課件6陰道宮頸分泌物檢查(甘雪華)

本文格式為Word版，下載可任意編輯——課件6陰道宮頸分泌物檢查(甘雪華)臨川區(qū)婦幼保健院檢驗科楊國林宮頸癌檢查技術(shù)操作（陰道及宮頸分泌物檢查）（一）陰道/宮頸分泌物檢查方法及部位檢查方法取材部位及方法檢查目的陰道分泌物濕片鏡檢陰道側(cè)壁上1/3檢查有無滴蟲、假菌絲或芽生孢子、線索細(xì)胞及清潔度陰道分泌物涂片革蘭染色鏡檢陰道側(cè)壁上1/3線索細(xì)胞、加德納菌、厭氧菌、假菌絲或芽生孢子、乳桿菌等宮頸分泌物涂片革蘭染色鏡檢宮頸管內(nèi)1-2cm，稍用力轉(zhuǎn)動，停留10-30秒后取出中性粒細(xì)胞、淋病奈瑟菌陰道/宮頸分泌物檢查方法及部位（二）陰道分泌物檢查1.胺試驗原理細(xì)菌性陰道病時，正常菌群乳酸桿菌裁減或消散，而陰道加德納菌、厭氧菌及人型支原體等微生物過度生長，導(dǎo)致乳酸桿菌產(chǎn)生的乙酸濃度降低，而厭氧菌的代謝產(chǎn)物胺類如腐胺、尸胺和三甲胺增多，使陰道分泌物PH值增高。在分泌物中滴加10KOH可導(dǎo)致游離氨釋放，產(chǎn)生典型的魚腥樣氣味，該試驗被稱為胺試驗。

標(biāo)本采集插入窺器，暴露陰道和宮頸后，查看分泌的色澤，用拭子從陰道側(cè)壁上中1/3處取分泌物。

方法和結(jié)果①.PH值測定使用PH范圍在3.8-5.4的細(xì)致PH試紙。用拭子取出陰道分泌物后，直接與PH試紙接觸讀PH值。也可在窺器從陰道取出后，將PH試紙直接接觸其下葉凹窩處分泌物讀PH值。

②.胺試驗取少量陰道分泌物置于載玻片上，加一滴10KOH，聞到氨味或魚腥樣氣味即為胺試驗陽性。

臨床意義正常成人陰道分泌物呈酸性，PH值為3.8-4.5左右。在細(xì)菌性陰道病時PH值通常4.5。PH值測定的敏感性較高（92-97），但特異性低。陰道分泌物污染了月經(jīng)血、宮頸粘液及患者有滴蟲感染時，其PH值亦可增高。

2.陰道分泌物濕片鏡檢標(biāo)本采集插入窺器，暴露陰道和宮頸后，查看分泌物的色澤，用滅菌拭子從陰道側(cè)壁上1/3處取分泌物。

方法與結(jié)果在載玻片上加1滴或2滴生理鹽水，將陰道分泌物與生理鹽水混合成懸液，加蓋玻片后，在顯微鏡下檢查。

①.將陰道分泌物加生理鹽水作涂片，用高位鏡檢查，主要依靠上皮細(xì)胞、桿菌與球菌的比例、白細(xì)胞的數(shù)量劃分清潔度。

陰道分泌物清潔度分級清潔度桿菌球菌上皮細(xì)胞白細(xì)胞臨床意義Ⅰ0-5/HPF正常Ⅱ5-15/HPF大致正?；蚣?xì)菌性陰道病Ⅲ15-30/HPF提示炎癥Ⅳ30/HPF多見于嚴(yán)重的陰道炎和/宮頸炎\盆腔炎②.在低倍鏡（10X10）下檢查，探索呈典型晃動運動的毛滴蟲。

③.在高倍鏡（10X40）下檢查，查看假絲酵母菌（孢子和假菌絲）和毛滴蟲，以及線索細(xì)胞。線索細(xì)胞為陰道上皮細(xì)胞表面吸附或聚集大量球桿菌，使細(xì)胞呈顆粒狀外觀，細(xì)胞邊緣模糊不清呈鋸齒狀。

注將標(biāo)本溶于1滴生理鹽水，并參與1滴10KOH溶液，更輕易識別假絲酵母菌，由于KOH能將其它細(xì)胞溶解。

白色念珠菌臨床意義①.陰道分泌物清潔度分級的臨床意義②.濕片檢查見到活動滴蟲，可診斷滴蟲性陰道炎，但其敏感性僅38-82，尤其是對無病癥的滴蟲感染者診斷率較低。

③.濕片中查看到假菌絲或芽生孢子支持假絲酵母菌性陰道病的診斷，10KOH濕片檢查的敏感性85。

④.一般認(rèn)為當(dāng)線索細(xì)胞占全部上皮細(xì)胞的20以上時為線索細(xì)胞陽性。根據(jù)線索細(xì)胞能切實診斷85-95的細(xì)菌性陰道。

⑤.卵巢功能缺乏、雌激素減低，陰道上皮增生較差時可見到陰道桿菌裁減，易感染。當(dāng)清潔度為Ⅲ-Ⅳ度時?？赏瑫r察覺病原微生物，提示存在感染引起的陰道炎和/或?qū)m頸炎、盆腔炎。

3.陰道分泌物涂片革蘭染色鏡檢標(biāo)本采集插入窺器，暴露陰道和宮頸后，查看分泌物的外觀，用棉拭子從陰道側(cè)壁上1/3處取分泌物。陰道分泌物標(biāo)本采集前24小時內(nèi)遏止性交、盆浴、陰道灌洗及局部用藥等，以免影響檢查結(jié)果。分泌物經(jīng)固定與革蘭染色后，置于鏡下查看。

結(jié)果判斷在油鏡（10X100）下檢查涂片，查看陰道菌群的處境及有無線索細(xì)胞。正常陰道菌群以乳酸桿菌占優(yōu)勢，可能有少量的球菌和棒狀桿菌。

乳酸桿菌為在的革蘭陽性桿菌，末端鈍圓或平齊，呈單根、鏈狀排列。細(xì)菌性陰道病時乳酸桿菌裁減或消散，而其它細(xì)菌增多，呈混合菌群。陰道加德納菌為革蘭染色不定性球桿菌，厭氧包括動彎桿菌、普氏桿菌或陽性球菌。

臨床意義革蘭染色鏡檢查看細(xì)菌的染色性、形態(tài)和排列，查看假絲酵母菌孢子和假菌絲。革蘭染色鏡檢查看陰道分泌物中線索細(xì)胞的敏感性和特異性高于濕片法，分別為89和93。

（三）宮頸分泌物涂片革蘭染色鏡檢標(biāo)本采集插入窺器，暴露陰道和宮頸，假設(shè)宮頸口外面的分泌物較多，先用滅菌拭子除掉過多的分泌物。將女用取材拭子插入宮頸管內(nèi)1-2cm，稍用力轉(zhuǎn)動，停留10-30秒后取出。分泌物經(jīng)固定與革蘭染色后，置于顯微鏡下查看。

結(jié)果判斷在油鏡下（10X100）檢查涂片。留神查看細(xì)胞類型（如上皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞），病原體的染色特性（革蘭陽性或陰性）、外形（球狀或桿狀）、排列及位置（細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外）等。在中性粒細(xì)胞內(nèi)見到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌那么支持淋菌性宮頸炎的診斷。

臨床意義①.宮頸分泌物涂片革蘭染色鏡檢多形核白細(xì)胞數(shù)≥15/HPF，或油鏡下可見每視野多形核白細(xì)胞10個提示有宮頸感染，為診斷黏液膿性宮頸炎的指標(biāo)之一。

②.革蘭染色診斷宮頸淋球菌感染與培養(yǎng)的符合率50-70，確診需做淋病奈瑟菌培養(yǎng)。

（四）淋病奈瑟菌培養(yǎng)標(biāo)本采集插入窺器，暴露陰道和宮頸，假設(shè)宮頸口外面的分泌物較多，先用無菌棉拭除掉過多的分泌物。將女用取材拭子插入宮頸管內(nèi)1-2cm，稍用力轉(zhuǎn)動，停留10-30秒后取出。男性尿道分泌物標(biāo)本采集生理鹽水清洗尿道口，男用拭子插入尿道口1-2cm，停留10余秒鐘，輕輕旋轉(zhuǎn)采集標(biāo)本。

結(jié)果判斷標(biāo)本培養(yǎng)24-48小時后查看結(jié)果，48小時仍無菌生長時，可作出淋病奈瑟菌培養(yǎng)陰性的報告。對選擇性培養(yǎng)基上分開的可疑菌落應(yīng)作初步鑒定和確證性鑒定。菌落特征，革蘭染色和氧化酶試驗是初步鑒定淋球菌的三個主要指標(biāo)。確證性鑒定是在初步鑒定的根基上利用生化回響將細(xì)菌鑒定到種。

菌落特征生長24小時淋病奈瑟菌菌落直徑大約為0.5-1mm,呈圓形、灰白色、潤濕、光滑、半通明呈露滴樣凸起菌落。

氧化酶試驗試劑為1鹽酸四甲基對苯二胺或1鹽酸二甲基對苯二胺溶液。在10-15秒內(nèi)展現(xiàn)深紫紅色（二甲基對苯二胺）或深紫色（四甲基對苯二胺）即為陽性回響。淋病奈瑟菌氧化酶試驗為陽性，但氧化酶回響并非特異性試驗。全體奈瑟菌屬細(xì)菌及大量其它細(xì)菌亦呈陽性。如氧化酶陰性，一般可擯棄淋病奈瑟菌。

革蘭染色取單個可疑菌落制備涂片作革蘭染色鏡檢。24小時的嶄新菌落可見到呈典型腎形的革蘭陰性雙球菌（約占25），其余呈單個、四聯(lián)或八疊形。

臨床意義淋病奈瑟菌培養(yǎng)是診斷淋病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，