實(shí)驗(yàn)一光學(xué)顯微鏡技術(shù)

關(guān)于實(shí)驗(yàn)一光學(xué)顯微鏡技術(shù)第1頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三實(shí)驗(yàn)報(bào)告六、作業(yè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)材料五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析四、實(shí)驗(yàn)步驟第2頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三實(shí)驗(yàn)一光學(xué)顯微鏡技術(shù)第3頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馄胀ü鈱W(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡和微分干涉顯微鏡的構(gòu)造、工作原理和使用方法。學(xué)習(xí)測(cè)微尺的用法并測(cè)量細(xì)胞的大小。第4頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三顯微鏡,目鏡測(cè)微尺(eyepiecesor

ocularmicrometer),鏡臺(tái)測(cè)微尺（stagemicrometer）,載玻片,蓋玻片等。

實(shí)驗(yàn)用品第5頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三夾竹桃葉片橫切片實(shí)驗(yàn)材料小腸切片雞紅細(xì)胞洋蔥

采雞血（阿氏液：血2：1)(阿氏液紅細(xì)胞保存液：葡萄糖2.05g

檸檬酸鈉0.88g

氯化鈉0.42g

加蒸餾水至100ml，過濾分裝，滅菌后在0－4℃冰箱中可保存兩周。)第6頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三普通光學(xué)顯微鏡光鏡主要由三部分組成：（1）光學(xué)放大系統(tǒng)：目鏡與物鏡（2）照明系統(tǒng)（3）機(jī)械和支架系統(tǒng)第7頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第8頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三調(diào)節(jié)光瞳間距，使左、右兩個(gè)視場(chǎng)像合二為一;調(diào)節(jié)屈光度以適應(yīng)觀察者的視力，調(diào)節(jié)方法隨鏡的不同而不同.第9頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三物鏡標(biāo)示

第10頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三將孔徑光闌縮至物鏡數(shù)值孔徑的60%～80%或合適的范圍。注意：當(dāng)物鏡或標(biāo)本更換時(shí)，需重新調(diào)節(jié)視場(chǎng)光闌和孔徑光闌。第11頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三注意事項(xiàng)移動(dòng)顯微鏡，一手托鏡座，一手拿鏡臂!更換物鏡時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換盤!使用油鏡后，用鏡頭液清洗鏡頭。只有100倍物鏡為油鏡，在低倍鏡下調(diào)焦清晰后，再轉(zhuǎn)到油鏡!固定切片不要使用油鏡!第12頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三暗視野顯微鏡原理：利用暗視野聚光器使入射光束從聚光器斜向照明樣品，使之發(fā)出反射和散射光。由樣品發(fā)出的散射光和反射光形成了明亮的物體影象。背景是黑暗的。第13頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三相差顯微鏡原理：利用相差裝置將透過細(xì)胞標(biāo)本不同區(qū)域（密度不同）的光的光程差變成振幅差，從而使細(xì)胞內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)之間呈現(xiàn)出清晰可見的明暗差異的顯微鏡。第14頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三在構(gòu)造上，相差顯微鏡有不同于普通光學(xué)顯微鏡兩個(gè)特殊之處：

1.環(huán)形光闌（annulardiaphragm）位于光源與聚光器之間，作用是使透過聚光器的光線形成空心光錐，焦聚到標(biāo)本上。2.相位板（annularphaseplate）在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ。分為兩種：

A+相板：將直射光推遲1/4λ，兩組光波合軸后光波相加，振幅加大，標(biāo)本結(jié)構(gòu)比周圍介質(zhì)更加變亮，形成亮反差（或稱負(fù)反差）。B+相板：將衍射光推遲1/4λ，兩組光線合軸后光波相減，振幅變小，形成暗反差（或稱正反差），結(jié)構(gòu)比周圍介質(zhì)更加變暗。第15頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第16頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三微分干涉顯微鏡DIC利用的是偏振光，有四個(gè)特殊的光學(xué)組件：偏振器（polarizer）、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器（analyzer）。偏振器直接裝在聚光系統(tǒng)的前面，使光線發(fā)生線性偏振。優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像。第17頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第18頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三

四種不同顯微鏡顯微鏡所拍攝的體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞圖像比較（A）普通明視場(chǎng)顯微鏡（B）相差顯微鏡（C）微分干涉顯微鏡（D）暗場(chǎng)顯微鏡第19頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法細(xì)胞形態(tài)的觀察細(xì)胞大小的測(cè)量第20頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三不同形狀的動(dòng)植物細(xì)胞第21頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三一、細(xì)胞觀察動(dòng)物細(xì)胞的觀察

植物細(xì)胞的觀察

小腸切片:細(xì)胞的形狀，細(xì)胞核，核仁，細(xì)胞質(zhì)

雞血紅細(xì)胞:紅細(xì)胞的特點(diǎn)夾竹桃葉橫切片:表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞洋蔥表皮細(xì)胞:內(nèi)表皮細(xì)胞第22頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第23頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第24頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第25頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第26頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三1、紅細(xì)胞2、中性粒細(xì)胞3、嗜酸性粒細(xì)胞4、嗜堿性粒細(xì)胞5、單核細(xì)胞6、淋巴細(xì)胞7、異嗜性粒細(xì)胞8、凝血細(xì)胞第27頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第28頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第29頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三Onionepidermalcells第30頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三二、細(xì)胞測(cè)量如何使用測(cè)微尺?如何測(cè)量細(xì)胞的大小?如何計(jì)算細(xì)胞的大小?第31頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三如何使用測(cè)微尺?目鏡測(cè)微尺（Eyepiecemicrometer）鏡臺(tái)測(cè)微尺（Stagemicrometer）第32頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三目鏡測(cè)微尺鏡臺(tái)測(cè)微尺第33頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三

鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=------------------------------10

目鏡測(cè)微尺的格數(shù)

第34頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三如何測(cè)量細(xì)胞的大小?測(cè)量一個(gè)洋蔥表皮細(xì)胞的大小第35頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三如何計(jì)算細(xì)胞的體積?橢球形V=4πab2/3圓球形V=4/3πr3圓柱形V=πr2h*a:長(zhǎng)半徑;b:短半徑；r:半徑;h:高第36頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三作業(yè)計(jì)算不同倍數(shù)物鏡下，一格目鏡測(cè)微尺所代表的長(zhǎng)度。第37頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三暗視野、相差、微分干涉顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡相比在結(jié)構(gòu)上有何特點(diǎn)及用途。繪洋蔥表皮細(xì)胞的模式圖，注明物鏡的倍數(shù)；并測(cè)量五個(gè)細(xì)胞的長(zhǎng)、寬。動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞的異同點(diǎn)

。第38頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三鏡油瓶的使用方法(1)(2)(3)(4)第39頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三(5)(6)(7)鏡油瓶的使用方法第40頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第41頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第42頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第43頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三第44頁，共46頁，2023年，2月20日，星期三細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)繪圖方法與要求

二、用鉛筆繪圖，線條要明確清晰，圖的深淺明暗一律以點(diǎn)的疏密來表示，點(diǎn)要圓而一致，不得涂暗影或進(jìn)行其它美術(shù)加工。一、在仔細(xì)觀察的基礎(chǔ)上，選