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文檔簡介

Ⅲ動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)

和克隆動(dòng)物

將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)1.概念:一、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)供體細(xì)胞:提供細(xì)胞核的細(xì)胞受體細(xì)胞:接受細(xì)胞核的細(xì)胞(即去核的卵母細(xì)胞)結(jié)果:獲得克隆動(dòng)物(用核移植方法得到的動(dòng)物)2.原理:動(dòng)物細(xì)胞核的全能性3.生殖方式:無性生殖5.非人靈長類動(dòng)物體細(xì)胞核移植困難的原因①供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化前的功能狀態(tài),這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低②對(duì)非人靈長類動(dòng)物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)尚不完善非人靈長類動(dòng)物:具有許多與人類相似的生物學(xué)特征的靈長類動(dòng)物4.種類胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:分化程度低,表現(xiàn)全能性相對(duì)容易分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植二、體細(xì)胞核移植的過程采集卵母細(xì)胞供體體外

培養(yǎng)MⅡ期體細(xì)胞體細(xì)胞培養(yǎng)顯微操作去核供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞融合,形成重構(gòu)胚用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚將胚胎移入(受體)代孕母牛體內(nèi)克隆動(dòng)物采集卵母細(xì)胞供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)MⅡ期供體取體細(xì)胞顯微操作去核體細(xì)胞培養(yǎng)電融合法兩細(xì)胞融合重構(gòu)胚激活早期胚胎胚胎移植代孕個(gè)體克隆動(dòng)物1.MⅡ期:減數(shù)分裂Ⅱ中期2.為什么要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到MⅡ期?

①細(xì)胞體積比較大,易操作;

②細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。3.為什么要去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核?

保證克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)最大限度來自優(yōu)良供體4.去核的實(shí)質(zhì)是:去除“紡錘體—染色體復(fù)合物”5.為什么核移植操作是將整個(gè)供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中?

①對(duì)卵母細(xì)胞損傷較小;

②保證供體細(xì)胞的細(xì)胞核不被破壞;

③操作方便6.誘導(dǎo)供體細(xì)胞和受體細(xì)胞融合的方法:電融合法7.什么是重構(gòu)胚?

重構(gòu)胚是指人工重新構(gòu)建的胚胎,具有發(fā)育成完整個(gè)體的

能力8.為什么要激活重構(gòu)胚?用什么方法激活?

(1)使重構(gòu)胚完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程;

(2)物理方法:電融合法;

化學(xué)方法:Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑9.克隆動(dòng)物與哪個(gè)個(gè)體最相似?與該個(gè)體是否完全相同?為什么?克隆動(dòng)物與供體相似但又不完全相同。因?yàn)榭寺?dòng)物與供體的核基因完全相同,但質(zhì)基因同時(shí)來自供體細(xì)胞和受體卵母細(xì)胞;此外,生物體的性狀還受環(huán)境的影響。10.該過程應(yīng)用到的生物技術(shù)有哪些?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植三、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景1.在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程、促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育2.在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用(1)通過建立轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞系,再利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)許多珍貴的醫(yī)用蛋白。乳腺生物反應(yīng)器(2)在治療人類疾病時(shí),轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織或器官可以用于異種移植。(3)以患者作為供體,培育的人核移植胚胎干細(xì)胞,經(jīng)過誘導(dǎo)分化能形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官,將它們移植給患者時(shí)可以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。3.在科研領(lǐng)域的應(yīng)用(1)研究克隆動(dòng)物可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程。(2)克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)物,可以通過它們之間的對(duì)比來分析致病基因。(3)克隆特定疾病模型的動(dòng)物,還能為研究該疾病的致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。4.在保護(hù)瀕危物種方面的應(yīng)用該技術(shù)有望增加瀕危物種的存活數(shù)量四、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題1.成功率低,各技術(shù)環(huán)節(jié)

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