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中藥學(xué)專業(yè)綜合實驗報告實驗名稱:不同激素配比對番紅花側(cè)芽誘導(dǎo)愈傷組織的影響班級:13中藥本科班學(xué)號:姓名:指導(dǎo)老師:南陽理工學(xué)院一、實驗?zāi)康难芯坎煌に嘏浔葘Ψt花側(cè)芽誘導(dǎo)愈傷組織的影響,為番紅花組織培養(yǎng)提供基礎(chǔ)資料。實驗方法本實驗所選用的番紅花為張仲景國醫(yī)國藥學(xué)院藥用植物院所栽培的西紅花,在十月份中旬,選取番紅花球莖幼嫩側(cè)芽為外植體。本實驗選用組合A:MS+NAA5mg/L+6-BA5mg/L、組合B:MS+2,4-D2mg/L+KT0.5mg/L、組合C:MS+6-BA5mg/L+2,4-D1mg/L、組合D:MS+KT5mg/L+IAA4mg/L、組合E:MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D2mg/L這5種生長激素組合和濃度配比。首先配制MS培養(yǎng)基,添加7g/L瓊脂和20g/L蔗糖,加入上述植物激素,PH調(diào)配至5.8-6,把培養(yǎng)基均勻地分裝在培養(yǎng)瓶里面,高壓滅菌。用解剖刀切取番紅花幼嫩側(cè)芽,在水龍頭下用清水沖洗兩個小時,然后用70%乙醇浸泡消毒30S,取出,然后在濃度為0.05%的升汞溶液中滅菌8min,取出,用鑷子和解剖刀剝?nèi)パ壳?,再用濃度?.05%的升汞溶液滅菌3min,取出,最后用無菌水漂洗4次。用無菌濾紙吸干表面水分,分別斜切成0.5cm的小段,每段背劃2個傷口,接種于滅菌的培養(yǎng)基,每個濃度接種40個。在接種第10天是統(tǒng)計萌動率,在接種低30天時,統(tǒng)計誘導(dǎo)率,觀察愈傷組織的質(zhì)地和色澤,分析最優(yōu)激素配比。實驗結(jié)果側(cè)芽接種于不同激素配比條件下,在第10天時,統(tǒng)計的萌動率數(shù)據(jù)如下表1。表1接種第10天萌動率情況編號接種數(shù)萌動數(shù)萌動率%A402972.5B402665C402870D402050E401845側(cè)芽接種于不同激素配比條件下,在第30天時,統(tǒng)計的愈傷組織誘導(dǎo)率情況如表2。表2接種第30天誘導(dǎo)率情況編號接種數(shù)出愈數(shù)誘導(dǎo)率%A402255B401025C401230D40512.5E401537.5側(cè)芽接種于不同激素配比條件下,在第30天時,統(tǒng)計出愈傷組織的質(zhì)地,情況如表3。由表3可以看出,A和E激素配比條件下愈傷組織的致密性較好。表3黑暗條件下愈傷組織的質(zhì)地比較激素濃度接種數(shù)出愈數(shù)疏松致密數(shù)量百分?jǐn)?shù)%數(shù)量百分?jǐn)?shù)%A4022313.61986.4B4010550550C4012433.3866.7D405360240E40153201280西紅花側(cè)芽愈傷組織容易褐化(褐化會導(dǎo)致組織代謝紊亂,生長受阻,最終逐漸死亡)或者部分褐化,通過觀察側(cè)芽愈傷組織的顏色可以判斷愈傷組織的褐化程度,情況如表4。表4黑暗條件下愈傷組織的色澤比較激素濃度接種數(shù)出愈數(shù)褐色黃色白色數(shù)量百分?jǐn)?shù)%數(shù)量百分?jǐn)?shù)%數(shù)量百分?jǐn)?shù)%A402229.1836.41254.5B4010110660330C4012216.7866.6216.7D40524036000E4015320533.3746.7四、討論分析根據(jù)表2得出的數(shù)據(jù),B激素濃度配比MS+2,4-D2mg/L+KT0.5mg/L和E激素濃度配比MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D2mg/L對比,在2,4-D濃度相同的條件下,相同濃度的濃度6-BA的誘導(dǎo)率比KT高,可以得出結(jié)論0.5mg/L的6-BA比0.5mg/L的KT誘導(dǎo)效果好。A激素濃度配比MS+NAA5mg/L+6-BA5mg/L和E激素濃度配比MS+6-BA5mg/L+2,4-D1mg/L對比,在6-BA濃度相同的條件下,A激素濃度配比的誘導(dǎo)率較高,說明5mg/L的NAA比1mg/L的2,4-D誘導(dǎo)效果好。而在激素濃度配比組合中,A組誘導(dǎo)率明顯優(yōu)于其他組合。根據(jù)表3得出的數(shù)據(jù),在A激素濃度配比(MS+NAA5mg/L+6-BA5mg/L)條件下,愈傷組織質(zhì)地為致密的愈傷組織為86.4%,致密性優(yōu)于其他組合。根
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