藥物分析總結(jié)

各論總結(jié)芳酸類非甾體抗炎藥物結(jié)構(gòu)特征：苯環(huán)、游離羧基代表藥物：水楊酸（游離羧基）、阿司匹林（酯鍵、游離羧基）、雙水楊酯（酯鍵、游離羧基）、二氟尼柳（游離羧基）、甲芬那酸（游離羧基）、雙氯芬酸鈉（酯鍵）、布洛芬（游離羧基）、酮洛芬（二苯甲酮、游離羧基）、萘普生（酯鍵）、吲哚美辛（游離羧基）、吡羅昔康（S、酰胺鍵）、美洛昔康（S、酰胺鍵）、尼美舒利、對(duì)乙酰氨基酚（酰胺鍵）鑒別實(shí)驗(yàn)：三氯化鐵反應(yīng)：水楊酸反應(yīng)：水楊酸加三氯化鐵試液，生成紫堇色配位化合物阿司匹林（水解）、雙水楊酯（水解）、二氟尼柳酚羥基反應(yīng)：對(duì)乙酰氨基酚的水溶液加三氯化鐵試液，顯藍(lán)紫色吡羅昔康、美洛昔康：烯醇式羥基縮合反應(yīng)（酮洛芬）酮洛芬（二苯甲酮）：乙醇溶解，酸性條件下（硫酸），與二硝基苯肼縮合（加熱至沸）生成橙色的偶氮化合物重氮化偶合反應(yīng)（對(duì)乙酰氨基酚：潛在的芳伯氨基）對(duì)乙酰氨基酚：稀鹽酸加熱條件下，與亞硝酸鈉試液，再加入堿性β萘酚生成紅色偶氮化合物水解反應(yīng)（阿司匹林）阿司匹林與碳酸鈉加熱水解，加入過量稀硫酸酸化，生成白色沉淀，并產(chǎn)生醋酸臭氣（5）熒光反應(yīng)（甲芬那酸）溶于硫酸后，與重鉻酸鉀反應(yīng)顯深藍(lán)色，隨即變?yōu)樽鼐G色阿司匹林及雙水楊酯中游離水楊酸與有關(guān)物質(zhì)的檢查（1）阿司匹林中的有關(guān)物質(zhì)：合成起始原料苯酚及合成中間體與副產(chǎn)物，如游離水楊酸、醋酸苯酯、水楊酸本酯、水楊酰水楊酸、水楊酸酐、乙酰水楊酸本酯、乙酰水楊酸酐游離水楊酸：阿司匹林為乙酰水楊酸，在生產(chǎn)過程中因乙酰化不完全，或在精制過程中及貯藏期間的水解而產(chǎn)生水楊酸。游離水楊酸對(duì)人體有毒性，因其分子中所含的酚羥基在空氣中易被逐漸氧化生成一系列有色（如淡黃、紅棕甚至深棕色）醌型化合物而使阿司匹林成品變色，因而需加以控制①阿司匹林中游離水楊酸的檢查（HPLC）檢測(cè)方法：稀硫酸鐵銨溶液顯色反應(yīng)注：藥典采用1%冰醋酸溶液制備供試品溶液，以防阿司匹林水解，同時(shí)采用HPLC檢查，C18作填充柱②雙水楊酯中游離水楊酸的檢查（紫外）檢測(cè)方法：鐵鹽比色法（水楊酸可與三價(jià)鐵生成有色配位化合物）注：為避免雙水楊酯的水解，以三氯甲烷為溶劑，采用水相萃取比色法對(duì)乙酰氨基酚中對(duì)氨基酚和對(duì)氯苯乙酰胺的檢查①對(duì)氨基酚及有關(guān)物質(zhì)對(duì)氨基酚同時(shí)含有酚羥基和氨基，具有酸堿兩性，在反相色譜條件下易出現(xiàn)峰拖尾和峰分裂的現(xiàn)象，可使用離子對(duì)色譜法消除這一現(xiàn)象檢測(cè)方法：以四丁基氫氧化銨為離子對(duì)試劑，采用離子對(duì)反相HPLC法檢查含量測(cè)定（1）原料藥的測(cè)定：阿司匹林：酚酞作指示劑①直接滴定法：藥物溶于中性乙醇，以酚酞為指示劑，用NaOH滴定液直接滴定（專屬性較差，易受阿司匹林的水解及其產(chǎn)物、有機(jī)酸類穩(wěn)定劑的干擾，不適于阿司匹林制劑；原料藥測(cè)定時(shí)，也需要注意規(guī)范操作，避免水解引起的偏差）②剩余量滴定法：用定量過量的NaOH滴定液溶解后，用鹽酸滴定液回滴定剩余的NaOH滴定液③水解后剩余量滴定法：加入定量過量的NaOH，加熱使酯鍵水解后，再用硫酸回滴剩余的NaOH滴定液（可顯著提高準(zhǔn)確度和精密度）【阿司匹林原料藥】?jī)?yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、避免了酯鍵水解的干擾缺點(diǎn)：但無(wú)法消除藥物里本身酸性物質(zhì)的干擾④兩步滴定法：第一步中和酸性水解產(chǎn)物及穩(wěn)定劑，以消除干擾；第二步為水解后剩余量滴定【阿司匹林制劑】制劑當(dāng)附加成分顯著影響主成分測(cè)定時(shí)，可采用：兩步滴定法、柱分配色譜-紫外分光光度法、高效液相色譜法高效液相色譜法：用離子抑制-反相高效液相色譜法測(cè)定，用外標(biāo)法計(jì)算含量注：供試品溶液制備里冰醋酸的作用：①抑制阿司匹林的解離，進(jìn)而消除因色譜柱對(duì)阿司匹林的吸附而造成的色譜峰拖尾與分裂的現(xiàn)象②抑制阿司匹林的水解，增加溶液的穩(wěn)定性苯乙胺類擬腎上腺素藥物結(jié)構(gòu)特征：苯乙胺、鄰二酚羥基（1）酚羥基①兩個(gè)酚羥基：腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、硫酸特布他林、鹽酸多巴胺②一個(gè)酚羥基：鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇、重酒石酸間羥胺③沒有酚羥基：鹽酸甲氧明、鹽酸氯丙那林、鹽酸克倫特羅、鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、鹽酸氨溴索脂肪伯胺（可發(fā)生Rimini反應(yīng)）重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸多巴胺、重酒石酸間羥胺、鹽酸甲氧明、理化性質(zhì)：酚羥基特性、弱堿性、旋光性、紫外吸收特性鑒別實(shí)驗(yàn)與三氯化鐵的反應(yīng)（鹽酸去氧腎上腺素、腎上腺素、鹽酸多巴胺）：酚羥基與三氯化鐵顯綠色、堿性條件下為紫紅色與甲醛硫酸的反應(yīng)：腎上腺素顯紅色、鹽酸異丙腎上腺素顯棕色至暗紫色、重酒石酸去甲腎上腺素顯淡紅色氨基醇的雙縮脲反應(yīng)（鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、鹽酸去氧腎上腺素芳環(huán)側(cè)臉具有氨基醇結(jié)構(gòu)）鹽酸麻黃堿（無(wú)酚羥基，極性小）：加水溶解后，加硫酸銅與20%NaOH溶液即顯藍(lán)紫色；加乙醚，振搖后放置，乙醚層顯紫紅色（絡(luò)合物），水層變成藍(lán)色（Cu2+）鹽酸去氧腎上腺素（有酚羥基，極性大）：加水溶解后，加硫酸銅與29%NaOH溶液即顯藍(lán)紫色；加乙醚，振搖后放置，乙醚層不顯色（絡(luò)合產(chǎn)物在水層，不在乙醚層）?？膳c鹽酸麻黃堿區(qū)別脂肪伯胺的Rimini反應(yīng)重酒石酸間羥胺：取本品5mg，溶解，加亞硝基鐵氰化鈉試液2滴、丙酮2滴與碳酸氫鈉0.2g，在60℃水浴中加熱1min，即顯紅紫色。特殊雜質(zhì)與檢查酮體：紫外分光光度法光學(xué)純度的檢查：色譜法、電泳法有關(guān)物質(zhì)（除鹽酸克倫特羅外）：去氧腎上腺素（TLC）、其他（高效液相色譜法）含量測(cè)定非水溶液滴定法由于本類藥物為弱堿性，在水溶液中用酸滴定液直接滴定沒有明顯的突躍，終點(diǎn)難以觀測(cè)，常不能獲得滿意的測(cè)定結(jié)果。而在非水酸性溶劑中，只要其在水溶液中的pKb值小于10，都能被冰醋酸均化到溶劑醋酸根水平，相對(duì)堿強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，因而使弱堿性藥物的滴定能夠順利進(jìn)行①對(duì)象：有機(jī)堿及其氫鹵酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽及金屬鹽類藥物②非水溶劑種類：酸性溶劑：冰醋酸堿性溶劑：二甲基甲酰胺兩性溶劑：甲醇惰性溶劑：甲苯、三氯甲烷③pKb為8~10：冰醋酸pKb為10~12：冰醋酸與醋酐pKb>12：醋酐④基本原理：強(qiáng)酸置換出與弱堿結(jié)合的弱酸BH+A-+HClO4?→?BH+ClO4-+HA。⑤酸根的影響：HA在醋酸介質(zhì)中的酸性：高氯酸>氫溴酸>硫酸>鹽酸>硝酸>磷酸如測(cè)定有機(jī)堿性藥物氫鹵酸鹽時(shí)，由于被置換出的氫鹵酸鹽的酸性相當(dāng)強(qiáng)，影響滴定終點(diǎn)，不能直接滴定，需進(jìn)行處理。一般處理方法是加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成在醋酸中難解離的鹵化汞，以消除氫鹵酸對(duì)滴定的干擾與不良影響⑥終點(diǎn)指示：常用電位法和指示劑法。指示劑為結(jié)晶紫，酸式色為黃色，堿式色為紫色溴量法（一個(gè)酚羥基：鹽酸去氧腎上腺素：淀粉作指示劑、重酒石酸間羥胺）在酸性溶液中酚羥基的鄰對(duì)位活潑氫能與過量的溴定量地發(fā)生溴代反應(yīng)，再以碘量法硫代硫酸鈉滴定測(cè)定剩余的溴亞硝酸鈉法（重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸多巴胺、重酒石酸間羥胺、鹽酸甲氧明）鹽酸克倫特羅分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，可用永停滴定法指示終點(diǎn)紫外分光光度法及比色法（鹽酸克倫特羅栓（芳伯氨基）和鹽酸異丙腎上腺素氣霧劑（酚羥基））鹽酸克倫特羅：處理后加亞硝酸鈉，搖勻、加氨基磺酸鈉、搖勻、加鹽酸奈乙胺、搖勻注：奈乙胺遇亞硝酸鈉也能顯色，干擾比色測(cè)定，所以在重氮化后，應(yīng)加氨基磺酸銨將剩余的亞硝酸分解除去對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物結(jié)構(gòu)：親脂性芳香環(huán)、中間連接功能基（酯鍵——對(duì)氨基苯甲酸酯類、酰胺鍵——酰苯胺類）、親水性胺基鑒別反應(yīng)重氮化偶合反應(yīng)（芳伯氨基：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普卡因、鹽酸普魯卡因胺）芳伯氨基在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應(yīng)，加入堿性β-萘酚溶液顯猩紅色沉淀芳仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成乳白色沉淀與金屬離子的反應(yīng)①鑒別鹽酸利多卡因：在碳酸鈉試液中與硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，再轉(zhuǎn)入三氯甲烷中顯黃色②鑒別鹽酸普魯卡因胺：被濃過氧化氫氧化成羥肟酸，再與三氯化鐵反應(yīng)顯紫紅色，隨即變?yōu)樽睾谏??！玖u肟酸鐵的反應(yīng)】③．鹽酸利多卡因在酸性條件下可與氯化鈷試液反應(yīng)生成亮綠色水解產(chǎn)物反應(yīng)①鑒別鹽酸普魯卡因：加NaOH變?yōu)榘咨恋?，加熱變?yōu)橛蜖钗?，繼續(xù)加熱，生成的氣體使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)，加熱至油狀物消失，加鹽酸即析出白色沉淀②鑒別苯佐卡因：加NaOH加熱煮沸，再加入碘加熱，生成黃色沉淀，并產(chǎn)生碘仿的臭氣（水解后，與碘生成黃色沉淀）特殊雜質(zhì)與檢查對(duì)氨基苯甲酸類雜質(zhì)的檢查水解生成對(duì)氨基苯甲酸類，對(duì)氨基苯甲酸隨儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng)或受熱，可進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化成苯胺，而苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃、療效下降、毒性增加（2）酰苯胺類局麻藥中2,6二甲基苯胺及其他雜質(zhì)的檢查（3）鹽酸羅哌卡因的光學(xué)純度檢查（毛細(xì)管電泳法）4.含量測(cè)定（1）亞硝酸鈉滴定法：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因（中性紅做指示劑：內(nèi)指示劑法）、注射用鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺及其制劑、醋氨苯砜①原理：芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，可用永停滴定法指示終點(diǎn)②測(cè)定的主要條件加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度：在不同無(wú)機(jī)酸中，重氮化反應(yīng)速度不同，即氫溴酸>鹽酸>硝酸、硫酸，由于氫溴酸昂貴，多用鹽酸；但為了加快反應(yīng)速度，往往加入適量的溴化鉀，使體系中的溴化鉀和鹽酸起到氫溴酸的加速作用加過量鹽酸加速反應(yīng)：過量鹽酸有利于：1）重氮化反應(yīng)速度加快；2）重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；3）防止生產(chǎn)偶氮氨基化合物而影響測(cè)定結(jié)果芳胺類藥物與酸的摩爾比為：1：（2.5~6）反應(yīng)溫度：重氮化反應(yīng)的速度與溫度成正比，但是生成的重氮鹽又隨溫度升高而加速分解，可在室溫（10~30℃），其中15℃以下結(jié)果較準(zhǔn)確滴定速度滴定時(shí)宜將滴定管尖端插入液面以下2/3處，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，然后將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定指示終點(diǎn)的方法：電位法、永停滴定法、外指示劑法（準(zhǔn)確度差）、內(nèi)指示劑法（終點(diǎn)提前，測(cè)定結(jié)果偏低）非水溶液滴定法（鹽酸布比卡因弱堿性氮原子）將供試品溶于冰醋酸-醋酐溶液中，用高氯酸滴定至終點(diǎn)；以電位法指示滴定終點(diǎn)注：加入醋酐的目的是：增強(qiáng)布比卡因的堿性，使滴定突躍明顯二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)：苯基、1,4-二氫吡啶母核典型藥物：硝苯地平、尼莫地平、非洛地平、尼索地平理化性質(zhì)二氫吡啶的還原性：鈰量法硝基的氧化性（亞鐵鹽反應(yīng)、重氮化-偶合反應(yīng)）二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性：丙酮溶液與氫氧化鈉反應(yīng)顯橙紅色弱堿性：與氯化汞生成白色沉淀光不穩(wěn)定性：避光操作旋光性：外消旋體UV化學(xué)鑒別亞鐵鹽反應(yīng)：苯環(huán)硝基具有氧化性，可與氫氧化亞鐵發(fā)生反應(yīng)，生成紅棕色沉淀重氮化-偶合反應(yīng)：硝基具有氧化性，在酸性條件下被鋅粉還原為芳伯氨基，可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別（硝苯地平）有關(guān)物質(zhì)與檢查：避光操作、名字①硝苯地平中有關(guān)物質(zhì)的檢查雜質(zhì)I：2,6-二甲基-4（2-硝基苯基）-3,5-吡啶二甲酸二甲酯雜質(zhì)II：2,6-二甲基-4（2-亞硝基苯基）-3,5-吡啶二甲酸二甲酯②苯磺酸氨氯地平雜質(zhì)I：2-[(2-氨基乙氧基）]甲基）-4（2-氯苯基）6-甲基-吡啶-3-羧酸乙酯-5-羧酸甲酯

含量測(cè)定：硝苯地平：鄰二氮菲做指示劑鈰量法（硝苯地平）鈰量法也稱為硫酸鈰法，是以Ce（SO4）2為標(biāo)準(zhǔn)溶液的氧化還原反應(yīng)滴定法。由于酸度較低時(shí)Ce4+易水解，故本滴定在強(qiáng)酸條件下進(jìn)行。Ce4+位黃色，Ce3+無(wú)色，自身可做指示劑，但不夠靈敏，常用鄰二氮菲做指示劑。鈰量法優(yōu)點(diǎn)：Ce（SO4）2標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定Ce4+還原為Ce3+是單電子轉(zhuǎn)移，不產(chǎn)生中間價(jià)態(tài)的產(chǎn)物，反應(yīng)簡(jiǎn)單，副反應(yīng)少大部分有機(jī)物不與Ce（SO4）2作用，不干擾測(cè)定。因此本法特別適合于糖漿劑巴比妥及苯二氮卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物巴比妥類結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)：環(huán)狀丙二酰脲代表藥物：巴比妥（barbital）、苯巴比妥（phenobarbital、苯基）、司可巴比妥（secobarbital、雙鍵）、戊巴比妥（pentobbarbital）、異戊巴比妥（amobarbital）、硫噴妥鈉（thiopentalsodium，C2上S取代）理化性質(zhì)：弱酸性：酮式烯醇式互變：二元酸水解反應(yīng)：與堿液共沸水解，釋放出氨氣與金屬離子的反應(yīng)：與銀鹽的反應(yīng)：在碳酸鈉溶液中生成鈉鹽而溶解，再與硝酸銀反應(yīng)，先生成一銀鹽，硝酸銀過量時(shí)再生成二銀鹽（一銀鹽溶解二銀鹽不溶）銅鹽：在吡啶溶液中生成烯醇式異構(gòu)體，再與銅-吡啶試液反應(yīng)，生成紫色配位化合物（鑒別含S巴比妥類藥物，呈綠色）鈷鹽：堿性溶液中與鈷鹽反應(yīng)，生成紫堇色配合物汞鹽：與硝酸汞或氯化汞反應(yīng)，生成白色沉淀，沉淀在氨試液中溶解與香草醛反應(yīng)：在濃硫酸存在下，與香草醛發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物UV：原性藥物在酸性溶液中無(wú)UV吸收(5,5-二取代，1,5,5-三取代)堿性溶液中電離：5,5-二取代巴比妥類藥物pH10：一級(jí)電離：240nmpH13：二級(jí)電離：255nm1,5,5-三取代巴比妥類藥物：只發(fā)生一級(jí)電離：240nm⑥顯微結(jié)晶：巴比妥為長(zhǎng)方形結(jié)晶；苯巴比妥開始結(jié)晶是球形，后成花瓣?duì)铊b別實(shí)驗(yàn)1）丙二酰脲反應(yīng)銀鹽反應(yīng)：與碳酸鈉、硝酸銀反應(yīng)，生成白色沉淀，沉淀振搖即溶解，硝酸銀過量時(shí)不溶解銅鹽反應(yīng)：在吡啶溶液中溶解后，與銅吡啶試液反應(yīng)，顯紫色特征基團(tuán)反應(yīng)硫元素：在NaOH溶液中與鉛離子反應(yīng)，生成白色沉淀不飽和取代基：分子結(jié)構(gòu)中含有丙烯基，可與I2、Br2、KMnO4發(fā)生加成反應(yīng)，使其褪色（可作為司可巴比妥的專屬性鑒別）特殊雜質(zhì)的檢查項(xiàng)目：酸度（甲基橙指示劑）、乙醇溶液的澄清度、中性或堿性物質(zhì)（提取重量法）、有關(guān)物質(zhì)（6）含量測(cè)定①．銀量法：在滴定過程中，巴比妥類藥物首先形成可溶性的一銀鹽，當(dāng)被測(cè)供試品完全形成一銀鹽后，繼續(xù)用硝酸銀滴定液滴定，稍過量的銀離子就與巴比妥類藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，使溶液變渾濁，以此指示終點(diǎn)【ChP采用甲醇和無(wú)水碳酸鈉溶劑系統(tǒng)，以銀-玻璃電極電位法指示終點(diǎn)】溴量法：司可巴比妥中的不飽和建可與溴定量發(fā)生加成反應(yīng)苯二氮卓類：硫酸熒光反應(yīng)結(jié)構(gòu)：苯環(huán)、七元含氮雜環(huán)1位N上無(wú)取代基的有：奧沙西泮、勞拉西泮、氯硝西泮，可發(fā)生醇式-烯醇式互變，具有酸堿兩性性質(zhì)：弱堿性（N）、水解性（在強(qiáng)酸溶液中生成二苯甲酮衍生物）、UV鑒別實(shí)驗(yàn)化學(xué)鑒別法①沉淀反應(yīng)：遇碘化鉍鉀生成橙紅色沉淀②硫酸熒光反應(yīng)芳伯胺反應(yīng)：1位N上無(wú)取代者，與鹽酸共熱水解后，生成芳伯胺，可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)如奧沙西泮的鹽酸溶液，緩慢加熱煮沸，放冷，依次加入亞硝酸鈉和堿性β-萘酚試液，生成橙紅色沉淀。有關(guān)物質(zhì)與檢查氯氮卓：二苯甲酮含量測(cè)定非水溶液滴定法（原料藥的測(cè)定）①非水堿量法：本類藥物多為堿性，高氯酸滴定液②非水酸量法：奧沙西泮及勞拉西泮，氫氧化四丁基銨滴定液，二甲基甲酰胺為溶劑吩噻嗪類抗精神病藥結(jié)構(gòu)：硫氮雜蒽母核，2、10位有取代基理化性質(zhì)：①弱堿性（N）②易氧化性（光照時(shí)易氧化變色，避光保存）③與金屬離子配合呈色（硫與鈀離子配合呈色），其氧化物亞砜和砜則無(wú)此反應(yīng)④UV：205、254（最強(qiáng)）、300nm，雙波長(zhǎng)分光光度法鑒別實(shí)驗(yàn)與生物堿沉淀劑反應(yīng)：與三硝基苯酚反應(yīng)生成沉淀氧化顯色反應(yīng)（硫氮雜蒽母核具有還原性）與鈀離子配合呈色：硫氮雜蒽母核與鈀離子配合呈色的反應(yīng)可用于吩噻嗪類藥物及其制劑鑒別。（鹽酸異丙嗪）由于配合反應(yīng)發(fā)生在硫氮雜蒽母核的硫元素與鈀離子之間，該反應(yīng)不受硫氮雜蒽母核氧化物亞砜和砜的干擾，專屬性強(qiáng)如葵氟奮乃靜與氯化鈀反應(yīng)生成紅色沉淀題：有氧化產(chǎn)物存在時(shí)，吩噻嗪類藥物的鑒別或含量測(cè)定方法為鈀離子比色法吩噻嗪類藥物與鈀離子反應(yīng)，需在pH2±0.1酸性條件下進(jìn)行含鹵素取代基的反應(yīng)焰色反應(yīng)：奮乃靜（氯）：綠色顯色反應(yīng)：吩噻嗪類的2位有含氟取代基時(shí)，可經(jīng)有機(jī)破壞使共價(jià)結(jié)合的氟元素分解成氟化物，在酸性條件下與茜素鋯試液反應(yīng)，溶液顏色改變。有關(guān)物質(zhì)與檢查名字：有個(gè)吩噻嗪含量測(cè)定非水溶液滴定法：弱堿性，高氯酸為滴定液（2）提取后雙波長(zhǎng)分光光度法：消除輔料及氧化物的干擾（3）鈀離子比色法（鹽酸異丙嗪）：同上性質(zhì)（4）HPLC：由于本類藥物具有弱堿性及紫外吸收特性，主要采用反相色譜和離子對(duì)色譜進(jìn)行分離、紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)①反相高效液相色譜法：掃尾劑：含氮堿性競(jìng)爭(zhēng)試劑：醋酸銨、三乙胺、二乙銨、乙腈②離子對(duì)高效液相色譜法極性較強(qiáng)的吩噻嗪類藥物在反相色譜固定相中的保留較弱，有時(shí)調(diào)整流動(dòng)相的pH抑制其解離也不能使這些藥物的色譜行為得到改善。離子對(duì)高效液相色譜法（RP-HPLC）通常在反相色譜流動(dòng)相的水中加入與待測(cè)組分離子電荷相反的離子對(duì)試劑，使之在洗脫中與待測(cè)組分離子形成離子對(duì)，以增強(qiáng)待測(cè)組分在非極性固定相中的保留（離子對(duì)的非極性部分越大，離子對(duì)在非極性固定相中的保留越強(qiáng)），從而改善待測(cè)組分的色譜保留行為與分離行為弱堿性吩噻嗪類藥物常用烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑，如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。為促進(jìn)堿性藥物質(zhì)子化，一般使流動(dòng)相呈酸性。鹽酸氯丙嗪的含量測(cè)定方法：非水滴定法、紫外法、鈰量法喹啉與青蒿素類抗瘧藥一、喹啉類藥物（熒光）結(jié)構(gòu)：喹啉環(huán)、奎寧環(huán)（N堿性強(qiáng)，與硫酸成鹽，2個(gè)N與一個(gè)硫酸成鹽）理化性質(zhì)：堿性旋光性熒光特性：藍(lán)色熒光（喹啉、甲芬那酸、苯并二氮卓類）：UV鑒別實(shí)驗(yàn)熒光：硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸溶液中顯藍(lán)色熒光綠奎寧反應(yīng)：水溶液中滴加溴試液與氨試液，即顯翠綠色有關(guān)物質(zhì)與檢查硫酸奎寧：酸度、三氯甲烷-乙醇中的不溶物、其他金雞納堿磷酸咯萘啶：酸度、氯化物、水中不溶物、甲醛、四氫吡咯含量測(cè)定注意：原料藥和片劑消耗高氯酸的摩爾比是不同的二、青蒿素類（無(wú)特征UV吸收）1.結(jié)構(gòu)：倍半萜內(nèi)酯、過氧橋2.理化性質(zhì)：（1）氧化性：過氧橋（2）旋光性：右旋體（3）水解反應(yīng)：內(nèi)酯在堿性條件下水解（4）無(wú)特征UV吸收（青蒿素、巴比妥原型藥物）鑒別實(shí)驗(yàn)過氧橋的氧化反應(yīng)（碘化鉀-淀粉實(shí)驗(yàn)）：酸性條件下與碘化鉀試液反應(yīng)，淀粉指示液顯藍(lán)紫色羥肟酸鐵反應(yīng)：在堿性條件下與羥胺生成羥肟酸，在稀酸中與高鐵離子反應(yīng)顯紫紅色（鹽酸普魯卡因胺、青蒿素）香草醛-硫酸實(shí)驗(yàn)IR【無(wú)特征UV吸收】第十三章莨菪烷類抗膽堿藥結(jié)構(gòu)：莨菪醇、苯乙酸性質(zhì)：水解性：酯鍵，阿托品可水解成莨菪醇和莨菪酸堿性：N（較強(qiáng)）旋光性：東莨菪堿有旋光性，阿托品為外消旋體無(wú)旋光性，可用于區(qū)分鑒別實(shí)驗(yàn)托烷生物堿類的Vitali鑒別酯鍵水解后，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱，再與KOH醇溶液和固體KOH作用，顯深紫色有關(guān)物質(zhì)與檢查氫溴酸東莨菪堿：酸度、易氧化物（阿撲東莨菪堿/脫水東莨菪堿，含有不飽和雙鍵，紫外吸收）、其他生物堿（阿撲阿托品/脫水阿托品、顛茄堿，渾濁）硫酸阿托品：莨菪堿（左旋體，利用旋光度檢查）含量測(cè)定酸性染料比色法：硫酸阿托品原理：在適當(dāng)pH水溶液中，堿性藥物與H+結(jié)合成陽(yáng)離子，而一些酸性染料可解離成陰離子；兩種離子定量結(jié)合，生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對(duì)，該離子對(duì)可以定量地被有機(jī)溶劑萃取，測(cè)定有機(jī)相中有色離子對(duì)特征波長(zhǎng)處的吸光度，即可進(jìn)行堿性藥物的含量測(cè)定。酸性染料：溴甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)影響因素：水相最佳pH：選擇一個(gè)最佳pH，使有機(jī)堿性藥物和酸性染料分別全部以BH+和In-的狀態(tài)存在，是酸性染料比色法至關(guān)重要的條件酸件染料比色法中，水相的pH值過小，則酸性染料以分子狀態(tài)存在酸性染料及其濃度：選用的酸性染料與有機(jī)堿性藥物定量地結(jié)合生成的離子對(duì)要在有機(jī)相中有較大的溶解度生成的離子對(duì)在最大吸收波長(zhǎng)處有較高的吸光度染料在有機(jī)相中要不溶或很少溶濃度太高，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的乳化層有機(jī)溶劑的選擇應(yīng)選擇對(duì)有機(jī)堿性染料與酸性染料形成的離子對(duì)萃取效率高、能與離子對(duì)形成氫鍵，不與或極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑，一般用三氯甲烷水分的影響：水相中有過量的酸性染料，水分的混入又可能會(huì)使有機(jī)相渾濁，從而影響比色測(cè)定的準(zhǔn)確性，所以在萃取過程中應(yīng)嚴(yán)防水分混入有機(jī)相?？杉尤朊撍畡┗蚋稍餅V紙過濾酸性染料中的有色雜質(zhì)：可在加入供試品之前將緩沖液與酸性染料的混合液先用所選用的有機(jī)溶劑萃取棄去，以便除去酸性染料中的有色雜質(zhì)第十四章維生素類藥物脂溶性維生素：ADEK；水溶性維生素：B、C、鹽酸、葉酸（一）維生素A1.結(jié)構(gòu)：環(huán)己烯、共軛多烯醇側(cè)鏈2.來(lái)源：魚肝油3.維生素A1又稱為視黃醇，魚肝油中維生素A主要為醋酸酯和棕櫚酸酯4.鑒別三氯化銻反應(yīng)：維生素A在無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇三氯甲烷溶液中顯藍(lán)色，漸變?yōu)樽霞t色。（注：反應(yīng)必須在無(wú)水、無(wú)醇條件下進(jìn)行）含量測(cè)定：三點(diǎn)校正法維生素B1（氨基嘧啶環(huán)與噻唑環(huán)）（熒光反應(yīng)）維生素B1也稱為鹽酸硫胺（thiaminehydrochloride）鑒別實(shí)驗(yàn)：硫色素?zé)晒夥磻?yīng)：維生素B1在堿性溶液中可被鐵氰化鉀氧化成硫色素，硫色素溶于正丁醇中顯藍(lán)色熒光（維生素B1的專屬性鑒別）方法：加NaOH試液溶解后，加鐵氰化鉀試液與正丁醇，強(qiáng)力振搖，放置使分層，上面的醇層顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光；加酸使成酸性，熒光即消失，再加堿使成堿性，熒光又顯出含量測(cè)定：非水溶液滴定法（原料藥）、紫外分光光度法（維生素B1片劑和注射液的含量測(cè)定）、硫色素?zé)晒夥ǎ╒B1的專屬性反應(yīng)）維生素C（水溶性抗氧化劑）結(jié)構(gòu)：烯二醇、內(nèi)酯環(huán)理化性質(zhì)：溶解性：水溶性酸性：一元酸旋光性：2個(gè)手性碳，4個(gè)對(duì)映異構(gòu)體還原性：烯二醇基具有極強(qiáng)的還原性水解性：Vc因雙鍵使內(nèi)酯環(huán)變得較穩(wěn)定，和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不發(fā)生水解。但在強(qiáng)堿中，內(nèi)酯環(huán)水解生成酮酸鹽糖類性質(zhì)UV鑒別與硝酸銀反應(yīng)：烯二醇具有強(qiáng)還原性，可被硝酸銀氧化，產(chǎn)生黑色金屬銀沉淀與二氯靛酚鈉反應(yīng)：2,6-二氯靛酚鈉在酸性介質(zhì)中為玫瑰紅色，堿性介質(zhì)中為藍(lán)色。與維生素C作用后生成還原型的無(wú)色的酚亞胺方法：取本品，加水溶解。加二氯靛酚鈉，試液的顏色即消失雜質(zhì)的檢查溶液的澄清度與顏色檢查：糠醛鐵、銅離子檢查：催化維生素C水解，b<(a-b)草酸的檢查：維生素C的降解產(chǎn)物含量測(cè)定碘量法原理：維生素C在醋酸酸性條件下可被碘定量氧化，根據(jù)消耗的碘滴定液的體積，即可以計(jì)算維生素C的含量稀醋酸：維生素C在酸性介質(zhì)中受空氣中氧的氧化速度減慢新沸過的冷水：減少水中溶解的氧對(duì)測(cè)定的影響注射劑測(cè)定前加丙酮：消除抗氧劑/掩蔽劑的干擾（2）二氯靛酚滴定法原理：2,6-二氯靛酚為一染料，其氧化型在酸性溶液中顯紅色，在堿性溶液中為藍(lán)色。當(dāng)與維生素C反應(yīng)后，即轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)色的酚亞胺（還原型）。因此，維生素C在酸性溶液中可用二氯靛酚標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液顯玫瑰紅色為終點(diǎn)，無(wú)需另加指示劑。（五）維生素D：需要檢查麥角甾醇維生素E（脂溶性抗氧化劑）（苯并二氫吡喃）性質(zhì)溶解性：脂溶性水解性：有乙?；姆恿u基，在酸性或堿性溶液中加熱可水解生成游離的生育酚，常作為特殊雜質(zhì)檢查氧化性：氧化產(chǎn)物為α-生育醌、α-生育酚二聚體UV鑒別實(shí)驗(yàn)三氯化鐵反應(yīng)：維生素E在堿性條件下水解生成游離的生育酚，生育酚經(jīng)乙醚提取后，可被三氯化鐵氧化成對(duì)-生育醌；同時(shí)Fe3+被還原為Fe2+，F(xiàn)e2+與聯(lián)吡啶生成血紅色的配位離子硝酸反應(yīng)：維生素E在硝酸酸性條件下水解生成生育酚，生育酚被硝酸氧化為鄰醌結(jié)構(gòu)的生育紅而顯橙紅色雜質(zhì)檢查酸度：醋酸生育酚：生育酚具有還原性，可被硫酸鈰定量氧化有關(guān)物質(zhì)殘留溶劑含量測(cè)定氣相色譜法：氣相內(nèi)標(biāo)定量（一定考）HPLC甾體激素類藥物的分析結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲藥理分類：腎上腺皮質(zhì)激素、性激素（雄激素及蛋白同化激素、雌激素、孕激素）骨架分類：雌甾烷（13）、雄甾烷（10、13）、孕甾烷（10、13、17）結(jié)構(gòu)特征：腎上腺皮質(zhì)激素：——A環(huán)有△4-3酮基，有紫外吸收；C17位有α-醇酮基，具有還原性雄激素：A環(huán)有△4-3酮基；C17位有羥基孕激素：A環(huán)有△4-3酮基；C17位為甲酮基、羥基雌激素：A環(huán)為苯環(huán)，C3位有酚羥基；C17位有羥基、乙炔基鑒別實(shí)驗(yàn)（1）硫酸顯色反應(yīng)：母核特征鑒別，有的有熒光現(xiàn)象（如氫化可的松）（2）C-17甲酮基反應(yīng)：黃體酮與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)生成藍(lán)紫色產(chǎn)物，該反應(yīng)作為黃體酮的專屬、靈敏的鑒別方法（3）C-17α醇酮基反應(yīng)：加堿性酒石酸顯磚紅色沉淀，加氯化三苯四氮唑（四氮唑比色法→醋酸可的松）顯紅色，加氨制硝酸銀顯黑色沉淀【用于皮質(zhì)激素藥物的鑒別→醋酸地塞米松】（4）可與重氮苯磺酸作用生成紅色偶氮染料的甾體激素類藥物是：雌二醇【酚羥基】（5）炔基的沉淀反應(yīng)：與硝酸銀反應(yīng)生成白色沉淀【炔雌醇、炔諾酮】（6）UV：△4-3酮基：240nmA環(huán)具有酚羥基的雌激素：280nm（7）酮基的呈色反應(yīng)：和羰基試劑如2，4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、異煙肼、亞硝基鐵氰化鈉等反應(yīng)，形成黃色的腙用于鑒別【黃體酮】有關(guān)物質(zhì)與檢查硒：二氨基萘比色法游離磷酸鹽：磷鉬酸比色法含量測(cè)定四氮唑比色法皮質(zhì)激素類藥物的C17-α-醇酮基有還原性，在堿性條件下可以定量還原四氮唑生成有色甲噆，此顯色反應(yīng)可用于皮質(zhì)激素類藥物的含量測(cè)定柯柏反應(yīng)比色法雌激素與硫酸-乙醇反應(yīng)，顯紅色，并在520nm附近處有最大吸收HPLC：常用UV抗生素抗生素與化學(xué)合成藥物相比，其結(jié)構(gòu)、組成更復(fù)雜，表現(xiàn)為：化學(xué)純度較低：三多：同系物多、異構(gòu)體多、降解物多活性組分易發(fā)生變異穩(wěn)定性差β-內(nèi)酰胺類抗生素：青霉素（penicillins）、頭孢菌素（cephalosporins）結(jié)構(gòu)：β內(nèi)酰胺環(huán)、6-氨基青霉烷酸（6-APA）、7-氨基頭孢菌烷酸（7-ACA）理化性質(zhì)：β-內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性（青霉素水溶液在pH6~6.8時(shí)較穩(wěn)定）旋光性：青霉素3個(gè)手性C（2、5、6），頭孢菌素（6、7）酸性與溶解度：游離羧基，相當(dāng)強(qiáng)的酸性；青霉素的堿金屬鹽水溶液遇酸析出白色沉淀UV：頭孢菌素類有紫外特性，而青霉素類只有側(cè)鏈含苯環(huán)時(shí)才有紫外特性。）鑒別異羥肟酸鐵反應(yīng)青霉素及頭孢菌素在堿性溶液中與羥胺作用，β-內(nèi)酰胺環(huán)破裂生成異羥肟酸；在稀酸中與高鐵離子呈色有關(guān)物質(zhì)與檢查本類抗生素的雜質(zhì)主要有高分子聚合物、有關(guān)物質(zhì)、異構(gòu)體等聚合物采用分子排阻色譜法色譜柱：親水硅膠、凝膠或經(jīng)過修飾的凝膠如葡聚糖凝膠和瓊脂糖凝膠等為填充劑流動(dòng)相pH：2~8（水溶液或緩沖液），可加入適量的有機(jī)溶劑（一般不應(yīng)超過30%）流速：0.5~1.0ml/min結(jié)晶性：第一法：偏光顯微鏡法第二法：X射線粉末衍射法氨基糖苷類抗生素結(jié)構(gòu)：鏈霉素（鏈霉胍、鏈霉雙糖胺）無(wú)特征的UV吸收鑒別實(shí)驗(yàn)N-甲基葡萄糖糖胺反應(yīng)（Elson-Morgan反應(yīng)）經(jīng)水解后，在堿性條件下與乙酰丙酮、對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng)，呈櫻桃紅色。?麥芽酚反應(yīng)（Maltol）：鏈霉素特征反應(yīng)鏈霉素在堿性溶液中生成麥芽酚，麥芽酚與高鐵離子在微酸性條件下（硫酸鐵銨）反應(yīng)顯紫紅色坂口反應(yīng)：鏈霉素水解產(chǎn)物鏈霉胍的特有反應(yīng)本品水溶液加氫氧化鈉試液，水解生成鏈霉胍鏈霉胍和8-羥基喹啉分別同次溴酸反應(yīng)，其各自的產(chǎn)物再相互作用生成橙紅色化合物方法：本品加水溶解，加氫氧化鈉與羥基喹啉，加次溴酸鈉，顯橙紅色