對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的分析

對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的分析第1頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四苯佐卡因第2頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸丁卡因第3頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸普魯卡因胺第4頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四酰苯胺類藥物(苯胺的?；苌?的基本結(jié)構(gòu)第5頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四非那西丁（對(duì)乙酰氨基苯乙醚,解熱鎮(zhèn)痛藥）對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）第6頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸利多卡因第7頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸布比卡因第8頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

鹽酸羅派卡因(S)-N-(2,6-二甲基苯基)-1-正丙基哌啶-2-甲酰胺鹽酸鹽一水合物。

第9頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

（一）具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色。如酰氨基鄰位存在甲基，空間位阻難于水解，較穩(wěn)定。

第10頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

（三）具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量。水溶液無法直接滴定，需用非水滴定。（四）游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水。（二）酯鍵或酰胺鍵易水解第11頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（五）鹽酸利多卡因（布比卡因，羅哌卡因）分子結(jié)構(gòu)酰胺基氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿顯色。第12頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（六）UV（七）IR第13頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四二、鑒別試驗(yàn)

（一）重氮化—偶合反應(yīng)

芳香第一胺類鑒別反應(yīng)

第14頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸普魯卡因第15頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

直接：鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺

間接：對(duì)乙酰氨基酚第16頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸普魯卡因ChP（2010）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

第17頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四對(duì)乙酰氨基酚ChP（2005）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。第18頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子結(jié)構(gòu)中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成白色沉淀，與具有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別。第19頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（二）與金屬離子反應(yīng)

1.與銅和鈷離子反應(yīng)

苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因和鹽酸丁卡因等不發(fā)生此反應(yīng)。第20頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第21頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

與汞離子的反應(yīng)

2．羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

第22頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第23頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（三）水解產(chǎn)物的反應(yīng)

1.鹽酸普魯卡因ChP（2010）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。

第24頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第25頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第26頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四2.苯佐卡因ChP（2010）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。第27頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第28頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

（四）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1．三硝基苯酚衍生物

鹽酸利多卡因ChP（2010）[鑒別]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)為228～232℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。第29頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四2.硫氰酸鹽衍生物

鹽酸丁卡因ChP（2010）[鑒別]（1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。第30頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

鹽酸布比卡因、鹽酸普魯卡因胺ChP（2010）[鑒別]（2）取本品，精密稱定，按干燥品計(jì)算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48。（五）UV

第31頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（六）IR

鹽酸布比卡因ChP（2005）[鑒別]（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜（光譜集324圖）一致。第32頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四一.鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查

檢查方法

HPLC雜質(zhì)對(duì)照品法

雜質(zhì)來源水解產(chǎn)生

第三節(jié)、特殊雜質(zhì)與檢查第33頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第34頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四供試液:鹽酸普魯卡因0.2mg/ml對(duì)照品:對(duì)氨基苯甲酸1g/ml溶液。固定相：C18流動(dòng)相：0.1%庚烷磺酸鈉的0.05MKH2PO4（pH3.0）-甲醇（68:32）檢測(cè)波長(zhǎng)：279nm第35頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四二.鹽酸氯普魯卡因注射液中有關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查雜質(zhì)：4-氨基-2-氯苯甲酸來源：生產(chǎn)、貯藏

第36頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四【雜質(zhì)檢查】USP30-NF25:HPLC-MS分析色譜條件：ZobaxSB-C18，流動(dòng)相：0.5%乙酸水溶液-0.5%乙酸乙腈溶液(87:13),流速1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm質(zhì)譜條件:ESI(+),質(zhì)量掃描范圍:80~600,噴霧電壓4000V,等第37頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四m/z:253,鹽酸羥普魯卡因[M+1]+

，鹽酸氯普魯卡因光水解產(chǎn)物m/z:172,[M+1]+4-氨基-2-氯苯甲酸準(zhǔn)分子離子峰第38頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（一）亞硝酸鈉滴定法1.原理具芳伯氨基的藥物四、含量測(cè)定

第39頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四ChP(2010年):苯佐卡因,鹽酸普魯卡因及其注射液,鹽酸普魯卡因胺片劑及其注射液第40頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四

具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。

第41頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第42頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四2.主要測(cè)定條件（1）加入適量KBr加速反應(yīng)

NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O

重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：第43頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第44頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2

加入KBr，可增大溶液中NO+亞硝酰離子的濃度，加快重氮化反應(yīng)速度第45頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（2）酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3第46頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸1:2.5～6；加入鹽酸：①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果第47頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第48頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（3）室溫條件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定第49頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四3.指示終點(diǎn)的方法（1）永停滴定法

ChP（2005）、BP第50頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四第51頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四永停滴定法（附錄ⅦA）調(diào)節(jié)R1使加于電極上的電壓約為50mV。取供試品適量，精密稱定，加水40ml與鹽酸溶液（1→2）15ml，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑—鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。第52頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四亞硝酸鈉永停滴定法原理終點(diǎn)前：無可逆電對(duì)，無電流產(chǎn)生，電流計(jì)指針停止在“0”位終點(diǎn)后：過量NaNO2陽極：NO+H2OHNO2+H++eHNO2+H++e陰極：NO+H2O電路有電流通過，電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)并不再回“0”第53頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（2）電位法（3）外指示劑法

KI—淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

（4）內(nèi)指示劑法中性紅不可逆指示劑第54頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四4.測(cè)定方法

鹽酸普魯卡因ChP（2005）取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl第55頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（二）非水溶液滴定法脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性.鹽酸丁卡因,鹽酸利多卡因，鹽酸布比卡因側(cè)鏈上的叔胺氮具有弱堿性，均可采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。

原理:第56頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四溶劑:醋酸或冰醋酸或酸酐標(biāo)準(zhǔn)溶液:HClO4指示劑:結(jié)晶紫（或萘酚苯）結(jié)晶紫：紫色（堿式色）終點(diǎn):藍(lán)色或綠色（黃綠色）加入醋酸汞作用:除去氫鹵酸的干擾藍(lán)色、綠色、黃綠色、黃色（酸式色）pH第57頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四滴定鹽酸丁卡因時(shí)，加入適量醋酐。因醋酐解離生成的醋酐合乙酰氧離子比醋酸合質(zhì)子的酸性還強(qiáng)，有利于丁卡因堿性的增強(qiáng)，使滴定突躍敏銳。

2(CH3CO)2O—(CH3CO)3O+十CH3COO—第58頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四【鹽酸利多卡因的測(cè)定】取本品0.2g，精密稱定，加冰醋酸溶解后，加醋酸汞5ml與結(jié)晶紫指示劑1滴，用HClO4滴定液（0.1mol/L)滴至溶液顯綠色，將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mlHClO4滴定液（0.1mol/L)相當(dāng)于27.08mg的C14H22N2O.HCl第59頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四鹽酸利多卡因非水溶液滴定法反應(yīng)過程如下：

第60頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（三）紫外分光光度法

對(duì)乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。

第61頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四對(duì)乙酰氨基酚ChP（2005）

取本品約40mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液5.0ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計(jì)算，即得。第62頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四原料藥

吸收系數(shù)法

USP（25）對(duì)照法

第63頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四（四）高效液相色譜法對(duì)乙酰氨基酚泡騰片:色譜條件:柱C18,流動(dòng)相:甲醇-水(pH4.5磷酸緩沖液);檢測(cè)波長(zhǎng):254第64頁，共71頁，2023年，2月20日，星期四取10片片劑,稱取其質(zhì)量流動(dòng)相溶解定容至50ml過濾取續(xù)濾液10ml定容至50ml,得供試液,精密量取10