我國(guó)微生態(tài)制劑(益生菌、合生元、益生元)市場(chǎng)與研究進(jìn)展

微生態(tài)制劑的定義微生態(tài)制劑包括：益生菌（Probiotics）：它是一類(lèi)口服的有益的活菌制劑。它能改善腸道菌群平衡，對(duì)人體和動(dòng)物產(chǎn)生有益作用（保健食品要求保值期內(nèi)活菌總數(shù)不低于106，雙歧桿菌和乳桿菌菌料要求符合國(guó)家規(guī)定）益生元（Prebiotics）:是指不被宿主消化吸收，卻又能選擇性促進(jìn)一種或幾種有益菌代謝和繁殖，增進(jìn)宿主健康，如各類(lèi)功能性低聚糖。合生元（Synbiotics）:在制劑中包括益生菌和益生元兩部分。第一頁(yè)，共155頁(yè)。微生態(tài)制劑的市場(chǎng)世界各國(guó)微生態(tài)制劑發(fā)展很快。如日本的FOSHU微生態(tài)制劑產(chǎn)品，2004年銷(xiāo)售額為3456億日元，占FOSHU產(chǎn)品總銷(xiāo)售額的54.4%，其中寡糖產(chǎn)品為70億日元，乳酸菌產(chǎn)品為3145億日元。臺(tái)灣的健康食品中，益生菌產(chǎn)品銷(xiāo)售額占第三位。個(gè)性化生產(chǎn)、個(gè)性化服務(wù)成分包裝，益生菌+益生元產(chǎn)品第二頁(yè)，共155頁(yè)。臺(tái)灣益生菌和益生元的市場(chǎng)：從1999-2006年底臺(tái)灣衛(wèi)生署共批準(zhǔn)健康食品95個(gè)，其中益生菌和益生元的產(chǎn)品27個(gè)，占總數(shù)的28.4%。微生態(tài)制劑的市場(chǎng)第三頁(yè)，共155頁(yè)。一、人體消化道各器官的功能二、胃腸道正常菌群及其生理功能三、胃腸道菌群失調(diào)與疾病和亞健康四、微生態(tài)制劑與健康第四頁(yè)，共155頁(yè)。（一）人體消化道各器官功能口腔——咀嚼、食團(tuán)機(jī)械消化——咀嚼化學(xué)消化——唾液淀粉酶胃——食糜（酸性）胃酸、胃蛋白酶機(jī)械消化——腸蠕動(dòng)化學(xué)消化——鹽酸、胃蛋白酶小腸——小腸運(yùn)動(dòng)、消化與吸收機(jī)械消化——分節(jié)運(yùn)動(dòng)，小腸蠕動(dòng)化學(xué)消化——胰液、膽汁蛋白質(zhì)→氨基酸、肽淀粉→葡萄糖脂肪→脂肪酸、甘油大腸——大腸運(yùn)動(dòng)機(jī)械消化——蠕動(dòng)、節(jié)段運(yùn)動(dòng)化學(xué)消化——水分吸收、腸道菌群第五頁(yè)，共155頁(yè)。（二）人體胃腸道菌群（1）人體各器官系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)約1013個(gè)人體胃腸道內(nèi)微生物50余屬，約500余種，1014個(gè)，其中重量為1-1.5公斤，約有一個(gè)肝臟大小第六頁(yè)，共155頁(yè)。（二）人體胃腸道菌群（2）第七頁(yè)，共155頁(yè)。菌群糞便含菌數(shù)菌群糞便含菌數(shù)需氧與兼性厭氧菌腸桿菌104~1010厭氧菌擬桿菌1010~1012鏈球菌103~1010雙歧桿菌108~1012葡萄球菌104~107革蘭式陽(yáng)性球菌108~1011乳桿菌106~1010梭狀芽孢桿菌106~1011霉菌102~106真桿菌109~1012人糞便中菌群數(shù)量（二）人體胃腸道菌群（3）第八頁(yè)，共155頁(yè)。（二）人體胃腸道菌群（4）人體胃腸道內(nèi)的菌群分為三類(lèi)菌群種類(lèi)對(duì)健康的影響數(shù)量有益菌對(duì)人體健康有益如雙歧桿菌、乳酸菌109-1011條件性有害菌正常情況下對(duì)人體有益，一定條件下對(duì)健康有害，如大腸桿菌，腸球菌105-108有害菌對(duì)人體健康有害，如葡萄球菌、韋氏梭菌、梭狀芽胞桿菌0-104第九頁(yè)，共155頁(yè)。雙歧桿菌與人的生命旅程胃腸道菌群在人體腸道中定植（1）第十頁(yè)，共155頁(yè)。正常情況下，人腸道菌群各類(lèi)均達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，構(gòu)成一個(gè)為生態(tài)系統(tǒng)。胃腸道菌群在人體腸道中定植（2）

第十一頁(yè)，共155頁(yè)。人體消化道的組織結(jié)構(gòu)第十二頁(yè)，共155頁(yè)。第十三頁(yè)，共155頁(yè)。第十四頁(yè)，共155頁(yè)。（三）胃腸道菌群在人體腸道中的定植（1）

益生菌的粘附與定植細(xì)菌的粘附（adhesion）細(xì)菌（益生菌）對(duì)宿主細(xì)胞的粘附是他們?cè)谖改c道定植的前提粘附是細(xì)菌的粘附素與宿主細(xì)胞上的特異性受體，在雙方的基因決定下產(chǎn)生的綜合效果，有其特異性和生理性。第十五頁(yè)，共155頁(yè)。（三）胃腸道菌群在人體腸道

中的定植（2）（1）粘附素

細(xì)菌表面有特異性的粘附因子①脂磷壁酸（LTA）：它由1,3二磷酸甘油和粘質(zhì)構(gòu)成。通過(guò)脂結(jié)構(gòu)與細(xì)胞膜相連②肽聚糖（WPG）③多糖及表層蛋白（SLP）：細(xì)菌表面排列整齊的蛋白質(zhì)，有一些被糖基化或磷酸化。第十六頁(yè)，共155頁(yè)。（三）胃腸道菌群在人體腸道

中的定植（3）（2）腸上皮細(xì)胞上特異性的粘附素受體

①粘附素受體可能是糖蛋白或粘蛋白。乳酸菌的粘附素受體與D-甘露醇有關(guān)②粘附素與受體結(jié)合是特異性的③粘附作用經(jīng)胰蛋白酶或碘酸處理，粘附能力下降④不同細(xì)菌可在腸道不同部位定位或微生物在腸道分布有特異性第十七頁(yè)，共155頁(yè)。（三）胃腸道菌群在人體腸道

中的定植（4）（3）粘附與細(xì)胞通訊

細(xì)菌與細(xì)胞粘附者，在細(xì)菌和細(xì)胞本身都會(huì)發(fā)生復(fù)雜的的細(xì)胞通訊，他們之間也會(huì)有復(fù)雜的信號(hào)傳遞，兩者構(gòu)成網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)。如在腸細(xì)胞內(nèi)Ca通道打開(kāi)，從而誘導(dǎo)第二信使（cAMP，cGMP）產(chǎn)生，啟動(dòng)細(xì)胞活性第十八頁(yè)，共155頁(yè)。（三）胃腸道菌群在人體腸道

中的定植（5）2.細(xì)菌的定植（colonization）

粘附后細(xì)菌就定植在腸壁上皮細(xì)胞上，產(chǎn)生了一系列生理效應(yīng)。定植是細(xì)菌生長(zhǎng)發(fā)育的前提，也是產(chǎn)生一系列生理作用的前提。（1）定植的微生物分泌特殊物質(zhì)（細(xì)菌素、有機(jī)酸、雙氧水、短鏈脂肪酸）來(lái)抑制其它菌株生長(zhǎng)。（2）腸道內(nèi)一部分乳酸菌不受其它外界菌株生長(zhǎng)影響，自我迅速擴(kuò)增，迅速形成優(yōu)勢(shì)菌，排斥致病菌定植。第十九頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（1）（一）益生菌的免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制

1.益生菌對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用益生菌對(duì)人體免疫的調(diào)節(jié)作用，特別是增強(qiáng)免疫作用研究很多。概括起來(lái)：①口服益生菌可通過(guò)腸粘膜刺激機(jī)體免疫反應(yīng)。如益生菌（乳酸菌、雙歧桿菌）提高機(jī)體抗體水平，人口服乳酸桿菌GG，提高機(jī)體對(duì)輪狀病毒和沙門(mén)氏桿菌疫苗的抗體反應(yīng)（Fangac等2000）②益生菌提高老年個(gè)體T細(xì)胞誘導(dǎo)免疫反應(yīng)提高NK細(xì)胞和吞噬細(xì)胞功能（Solana等2000）第二十頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（2）（一）益生菌的免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制免疫學(xué)的基本概念早在16世紀(jì)，人們就注意到，在傳染病者痊愈后，對(duì)該病有不同程度的抵抗能力，即免疫能力。因此早期免疫（Immunity）的概念是指對(duì)傳染因子再次感染有抵抗力。第二十一頁(yè)，共155頁(yè)。現(xiàn)代的免疫概念認(rèn)為：免疫系統(tǒng)具有防御、自穩(wěn)和監(jiān)視三種功能。防御指機(jī)體對(duì)入侵微生物的防御功能，包括非特異性的細(xì)胞防御功能，即排除異物的功能。自穩(wěn)是指一切多細(xì)胞的生物具有保持自身細(xì)胞類(lèi)型、代謝類(lèi)型的功能。包括排除受損衰老的細(xì)胞成分。監(jiān)視指識(shí)別體內(nèi)不斷產(chǎn)生的變異細(xì)胞（如腫瘤細(xì)胞），包括排除它們的能力。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（3）第二十二頁(yè)，共155頁(yè)。總之，機(jī)體的免疫（Immunity）功能是指：“識(shí)別自己，排斥異己”的一種生理功能。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（4）第二十三頁(yè)，共155頁(yè)。免疫系統(tǒng)的細(xì)胞和組織器官

機(jī)體的免疫系統(tǒng)由免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫分子組成。第二十四頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（5）第二十五頁(yè)，共155頁(yè)。免疫系統(tǒng)可分為：天然免疫系統(tǒng)（InnateImmunesystem）機(jī)體生來(lái)具有的抵御外來(lái)入侵異物、細(xì)菌、病毒。但對(duì)蛋白質(zhì)性質(zhì)抗原無(wú)作用，無(wú)記憶功能肥大細(xì)胞（mastcell）巨噬細(xì)胞（macrophage）天然殺傷細(xì)胞(NatureKiller,NK)中性粒細(xì)胞可溶性分子如補(bǔ)體非特異性免疫系統(tǒng)：在機(jī)體感染早期抑制微生物繁殖，擴(kuò)散，甚至清除。獲得性免疫系統(tǒng)（Adapstiveimmunesystem）有記憶功能T細(xì)胞B細(xì)胞：通過(guò)B細(xì)胞受體，識(shí)別抗原而活化增殖漿細(xì)胞抗體CD4+:輔助性T細(xì)胞細(xì)胞因子CD8+:殺傷性（細(xì)胞毒）性細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞免疫系統(tǒng)第二十六頁(yè)，共155頁(yè)?？乖侵改芘c淋巴細(xì)胞上獨(dú)特的抗原受體特異性結(jié)合誘發(fā)（活化或抑制），淋巴細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)的入侵異物（細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)、異體蛋白和藥物等）抗體與抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。人的抗體分為五大類(lèi)：IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。抗體由漿細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞）合成。第二十七頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（6）

2.益生菌免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)理

這是目前研究最多，也是研究較為透徹的一個(gè)領(lǐng)域（1）胃腸粘膜免疫系統(tǒng)（Mucosalimmunesystem，MIS）粘膜免疫系統(tǒng)是指機(jī)體與外界相通的胃腸道腔道表面的免疫。人體70%以上免疫細(xì)胞位于腸粘膜內(nèi)。第二十八頁(yè)，共155頁(yè)。LaminapropriaMuscularismucosaesubmucosaCircularmuscleLongitudinalmuscle第二十九頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（7）★粘膜免疫系統(tǒng)構(gòu)成

粘膜淋巴小結(jié)：廣泛分布于粘膜固有層淋巴組織。包括集合淋巴小結(jié)和孤立淋巴小結(jié)兩部分：集合淋巴小結(jié)如皮氏小結(jié)（Peyer’spatche）它是位于小腸粘膜絨毛細(xì)胞之下散在分布的細(xì)胞團(tuán)，其中除B細(xì)胞外還包括巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞及少量T細(xì)胞。在固有膜的皮氏小結(jié)團(tuán)聚集成層稱(chēng)為集合淋巴組織，皮氏小結(jié)僅有輸出淋巴系第三十頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（8）★粘膜免疫系統(tǒng)構(gòu)成

M細(xì)胞：又稱(chēng)潘氏細(xì)胞，在皮氏小結(jié)上方，它通過(guò)胞飲作用攝取腸腔內(nèi)抗原形成吞飲小體，穿過(guò)M細(xì)胞，在另一側(cè)排出傳遞給皮氏小結(jié)內(nèi)的巨噬細(xì)胞或樹(shù)突狀細(xì)胞，也可通過(guò)引流淋巴管進(jìn)入淋巴結(jié)，從而激活其中淋巴細(xì)胞第三十一頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（9）

★粘膜免疫系統(tǒng)構(gòu)成

孤立淋巴小結(jié)指廣泛分布粘膜固有層中的活化B細(xì)胞，漿細(xì)胞、NK細(xì)胞和T細(xì)胞。這些細(xì)胞通過(guò)分泌抗體和細(xì)胞因子等執(zhí)行粘膜免疫功能。集合淋巴小結(jié)主要由B細(xì)胞組成可產(chǎn)生IgA和IgE，孤立淋巴小結(jié)則以T細(xì)胞為主。第三十二頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（10）

★粘膜免疫系統(tǒng)構(gòu)成

上皮間淋巴細(xì)胞和固有膜淋巴細(xì)胞﹡上皮間淋巴組織位于具有吸收功能的上皮細(xì)胞之間，主要是CD8型T細(xì)胞﹡固有膜淋巴細(xì)胞位于腸粘膜固有層內(nèi)，含有大量漿細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞及肥大細(xì)胞。第三十三頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（11）（2）腸道菌群對(duì)免疫功能影響

新生兒出生后，細(xì)菌就可按一定程序在腸粘膜粘附、定植構(gòu)成原籍菌群。于是原籍菌群與腸粘膜構(gòu)成一道保護(hù)屏障，阻止其他細(xì)胞、病毒和食物抗原入侵，同時(shí)刺激腸道的免疫器官發(fā)揮較強(qiáng)免疫功能。第三十四頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（12）

3.益生菌免疫增強(qiáng)作用意義

益生菌存在，可以明顯促進(jìn)腸道菌群平衡，提高機(jī)體免疫水平，增強(qiáng)抗病能力，改善臨床癥狀，輔助治療已有疾病。（1）抗炎抗感染抗生素相關(guān)性腸炎：由于服用抗生素后引起嚴(yán)重度不同的，以腹瀉為主要癥狀的疾病，稱(chēng)為腸菌群失調(diào)，用益生菌可輔助治療。第三十五頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（13）（2）抗腫瘤

雙歧桿菌在動(dòng)物體內(nèi)可抑制多種腫瘤生長(zhǎng)如肝癌、結(jié)腸癌和乳腺癌，乳桿菌可明顯降低MCA誘導(dǎo)小鼠肉瘤發(fā)病率，其機(jī)理：①降低腸內(nèi)具有致癌相關(guān)細(xì)菌酶的活性，如硝酸鹽還原酶②激活體內(nèi)免疫細(xì)胞③影響腫瘤細(xì)胞基因和酶表達(dá)，抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)。第三十六頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌的生理作用——免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制（14）

（3）對(duì)自身免疫病影響小結(jié)：

益生菌對(duì)機(jī)體免疫有明顯促進(jìn)作用★促進(jìn)新生兒免疫系統(tǒng)成熟，促進(jìn)腸粘膜局部和系統(tǒng)免疫作用★對(duì)特異性和非特異性免疫應(yīng)答均有調(diào)節(jié)作用，維持機(jī)體健康狀態(tài)時(shí)免疫功能正常水平，促進(jìn)免疫功能在疾病狀態(tài)時(shí)增強(qiáng)。★益生菌不同菌種，同一菌種不同菌株之間活性存在明顯差別。第三十七頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——改善胃腸道功能（1）

（二）益生菌改善胃腸道功能

益生菌改善胃腸道功能：包括組成生物屏障；調(diào)節(jié)胃腸道菌群，使有益菌占優(yōu)勢(shì)；潤(rùn)腸通便及保護(hù)胃粘膜等。第三十八頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——改善胃腸道功能（2）

1.腸粘膜與有益菌優(yōu)勢(shì)

腸粘膜表層粘液也有益生菌結(jié)合受體，細(xì)菌等粘附后就不能到達(dá)場(chǎng)上皮細(xì)胞，粘液被不斷剝離進(jìn)入腸腔，代之杯狀細(xì)胞分泌新粘液，所以一些細(xì)菌如數(shù)量少，只在腸道內(nèi)短暫定植，而只有當(dāng)細(xì)胞增殖超過(guò)粘液層的轉(zhuǎn)換和剝離，才可大量定植在腸上皮。腸道內(nèi)益生菌如果通過(guò)占位競(jìng)爭(zhēng)、營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)能在腸道內(nèi)大量繁殖。占優(yōu)勢(shì)后生成生物屏障防止有害菌在腸中繁殖發(fā)育第三十九頁(yè)，共155頁(yè)。第四十頁(yè)，共155頁(yè)。第四十一頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——改善胃腸道功能（3）

2.通便

益生菌如雙歧桿菌產(chǎn)生有機(jī)酸，使腸道pH下降，滲透壓升高，水分進(jìn)入腸腔，加之腸蠕動(dòng)加快緩解便秘。3.保護(hù)胃腸粘膜

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，乳酸菌能降低因攝入大量酒精后大鼠血清中乙醇濃度，病理檢查結(jié)果顯示，乳酸菌能減輕酒精對(duì)胃粘膜的損傷，同時(shí)對(duì)酒精肝損傷有一定保護(hù)作用。第四十二頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——改善胃腸道功能（4）

（三）益生菌改善維生素代謝

益生菌如雙歧桿菌，不僅合成各種維生素VB1、VB2、VB6、VB12、煙酸和葉酸，還能通過(guò)抑制某些維生素分解菌，來(lái)保障機(jī)體維生素供應(yīng)，如它能抑制分解VB1的芽胞桿菌。第四十三頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——降膽固醇作用（1）（四）益生菌降低動(dòng)物和人體血漿膽固醇作用

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Akalin用含有德氏乳桿菌的酸乳酪喂養(yǎng)老鼠發(fā)現(xiàn)動(dòng)物血漿總膽固醇和LDL顯著下降，糞便中乳桿菌數(shù)量大大提高，而腸球菌數(shù)量降低。★Xiao用一種雙歧桿菌發(fā)酵牛奶制品，進(jìn)行鼠和人的實(shí)驗(yàn)，血漿膽固醇明顯下降?！镉腥藦?974-2000年評(píng)價(jià)465人服用發(fā)酵牛奶制品對(duì)人體血脂作用，總膽固醇降低5.4%-23.2%，LDL降低9%-9.8%第四十四頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——降膽固醇作用（2）

降低膽固醇機(jī)理

（1）共沉淀作用去結(jié)合型膽酸鹽和膽固醇在pH<5.5時(shí)共沉淀（2）滲入人體細(xì)胞膜（3）細(xì)菌對(duì)膽固醇吸收（4）將結(jié)合型膽酸鹽降解為去結(jié)合型膽酸鹽膽酸鹽是膽固醇水溶性代謝終產(chǎn)物，是某些腸道細(xì)菌在腸肝循環(huán)中通過(guò)酶的作用形成，體內(nèi)高BSH（膽酸鹽水解酶）活性可以加快膽固醇排出。因?yàn)槿ソY(jié)合型膽酸鹽與結(jié)合型相比，不易被腸道粘膜吸收。第四十五頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——降血壓作用（五）降血壓作用

益生菌，如乳酸菌降壓作用1.通過(guò)胞外酶，肽酶（羧肽酶、氨肽酶）的水解作用，將食物蛋白如乳蛋白中具有降壓活性的肽片斷釋放出來(lái)，如ACE抑制肽。2.乳酸菌的菌體成分——如細(xì)胞里的一種多肽——肽聚糖具有降壓作用。3.部分乳酸菌特別是可到達(dá)腸道的乳酸菌，在腸道可促進(jìn)具有降壓作用礦物質(zhì)吸收4.部分乳酸菌能產(chǎn)生胞外多糖有一定降壓作用。第四十六頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——促進(jìn)礦物質(zhì)吸收（六）促進(jìn)礦物質(zhì)吸收

益生菌如乳酸菌產(chǎn)生有機(jī)酸，使Ca、P和Fe等元素處于離子狀態(tài)，易于腸道吸收，而且還可與肽等有機(jī)物組成更易吸收有機(jī)Ca、Fe。第四十七頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——促進(jìn)乳糖水解

（七）分泌乳糖酶

益生菌分泌乳糖酶，水解乳糖，有利于乳糖不耐癥的人群服用乳制品。第四十八頁(yè)，共155頁(yè)。（四）益生菌生理作用——預(yù)防齲齒

（八）預(yù)防齲齒

實(shí)驗(yàn)證明，乳酸菌能抑制齲齒活動(dòng)，阻礙牙周病菌增值作用，對(duì)齲齒和牙周病有一定預(yù)防效果。第四十九頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）

（一）胃腸道菌群失調(diào)胃腸道內(nèi)的細(xì)菌、宿主（人體）和環(huán)境三方面生態(tài)失調(diào)引起的疾病稱(chēng)為菌群失調(diào)。菌群失調(diào)分為：質(zhì)的失調(diào)，量的失調(diào)及定位轉(zhuǎn)移。第五十頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）

（一）胃腸道菌群失調(diào)胃腸道內(nèi)的細(xì)菌、宿主（人體）和環(huán)境三方面生態(tài)失調(diào)引起的疾病稱(chēng)為菌群失調(diào)。菌群失調(diào)分為：質(zhì)的失調(diào)，量的失調(diào)及定位轉(zhuǎn)移。第五十一頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）（一）胃腸道菌群失調(diào)

菌群質(zhì)的失調(diào)消化道內(nèi)厭氧菌應(yīng)占優(yōu)勢(shì)，若它的優(yōu)勢(shì)地位發(fā)生變化則為質(zhì)的失調(diào)。消化道內(nèi)占優(yōu)勢(shì)的原籍菌被過(guò)路的外籍菌取代，也是質(zhì)的失調(diào)。如使用抗生素治療后或體內(nèi)藥物過(guò)敏菌被耐藥菌取代。第五十二頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）（一）胃腸道菌群失調(diào)菌群量的失調(diào)?一度失調(diào)：可自愈，如服用四環(huán)素等抗生素后引起便秘，停藥后會(huì)自愈。?二度失調(diào)：不能自愈，如慢性腹瀉、便秘或功能紊亂。?三度失調(diào)：更嚴(yán)重，如急性腸炎，原籍菌被外籍菌代替。第五十三頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）（一）胃腸道菌群失調(diào)定位轉(zhuǎn)移不同菌群在腸道內(nèi)定位是固定的，腸道內(nèi)局部的物理、化學(xué)及生理?xiàng)l件決定了各種菌群平衡。當(dāng)局部環(huán)境發(fā)生改變?nèi)缡褂每股兀诳股氐淖饔孟聫哪c粘膜上脫落下來(lái)，外籍菌取而代之，稱(chēng)之定位轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生疾病。第五十四頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）

（二）胃腸道菌群與亞健康

中國(guó)中醫(yī)研究院報(bào)告，在我國(guó)人群中有60%-70%人處于亞健康。而且?guī)缀跛袑?dǎo)致亞健康的原因，如精神壓力、疲勞、機(jī)體損傷、營(yíng)養(yǎng)失衡及濫用抗生素等，都能導(dǎo)致胃腸道菌群失調(diào)。因此可以認(rèn)為：人體亞健康發(fā)生，發(fā)展和轉(zhuǎn)歸均伴隨胃腸道菌群失調(diào)和復(fù)衡第五十五頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾病（6）

（二）胃腸道菌群與亞健康

1.濫用抗生素問(wèn)題：由于大量使用抗生素，同時(shí)也殺死胃腸道、口腔、陰道和皮膚中有害和有益微生物。對(duì)那些抗生素有耐藥性的細(xì)菌、寄生蟲(chóng)、病毒和真菌提供了生長(zhǎng)空間，在反復(fù)使用抗生素情況下，導(dǎo)致機(jī)體微生態(tài)失調(diào)。第五十六頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾病（7）

（二）胃腸道菌群與亞健康

2.環(huán)境壓力如饑餓，外科手術(shù)、疾病侵襲和情緒波動(dòng)都會(huì)通過(guò)某種方式影響腸道菌群?！锿ㄟ^(guò)對(duì)宇航員腸內(nèi)菌群研究，當(dāng)情緒波動(dòng)或憤怒時(shí)，腸道菌群都會(huì)出現(xiàn)較大波動(dòng)，出現(xiàn)微生態(tài)失衡?！锶粘９ぷ?、緊張也可影響腸道菌群。細(xì)菌感染，長(zhǎng)時(shí)間旅行，大便干燥等情況都會(huì)使腸內(nèi)菌群遭受破壞。第五十七頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）（二）胃腸道菌群與亞健康3.便秘

便秘也是一種亞健康，它會(huì)產(chǎn)生一系列的癥狀，如頭痛、肩痛、食欲不振、氣脹、放屁、皮膚干燥等亞健康癥狀。研究指出，腸道菌群失調(diào)是便秘原因之一。便秘者腸道內(nèi)有益菌較正常健康人少25%。也有報(bào)道，50%的便秘者糞便中無(wú)有益菌。故可通過(guò)服用益生菌改善便秘。第五十八頁(yè)，共155頁(yè)。腸道菌群失調(diào)益生菌有害菌腹痛、腹瀉、便秘、便臭……飲食不節(jié)/潔，食用辛辣刺激食物、化學(xué)污染、農(nóng)藥殘留食物細(xì)菌感染情緒因素，壓力大，精神緊張，服用抗生素暗瘡皮膚暗沉粗糙易長(zhǎng)斑腸道與美麗密不可分（二）胃腸道菌群與亞健康4.美容當(dāng)腸內(nèi)細(xì)菌平衡遭到破壞時(shí)，有益菌減少，有害菌增加，有害菌產(chǎn)生大量的腐敗和有毒物質(zhì)，經(jīng)血液散布到全身，就會(huì)引起皮膚長(zhǎng)疙瘩、暗沉、粗糙等皮膚問(wèn)題。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?）第五十九頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?0）致病菌條件致病菌

腸道益生菌在數(shù)量上處于絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，是維持人體微生態(tài)平衡的前提和基礎(chǔ)。益生菌益生菌微生態(tài)平衡微生態(tài)失調(diào)內(nèi)源性感染外源性感染環(huán)境因素第六十頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾病（11）（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病1.炎癥性腸?。↖BD）

★在炎癥性腸病動(dòng)物模型研究證實(shí)，在無(wú)菌狀態(tài)下不會(huì)致病，說(shuō)明IBD必須有腸道菌群參與。★用益生菌可治療IBD，研究認(rèn)為乳酸桿菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物酪酸，可改善大腸上皮功能，促使生成細(xì)胞因子，抑制可致炎癥的轉(zhuǎn)錄因子NF-κB第六十一頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾病（12）

（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病2.特異性皮炎

應(yīng)用益生菌可預(yù)防乳兒期特異性皮炎（一種過(guò)敏性皮炎）。研究發(fā)現(xiàn)活菌及死菌均有效，但活菌制劑效果更好，但機(jī)制尚不十分清楚。第六十二頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?3）（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病3.流感

利用益生菌L.CaseiShirota(Lcs)株可增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫和抗流感病毒能力，小鼠經(jīng)鼻投入Lcs三次后，檢查因流感病毒感染小鼠上呼吸道中病毒滴度下降，小鼠生存率明顯提高第六十三頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?4）

（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病4.牙周病

牙周病是近年備受重視多發(fā)病，特別發(fā)現(xiàn)牙周病患者易患心肌梗塞和糖尿病。石川（2003）研究了57名志愿者服用乳酸菌L.Salivarious1次5片，日服5次（每日2000萬(wàn)菌體），以服用前、服后四周和服后八周對(duì)比，結(jié)果顯示牙周病菌數(shù)顯著降低，有三分之一病例，服用8周后口臭消失或減輕。第六十四頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?5）

（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病5.大腸癌

不少研究報(bào)告，Lcs株LcGG株對(duì)大鼠因化學(xué)致癌劑AOM和DMH有降低致癌效果。臨床證明含有乳酸菌及雙歧桿菌發(fā)酵的乳制品可能有預(yù)防大腸癌作用。如芬蘭人經(jīng)常攝取高脂肪餐，但結(jié)腸癌發(fā)病率不高，可能與多飲酸奶有關(guān)。第六十五頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?6）

（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病6.短腸綜合癥及難治性腸炎

用益生菌（BifidobacteriumbreveofLactobacilluscasei）加之乳寡糖，治療患有短腸綜合癥、難治性腸炎小兒，發(fā)現(xiàn)患兒治療前無(wú)一例外有腸道菌群異常，顯示發(fā)現(xiàn)厭氧菌發(fā)育不良和致癌微生物生長(zhǎng)。治療后腸道菌群很快轉(zhuǎn)為厭氧菌為主，并出現(xiàn)治病微生物明顯受抑，隨之患者營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)良好，從而不致發(fā)生重癥感染第六十六頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?7）

（三）胃腸道菌群失調(diào)與疾病7.腸道感染

益生菌除了抑制腸道菌群有害菌外，還有增強(qiáng)腸道蠕動(dòng)，修復(fù)腸管上皮，降低腸道pH，使腸道通透性正常，又有激活腸道免疫系統(tǒng)，所以利用益生菌可防止抗生素誘發(fā)腹瀉（ADD）預(yù)防旅行者腹瀉或治療輪狀病毒腹瀉。第六十七頁(yè)，共155頁(yè)。（五）胃腸道菌群失調(diào)與疾?。?8）

小結(jié)：

由上所述可見(jiàn)，胃腸道菌群的失調(diào)是造成亞健康的原因之一，也是引起胃腸道疾病的病因。利用微生態(tài)制劑對(duì)于治療一些胃腸道疾病，改善亞健康均有重要意義。第六十八頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（1）

利用微生態(tài)制劑可以糾正胃腸菌群失調(diào)，從而增進(jìn)健康，微生態(tài)制劑包括：益生菌（probiotics）、益生元、（prebiotics）和合生元（synbiotics）三類(lèi)。第六十九頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（2）

（一）益生菌1.益生菌定義：

Lilly（1965）：最早提出“益生菌”概念，是指對(duì)飼養(yǎng)動(dòng)物腸道菌有益的促進(jìn)物和微生物。Fuller（1989）：“益生菌是補(bǔ)充活的微生物可通過(guò)改善腸道菌群平衡而對(duì)宿主產(chǎn)生良好健康效應(yīng)”Fuller（1991）：“益生菌劑是含有生理活性菌”能通過(guò)胃腸或定植于結(jié)腸或在腸道增殖調(diào)整腸道菌群而提高機(jī)體免疫力活的微生物。Arameo（1996）對(duì)益生菌制劑不再是活的微生物?！耙嫔呛砘钚跃蛩兰?xì)胞，包括代謝產(chǎn)物或細(xì)胞組成，攝取后可改善粘膜表面菌群或酶平衡或刺激機(jī)體特異性或非特異性免疫里的微生物制劑”第七十頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（3）

（一）益生菌2.益生菌的安全性包括：（1）應(yīng)用于人體的益生菌最好來(lái)自人體，從健康人體腸道中分離。（2）必須進(jìn)過(guò)一定時(shí)間證明無(wú)致病性（3）不能攜帶可以轉(zhuǎn)移的抗生素基因。（4）不能引起一些與疾病相聯(lián)系疾?。ㄈ缧膬?nèi)膜炎腸道不適癥）（5）抗酸、抗膽汁能力較強(qiáng)第七十一頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（4）可用于保健食品的益生菌菌種：

兩岐雙岐桿菌Bifidobacteriumbifidum嬰兒雙岐桿菌B.infantis長(zhǎng)雙岐桿菌B.longum短雙岐桿菌B.breve青春雙岐桿菌B.adolescentis保加利亞乳桿菌Lactobacillusbulgaricus嗜酸乳桿菌L.acidophilus干酪乳桿菌干酪亞種L.Caseisubsp.Casei嗜熱金鏈球菌Streptococcuthermophilus第七十二頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（5）

3.益生菌制劑研發(fā)動(dòng)向及提高食用益生菌活性的方法。（1）與益生元的協(xié)同作用（后面詳述）第七十三頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（6）

（2）微膠囊包埋技術(shù)

利用微膠囊技術(shù)可以提高益生菌產(chǎn)品的活菌存活率，延長(zhǎng)存活期，使產(chǎn)品賦有耐貯藏、改善加工性能，減少使用率，充分發(fā)揮益生菌產(chǎn)品作用，采用微膠囊技術(shù)優(yōu)點(diǎn)有：①改變益生菌產(chǎn)品形態(tài)，將益生菌產(chǎn)品微膠囊化，使它轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N細(xì)粉狀顆粒，因而具有良好流動(dòng)性、分散性，易于其他產(chǎn)品混合，便于運(yùn)輸貯藏。②提高益生菌產(chǎn)品穩(wěn)定性，有膠囊保護(hù)不易失活③將與配伍禁忌的一些成分隔開(kāi)④使用不同極性的物質(zhì)均勻穩(wěn)定分散在一起。第七十四頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（7）

（3）與中藥配伍問(wèn)題

有些中藥與益生菌有協(xié)同促進(jìn)作用，如人參提取物含有雙歧桿菌促生長(zhǎng)因子。日本一些公司在研發(fā)益生菌、益生元及人參抽提物產(chǎn)品，并已問(wèn)世。

第七十五頁(yè)，共155頁(yè)。（六）微生態(tài)制劑與健康（8）（4）飲食對(duì)益生菌影響

腸道中微生物具有選擇利用不同寡糖能力。因而食物中碳水化合物組成對(duì)腸道微生物組成有一定影響，據(jù)日本研究，吃精米的人群腸道內(nèi)雙歧桿菌少，食粗糧者多?！锒喑允卟巳巳耗c道內(nèi)雙歧桿菌多，食高比例肉類(lèi)、高脂肪食物人群腸道內(nèi)雙歧桿菌少?！镩L(zhǎng)壽老人與一般健康老人比較，腸道內(nèi)雙歧桿菌多

腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量成了衡量人體健康與否標(biāo)志之一。第七十六頁(yè)，共155頁(yè)。二、益生元及其健康功能第七十七頁(yè)，共155頁(yè)。益生元的定義益生元（Prebiotics）:是指不被宿主消化吸收，卻又能選擇性促進(jìn)一種或幾種有益菌代謝和繁殖，增進(jìn)宿主健康，如各類(lèi)功能性低聚糖。如低聚果糖、低聚異麥芽糖、低聚乳果糖、低聚殼聚糖、水蘇糖等。第七十八頁(yè)，共155頁(yè)。低聚糖的概念與分類(lèi)（一）低聚糖：由2-10個(gè)單糖由糖苷鍵相連，合成的直鏈或支鏈低度聚合糖。第七十九頁(yè)，共155頁(yè)。（一）低聚糖的概念與分類(lèi)（1）低聚糖（Oligosaccharide）普通低聚糖：蔗糖、乳糖、麥芽糖功能性低聚糖：低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚半乳糖、水蘇糖等。第八十頁(yè)，共155頁(yè)。（一）低聚糖的概念與分類(lèi)（2）普通低聚糖主要功能：為人體提供能量及怡人的甜味，對(duì)腸道內(nèi)益生菌（probiotics）生長(zhǎng)無(wú)促進(jìn)作用。第八十一頁(yè)，共155頁(yè)。（一）低聚糖的概念與分類(lèi)（3）功能性低聚糖（FunctionalOligoSaccharide,FOS）人體腸道內(nèi)無(wú)水解功能性低聚糖的酶系統(tǒng)，它也不被人體胃酸、胃酶水解，故不能在小腸內(nèi)吸收，直接進(jìn)入大腸，優(yōu)先為腸道內(nèi)益生菌利用，促進(jìn)其生長(zhǎng)，故稱(chēng)之為益生元（prebiotics）第八十二頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（1）1.低熱值及減少機(jī)體脂肪積累功能性低聚糖，很難被人體吸收，故提供能量很低或沒(méi)有，有些還有一定甜味，可適用于糖尿病、肥胖病人食用。第八十三頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（2）減少脂肪的積累有些低聚糖如魔芋葡甘聚糖，具有較強(qiáng)吸水性，黏度大，膨脹率高，而且在胃內(nèi)停留時(shí)間長(zhǎng)，產(chǎn)生飽腹感，降低機(jī)體攝食量，又不被人體吸收，故減少機(jī)體脂肪積累。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)0.17-1.5g/Kg魔芋甘露聚糖可使?fàn)I養(yǎng)性肥胖鼠體重降低，并減少脂肪堆積，降低脂肪細(xì)胞的數(shù)量和大小。第八十四頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（3）2.雙歧桿菌的增殖因子：功能性低聚糖進(jìn)入大腸后，為腸道內(nèi)雙歧桿菌利用，使雙歧桿菌大量增殖，起到益生元作用；雙歧桿菌利用FOS，產(chǎn)生酸性物質(zhì)使腸道pH值降低，抑制有害菌生長(zhǎng)，故有效改善腸道菌群，又促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，有改善便秘功能。第八十五頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（4）功能性低聚糖及糖醇改善胃腸道功能的研究功能性低聚糖及糖醇類(lèi)別推薦量g/人·日潤(rùn)腸通便改善胃腸道菌群低聚異麥芽糖-502030低聚異麥芽糖-901510低聚木糖0.70.7木糖醇1515木糖1550第八十六頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（5）3.降低齲齒發(fā)生率：因FOS不被齲齒的病原菌-突變鏈球菌利用，與蔗糖并用，能阻止蔗糖與突變鏈球菌作用，從而抑制蔗糖的齲齒性。第八十七頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（6）4.降低血清膽固醇：每天攝入6-12g低聚半乳糖，維持2周-3個(gè)月，血清總膽固醇降低20-50mg/dL。其機(jī)理可能是FOS與膽固醇和膽酸結(jié)合增加糞便排出量。膽酸是利用膽固醇在肝臟合成，故膽酸排出體外，會(huì)增加體內(nèi)膽酸合成，降低膽固醇水平。第八十八頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（7）5.增強(qiáng)機(jī)體免疫動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，F(xiàn)OS提高小鼠血清溶血素和淋轉(zhuǎn)，增加腫瘤壞死因子（TNF）產(chǎn)生，對(duì)巨噬細(xì)胞合成和釋放白細(xì)胞介素I（IL1）有明顯促進(jìn)作用；改善便秘，降低消化道內(nèi)有毒物質(zhì)吸收；改善菌群：抑制有害菌生長(zhǎng)；FOS在腸道內(nèi)吸附有害物質(zhì)，排出體外。第八十九頁(yè)，共155頁(yè)。（二）功能性低聚糖主要生理功能（8）6.提高抗氧化能力動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明FOS提高SOD活性，降低LPO水平。7.促進(jìn)礦物質(zhì)吸收有的FOS，有效促進(jìn)Ca、Mg、P吸收，促進(jìn)蛋白質(zhì)消化。第九十頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（1）迄今為止FOS有1000多種，已經(jīng)開(kāi)發(fā)成功的也有70多種，如低聚果糖、低聚乳果糖、低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚龍膽糖、低聚殼聚糖、低聚半乳糖、水蘇糖等。第九十一頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（2）----低聚果糖1.低聚果糖（Fructooligossaccharide,GF）（1）結(jié)構(gòu)蔗糖分子的果糖殘基上通過(guò)β-1，2糖苷鍵結(jié)合1-3個(gè)果糖分子。故有蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）、蔗果五糖（GF4）。第九十二頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（3）----低聚果糖（2）來(lái)源天然GF：洋蔥（2.8%），牛蒡（3.6%），小麥（0.7%），大蒜（1%）人工GF：蔗糖低聚果糖聚合度≤5，平均3.7甜度為蔗糖的40%菊糖（inulin）經(jīng)內(nèi)切糖苷酶（endoglyosidase）水解而成聚合度〈9，平均4.5甜度為蔗糖的30%黑曲霉-β果糖基轉(zhuǎn)移酶第九十三頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（4）----低聚果糖（3）體內(nèi)代謝：在大腸內(nèi)，由于厭氧菌（雙歧桿菌、乳桿菌）能產(chǎn)生水解β-1，2糖苷鍵的酶，將其水解生成：醋酸（83%）；丙酸（13%）；丁酸（4%）；乳酸。這些物質(zhì)被大腸吸收。還會(huì)產(chǎn)生氣體。

實(shí)驗(yàn)證明89%的GF的代謝產(chǎn)物可在回腸吸收，在尿、糞便中很少檢出，不到10%第九十四頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（5）----低聚果糖（4）攝入量和耐受性Tomomatsu研究：每日有效劑量-3.0g最大有效劑量（Hata）不引起腹瀉0.3g/Kg體重（男）0.4g/Kg體重（女）即男性（70Kg）每天21g，女性（60Kg）每天24g50%最大有效劑量（50%志愿者腹瀉）0.78g/Kg體重（男）0.84g/Kg體重（女）即男性（70Kg）每天55g，女性（60Kg）每天50g第九十五頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（6）----低聚果糖（5）毒性進(jìn)行毒理研究表明：未發(fā)現(xiàn)有潛在基因毒性；長(zhǎng)期攝入2170mg/Kg體重，未發(fā)現(xiàn)有毒副作用；攝入大量GF，副作用僅為稀便和腹瀉；美FDA批準(zhǔn)為GRAS。第九十六頁(yè)，共155頁(yè)。1、實(shí)驗(yàn)材料1.1樣品：由江門(mén)量子高科生物工程有限公司提供的低聚果糖，為淡黃色透明黏稠狀液體。批號(hào)：06720B1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:選用體重18-22g,BALB/C健康清潔級(jí)雄性小鼠。由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所繁殖[許可證號(hào)：SCXK-(京)2004-0001]低聚果糖改善胃腸道菌群和增強(qiáng)免疫功能的研究第九十七頁(yè)，共155頁(yè)。

1.3劑量與分組：試驗(yàn)按成人60kg體重每日8.3g劑量的5倍、10倍、30倍，即0.69g/kgBW、1.38g/kgBW、4.15g/kgBW分為低、中、高三個(gè)劑量試驗(yàn)組。同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組，每日給予同體積的白水。每組動(dòng)物12只。連續(xù)灌胃20天1.4儀器與試劑：略2實(shí)驗(yàn)方法取樣和稀釋菌群培養(yǎng)和鑒定菌落計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)處理第九十八頁(yè)，共155頁(yè)。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1低聚果糖對(duì)小鼠體重的影響

組別動(dòng)物數(shù)（只）試驗(yàn)前體重(g)與0g/kgBW組比較的P值試驗(yàn)后體重（g）與0g/kgBW組比較的P值

0g/kgBW1220.8±1.024.0±1.30.69g/kgBW1221.0±1.00.87524.8±0.70.4671.38g/kgBW1220.9±0.90.96324.8±1.80.4494.15g/kgBW1221.0±1.00.92223.8±1.60.963

由表1可知，試驗(yàn)前、后各試驗(yàn)組小鼠體重與0g/kgBW組比較，差異無(wú)顯著性P＞0.05。說(shuō)明低聚糖對(duì)小鼠體重沒(méi)有影響。

第九十九頁(yè)，共155頁(yè)。3.2低聚果糖對(duì)小鼠腸道中腸桿菌的影響log10cfu/g給受試物前、后各劑量組與0g/kgBW組間比較，腸桿菌的數(shù)量均無(wú)顯著性差異（p＞0.05）；給受試物前、后0g/kgBW組和0.69g/kgBW組自身比較，腸桿菌的數(shù)量分別增加12.9%和12.6%有顯著性差異（p＜0.05）第一百頁(yè)，共155頁(yè)。3.3低聚果糖對(duì)小鼠腸道中腸球菌的影響log10cfu/g給受試物前、后各劑量組與og/kgBW組間比較，腸球菌的數(shù)量無(wú)顯著性差異（p＞0.05）。給受試物前、后，0g/kgBW、0.69g/kgBW和1.38g/kgBW組自身比較，腸球菌的數(shù)量分別增加7.4%、7.0%和10.7%有顯著性差異(p＜0.05)第一百零一頁(yè)，共155頁(yè)。log10cfu/g3.4低聚果糖對(duì)小鼠腸道中乳桿菌的影響給受試物前各組間乳桿菌數(shù)無(wú)差異。給受試物后1.38g/kgBW和4.15g/kgBW劑量組自身比較分別提高8.4%和9.1%有顯著性（p＜0.01）；與0g/kgBW比較乳桿菌增加也有顯著性（p＜0.05）第一百零二頁(yè)，共155頁(yè)。log10cfu/g3.5低聚果糖對(duì)小鼠腸道中雙歧桿菌的影響

4.15g/kgBW高劑量組在給受試物后與給受試物前和0g/kgBW比較雙歧桿菌數(shù)量有明顯增加（p＜0.05）。第一百零三頁(yè)，共155頁(yè)。12個(gè)17個(gè)25個(gè)12個(gè)17個(gè)17個(gè)25個(gè)12個(gè)3.6低聚果糖對(duì)小鼠腸道中產(chǎn)氣莢膜梭菌的影響給受試物前、后各劑量組自身比較和與0g/kgBW比較，產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量均無(wú)性差異第一百零四頁(yè)，共155頁(yè)。各組菌群變化一覽表

腸桿菌腸球菌乳桿菌雙歧桿菌產(chǎn)氣夾膜梭菌對(duì)照組試驗(yàn)前、后自身比增12.9%P＜0.01增7.4%P＜0.05－－－低劑量組試驗(yàn)前、后自身比增12.6%P＜0.01增10.7%P＜0.01

－

－

－中劑量組試驗(yàn)前、后自身比

－增7.0%P＜0.05增8.4%P＜0.01

－

－高劑量組試驗(yàn)前、后自身比

－

－增9.1%P＜0.01增3.4%P＜0.05

－第一百零五頁(yè)，共155頁(yè)。對(duì)照組和低劑量組試驗(yàn)前后自身比較，腸桿菌、腸球菌都有明顯的增加。中劑量組實(shí)驗(yàn)前、后自身比較，腸球菌、乳桿菌明顯增加，且乳桿菌比腸球菌增加明顯。高劑量組前后自身比較，雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加，而腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣夾膜梭菌都無(wú)增值。第一百零六頁(yè)，共155頁(yè)。（二）人體試食實(shí)驗(yàn)研究1實(shí)驗(yàn)對(duì)象與材料1.1受試者條件：年齡在18-65歲之間，一個(gè)月內(nèi)未患過(guò)腸胃疾病，未服用過(guò)抗生素，體檢指標(biāo)全部正常的志愿者。1.2試驗(yàn)分組與試食方法：將志愿者隨機(jī)分為兩組，每組50人，采用自身和組間兩種對(duì)照設(shè)計(jì)。試驗(yàn)組每日服用OLIGO(低聚果糖)1袋，6ml/袋（8.3g/袋）；對(duì)照組服用同體積果脯糖漿1袋1.3儀器與試劑：略第一百零七頁(yè)，共155頁(yè)。2觀察指標(biāo)2.1安全性指標(biāo)2.1.1一般狀況：血壓、心率、大小便、飲食、睡眠2.1.2血尿便常規(guī)2.1.3生化指標(biāo):血清肝腎功能腹部B超，心電圖，X光胸部透視2.1.5膳食調(diào)查：于試驗(yàn)開(kāi)始、結(jié)速前三天進(jìn)行膳食調(diào)查，觀察飲食因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。第一百零八頁(yè)，共155頁(yè)。2.2功效性指標(biāo)2.2.1臨床癥狀觀察：食欲不振、體倦、眩暈、心慌氣短等。2.2.2腸道菌群指標(biāo)：腸桿菌、腸球菌、擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌2.2.3試驗(yàn)方法：同上第一百零九頁(yè)，共155頁(yè)。3人體試食試驗(yàn)結(jié)果3.1試驗(yàn)分組情況：試食組50例，其中男23例，女27例，平均年齡42.9±8.5歲；對(duì)照組50例，男14例，女36例，平均年齡40.8±9.1歲3.2安全性指標(biāo)檢測(cè)：試食組與對(duì)照組試食前、后：精神、睡眠、飲食、大小便正常；血壓、心率正常；血、尿、便常規(guī)檢查及肝、腎功能檢查正常；腹部B超，心電圖，X線胸部透視正常。受試者無(wú)其它不良反應(yīng)。見(jiàn)表1、2第一百一十頁(yè)，共155頁(yè)。組別例數(shù)收縮壓舒張壓心率試食組50實(shí)驗(yàn)前114±1777±1176±8實(shí)驗(yàn)后115±1676±1175±8P>0.05>0.05>0.05對(duì)照組50實(shí)驗(yàn)前117±1176±774±7實(shí)驗(yàn)后116±1176±874±7P>0.05>0.05>0.05

表1試食前后血壓、心率變化第一百一十一頁(yè)，共155頁(yè)。項(xiàng)目例數(shù)試食組對(duì)照組試食前試食后試食前試食后ALT(u/L)5023.16±10.7918.62±9.4121.02±13.7719.88±9.71CRE(umol/L)5070.20±15.9873.84±19.3072.34±13.9672.18±13.44GLU(mmol/L)505.06±0.885.22±0.635.04±.0.655.04±0.67TC(mmol/L)504.82±0.864.59±0.904.70±0.704.62±0.78TG(mmol/L)501.78±1.421.55±1.091.40±0.841.35±0.58RBC(×1012/L)504.47±0.514.44±0.504.44±0.394.46±0.43WBC(×109/L)506.23±1.505.80±1.486.69±1.856.38±1.76HGB（g/L）50142±21141±21141±15142±16尿常規(guī)便常規(guī)5050正常正常正常正常正常正常正常正常表2安全性指標(biāo)檢測(cè)第一百一十二頁(yè)，共155頁(yè)。log10cfu/g,X±SD試驗(yàn)前后自身比較試食組實(shí)驗(yàn)前、后比較，雙歧桿菌數(shù)明顯增加5.8%(p＜0.01)產(chǎn)氣夾膜梭菌數(shù)明顯下降9％p＜0.01)，擬桿菌增1.0%(p＜0.01),腸桿菌、腸球菌分別增0.4%和0.8%(p＜0.05),但增幅明顯低于雙歧桿菌。第一百一十三頁(yè)，共155頁(yè)。log10cfu/g,X±SD試食組與對(duì)照組比較實(shí)驗(yàn)后試食組與對(duì)照組比，雙歧桿菌增4.2%(p＜0.01)，產(chǎn)氣夾膜梭菌數(shù)減少7.2%（p＜0.01)第一百一十四頁(yè)，共155頁(yè)。分組例數(shù)試食前3天結(jié)束前3天試食組501560±5641798±869對(duì)照組501625±4241629±4333.5膳食調(diào)查表6膳食調(diào)查表（千卡/天）兩組試食前后及組間進(jìn)食量無(wú)明顯差異，具有可比性第一百一十五頁(yè)，共155頁(yè)。腸桿菌腸球菌擬桿菌產(chǎn)氣夾膜梭菌雙歧桿菌乳酸桿菌對(duì)照組試食前后自身比較

－

－

－

－

－

－實(shí)驗(yàn)組試食前后自身比較增0.4%p＜0.05增0.8%p＜0.05增1.0%p＜0.01減8.6%p＜0.01增5.8%p＜0.01

－試食前試驗(yàn)組與對(duì)照組比較

－－－－－－試食后試驗(yàn)組與對(duì)照組比較減1.3%－減0.4%減7.2%p＜0.01增4.2%p＜0.01減2.1%表6各組菌群變化一覽表第一百一十六頁(yè)，共155頁(yè)。試食組實(shí)驗(yàn)前后自身比較，腸桿菌、腸球菌、擬桿菌、雙歧桿菌都明顯增加，但雙歧桿菌增加幅度明顯高于腸桿菌、腸球菌、擬桿菌，試食后實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比，雙歧菌明顯增加，產(chǎn)氣夾膜梭菌明顯減少。第一百一十七頁(yè)，共155頁(yè)。結(jié)論

OLIGO（低聚果糖）經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及人體試食實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：OLIGO（低聚果糖）有激活人體腸道益生菌增值、抑制有害菌、平衡微生態(tài)的作用。根據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）中調(diào)節(jié)腸道菌群功能的判定依據(jù)，可以判定OLIGO（低聚果糖）具有調(diào)節(jié)腸道菌群功能。第一百一十八頁(yè)，共155頁(yè)。二、低聚果糖增強(qiáng)免疫力的研究(一)材料和方法1.1樣品：同上1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：18-22g健康清潔級(jí)昆明種雌性小鼠，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。1.3劑量;同上第一百一十九頁(yè)，共155頁(yè)。圖1OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠脾臟/體重比值的影響圖2OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠胸腺/體重比值的影響OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠臟器/體重比值沒(méi)有影響第一百二十頁(yè)，共155頁(yè)。2.2OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠細(xì)胞免疫的影響圖3OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響與對(duì)照組相比，各組之間沒(méi)有差異第一百二十一頁(yè)，共155頁(yè)。圖4OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的影響4.15g/kgBW與0g/kgBW比，增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力（p＜0.01)★第一百二十二頁(yè)，共155頁(yè)。2.3OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠體液免疫的影響圖5OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)的影響

1.38g/kgBW、4.15g/kgBW組與對(duì)照組比顯著提高小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)（p＜0.05)★★第一百二十三頁(yè)，共155頁(yè)。表6OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠半數(shù)溶血值的影響組別動(dòng)物數(shù)(只)半數(shù)溶血值P值0g/kgBW12118±42——0.69g/kgBW12130±410.8621.38g/kgBW12154±560.1704.15g/kgBW12136±500.675第一百二十四頁(yè)，共155頁(yè)。2.4OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響★表7OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠碳廓清能力的影響

4.15g/kgBW與0g/kgBW組比能提高小鼠碳廓清能力（p＜0.01)★第一百二十五頁(yè)，共155頁(yè)。表8OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬率的影響4.15g/kgBW與0g/kgBW組比能提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬率（p＜0.05)★第一百二十六頁(yè)，共155頁(yè)。表9OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬指數(shù)的影響

4.15g/kgBW與0g/kgBW組比能提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬指數(shù)（p＜0.05)★第一百二十七頁(yè)，共155頁(yè)。2.5OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響

組別動(dòng)物數(shù)(只)NK細(xì)胞活性(%)NK細(xì)胞活性平方根反正弦轉(zhuǎn)換值P值0g/kgBW1221.6±5.00.48±0.06——0.69g/kgBW1222.6±5.60.49±0.070.9311.38g/kgBW1224.5±4.60.52±0.050.3554.15g/kgBW1222.2±4.50.49±0.060.976表10OLIGO（低聚果糖）對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響第一百二十八頁(yè)，共155頁(yè)。小結(jié)

經(jīng)口給予小鼠不同劑量的OLIGO(低聚果糖)33天后，與0g/kgBW組比較，1.38g/kgBW劑量組（中）能提高小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)（P<0.05）；4.15g/kgBW劑量組（高）能增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力（P<0.01）、提高小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)（P<0.05）、提高小鼠的碳廓清能力（P<0.01）、提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬率（P<0.05）、提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞吞噬指數(shù)（P<0.01）。該受試物對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)無(wú)不良影響。第一百二十九頁(yè)，共155頁(yè)。結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：OLIGO(低聚果糖)能提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的細(xì)胞免疫力、體液免疫力、提高巨噬細(xì)胞吞噬能力等三方面的免疫能力。根據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）中增強(qiáng)免疫力功能的判定依據(jù)，可以判定OLIGO（低聚果糖）具有增強(qiáng)免疫力功能。第一百三十頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（7）----低聚乳果糖2.低聚乳果糖（Lactosucrose,LS）（1）結(jié)構(gòu)由β-D半乳糖、α-D葡萄糖苷、β-D呋喃糖苷3個(gè)單糖殘基通過(guò)糖苷鍵連接而成?？煽醋魅樘墙?個(gè)果糖，也可看成蔗糖接一個(gè)半乳糖，又稱(chēng)乳蔗糖、乳果糖。第一百三十一頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（8）----低聚乳果糖（2）功能特點(diǎn)在FOS中，最有效的雙歧桿菌增殖因子。每天攝取2-5g，有效促進(jìn)雙歧桿菌增殖；甜味最接近蔗糖。第一百三十二頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（9）----低聚異麥芽糖3.低聚異麥芽糖(isomaltooligassacchride，MO)（1）結(jié)構(gòu)葡萄糖以α－１，６糖苷鍵結(jié)合而成的單糖數(shù)在２-５不等的一類(lèi)低聚糖，分子中除了α－１，６鍵外，還有α－１，４及α－１，３鍵等分枝狀。第一百三十三頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（10）----低聚異麥芽糖（2）特性有甜味，是蔗糖的45-50%，但隨聚合度的增加（異麥芽三糖、異麥芽四糖、異麥芽五糖），甜味消失；改善腸道菌群和改善便秘功能（IMO500,IMO900）熱值：2.8KJ/g（僅為葡萄糖的1/6），無(wú)糖食品（冰淇淋）第一百三十四頁(yè)，共155頁(yè)。（三）保健食品中幾種常用的功能性低聚糖（11）----低聚異麥芽糖（3）安全劑量第一百三十五頁(yè)，共155頁(yè)。低聚異麥芽糖調(diào)節(jié)腸道菌群動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：本實(shí)驗(yàn)選用中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所（許可證號(hào)：SCXK-（京）2004-0001）繁殖的18~22g，BALB/C健康清潔級(jí)雄性小鼠48只。分為四組，每組12只。劑量：益菌因子（IMO）的推薦劑量為成人（按60kg體重計(jì)）每日10g、20g和30g。分別依照三個(gè)推薦劑量的10倍設(shè)置小鼠實(shí)驗(yàn)劑量，即每日1.67g/kgBW、3.33g/kgBW、5.00g/kgBW為低、中、高劑量組。第一百三十六頁(yè)，共155頁(yè)。益菌因子（IMO）對(duì)小鼠體重的影響

由上圖可見(jiàn)，小鼠的初始體重和實(shí)驗(yàn)后體重在各劑量組與0g/kgBW間比較，差異均無(wú)顯著性(P>0.05)。即益菌因子（IMO）對(duì)小鼠的體重?zé)o不良影響。第一百三十七頁(yè)，共155頁(yè)。對(duì)小鼠腸道中腸桿菌的影響

從上圖可知：給受試物前各劑量組與0g/kgBW組間比較，腸桿菌的數(shù)量均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。給受試物14天后與0g/kgBW組比較，5.00g/kgBW組腸桿菌的數(shù)量減少，有顯著差異（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)前后各劑量組自身比較腸桿菌均無(wú)顯著性差異（P>0.05）?！锏谝话偃隧?yè)，共155頁(yè)。對(duì)小鼠腸道中腸球菌的影響由上圖可知：給受試物前各劑量組與0g/kgBW組間比較，腸球菌的數(shù)量均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。給受試物14天后與0g/kgBW組比較，5.00g/kgBW組腸球菌的數(shù)量減少，有顯著差異（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)前后各劑量組自身比較腸球菌均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。★第一百三十九頁(yè)，共155頁(yè)。對(duì)小鼠腸道中乳桿菌的影響由上圖可知：給受試物前、后各劑量組與0g/kgBW間比較，乳桿菌的數(shù)量無(wú)顯著性差異（P>0.05）。給受試物前后各劑量組自身比較，乳桿菌的數(shù)量均無(wú)顯著性差異（P>0.05）第一百四十頁(yè)，共155頁(yè)。對(duì)小鼠腸道中雙歧桿菌的影響由上圖可知：給受試物前、后各劑量組與0g/kgBW組間比較，雙歧桿菌的數(shù)量均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。給受試物前后0g/kgBW、1.67g/kgBW組自身比較，雙歧桿菌的數(shù)量無(wú)顯著性差異（P>0.05）；3.33g/