血型鑒定和亞型華信

ABO血型和亞型檢查北京佰利申公司市場部張松2009-9-24當前1頁，總共40頁。討論內(nèi)容ABO血型及遺傳血型試劑的現(xiàn)狀和發(fā)展ABO血型檢查和亞型診斷和案例ABO亞型輸血原則當前2頁，總共40頁。發(fā)現(xiàn)血型1900年奧地利醫(yī)生Landsteiner發(fā)現(xiàn)了ABO血型系統(tǒng)，成為血型血清學的奠基人。1932年獲諾貝爾醫(yī)學獎。被國際醫(yī)學界稱為“血型之父”血型血清學：應用血清學的方法研究血液中抗原、抗體及其反應的科學。當前3頁，總共40頁。血型與遺傳基因是遺傳的基本單位。一個個體所帶的基因總和，稱為基因型,血型抗原通常是共顯性性狀。血型血清學方法直接檢測出的基因產(chǎn)物，稱為表型。當前4頁，總共40頁。ABO血型的遺傳共由3個等位基因IA，IB和i控制的，通常為共顯性。

血型的遺傳是十分穩(wěn)定的，但也有一些特殊的情況人類ABO系統(tǒng)血型表血型表型基因型抗原(在細胞膜上)抗體基因和產(chǎn)物AIAIA,IAiAβ（抗B）IA(9q34)N-乙酰半乳糖轉(zhuǎn)移酶BIBIB,IBiBα（抗A)IB(9q34)半乳糖轉(zhuǎn)移酶ABIAIBAB-Oii-αβ（抗A抗B）i(9q34)無相應產(chǎn)物當前5頁，總共40頁。血型系統(tǒng)是指一系列等位基因產(chǎn)生的,可使用血清學方法或免疫學檢出化學上有關(guān)的抗原。當前6頁，總共40頁。血型在醫(yī)學、法醫(yī)學中的應用器官移植輸血治療疾病診斷（HDN等）疾病相關(guān)親子鑒定個體識別當前7頁，總共40頁。8ABO抗體性質(zhì)：多數(shù)為IgM，或有少量IgG，IgA天然抗體：沒有明顯抗原刺激而產(chǎn)生的抗體。免疫抗體：通過輸血、妊娠等免疫刺激獲得的抗體A型人——抗BB型人——抗A 多為IgMO型人——除具有抗A，抗B外，還有抗AB，為IgG，IgM或IgA混合物，IgG型抗A或抗B可通過胎盤。B型人抗A效價高于A型人抗B效價O型人抗A，抗B或抗AB效價高于B型或A型人相應抗A或抗B。完全缺乏抗A、抗B者，﹤0.01%。當前8頁，總共40頁。配血步入基因時代為了預防輸血不良反應和挽救生命，歐州學者們正在呼吁用DNA檢測替代血清學方法來鑒定血型?；蚍中湍芨鼫蚀_地完成供受者間的血型配型，從而防止同種免疫和其它免疫相關(guān)的輸血反應。100多年來血清學方法面臨挑戰(zhàn)。當前9頁，總共40頁。血型試劑的現(xiàn)狀與展望抗A抗B血型定型試劑：《中國生物制品規(guī)程》2000版：能檢測A2、A2B2010版藥典（正在修訂）不能低于中檢所的標準品。ISBT對定型試劑要求，既不能“漏檢”A3、B3，理想的是能識別Ax、Bx，血凝效價至少在1：128。當前10頁，總共40頁。我國抗A抗B血型試劑標準特異性：抗-A，只凝集含A抗原紅細胞，包括A1、A2、A1B、A2B;可不凝集Ax、Bx細胞。親和力：抗-A對A1細胞開始凝集的時間為15秒，對A2為30秒，對A2B為45秒；抗-B對B紅細胞為15秒。效價：抗-A11：128，抗-A2B1：16、抗-B1：128當前11頁，總共40頁。正確檢查方法和高質(zhì)量試劑缺一不可從理論到實際可以說明，不可能絕對避免亞型紅細胞“漏檢現(xiàn)象”。應用高質(zhì)量的血型試劑，應達到ISBT標準。正確的血型檢定方法：輸血規(guī)范要求，即”供受”必須做正反定型，才能正確判斷血型。確保安全輸血。當前12頁，總共40頁。13ABO亞型A亞型1911年,vonDungern發(fā)現(xiàn)A型有2種，A1，A2

A2與A1有量的差別，A2抗原位點數(shù)比A1少得多，糖基轉(zhuǎn)移酶活性也低A2與A1也有質(zhì)的差別，1-8%A2有抗A1A1細胞上有A及A1抗原A2細胞上只有A抗原A1，A2亞型實際上是由H抗原結(jié)構(gòu)造成的，H1，H2是非分支直鏈，而H3，H4為分支鏈，A1酶可將H1-4轉(zhuǎn)化為Aa-d，而A2酶只能轉(zhuǎn)化H1，H2為Aa，Ab，抗A1可能是針對Ac，Ad決定簇的。當前13頁，總共40頁。與抗A反應的相對凝集力

以及每個紅細胞上A位點的密度表現(xiàn)型凝集力抗原位點密度（每個紅細胞上的A位點X105）A1A2A3AxAendAm,AyAel10096±263±1033±1010±50010.5(7.95～14.56)2.21(1.29～3.53)0.35(0.07～1.0)0.048(0.014～0.10)0.035(0.011～0.044)0.012(0.001～0.019)0.007(0.001～0.014)當前14頁，總共40頁。亞型頻率分布獻血者檢測確定其它亞型66/440617份（除A214例，A2B35例）A亞型22份AxB11例，AelB3例，Ax3例，Ael2例，Amh2例，A31例B亞型41份Bx11例，B39例，ABx7例，AB35例，Bel3例，Bm2例，ABel1例，ABend1例，ABm1例，Bend1例。CisAB2例,B(A)1例B亞型多于A亞型。最常見亞型為AxB和Bx。有不規(guī)則抗體54例引自中國輸血雜志2006，19（1）：25當前15頁，總共40頁。血源“漏檢”亞型A3，B3漏檢：微孔板法，正反定型相符，忽略混合視野。AxB漏檢:誤定為B型，醫(yī)院配血次側(cè)不合退回。Bx漏檢：誤定為O型，輸注給O型，出現(xiàn)明顯輸血反應。A亞型的不規(guī)則抗體通常很弱，屬冷抗體，配血很容易漏檢。亞型受血者漏檢，又未查出抗體，很容易導致輸血反應。當前16頁，總共40頁。血型正定型試驗型物質(zhì)抗原數(shù)/細胞（×103）血清中抗-A1抗A、抗AB、抗H、抗A1A14+4+W+4+A，H810-1170無A24+4+3+0A，H240-2904%A32+mf2+mf4+0A，H35很少Ax0/w+1-2+4+0H4幾乎全部Am0/±0/±4+0A，H0.2-1.9無AendWkmfWkmf4+0H200(10%凝集)無Ael004+0H0.1-1.4經(jīng)常A亞型血清學反應特征當前17頁，總共40頁。主要A亞型：A1、A2亞型抗原數(shù)和分泌物質(zhì)量區(qū)別。與抗A試劑血清均可直接凝集。與抗A1試劑凝集：為A1、A1B紅細胞，占80%。與抗A1試劑不凝集：為A2、A2B紅細胞，占20%。A2、A2B紅細胞：10%,25%有抗A1抗體。A2、A2B紅細胞：血樣中不含抗A1抗體，則不必用抗A1確定其亞型。當前18頁，總共40頁。亞型有意外抗體2007某院輸血科、男、輸血前檢查，不同試劑出現(xiàn)不同結(jié)果。長春博德標清：-A（-）、-B（4+）。北京血站鑒定：A亞B。當前19頁，總共40頁。輔助檢查和吸收放散試驗進口試劑：-A(w+)、-B（4+）、-A1(-)、-H(2+w)、Ac(3+)、Bc(-)、Oc(-)、自身(W+)國產(chǎn)長春：-A(-)、-B（4+）吸收試驗：抗-A（進口）+3洗病人紅細胞各6滴混勻，放4℃冰箱1小時（混勻/15分鐘）。放散試驗：6洗吸收后紅細胞56℃/10分鐘，放散液+Ac離心→3+（效價1：8）。診斷：A亞B。建議輸B型洗滌紅細胞或O型洗滌紅細胞比較安全。當前20頁，總共40頁。B亞型案例2009年02月25日、某醫(yī)院正常體檢血型檢測B孔雙群，經(jīng)正反定進一步確證，報告B型。當前21頁，總共40頁。亞型有意外抗體2004年，某院、女、子宮肌瘤、術(shù)前輸血科血型檢查。戴安娜卡：正定：AB、反定：B，正反不符。長春博德標清：正定：B、反定：B，正反相符。對卡的血型結(jié)果提出疑問？經(jīng)北京血站鑒定：A亞B、血清中有抗A1抗體。報告發(fā)回數(shù)天后，用戶回電質(zhì)疑：其夫是B型，能生出O型孩子嗎？答案：？當前22頁，總共40頁。亞型有意外抗體2008某院、男、輸血前檢查，漏檢弱A，會誤判B型。北京血站鑒定：B（A）型、血清中有抗A1抗體。并做基因檢查（其基因型應為B（A）/O型）。家系調(diào)查：待查。當前23頁，總共40頁。亞型有意外抗體當前24頁，總共40頁。順式遺傳和B(A)順式AB指從父母的一方同時得到A和B基因，在一條染色體上，而另一條染色體上是從父母中另一方來的O基因。B（A）血型是一種罕見的ABO亞型，其A和B抗原的傳遞呈順式遺傳方式，同cisAB血型有相似之處。cisAB和B（A）表型的抗原含量各有偏重（其基因型應為B（A）/O型）。注意的是：含有不規(guī)則抗體的cisAB型、B（A）型，不宜作為普通供血者。若為受血者，除輸同型的cisAB型、B（A）型外，還可輸O型洗滌紅細胞及AB型血漿。當前25頁，總共40頁。正反定型不一致，則需要附加試劑進一步鑒定正定型中增加抗-A1、抗-H、抗-AB?？?AB用來確認弱A、弱B抗原?？笰1用于鑒定A亞型?？?H用于鑒定亞型及孟買型。反定型試驗中增加O細胞，用于鑒定是否存在ABO系統(tǒng)以外的同種抗體對定型的影響。吸收試驗、放散試驗證實抗原存在。當前26頁，總共40頁。ABO以外的同種抗體對定型的影響影響反定型的血型抗體，抗-M抗體多見試管法用O細胞與病人血漿離心看結(jié)果有凝集，即ABO以外抗體當前27頁，總共40頁。Am亞型及家系調(diào)查正定型：抗A(-)抗B(-)抗A1(-)抗AB(w+)反定型：Ac(-)Bc(3+)Oc(-)自身(-)血型物質(zhì)測定：A、H物質(zhì)吸收放散：證實：A家系：其父A其母O，子代:2個Am2個A推斷其父血型基因是A/Am,其母血型基因是O/O當前28頁，總共40頁。A3型特征：與抗-A試劑血清出現(xiàn)混合視野與抗-AB試劑血清出現(xiàn)混合視野與抗A1不凝集與抗-H反應偶爾血清中有抗-A1抗體。分泌型有A和H物質(zhì)。當前29頁，總共40頁。血站對亞型結(jié)果判斷血站對某些血型鑒定結(jié)果為：“暫定”或“初定”疑問：由于病人有過輸血或治療。某些疾病或治療影響抗體減弱或抗原生成、減弱。一般亞型可以用抗A1檢查，若陰性可以定為亞型。但新生兒本身抗原就弱，用抗A1確定亞型時，最好用正常的新生兒紅細胞用抗A1對照后，再確定結(jié)果（保證抗A1抗體的準確性）。當前30頁，總共40頁。Ax型特征：填空與抗-A試劑血清出現(xiàn)（）與抗-AB試劑血清出現(xiàn)（）與抗A1試劑血清（）與抗-H試劑血清反應（）其血清中是否有抗-A1抗體（）。分泌型有A（）H（）物質(zhì)。簡述吸收放散試驗？如何輸血？當前31頁，總共40頁。Oh(孟買）型特征：血型檢定：正定：-A（-）、-B（-）、-AB（-）、-H（-)，反定：Ac+、Bc+、Oc+抗篩：Ⅰ(+）、Ⅱ（+）、Ⅲ（+）、自身（-）鑒別Oh型、O型？Oh型輸血？當前32頁，總共40頁?？偨Y(jié)：亞型鑒定試驗紅細胞與抗A及抗A1的凝集強度。紅細胞與抗AB的凝集強度。紅細胞上H抗原活性強弱血清中是否存在抗A1抗體。分泌型人唾液中A及H物質(zhì)的存在。吸收放散試驗證明A抗原的存在。家系調(diào)查DNA當前33頁，總共40頁。臨床輸血技術(shù)規(guī)范[2000]

184號衛(wèi)生部關(guān)于《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》第十五條

輸血科（血庫）要逐項核對輸血申請單、受血者和供血者血樣，復查受血者和供血者ABO血型（正、反定型)除新生兒外，ABO血型檢測必須做正反定型ABO正反定型不一致時重復試驗，排除技術(shù)原因詢問患者病史，包括診斷、輸血史等不可根據(jù)自己經(jīng)驗，隨意下結(jié)論當前34頁，總共40頁?！杜R床輸血技術(shù)規(guī)范》輸血前檢查“三保險”ABO血型：相合99.4%，RHD：相合99.8%抗體篩查：相合99.94%交叉配血：相合99.95%當前35頁，總共40頁。疑難血型/配血，緊急輸血怎么辦？輸血前檢查（血型、抗篩、配血）與常規(guī)血液血檢查不同，如：Hb、WBC、PT可直接報結(jié)果。血型報告是綜合分析結(jié)果（診斷？）不是直接報告結(jié)果。如：正定（AB)、反定（O）→直接結(jié)果幾分鐘可報告。分析結(jié)果（到底是什么血型）？許多補充試驗→幾小時→幾天→外送。輸血科與醫(yī)生溝通：血型報告O/A/B?相當于臨床診斷休克/原因待查（？）疑似非典。政策依據(jù)《臨床技術(shù)規(guī)范》第10條，對稀有血型患者（疑難必稀有）輸血原則：自身輸血、同型輸血、配合型輸血。配合性輸血（沒有要求供受同型），不必為糾纏血型而耽誤輸血搶救。當前36頁，總共40頁。疑難血型/配血，緊急輸血怎么辦？例：血液病、亞型（疑難）血型：A?O?→進一步確定血型：吸收、放散、血型物質(zhì)、抗-H、家系、DNA