(抗生素類藥物的分析)

30三月2023(抗生素類藥物的分析)抗生素是指由微生物所產(chǎn)生、極微量即具有選擇性地抑制或殺滅其他微生物的一類有機(jī)化合物。一、抗生素藥物的特點(diǎn)第一節(jié)概述*生物合成（發(fā)酵）*化學(xué)合成或半合成細(xì)菌放線菌真菌2控制抗生素質(zhì)量的復(fù)雜性*發(fā)酵過程不易控制生產(chǎn)工藝復(fù)雜發(fā)酵液中含有各種無機(jī)鹽、脂肪、蛋白質(zhì)、降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì)*發(fā)酵過程易受污染*分子結(jié)構(gòu)多不穩(wěn)定穩(wěn)定性差*降解后療效↓

失效毒副作用↑3二、抗生素藥物的質(zhì)量分析方法（一）鑒別1.理化法2.生物學(xué)法（1）化學(xué)法（2）儀器法對(duì)照品法4例青霉素鈉ChP（2000）【鑒別】（1）取本品與已知含量的青霉素適量，分別加水制成每1ml中約含50mg的溶液，各取1ml，加入不少于200單位的青霉素酶溶液1ml，在37℃滅活1小時(shí)后，取滅菌濾紙片，分別用上述溶液浸濕后，用濾紙吸去多余的液體，置攤布金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003]的培養(yǎng)基上。在37℃培養(yǎng)約16小時(shí)后均無抑菌作用，而用同一方法檢查未經(jīng)青霉素酶滅活的溶液均有抑菌作用。5（二）檢查常增加“安全性檢查”【檢查】異常毒性熱原細(xì)菌內(nèi)毒素降壓物質(zhì)無菌6例鹽酸四環(huán)素ChP（2005）【檢查】酸度溶液的澄清度有關(guān)物質(zhì)干燥失重雜質(zhì)吸光度熱原無菌7（三）含量測(cè)定1.生物學(xué)方法以生物學(xué)方法或生化方法測(cè)定生理活性物質(zhì)，并按效價(jià)單位（IU）計(jì)算的測(cè)定方法抗生素微生物檢定法8例磺芐西林鈉ChP（2005）【含量測(cè)定】精密稱取本品適量，用滅菌水制成每1ml中約含1000單位的溶液，照抗生素微生物檢定法（附錄ⅪA）測(cè)定。1000磺芐西林單位相當(dāng)于1mg的C16H18N2O7S2。9微生物檢定法優(yōu)點(diǎn)

*與臨床效果一致*靈敏度高*干擾物質(zhì)少

*可測(cè)定未知藥物缺點(diǎn)

*操作繁瑣*耗時(shí)*準(zhǔn)確度、精密度差10以理化方法測(cè)定主藥含量，按有效物質(zhì)的質(zhì)量計(jì)算的測(cè)定方法2.理化方法優(yōu)點(diǎn)*準(zhǔn)確度高*簡(jiǎn)便快速缺點(diǎn)*不一定代表生物效價(jià)*易受雜質(zhì)干擾*僅用于己知藥物11例ChP（2005）【含量測(cè)定】青霉素類滴定法UVHPLC法微生物檢定法頭孢菌素類HPLC法汞量法碘量法12三、抗生素的分類細(xì)菌枯草菌真菌青霉素類、頭孢類、灰黃霉素放線菌鏈霉素1.按產(chǎn)生菌分類廣譜青霉素、頭孢類G+紅霉素（金葡菌）

G-卡那霉素、慶大霉素綠膿桿菌阿莫西林2.按抗菌譜分類3.按作用機(jī)制分類抑制轉(zhuǎn)肽酶交聯(lián)方式青霉素抑制蛋白質(zhì)合成過程紅霉素影響細(xì)胞膜通透性多粘菌素4.按化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)分類β－內(nèi)酰胺類多烯大環(huán)類氨基糖苷類多肽類四環(huán)素類苯烴胺類大環(huán)內(nèi)酯類蒽環(huán)類等

13第二節(jié)β－內(nèi)酰胺類抗生素青霉素類青霉素鈉（鉀）氨芐西林（鈉）阿莫西林（鈉）普魯卡因青霉素頭孢菌素類頭孢氨芐頭孢羥氨芐頭孢拉啶頭孢噻吩鈉14

青霉素類頭孢菌素類一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)-內(nèi)酰胺環(huán)氫化噻唑環(huán)氫化噻嗪環(huán)15青霉素類6-氨基青霉烷酸（6-APA）不穩(wěn)定***手性C酸性酰胺側(cè)鏈16青霉素G（芐青霉素）（K）青霉素鉀（Na）青霉素鈉17氨芐西林（氨芐青霉素）18阿莫西林（羥氨芐青霉素）19·普魯卡因青霉素20磺芐西林鈉21頭孢菌素類7-氨基頭孢菌烷酸（7-ACA）不穩(wěn)定酸性酰胺側(cè)鏈**手性C22頭孢氨芐23頭孢羥氨芐24頭孢拉定25（二）性質(zhì)*與堿金屬成鹽易溶于水pKa=2.5～2.81.羧基酸性*與有機(jī)堿成鹽難溶于水26難溶于水易溶于有機(jī)溶劑青霉素K+易溶于水難溶于有機(jī)溶劑青霉素鉀青霉素鈉溶解性272.手性C（5%頭孢唑啉鈉溶液

–18～–24°）旋光性*****283.共軛體系UV294.β-內(nèi)酰胺環(huán)水溶液不穩(wěn)定、易開環(huán)干燥純凈較穩(wěn)定易降解失效四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解不穩(wěn)定性因素30溫度↑氧化劑（頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%）（青霉素鈉水溶液30℃24h失活56%）Cu2+、Pb2+、Hg2+、Ag+31青霉素的降解反應(yīng)青霉胺orHgCl2H+青霉烯酸pH4青霉二酸pH2青霉醛-CO2脫羧青霉噻唑酸H+△-CO2青霉素青霉噻唑酸OHˉHgCl2HgCl2△H+or醇32不同pH條件下青霉素鈉降解情況24℃0.41.4129233621812531.29.31.4半衰期(h)234567891011pH33溫度對(duì)青霉素鈉穩(wěn)定性的影響pH2，30′溫度℃52637↓%

6779734二、鑒別反應(yīng)（一）羥肟酸鐵反應(yīng)OH-紅褐色Fe3+/3H+35OH-Fe3+/3H+36例磺芐西林鈉ChP（2000）【鑒別】（1）取本品約20mg，加水15ml溶解后，加鹽酸羥胺試液與氫氧化鈉試液各2ml，放置5分鐘后，加鹽酸溶液（1→100）3ml與三氯化鐵試液1ml，隨即振搖，即顯赤褐色。例頭孢哌酮ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約10mg，加水2ml與鹽酸羥胺溶液3ml，振搖溶解后，放置5分鐘，加酸性硫酸鐵銨試液1ml，搖勻，顯紅棕色。37（二）各種鹽的鑒別溶解有機(jī)溶劑過量HCl1.沉淀反應(yīng)38例青霉素鈉青霉素鉀ChP（2000）【鑒別】（2）取本品約0.1g，加水5ml溶解后，加稀鹽酸2滴，即生成白色沉淀；此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或過量的鹽酸中溶解。392.K+、Na+的反應(yīng)附錄ⅢK+火焰→紫色+

0.1%四苯硼鈉

+

HAc→↓白Na+火焰→鮮黃色+

醋酸氧鈾鋅→↓黃40例青霉素鈉ChP（2005）【鑒別】（4）本品顯鈉鹽的火焰反應(yīng)（附錄Ⅲ）。例青霉素鉀ChP（2005）【鑒別】（3）本品顯鉀鹽的火焰反應(yīng)（附錄Ⅲ）。41·3.有機(jī)胺鹽的特殊反應(yīng)（1）普魯卡因的反應(yīng)芳香第一胺類反應(yīng)芳伯氨基重氮化-偶合紅色堿性β-萘酚42例普魯卡因青霉素ChP（2000）【鑒別】（3）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。附錄Ⅲ

一般鑒別試驗(yàn)芳香第一胺類反應(yīng)取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。43（2）二芐基乙二胺的反應(yīng)44苦味酸芐星青霉素45（三）硫酸及硫酸-甲醛反應(yīng)（四）UV法46（五）IR法

β－內(nèi)酰胺環(huán)上的羰基伸縮振動(dòng)增強(qiáng)而向高波數(shù)方向位移47青霉素鈉48阿莫西林49三、特殊雜質(zhì)的檢查*高分子聚合物*吸光度雜質(zhì)*有關(guān)物質(zhì)*異構(gòu)體50四、含量測(cè)定（一）酸堿滴定法定量過量剩余滴定法原理51*β-內(nèi)酰胺類不直接與碘反應(yīng)*β-內(nèi)酰胺類水解產(chǎn)物可與碘發(fā)生定量反應(yīng)原理（二）碘量法（剩余碘量法）52（水解）（定量過量）+4I2（pH4.5）8I-53反應(yīng)分兩步進(jìn)行嚴(yán)格控制反應(yīng)條件采用標(biāo)準(zhǔn)品平行操作*氧化-還原反應(yīng)（無固定量關(guān)系，易受溫度、pH值和時(shí)間等因素影響*水解反應(yīng)（按化學(xué)計(jì)量進(jìn)行）54第一步第二步55空白試驗(yàn)A.消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾B.消除樣品中其他消耗碘的雜質(zhì)干擾C.消除碘揮發(fā)造成的誤差以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定56例注射用普魯卡因青霉素ChP（2000）【含量測(cè)定】取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，精密稱取約0.12g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置碘瓶中，加1mol/L氫氧化鈉溶液1ml，放置20分鐘，再加1mol/L鹽酸溶液1ml與醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，搖勻，在20～25℃暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，57近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失；另精密量取供試品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，搖勻，在暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，作為空白。同時(shí)用青霉素鈉對(duì)照品同法測(cè)定作對(duì)照，算出供試品的含量。58*β-內(nèi)酰胺類不直接與汞反應(yīng)*β-內(nèi)酰胺類水解產(chǎn)物可與汞發(fā)生定量反應(yīng)（三）汞量法1.原理ChP59水解ChP（2000）青霉素鉀青霉素鈉苯唑西林鈉普魯卡因青霉素氯唑西林鈉水解青霉胺絡(luò)汞60NaOHpH4.6脫羧Hg(NO3)2pH4.62:1突躍11:1突躍2Hg(NO3)2pH4.6青霉胺絡(luò)汞612.討論（1）電位法指示終點(diǎn)，以第二次滴定突躍為終點(diǎn)，反應(yīng)摩爾比1:1

（2）空白試驗(yàn)消除已降解產(chǎn)物干擾（3）優(yōu)點(diǎn)不需標(biāo)準(zhǔn)品62例青霉素鈉ChP（2000）【含量測(cè)定】取本品約50mg，精密稱定，加水5ml溶解后，加1mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置15分鐘，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸鹽緩沖液（pH4.6）20ml及水20ml，搖勻，照電位滴定法（附錄ⅦA）,用鉑電極為指示電極，汞-硫酸亞汞電極為參比電極，在35~40℃，用硝酸汞滴定液（0.02mol/L）緩慢滴定，（控制滴定過程約為15分鐘），不計(jì)第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)，計(jì)算第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)時(shí)消耗滴定液的量。63每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相當(dāng)于7.128mg的總青霉素（按C16H17N2NaO4S計(jì)算）。另取本品約0.5g，精密稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，立即用硝酸汞滴定液（0.02mol/L）滴定，滴定終點(diǎn)判斷方法同上。每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相當(dāng)于7.128mg的降解物（按C16H17N2NaO4S計(jì)算）。每1mg的C16H17N2NaO4S相當(dāng)于1670青霉素單位。64總青霉素的百分含量與降解物的百分含量之差值即為青霉素的含量。65硫醇汞鹽法催化劑ChP青霉素族（四）紫外分光光度法1.原理（水解）66咪唑672.討論（1）咪唑催化的水解率高，硫醇汞鹽穩(wěn)定（≥3h）（2）側(cè)鏈有-NH2時(shí)，需加醋酐先將其乙?；蟛拍馨l(fā)生上述反應(yīng)68pH9咪唑69例青霉素V鉀片ChP（2000）【含量測(cè)定】取本品10片（如為糖衣片則除去糖衣），精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于青霉素0.15g）置250ml量瓶中，加水150ml，振搖使溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5ml，置25ml量瓶中，加咪唑溶液至刻度，搖勻，置60℃水浴中加熱30分鐘，取出放冷至室溫，照分光光度法（附錄ⅣA），在325nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另取青霉素V對(duì)照品，同法測(cè)定，計(jì)算。

70（五）RP-HPLC法特點(diǎn)快速高效靈敏度高專屬性強(qiáng)重現(xiàn)性好

一法多用(鑒別、檢查、含測(cè))ChP71例頭孢呋辛酯【鑒別】【檢查】有關(guān)物質(zhì)【含量測(cè)定】托西酸舒他西林【鑒別】【檢查】有關(guān)物質(zhì)【含量測(cè)定】阿莫西林鈉【鑒別】【檢查】有關(guān)物質(zhì)【含量測(cè)定】7295：139.屬于-內(nèi)酰胺類的抗生素藥物有

A.青霉素B.紅霉素C.頭孢菌素D.慶大霉素E.四環(huán)素7396：135.青霉素類藥物可用下面哪些方法測(cè)定

A.三氯化鐵比色法B.汞量法C.碘量法D.硫醇汞鹽法E.酸性染料比色法7499：89.下列哪個(gè)藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸鐵反應(yīng)

A.青霉素B.慶大霉素C.紅霉素D.鏈霉素E.維生素C

7500：86.汞量法測(cè)定青霉素鈉含量時(shí)，以電位法指示終點(diǎn)，在滴定曲線上出現(xiàn)兩次突躍。青霉素含量的計(jì)算以第二次滴定終點(diǎn)為依據(jù)，此時(shí)青霉素與汞的摩爾比為

A.1:0.5B.1:1C.1:2D.1:3E.1:47601：138.青霉素類藥物可以采用的含量測(cè)定方法有

A.酸堿滴定法B.非水溶液滴定法C.碘量法D.硫醇汞鹽法E.高效液相色譜法77例1.能發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)的抗生素類藥物是

A.青毒素B.慶大霉素C.芐星青霉素D.鹽酸四環(huán)素E.普魯卡因青霉素78例2.-內(nèi)酰胺類藥物可用碘量法測(cè)定含量，其理論根據(jù)是

A.樣品堿水解產(chǎn)物青霉噻唑酸可定量與碘反應(yīng)B.-內(nèi)酰胺環(huán)不穩(wěn)定可定量被碘氧化C.樣品酸水解產(chǎn)物青霉烯酸可定量與碘反應(yīng)D.樣品酸水解產(chǎn)物與咪唑類縮合后可定量與碘反應(yīng)E.以上都不對(duì)79例3.硫醇汞鹽法測(cè)定氨芐青霉素鈉的含量，其方法是

A.樣品經(jīng)溶解后，制成一定濃度直接測(cè)定B.樣品經(jīng)酸水解后，用于測(cè)定C.樣品經(jīng)堿水解后，用于測(cè)定D.樣品經(jīng)咪唑催化與氯化汞作用，形成汞鹽后用于測(cè)定E.樣品經(jīng)酸水解后，與微量氯化銅作用形成銅鹽后用于測(cè)定80例4.-內(nèi)酰胺類抗生素經(jīng)水解后，可可用以測(cè)定含量的方法是A.分光光度法B.汞量法C.碘量法D.中和法E.生物效價(jià)法81例5.下列哪些藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸鐵反應(yīng)

A.阿莫西林B.四環(huán)素C.普魯卡因胺D.普魯卡因E.頭孢氨芐

82例6.（）青霉素能與碘定量反應(yīng)，因此可以根據(jù)消耗的碘量計(jì)算青霉素的含量。×Hg2+×83第三節(jié)氨基糖苷類抗生素一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)非糖體84鏈霉素氨基糖——鏈霉雙糖胺鏈霉胍鏈霉糖N-甲基葡萄糖胺85HOHO慶大霉素（紫素胺）絳紅糖胺脫氧鏈霉胺加洛糖胺（復(fù)合物）86慶大霉素C復(fù)合物慶大霉素C1R=HR1、R2=CH3慶大霉素C2R=R2=H

R1=CH3慶大霉素C1aR、R1、R2=H慶大霉素C2aR=CH3R1=R2=H87（二）性質(zhì)（可與酸成鹽）1.堿性-NH2溶解性水溶性（多羥基、氨基）88鏈霉素***************旋光性89HOHO慶大霉素************旋光性902.旋光性手性C3.穩(wěn)定性鏈霉素pH5～7.5穩(wěn)定OH-坂口反應(yīng)N-甲基葡萄糖胺鏈霉糖麥芽酚反應(yīng)91坂口反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)鏈霉素92鏈霉素慶大霉素?zé)oUV特征鏈霉素λmax=230nm4.UV93慶大霉素94（一）茚三酮反應(yīng)α-氨基醇△藍(lán)紫色二、鑒別試驗(yàn)95茚三酮反應(yīng)鏈霉素α-氨基醇96慶大霉素97例硫酸慶大霉素ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約5mg，加水1ml溶解后，加0.1%茚三酮的水飽和正丁醇溶液1ml與吡啶0.5ml，在水浴中加熱5分鐘，即顯紫藍(lán)色。例硫酸小諾霉素ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約5mg，加水溶解后，加0.1%茚三酮的水飽和正丁醇溶液1ml與吡啶0.5ml，在水浴中加熱5分鐘，即顯藍(lán)紫色。98（二）N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對(duì)二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色水解99(縮合)100對(duì)二甲氨基苯甲醛H+101例硫酸新霉素ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約10mg，加水1ml溶解后，加鹽酸溶液（9→100）2ml，在水浴中加熱10分鐘，加8%氫氧化鈉溶液2ml與2%乙酰丙酮水溶液1ml，置水浴中加熱5分鐘，冷卻后，加對(duì)二甲氨基苯甲醛試液1ml，即顯櫻桃紅色。102（三）麥芽酚反應(yīng)鏈霉素特有反應(yīng)△H+紫紅色103麥芽酚反應(yīng)麥芽酚NaOH分子重排104例硫酸鏈霉素ChP（2005）【鑒別】（2）取本品約20mg，加水5ml溶解后，加氫氧化鈉試液0.3ml，置水浴上加熱5分鐘，加硫酸鐵銨溶液（取硫酸鐵銨0.1g，加0.5mol/L硫酸溶液5ml使溶解）0.5ml，即顯紫紅色。105（四）坂口反應(yīng)鏈霉胍特有反應(yīng)水解橙紅色次溴酸鈉8-羥基喹啉（或α-萘酚）106坂口反應(yīng)1078-羥基喹啉+α-萘酚108例硫酸鏈霉素ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加水4ml溶解后，加氫氧化鈉試液2.5ml與0.1%8-羥基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至約15℃，加次溴酸鈉試液3滴，即顯橙紅色。109三、含量測(cè)定微生物檢定法11098：[126~130]可以鑒別的藥物是

A.鏈霉素B.慶大霉素C.兩者均可D.兩者均不可126.用Kober反應(yīng)127.用坂口反應(yīng)128.用麥芽酚反應(yīng)129.用三氯化鐵反應(yīng)130.用茚三酮反應(yīng)DAADC11199：[116~120]以下反應(yīng)可適用的藥物

A.青霉素B.鏈霉素C.兩者均能D.兩者均不能116.Kober反應(yīng)117.羥肟酸鐵反應(yīng)118.坂口反應(yīng)119.N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)120.在酸性溶液中水解DABBC11299m：131.鏈霉素的鑒別方法為

A.坂口（Sakaguchi）反應(yīng)B.麥芽酚（Maltol）反應(yīng)C.三氯化鐵反應(yīng)D.茚三酮反應(yīng)E.N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)（Elson-Morgan反應(yīng)）11301：[116~120]以下藥物的鑒別反應(yīng)為

A.茚三酮反應(yīng)B.麥芽酚反應(yīng)C.兩者均可D.兩者均不可116.硫酸慶大霉素117.硫酸鏈霉素118.硫酸阿托品119.炔雌醇120.鹽酸普魯卡因ACDDD114第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)1155612347碳原子編號(hào)89101112116兩性弱酸性弱酸性、UV、FR弱堿性117四環(huán)素（TC）118金霉素

（CTC）氯四環(huán)素119土霉素（OTC）氧四環(huán)素120多西環(huán)素

（DOTC）脫氧土霉素強(qiáng)力霉素121二甲胺基弱堿性酚羥基、烯醇型羥基弱酸性1.酸堿性（二）性質(zhì)兩性1222.旋光性

不對(duì)稱C原子******123易溶于有機(jī)溶劑難溶于水游離四環(huán)素易溶于水難溶于有機(jī)溶劑OH-四環(huán)素鹽3.溶解性臨床上多用鹽酸鹽124（1）差向異構(gòu)化4.不穩(wěn)定性125土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)化126（2）降解反應(yīng)A.酸性降解127-H2O四環(huán)素脫水四環(huán)素128pH＜2pH＜2四環(huán)素4-差向四環(huán)素脫水四環(huán)素差向脫水四環(huán)素129B.堿性降解（熒光）1304.與金屬離子生成有色配位化合物烯醇基Ca2+、Mg2+、Fe3+、Al3+pH3~7.5有強(qiáng)烈熒光131二、鑒別試驗(yàn)（一）與硫酸反應(yīng)氧化、脫水例鹽酸金霉素ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加硫酸2ml即顯藍(lán)色，漸變?yōu)殚蠙炀G色，加水1ml后，顯金黃色或棕黃色。132（二）與三氯化鐵反應(yīng)酚羥基例鹽酸四環(huán)素ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加硫酸2ml，即顯深紫色，再加三氯化鐵試液1滴，溶液變?yōu)榧t棕色。133（三）熒光反應(yīng)例鹽酸土霉素ChP（2000）【鑒別】（4）取本品約50mg，加0.4%氫氧化鈉溶液5mL使溶解，于100℃加熱1分鐘，在紫外光燈（365nm）下檢視，顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。134三、雜質(zhì)檢查鹽酸四環(huán)素毒性降解、失效影響外觀有關(guān)物質(zhì)*4-差向四環(huán)素*脫水四環(huán)素*差向脫水四環(huán)素*鹽酸金霉素

HPLC135例鹽酸四環(huán)素ChP（2005）【檢查】有關(guān)物質(zhì)

取本品適量，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中含2.0mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取2ml，置100ml量瓶中，