演示文稿分子相互作用儀講座

演示文稿分子相互作用儀講座當(dāng)前1頁，總共36頁。分子相互作用儀講座當(dāng)前2頁，總共36頁。ForteBioInc.2004年由華人物理學(xué)家創(chuàng)立,2009年開始在中國(guó)銷售專利的生物膜干涉Bio-LayerInterferometry(BLI)技術(shù)總部在美國(guó)硅谷全球超過350個(gè)用戶，中國(guó)14個(gè)用戶全球第二的專業(yè)非標(biāo)記技術(shù)廠商SDi2010MarketReportsurvey成長(zhǎng)最快速的非標(biāo)記技術(shù)公司公司發(fā)展的遠(yuǎn)景：成為每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都能擁有的分子互作系統(tǒng)當(dāng)前3頁，總共36頁。專業(yè)的服務(wù)在中國(guó)有2名硬件工程師，3名應(yīng)用工程師除了提供批量生產(chǎn)的生物傳感器以外，還可以為用戶定制傳感器提供實(shí)驗(yàn)方法開發(fā)和優(yōu)化服務(wù)當(dāng)前4頁，總共36頁。國(guó)內(nèi)用戶名單軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院2臺(tái)NovoNordisc中國(guó)研發(fā)中心中國(guó)生物制品藥品檢定所神州細(xì)胞工程有限公司中科院武漢病毒所廈門大學(xué)天津商業(yè)大學(xué)上海藥明康德新藥開發(fā)有限公司GSK中國(guó)研發(fā)中心Novartis中國(guó)研發(fā)中心上海旭華生物科技有限公司江蘇太平洋美諾克生物藥業(yè)有限公司江蘇泰康生物醫(yī)藥有限公司當(dāng)前5頁，總共36頁。實(shí)時(shí)檢測(cè)，非標(biāo)記的

生物分子互作檢測(cè)平臺(tái)

當(dāng)前6頁，總共36頁。Octet可分析多種生物分子間的相互作用CellsBacteriaVirusIgMIgAIgG,IgD,IgEAntibodyFragmentsProteinsPeptidesNucleotides(DNA)SmallMoleculesAtoms200nm1000nm0.1nm11,000100,0001,000,00075nm150MWSize7nm1nmBacteriaVirusAntibody-AntigenReceptor-LigandDNA-DNADNA-ProteinAntibodyFragment-AntigenAntigen–FusionProteinAntibody-PeptideMultipleAntibodyPairingsAntibody-SmallMoleculeProtein-SmallMoleculeCurrentOctetassayswithinbluearea當(dāng)前7頁，總共36頁。親和力測(cè)定BindingKDOnandoffratesRankorder結(jié)合特異性Yes/NokineticscreeningEpitopebinning/mapping蛋白質(zhì)濃度定量（混合物）PicogramtomilligramdynamicrangeContaminanttestingOctet系統(tǒng)可提供的數(shù)據(jù)

當(dāng)前8頁，總共36頁。OctetSolutionforDrugDevelopmentWideFitWithinDiscoveryandDevelopmentProcessLeadCharacterizationScreeningPreclinicalandClinicalManufacturingandQCAssaydevelopmentExpressionmonitoringCloneselectionandrankingEpitopemappingSmallmoleculeorligandscreeningKineticscreeningofhybridomasSecondaryhitconfirmationAffinitymeasurementOnandoff-ratesBindingaffinityrankingKineticprofilingofimmunotherapeuticsRapidconcentrationmeasurementsImmunogenicity21CFRCompliantProductionmonitoringProcessoptimizationProteinandsmallmoleculetherapeuticsFastandaccurateconcentrationmeasurementsResearch當(dāng)前9頁，總共36頁。Octet系統(tǒng)和特點(diǎn)當(dāng)前10頁，總共36頁。Octet系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)更高的通量,更快的實(shí)驗(yàn)流程8-16個(gè)樣品同時(shí)檢測(cè)，是非標(biāo)記技術(shù)中通量最高的15-30分鐘可以完成96個(gè)樣品的分析沒有溶液控制系統(tǒng)，不需要清洗和維護(hù)流路，直接開始讀取數(shù)據(jù)操作簡(jiǎn)單適應(yīng)多用戶的情況，經(jīng)過半天的培訓(xùn)就可以操作和使用不需要特別優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，傳感器是拋棄式的更寬的應(yīng)用范圍直接檢測(cè)粗制的樣品，甚至是樣品中存在不溶解的成分耐受各種溶液環(huán)境，只有結(jié)合到傳感器表面的分子才會(huì)被檢測(cè)病毒顆粒等大分子樣品也能得到動(dòng)力學(xué)結(jié)果檢測(cè)共價(jià)鍵結(jié)合的樣品更低使用和維護(hù)的成本相對(duì)其他的非標(biāo)記檢測(cè)系統(tǒng)，耗材的成本低系統(tǒng)穩(wěn)定，未來的使用和維護(hù)成本也低當(dāng)前11頁，總共36頁。傳感器種類12種ApplicationSensorTypeRegenerationQuantitationAnti-HumanIgGFcAnti-MurineIgG(Fab’)2ProteinA/G/LStreptavidin(SA)Anti-Penta-HIS(HIS)YesYesYesYesKineticsStreptavidin(SA)SuperStreptavidin(SSA)AmineReactive(AR)Aminopropylsilane(APS)Anti-hIgGFcCaptureSurface(AHC)Anti-mouseCaptureSurfaceYesYesYesYesYesKitsDipandReadImmunogenicityKitDipandReadResidualProteinADetectionKitNoNo可以根據(jù)用戶的應(yīng)用設(shè)計(jì)傳感器為目前種類最多的供應(yīng)商當(dāng)前12頁，總共36頁。傳感器可再生使用ADAIDCycle#nmShiftMab#210.7049Mab#220.7435Mab#230.7431Mab#240.7822Mab#250.7702Mab#260.6712Mab#270.7221Mab#280.7654Mab#290.7515Mab#2100.7729Streptavidin(SA)sensor表面固定了生物素化的蛋白質(zhì)藥物10%的猴血清樣品，含有抗該藥物的抗體可同時(shí)平行優(yōu)化8種傳感器再生條件每個(gè)傳感器表面結(jié)合抗體以后進(jìn)行再生，如此反復(fù)10次由于8個(gè)傳感器上的數(shù)據(jù)可以同時(shí)檢測(cè)，因此3分鐘內(nèi)就可以得到8個(gè)數(shù)據(jù)最終每個(gè)樣品的檢測(cè)成本僅為4元人民幣Avg.nmShift0.7427StDev0.0346%CV4.7%Regenerationsolution=1mMHCl當(dāng)前13頁，總共36頁。Octet產(chǎn)品簡(jiǎn)介OctetInstruments5種型號(hào)-OctetQK,OctetQke,OctetRED,OctetQK384,OctetRED384使用通用的樣品板(96and384well)沒有流路系統(tǒng)樣品經(jīng)過檢測(cè)后，仍然留在原處，可以回收再使用Biosensors浸入樣品即檢測(cè)，1至16個(gè)樣品可以同時(shí)檢測(cè)10種傳感器可供選擇，分析不同種類的樣品傳感器為拋棄式設(shè)計(jì)，既可以檢測(cè)共價(jià)鍵結(jié)合的樣品也可以再生使用Softwareandcomputer常用實(shí)驗(yàn)方法已經(jīng)預(yù)制在模板中不需要單獨(dú)購買軟件Validationoptions經(jīng)過驗(yàn)證,提供IQOQ服務(wù),符合美國(guó)FDACFRPart11標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)前14頁，總共36頁。OctetSystemSpecificationsOctetQKOctetQKeOctetQK384OctetRED96OctetRED384MolecularWeightRange>10,000D>5000D>5000D>150D>150DDataAcquisitionRate0.6Hz0.3Hzor0.6Hz0.3Hzor0.6Hz2,5,or10Hz2,5,or10Hz#Spectrometers112816#ChannelsperRead1-81-81-161-81-16MicroplatePositions11212BiosensorRerackingNoYesYesYesYesRobotCompatibleNoNoYesNoYesMicroplateFormats96,96HA96,96HA96/96HA384/384TW9696/96HA384/384TWMinimumSampleVolume80μLperwell80μLperwell40μLperwell180μLperwell40μLperwellAffinityrange(approximate)0.1mMto0.1nM0.1mMto0.1nM0.1mMto0.1nM1mMto10pM1mMto10pMSampleUsageNon-destructiveandrecoverableTemperatureControl4°Caboveambientto40°C21CFRPart11ComplianceAvailableasoptionforallsystems96HA 96wellmicroplatewithhalf-areawellsize384TW ForteBio384tilted-wellmicroplate當(dāng)前15頁，總共36頁。Octet384系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)

兼容96孔板和384孔板更高的通量,更少的樣品消耗最小體積只要40ul

16通道同時(shí)檢測(cè)，讓所需實(shí)驗(yàn)時(shí)間更短

兩個(gè)樣品板位置更多的實(shí)驗(yàn)方案一次連續(xù)分析更多樣品

全自動(dòng)化解決方案可與多種液體工作站連接當(dāng)前16頁，總共36頁。Octet全自動(dòng)功能AutomateddoorandplatestageWorkswitharticulatedarmandtrack-styleroboticsystemsPlatestagepresentsthebiosensortray,sampleandreagentplatesforrobotOctetsoftwarehasautomationhooksenabledtointeractwithrobotsoftware當(dāng)前17頁，總共36頁。Octet“96”系統(tǒng)的內(nèi)部

自動(dòng)化的傳感器移動(dòng)樣品一直保留在微孔板內(nèi)，是不破壞樣品的檢測(cè)“浸入”式檢測(cè)，檢測(cè)快8通道同時(shí)檢測(cè)，一次可檢測(cè)多個(gè)樣品當(dāng)前18頁，總共36頁。Octet384系統(tǒng)的內(nèi)部?jī)蓚€(gè)微孔板的位置，一次可連續(xù)分析更多的樣品每個(gè)微孔板獨(dú)立使用，即可以是96孔板，也可以是384孔板。即可以同時(shí)使用一塊96孔板+384孔板根據(jù)實(shí)驗(yàn)步驟設(shè)定將傳感器在樣品板的不同位置移動(dòng)當(dāng)前19頁，總共36頁。當(dāng)生物分子結(jié)合到傳感器表面就形成了一層生物膜生物膜對(duì)透過傳感器的光的波形造成干涉現(xiàn)象干涉現(xiàn)象以相位移動(dòng)的方式被檢測(cè)，從而可以檢測(cè)結(jié)合到傳感器分子數(shù)量的變化生物膜光干涉技術(shù)Bio-LayerInterferometry(BLI)當(dāng)前20頁，總共36頁。Y=Y0+Ae-kd*t

Y=Y0+A(1-e-kobs*t)

kobs–kd[ConcAg(M)]ka=Ab+AgComplexkakdKD=kdka

Forsimple1:1binding:ka=rateofassociationor“on-rate”kd

=rateofdisassociationor“off-rate”Non-linearcurvefitofdata生物分子結(jié)合動(dòng)力學(xué)當(dāng)前21頁，總共36頁。BufferLigand-BiotinProteinofInterestBinding(nm)TimeBaselineLoadingBaselineAssociationDissociation8-16個(gè)樣品可以被同時(shí)平行檢測(cè)檢測(cè)數(shù)據(jù)被事實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)方法可根據(jù)用戶的要求來設(shè)計(jì)動(dòng)力學(xué)和親和力由軟件分析得到OctetBiosensorsOctet系統(tǒng)測(cè)定動(dòng)力學(xué)的工作流程當(dāng)前22頁，總共36頁。OctetRED進(jìn)行蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的工作流程

StandardsTest

SamplesBinding(nm)Time(sec)BindingRateConcentration利用標(biāo)準(zhǔn)品在不同濃度時(shí)結(jié)合速率的差異來定量樣品的濃度15-30分鐘可以分析各樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線可以重復(fù)使用病毒顆粒等其他樣品也可定量OctetBiosensors120當(dāng)前23頁，總共36頁。Octet軟件

可靈活輸出各種格式，Excel表，JEPG格式等動(dòng)力學(xué)分析直接得到ka,kdandKD結(jié)果濃度分析直接得到，ug/ml,ng/ml等濃度計(jì)算結(jié)果當(dāng)前24頁，總共36頁?？焖僭鲩L(zhǎng)的文獻(xiàn)發(fā)表數(shù)量從2005年底有第一個(gè)用戶，到2010年有超過100多篇文獻(xiàn)的發(fā)表當(dāng)前25頁，總共36頁。MultipleSystemsatTopPharmaandBiotech

當(dāng)前26頁，總共36頁。OctetAcademicandGovernmentCustomers

CenterforDiseaseControlEmoryUniversityErasmusMedicalCenterFachhochschuleNordwestschweizBaselFloridaGulfCoastUniversityInstituteofBasicMedicalSciencesAcademyInternationalAIDSVaccineInstituteJeonnamInstituteKagoshimaUniversityKennesawStateUniversityKoreaUniversityNIHPennStateUniversityScrippsFloridaSt.JudeUniversityStanfordUniversityTexasA&MUniversityTUDarmstadtUniversit?tWürzburgUniversityofCambridgeUniversityofFloridaUniversityofSouthFloridaUniversityofMichiganUniversityofPittsburghCancerInstituteUpstateMedicalCollegeMDAndersonCancerCenterVanAndelInstituteVanderbiltUniversityViennaInstituteofBiotechnologyXiamenUniversity當(dāng)前27頁，總共36頁。StudyLiposomesandVirusLikeParticales當(dāng)前28頁，總共36頁。Mutant2

FullAnalysisWith3ConcScreening(20nMonlyinduplicate)ka(1/Ms)2.56E+052.73E+05kd(1/M)2.41E-052.59E-05Kd(M)9.41E-119.49E-11Mutant1

FullAnalysisWith3ConcScreening(20nMonlyinduplicate)ka(1/Ms)2.84E+053.21E+05kd(1/M)8.59E-059.46E-05Kd(M)3.02E-102.95E-10EasilyDetermineFullKineticsCharacterizationDataprovidedbyGenitope當(dāng)前29頁，總共36頁。MatrixBufferKaKdKD50%Plasma5.20E67.91E-61.52E-12PBS4.39E66.63E-61.51E-12OctetQKAssociation1500ng/mLAg1130ng/mLAg760ng/mLAg390ng/mLAg205ng/mLAg113ng/mLAg20ng/mLAgTestKineticsofAb/AginteractionDirectlyinPlasma當(dāng)前30頁，總共36頁。WhatareLiposomes/VLPs?Liposomes(viruslikeparticles-VLPs)aretiny“bubbles”(vesicles)madeoutofthesamematerialasthecellmembrane.Theyarenotnaturallyoccurring.Theyaremadeofphospholipids,withahydrophilic(water-soluble)head,andhydrophobic(lipid-soluble)tailSizevaries,typicallyfrom10-150nmindiameter當(dāng)前31頁，總共36頁。