腔液中查出速殖子"或所取的組織樣品中查出包囊”或緩殖子”,則可將待檢樣品判為陽性。沒有查出則判為陰性。當(dāng)空白對照組和生理鹽水接種組沒有查出弓形蟲時(shí)，可進(jìn)行結(jié)果判定，否則應(yīng)重檢。當(dāng)所檢樣品中，有一個(gè)為陽性，即說明被檢動(dòng)物已被弓形蟲感染，將其判為陽性：當(dāng)所檢樣品全部為陰性時(shí)，將被檢動(dòng)物判為陰性。1）速殖子呈月芽形，長為4m～8gm，寬為2Fm～4m。包囊呈球形，囊壁薄，直徑為2