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PAGEPAGE1實(shí)驗(yàn)——制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、純化大腸桿菌1.在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大局部微生物無(wú)法生長(zhǎng);在培養(yǎng)基中參加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌;在培養(yǎng)基中參加10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述選擇培養(yǎng)基依次能從混雜的微生物群體中別離出()A.乳酸菌、金黃色葡萄球菌、放線菌B.固氮細(xì)菌、大腸桿菌、放線菌C.固氮細(xì)菌、霉菌、放線菌D.固氮細(xì)菌、金黃色葡萄球菌、放線菌2.以下關(guān)于配制培養(yǎng)基的表達(dá),正確的選項(xiàng)是()A.制作固體培養(yǎng)基必須參加瓊脂B.參加青霉素可得到放線菌C.培養(yǎng)自生固氮菌時(shí)不需要氮源D.發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基3.以下物質(zhì)中,不能用作酵母菌碳源的是〔〕A.含碳有機(jī)物B.蛋白胨C.含碳無(wú)機(jī)物D.石油、花生粉餅等天然物質(zhì)4.利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌,經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)了多種菌落,不可能的原因是〔〕A.培養(yǎng)基制備過(guò)程中被雜菌污染B.接種過(guò)程中,無(wú)菌操作不符合要求C.系列稀釋時(shí),無(wú)菌操作不符合要求D.由大腸桿菌的種類(lèi)不同造成的5.大腸桿菌能夠在哪種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖〔〕A.無(wú)氮培養(yǎng)基B.分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基C.纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基D.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基6.下表是一種培養(yǎng)基的配方,請(qǐng)答復(fù):牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水0.5g1.0g0.5g2.0g100mL(1)此培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分有________類(lèi),其中蛋白胨能提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有________、________、________等,瓊脂的作用是________。(2)在培養(yǎng)基定容之后,必須進(jìn)行的重要步驟是____________________。(3)該培養(yǎng)基從物理性質(zhì)看屬于________培養(yǎng)基,能培養(yǎng)的細(xì)菌從同化作用看其代謝類(lèi)型是________。(4)此培養(yǎng)基如要培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至________,如要培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至________。(5)假設(shè)用此培養(yǎng)基純化大腸桿菌,最常用的方法是________、________。最終,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)________,從而獲得純種菌株。7.平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是〔〕A.接種時(shí)再拿起來(lái)方便B.在皿底上標(biāo)記日期等方便C.正者放置容易破碎D.可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā)8.以下關(guān)于菌種保藏的表達(dá),錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔〕。A.菌種保藏的目的是保持菌種的純潔B.固體斜面培養(yǎng)基可用于菌種的臨時(shí)保藏C.菌種的長(zhǎng)期保存一般采用甘油管藏D.由于甘油管藏菌種在-20℃9.別離土壤中分解尿素的細(xì)菌,對(duì)培養(yǎng)基的要求是〔〕①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A.①③⑤⑦B.②④⑥⑧C.①③⑤⑧D.①④⑥⑦10.有關(guān)平板劃線操作的表達(dá)不正確的選項(xiàng)是〔〕A.第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B.每次劃線結(jié)束,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種C.在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液D.劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種參考答案:1.答案:C解析:綜合分析可知選擇培養(yǎng)基依次選擇的是:固氮細(xì)菌、霉菌和放線菌。2.答案:C解析:固體培養(yǎng)基需參加凝固劑,瓊脂是常用的凝固劑,但不是唯一的;青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng);發(fā)酵工程一般用液體培養(yǎng)基。自生固氮菌能夠?qū)⒖諝庵械牡獜?fù)原成氨,故培養(yǎng)基配制時(shí)不需加氮源。3.答案:C解析:
4.答案:D解析:大腸桿菌培養(yǎng)基中出現(xiàn)了多種菌落,說(shuō)明污染了雜菌,雜菌可能來(lái)自培養(yǎng)基,也可能是因?yàn)椴僮鬟^(guò)程中無(wú)菌操作不符合要求。5.答案:D解析:大腸桿菌在含碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽的培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng),A中沒(méi)有氮元素,B、C中的氮元素和碳元素不能被大腸桿菌利用。6.答案:(1)5碳源氮源維生素使培養(yǎng)基凝固(2)調(diào)節(jié)pH(3)固體異養(yǎng)型(4)酸性中性或微堿性(5)平板劃線別離法涂布別離法菌落解析:(1)此培養(yǎng)基中牛肉膏和蛋白胨含有糖、維生素(屬生長(zhǎng)因子)和有機(jī)氮,再加上NaCl、水。所以共包括5類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分。瓊脂只作為凝固劑,不起營(yíng)養(yǎng)作用。(2)培養(yǎng)基中各種成分都溶化并定容后需根據(jù)所培養(yǎng)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育的需要調(diào)整好pH后再分裝。(3)本培養(yǎng)基含有瓊脂,屬固體培養(yǎng)基,因培養(yǎng)基中含有有機(jī)物,培養(yǎng)的細(xì)菌的同化類(lèi)型為異養(yǎng)型,假設(shè)培養(yǎng)自養(yǎng)型生物,按照培養(yǎng)基配制時(shí)經(jīng)濟(jì)節(jié)約的原那么,不需加有機(jī)碳。(4)如要培養(yǎng)霉菌,培養(yǎng)基的pH需調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌需調(diào)至中性或微堿性。(5)微生物接種方法很多,如平板劃線別離法、涂布別離法,此外還有平面接種或穿刺接種等,但前兩種是最常用的。最終目的是使聚集在一起的菌種分散到培養(yǎng)基外表,形成肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體,即菌落。7.答案:D解析:平板冷凝后,要將平板倒置,使培養(yǎng)基外表的水分揮發(fā),防止皿蓋上的冷凝水掉下污染培養(yǎng)基。8.答案:D解析:接種前培養(yǎng)基都需滅菌。9.答案:C解析:試題分析:別離土壤中分解尿素的細(xì)菌,培養(yǎng)基中要有尿素、瓊脂糖、葡萄糖,尿素給分解尿素的細(xì)菌提供氮源,不加硝酸鹽??键c(diǎn):此題考查別離土壤中分解尿素的細(xì)菌的知識(shí)。意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。10.答案:C解析:在操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物,每次劃線之前都要灼燒接種環(huán),是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,在操作結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán),是為了及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,防止細(xì)菌污染環(huán)境和感
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