探討IL-37對(duì)單核巨噬細(xì)胞的泡沫化的作用及機(jī)制,病理學(xué)論文

探討IL-37對(duì)單核巨噬細(xì)胞的泡沫化的作用及機(jī)制,病理學(xué)論文動(dòng)脈粥樣硬化〔ＡＳ〕是一種累及全身血管的慢性病變。ＡＳ不僅僅僅是脂質(zhì)代謝紊亂，同時(shí)也是一種慢性炎癥性疾病，多種免疫細(xì)胞及細(xì)胞因子介入了其發(fā)生與進(jìn)展。單核細(xì)胞遷移到內(nèi)皮下轉(zhuǎn)化為具有吞噬作用的巨噬細(xì)胞，通過(guò)清道夫受體〔ｓｃａｖ－ｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＳＲ〕吞噬脂質(zhì)構(gòu)成泡沫細(xì)胞，釋放一系列炎性因子及趨化蛋白，啟動(dòng)炎癥級(jí)聯(lián)反響，促進(jìn)ＡＳ進(jìn)展。除此之外，泡沫細(xì)胞沉積于內(nèi)皮下，導(dǎo)致內(nèi)膜進(jìn)一步改變。白細(xì)胞介素〔ＩＬ〕被以為是調(diào)節(jié)ＡＳ進(jìn)展中泡沫細(xì)胞構(gòu)成的關(guān)鍵因素。ＩＬ－３７能夠抑制多種炎性因子的表示出，平衡體內(nèi)促炎因子與抑炎因子，抑制樹(shù)突狀細(xì)胞的活化，減輕炎癥反響。有實(shí)驗(yàn)在ＡＳ組織泡沫細(xì)胞中檢測(cè)到ＩＬ－３７蛋白表示出，但其能否影響單核巨噬細(xì)胞的泡沫化尚未明確。本研究以人單核細(xì)胞系ＴＨＰ－１為對(duì)象，體外模擬巨噬細(xì)胞泡沫化的經(jīng)過(guò)，觀察ＩＬ－３７的作用，并對(duì)可能機(jī)制進(jìn)行討論。１材料與方式方法１．１材料ＴＨＰ－１細(xì)胞系購(gòu)自美國(guó)ＡＴＣＣ公司，ＲＰＭＩ１６４０及胎牛血清購(gòu)自Ｇｉｂｉｃ公司，ｏｘ－ＬＤＬ購(gòu)自ＹｉｙｕａｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ公司，小鼠抗人ＡＢＣＡ－１單克隆抗體〔ｓｃ－５８２１９〕購(gòu)自美國(guó)ＳＡＮＴＡＣＲＵＺ公司，－Ａｃｔｉｎ〔ｓｃ－４７７７８〕購(gòu)自美國(guó)ＳＡＮＴＡＣＲＵＺ公司，兔抗人ＣＤ３６單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)ＥＰＩＴＯＭＩＣＳ公司，小鼠抗人ＳＲ－Ａ單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Ｒ＆Ｄ公司，Ｔｒｉｚｏｌ及ＲＴ－ＰＣＲ試劑盒購(gòu)自日本Ｔａｋａｒａ公司，ＣＤ３６引物、ＳＲＡ引物、ＡＢＣＡ－１引物、ＧＡＰＤＨ引物由中國(guó)武漢擎科生物公司設(shè)計(jì)合成。１．２方式方法１．２．１ＴＨＰ－１細(xì)胞培養(yǎng)ＴＨＰ－１細(xì)胞為懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞，用含１０％ＦＢＳ的ＲＰＭＩ１６４０培養(yǎng)基，培養(yǎng)基參加青霉素〔１００Ｕ／ｍｌ〕和鏈霉素〔１００ｇ／ｍｌ〕，３７℃、５％ＣＯ２培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)，每２～３ｄ傳代１次。１．２．２巨噬細(xì)胞的分化１０００ｇ、５ｍｉｎ離心上述培養(yǎng)的ＴＨＰ－１細(xì)胞，棄上清，按１１０６／ｍｌ重懸于新的培養(yǎng)基中，接種到６孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，參加ＰＭＡ〔終濃度為１６０ｎｍｏｌ／Ｌ〕，３７℃、５％ＣＯ２培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)２４ｈ，觀察細(xì)胞貼壁和形態(tài)改變。１．２．３分組及建立泡沫細(xì)胞模型ＴＨＰ－１細(xì)胞〔１１０６／ｍｌ〕在１６０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ刺激２４ｈ分化為巨噬細(xì)胞，然后分別給予ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕、ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕＋ＩＬ－３７〔５ｎｇ／ｍｌ〕、ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕＋ＩＬ－３７〔１０ｎｇ／ｍｌ〕、ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕＋ＩＬ－３７〔２０ｎｇ／ｍｌ〕。各組細(xì)胞均置５％ＣＯ２、３７℃孵箱，培養(yǎng)２４ｈ。華而不實(shí)僅給予ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕單獨(dú)刺激的對(duì)照組再進(jìn)行進(jìn)一步分組實(shí)驗(yàn)，一組給予ＩＬ－３７〔１０ｎｇ／ｍｌ〕，另一組僅更換新鮮培養(yǎng)基，２４ｈ后收集細(xì)胞。１．２．４油紅Ｏ染色觀察泡沫細(xì)胞形態(tài)將ＴＨＰ－１培養(yǎng)于放有蓋玻片的６孔培養(yǎng)板內(nèi)，用ＰＭＡ刺激２４ｈ后，參加ｏｘ－ＬＤＬ和〔或〕ＩＬ－３７干涉２４ｈ。待處理結(jié)束后，棄上清，用預(yù)冷ＰＢＳ液沖洗３次。４％多聚甲醛固定２～４ｍｉｎ，０．３％油紅Ｏ染色液染色１５～２０ｍｉｎ，蘇木素染色５ｍｉｎ，鹽酸酒精分色，明膠甘油封片，顯微鏡觀察。收集圖像并用圖像分析系統(tǒng)分析。１．２．５細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)測(cè)定棄干涉后的細(xì)胞培養(yǎng)液，用預(yù)冷ＰＢＳ沖洗３次，冰?。常埃恚椋睿眉?xì)胞刮刮下細(xì)胞，８００ｇ離心１０ｍｉｎ，參加０．５ｍｌ的氯仿－甲醇〔２∶１〕混合液研磨，３０００ｇ、４℃離心３０ｍｉｎ，取上清液，加兩倍體積的冰生理鹽水，３０００ｇ離心３０ｍｉｎ，去除上層液體，將下層有機(jī)相轉(zhuǎn)移到枯燥的ＥＰ管，用ＴＣ試劑盒測(cè)定ＴＣ，沉淀用０．１ｍｍｏｌ／ＬＮａＯＨ０．２ｍｌ溶解，ＢＣＡ法測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)含量。細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量用每克蛋白所含的ＴＣ表示。１．２．６ＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)ＲＮＡ提取上述干涉后的細(xì)胞，用預(yù)冷ＰＢＳ沖洗３次，每孔參加１ｍｌＴｒｉｚｏｌ，靜置１０ｍｉｎ，用槍吹打數(shù)次，吸入無(wú)ＲＮＡ酶的１．５ｍｌＥＰ管中，每管參加２００ｌ氯仿，震蕩數(shù)秒，室溫靜置１０ｍｉｎ，１２０００ｇ、１５ｍｉｎ，４℃，離心；汲取上層液體層２００～３００ｌ到另一ＥＰ管中，等體積參加預(yù)冷的異丙醇，輕輕混勻，－２０℃，放置１０ｍｉｎ，１２０００ｇ、１５ｍｉｎ，４℃離心；棄上清，參加１ｍｌ預(yù)冷無(wú)水乙醇，７５００ｇ、１０ｍｉｎ，４℃，離心；盡最大可能將上清丟棄，參加２０ｌ的ＤＥＰＣＨ２Ｏ。ＲＮＡ濃度和純度測(cè)定?。保焖崛〉模模危寥芤簠⒓樱梗梗欤模牛校盟?，充分混勻，然后用核酸分析儀檢測(cè)Ａ２６０，Ａ２６０／Ａ２８０比值，ＲＮＡ濃度〔ｍｇ／ｍｌ〕＝Ａ２６０１００稀釋倍數(shù)，Ａ２６０／Ａ２８０比值在１．８～２．０純度較高。逆轉(zhuǎn)錄溫度梯度ＰＣＲ儀按３７℃１５ｍｉｎ、８５℃５ｓ、４℃的程序進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。ＰＣＲ引物序列引物序列如下：ＧＡＰＤＨ：５－ＣＣＡＣＣＣＡＴＧ－ＧＣＡＡＡＴＴＣＣＡＴＧＧＣＡ－３，５－ＴＣＴＡＧＡＣＣＧＣＡＧＧＴＣＡＧＧＴＣＣＡＣＣ－３；ＣＤ３６：５－ＧＡＧＡＡＣＴＧＴＴＡＴ－ＧＧＧＧＣＴＡＴ－３，５－ＴＴＣＡＡＣＴＧＧＡＧＡＧＧＣＡＡＡＧ－Ｇ－３；ＳＲ－Ａ：５－ＣＣＡＧＧＧＡＣＡＴＧＧＡＡＴＧＣＡＡ－３，５－ＣＣＡＧＴＧＧＧＡＣＣＴＣＧＡＴＣＴＣＣ－３；ＡＢＣＡ１：５－ＴＧＴ－ＣＣＡＧＴＣＣＡＧＴＡＡＴＧＧＴＴＣＴＧ－Ｔ３，５－ＡＡＧＣＧＡ－ＧＡＴＡＴＧＧＴＣＣＧＧＡＴＴ－３。ＲＴ－ＰＣＲ按Ｔａｋａｒａ公司ＰＣＲ試劑盒講明，按ＲＯＸ０．２ｌ，ＳＹＢＲ?ＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑＴＭＩＩ５ｌ，ＰＣＲＦｏｒｗａｒｄＰｒｉｍｅｒ０．２ｌ，ＰＣＲＲｅ－ｖｅｒｓｅＰｒｉｍｅｒ０．２ｌ，ＤＮＡ模板１ｌ，ｄＨ２Ｏ３．４ｌ，配制１０ｌ擴(kuò)增體系；采取兩步法ＰＣＲ擴(kuò)增標(biāo)準(zhǔn)程序：９５℃、３０ｓ，９５℃、５ｓ，６０℃退火、延伸３０ｓ，共４０個(gè)循環(huán)。１．２．７Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡檢測(cè)蛋白質(zhì)提取上述干涉后的細(xì)胞，預(yù)冷ＰＢＳ沖洗３次，細(xì)胞刮用力將細(xì)胞刮落，用１ｍｌＰＢＳ重懸于１．５ｍｌＥＰ管中，３０００ｇ、１０ｍｉｎ，４℃離心，棄上清，參加現(xiàn)配的與沉淀體積約等的細(xì)胞裂解液和蛋白酶抑制劑復(fù)合物，將沉淀吹散，冰?。常埃恚椋?，３０ｓ、６次渦旋，間隔５ｍｉｎ進(jìn)行１次；１２０００ｇ、１０ｍｉｎ，４℃，離心；汲取上清為細(xì)胞蛋白質(zhì)。蛋白濃度測(cè)定和變性根據(jù)ＢＣＡ蛋白測(cè)定試劑盒的講明，用酶標(biāo)儀檢測(cè)樣本的蛋白濃度。而后按每個(gè)樣本上樣６０ｇ分裝樣本到２００ｌ的ＥＰ管中，９５℃、１０ｍｉｎ，使蛋白變性。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ電泳按濃縮膠６０～８０Ｖ恒壓，分離膠１００～１５０Ｖ恒壓，到蛋白Ｍａｒｋｅｒ條帶區(qū)分明顯或者溴酚藍(lán)到達(dá)分離膠最低端；轉(zhuǎn)膜用３００ｍＡ恒流，根據(jù)目的蛋白分子量大小決定轉(zhuǎn)膜時(shí)間；５％脫脂奶粉封閉３ｈ，ＴＢＳＴ洗滌５ｍｉｎ、３次，一抗按講明書(shū)要求稀釋，搖床冰浴過(guò)夜；ＴＢＳＴ洗滌５ｍｉｎ、３次，二抗按１∶３０００稀釋，封閉２ｈ；ＴＢＳＴ洗滌５ｍｉｎ、３次，用ＩｍａｇｅＬａｂ成像系統(tǒng)檢測(cè)并收集圖像。１．３統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)均重復(fù)３次，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以珚ｘｓ表示，采用ＳＰＳＳ１２．０作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。組間數(shù)據(jù)處理根據(jù)方差齊性分析的結(jié)果，進(jìn)一步使用ＳＮＫ檢驗(yàn)，進(jìn)行組間差異的比擬，Ｐ＜０．０５為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。２結(jié)果２．１泡沫細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)測(cè)定光固定和油紅Ｏ染色光鏡下顯示，ＩＬ－３７＋ｏｘ－ＬＤＬ組細(xì)胞攝取ｏｘ－ＬＤＬ減少，胞內(nèi)脂質(zhì)小滴顯著減少，油紅Ｏ染色陽(yáng)性細(xì)胞較ｏｘ－ＬＤＬ組顯著減少，且細(xì)胞形態(tài)多改變較少〔圖１〕。ＩＬ－３７＋ｏｘ－ＬＤＬ組巨噬細(xì)胞內(nèi)ＴＣ水平較ｏｘ－ＬＤＬ組顯著減少［〔１５０．４７．３６〕ｎｇ／ｍｇ∶〔３０３．１８．９〕ｎｇ／ｍｇ，Ｐ＜０．０１］。２．２ＴＨＰ－１源巨噬細(xì)胞ＣＤ３６、ＳＲＡ及ＡＢＣＡ－１的表示出水平Ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕組和ＩＬ－３７〔１０ｎｇ／ｍｌ〕＋ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕組ＴＨＰ－１源巨噬細(xì)胞ＣＤ３６、ＳＲＡ及ＡＢＣＡ－１蛋白及ｍＲＮＡ表示出水平見(jiàn)表１，不同濃度ｏｘ－ＬＤＬ組表示出水平見(jiàn)表２。２．３泡沫細(xì)胞ＣＤ３６、ＳＲＡ及ＡＢＣＡ－１的表示出水平Ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕組和ＩＬ－３７〔１０ｎｇ／ｍｌ〕＋ｏｘ－ＬＤＬ〔５０ｍｇ／ｍｌ〕組泡沫細(xì)胞ＣＤ３６、ＳＲＡ及ＡＢＣＡ－１蛋白及ｍＲＮＡ表示出水平見(jiàn)表３。３討論ＡＳ是是一種多因素介入的病理經(jīng)過(guò)。脂質(zhì)代謝紊亂和炎癥反響是致ＡＳ的最主要的兩個(gè)原因，相互互相促進(jìn)，加速ＡＳ的進(jìn)展。血液中的單核細(xì)胞遷移進(jìn)入內(nèi)皮下分化為巨噬細(xì)胞，通過(guò)ＳＲ吞噬血管內(nèi)膜下聚集的脂質(zhì)尤其是ｏｘ－ＬＤＬ構(gòu)成泡沫膜細(xì)胞，啟動(dòng)ＡＳ的進(jìn)程。泡沫細(xì)胞聚集構(gòu)成斑塊是ＡＳ的主要病變特征，同時(shí)泡沫細(xì)胞的構(gòu)成啟動(dòng)了動(dòng)脈內(nèi)皮下慢性炎癥級(jí)聯(lián)反響，促進(jìn)病變的進(jìn)展。研究表示清楚，多種細(xì)胞因子在ＡＳ泡沫細(xì)胞的構(gòu)成中發(fā)揮了重要作用。這些細(xì)胞因子能夠通過(guò)上調(diào)或下調(diào)巨噬細(xì)胞外表ＳＲ，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)的攝取，促進(jìn)或者抑制泡沫細(xì)胞的構(gòu)成；可以以通過(guò)上調(diào)或下調(diào)巨噬細(xì)胞逆向脂質(zhì)運(yùn)輸相關(guān)蛋白的表示出，延緩或加速泡沫細(xì)胞的構(gòu)成。巨噬細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞外表表示出的一系列ＳＲ辨別、攝取內(nèi)皮下脂質(zhì)；同時(shí)也表示出逆向膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，處理胞內(nèi)聚集的脂質(zhì)；二者的失衡將影響泡沫細(xì)胞的構(gòu)成。本實(shí)驗(yàn)表示清楚，ＩＬ－３７能夠抑制ＴＨＰ－１源巨噬細(xì)胞攝?。铮蹋模?，促進(jìn)胞內(nèi)脂質(zhì)外流，減少泡沫細(xì)胞的構(gòu)成，具有抗ＡＳ的作用。我們通過(guò)油紅Ｏ染色從形態(tài)學(xué)觀察到ＩＬ－３７能夠減少ＴＨＰ－１源巨噬細(xì)胞構(gòu)成泡沫細(xì)胞，降低ＴＨＰ－１源巨噬細(xì)胞胞內(nèi)ＴＣ的聚集。與ＩＬ－１０通太多種機(jī)制減少泡沫細(xì)胞的構(gòu)成，華而不實(shí)有些存在爭(zhēng)議。本實(shí)驗(yàn)明確了ＩＬ－３７抑制泡沫細(xì)胞的機(jī)制，與ＩＬ－３３、ＴＧＦ－類似，ＩＬ－３７通過(guò)抑制ＳＲＡ和ＣＤ３６，同時(shí)加強(qiáng)逆向膽固醇運(yùn)輸?shù)鞍祝粒拢茫粒钡谋硎境?，減輕巨噬細(xì)胞脂質(zhì)負(fù)荷，減少泡沫細(xì)胞的構(gòu)成，且該作用具有濃度依靠性。除此之外，用ＩＬ－３７和ＰＭＡ同時(shí)刺激ＴＨＰ－１的分化，能夠減少巨噬細(xì)胞的構(gòu)成，并且抑制所活化的巨噬細(xì)胞形態(tài)的改變，如變形、伸出偽足的細(xì)胞明顯減少，與之前的研究一致。研究表示清楚，ＩＬ－３７具有下調(diào)多種炎性因子的作用，減少體內(nèi)樹(shù)突狀細(xì)胞的數(shù)量，且能夠下調(diào)樹(shù)突狀細(xì)胞外表蛋白ＣＤ８６和ＭＨＣⅡ表示出量，減輕固有免疫和適應(yīng)性炎癥反響。與ＩＬ－３３和ＩＬ－１類似，ＩＬ－３７具有雙重生物學(xué)活性，一方面作為可溶性細(xì)胞因子，通過(guò)與ＩＬ－１８或者ＩＬ－１８ＢＰ結(jié)合，發(fā)揮抗炎作用，但是具體的機(jī)制尚未說(shuō)明；另一方面成熟的ＩＬ－３７作為核轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)入細(xì)胞核，與Ｓｍａｄ３互相作用，調(diào)節(jié)多條信號(hào)通路的關(guān)鍵酶，包括ＦＡＫ、ＰｙＫ２、ＭＡＰＫｐ３８、ＳＴＡＴｓ１－４等。轉(zhuǎn)染ＩＬ－３７的ＴＨＰ－１細(xì)胞，遭到ＬＰＳ和ＩＦＮ－刺激后，與對(duì)照組相比，ＦＡＫ、Ｐｙｋ２、ＭＡＰｋｉｎａｓｅｐ３８、ＳＴＡＴｓ、ｐ５３、ＴＯＲ的表示出顯著下調(diào)［１］；華而不實(shí)ＳＴＡＴ是脂質(zhì)代謝ＪＡＫ／ＳＴＡＴ信號(hào)通路的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，通過(guò)調(diào)控ＡＢＣＡ１的表示出影響吞噬細(xì)胞逆向轉(zhuǎn)運(yùn)胞內(nèi)脂質(zhì)；除此之外，ｍＴＯＲ信號(hào)通路、ＭＡＰＫ信號(hào)通路也介入了巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)代謝。所以，我們揣測(cè)成熟的ＩＬ－３７進(jìn)入細(xì)胞核后，與Ｓｍａｄ３結(jié)合，通太多條脂質(zhì)代謝通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞ＳＲ和膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)受體的表示出，調(diào)控巨噬細(xì)胞泡沫化，進(jìn)而影響ＡＳ的進(jìn)程。ＳＲ和逆向膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是巨噬細(xì)胞泡沫化的關(guān)鍵因素，ＳＲＡ和ＣＤ３６是巨噬細(xì)胞結(jié)合和攝?。铮蹋模痰闹饕荏w，ＡＢＣＡ１是巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇外流的重要轉(zhuǎn)運(yùn)體。敲除ＣＤ３６基因后小鼠以及同時(shí)敲除ＣＤ３６，ＳＲＡ基因小鼠ＡＳ進(jìn)程明顯延緩；而上調(diào)ＡＢＣＡ１則能夠延緩ＡＳ的進(jìn)展，表明ＣＤ３６、ＳＲＡ和ＡＢＣＡ１起著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示清楚，ＩＬ－３７能夠顯著抑制ＣＤ３６和ＳＲＡ的表示出，促進(jìn)ＡＢＣＡ－１的表示出，且有劑量依靠關(guān)系。除此之外，對(duì)已形成的泡沫細(xì)胞，ＩＬ－３７也能顯著上調(diào)ＡＢＣＡ１，下調(diào)ＳＲＡ和ＣＤ３６的表示出。綜上所述，ＩＬ－３７具有抗ＡＳ的作用。結(jié)合之前關(guān)于ＩＬ－３７具有下調(diào)多種炎性因子、抑制炎性細(xì)胞活化、減輕炎癥反響的研究，相信ＩＬ－３７有可能會(huì)成為ＡＳ預(yù)防和治療的新靶點(diǎn)。以下為參考文獻(xiàn)［１］ＮｏＬＤＭＦ，ＮＯＬＤ－ＰＥＴＲＹＣＡ，ＺＥＰＰＪＡ，ｅｔａｌ．ＩＬ－３７ｉｓａｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｉｎｎａｔｅｉｍｍｕｎｉｔｙ［Ｊ］．ＮａｔＩｍｍｕｎｏｌ，２０１０，１１：１０１４－１０２２．［２］ＭＣＮＡＭＥＥＥＮ，ＭＡＳＴＥＲＳＯＮＪＣ，ＪＥＤＬＩＣＫＡＰ，ｅｔａｌ．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ３７ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｔｅｃｔｓｍｉｃｅｆｒｏｍｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，２０１１，１０８：１６７１１－１６７１６．［３］ＢＯＲＡＳＣＨＩＤ，ＬＵＣＣＨＥＳＩＤ，ＨＡＩＮＺＬＳ，ｅｔａｌ．ＩＬ－３７：ａｎｅｗａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｙｔｏｋｉｎｅｏｆｔｈｅＩＬ－１ｆａｍｉｌｙ［Ｊ］．