《發(fā)酵工程實驗》教案：發(fā)酵培養(yǎng)基的制備和實罐滅菌

發(fā)酵培育基的制備和實罐滅菌一、試驗?zāi)康牧骷友a料掌握技術(shù)。發(fā)酵罐及管路、空氣過濾器滅菌操作及發(fā)酵罐系統(tǒng)管路的生疏實罐滅菌—培育基滅菌試驗二、試驗原理生殖和合成各種代謝產(chǎn)物的養(yǎng)分物質(zhì)。主要包括：碳源、氮源、無機鹽、生長因子、前體保保溫保保溫溫度〔℃〕溫加熱冷卻時間〔min〕三、試驗儀器、設(shè)備和材料10升發(fā)酵罐PH儀，培育液及酸堿液流加裝置，蠕動泵1粉水解糖液、尿素等原料。四、試驗內(nèi)容與方法：10際狀況選用分批培育或分批補料培育，測定酵母濃度。主要內(nèi)容有：基的配制及滅菌?？偭鞒蹋盒泵媾嘤渲婆c滅菌所需儀器物品：滅菌鍋、試管、棉塞、培育基原料、培育箱300500ml100ml、培育基、培育搖瓶、紗布。發(fā)酵培育基制備，滅菌。面包酵母菌的培育基組成：酵母斜面培育基：10o麥芽汁固體斜面，PH5.0酵母搖瓶培育基：10o麥芽汁，PH5.0101%，尿0.2%，PH5.0酵母分批發(fā)酵培育基：玉米淀粉經(jīng)液化、糖化，折合葡萄糖濃度為1%，0.2%，PH5.5。五、試驗報告內(nèi)容和數(shù)據(jù)處理試驗設(shè)計原理；發(fā)酵系統(tǒng)的構(gòu)造與操作方法；實罐滅菌工藝。附：機械攪拌發(fā)酵系統(tǒng)介紹：技術(shù)指標概述pHDO及掌握功能，并配有機械消泡漿。指標1.2.15℃～50℃﹙±0.2℃﹚顯示范圍：0～15050～1000±5rpm空氣流量：顯示掌握范圍0～10L/min2～12pH±0.05﹙酸堿雙向﹚1.2.50～150±2℅補料、消泡蠕動泵各一臺10L,2.0kg/c2.0kg/c131℃滅菌方法:手動掌握蒸汽消毒滅菌功率：主機：3kw,220v氣源：2～4kg/c蒸汽：2～4kg/c管路說明AXX”,蒸汽管路閥門的標號為“SXWX電磁閥標號為“CXXPXX”,冷凍水管路標號為“CWNX空氣及其凈化〔空氣予過濾器〕進入發(fā)酵罐空氣總管，空氣流量計針閥A01A02、單向閥、空氣過濾器，閥A03VT1量，不是標準狀態(tài)下的流量。蒸汽蒸汽進夾套蒸汽經(jīng)閥S01進入夾套〔上進，經(jīng)閥V01基預(yù)熱。蒸氣進反響器蒸汽經(jīng)閥S02、單向閥、空氣過濾器、閥A03制閥VT1蒸汽進取樣閥及放料閥蒸汽經(jīng)閥S03P02自來水自來水進夾套當(dāng)電磁閥C01W01〔下進，由夾套上口、閥W0、加熱器、電磁閥C01閉時，夾套水經(jīng)W02進入電加熱器、循環(huán)泵、單向閥進入夾套〔下口，酵液。特別提示：溫度自動前必需對夾套注水。自來水進排氣冷凝器自來水經(jīng)閥W03基的水分蒸發(fā)冷卻水〔選配〔消毒后降溫應(yīng)優(yōu)先使用 自來水〕冷凍水經(jīng)電磁閥C02T02〔T01〕T04〔關(guān)T03)返回冷凍水回路。純氧管線〔選配〕純氧管線：純氧進入流量計、電磁閥C03、切斷閥A21器。純氧流量調(diào)整：開C03、A21空氣流量檢測與掌握：發(fā)酵過程中才開質(zhì)量流量計的前后切斷閥A11、A12，發(fā)酵完畢后應(yīng)準時關(guān)閉A11、A12〔具體說明見熱質(zhì)量流量計的說明書〕補氨水管線C04A31、補料針進入發(fā)酵罐，電磁閥由掌握器掌握。實罐滅菌操作預(yù)備蓋緊罐蓋上各種罐蓋，旋緊罐蓋上壓緊螺栓。pH、DO鎖緊螺母，確保安裝妥當(dāng)防止高壓下傳感器彈出傷人。關(guān)緊發(fā)酵罐底閥P01，倒入培育基，調(diào)整PH注：氯離子對不銹鋼會帶來不行逆轉(zhuǎn)的破壞，因此應(yīng)避開用鹽酸溶PH，5℅且在添加過程中不得直接接觸不銹鋼。關(guān)排氣冷凝器進水W03，移去進出口的軟管排盡冷凝水夾套中水3.1.5提起過濾器使過濾器后的三通閥A03S〔S—消—發(fā)酵，培育基預(yù)熱預(yù)備工作動。開排氣閥VT1，關(guān)閉其它全部閥門。VT1V01門200～300RpmS01〔有稍微爆破聲屬正常，如聲音過響則開閥的速度應(yīng)減慢。待排水總口排出蒸汽時調(diào)整冷凝水閥V01，掌握蒸氣排出量以有少量蒸汽排出即可。并0.2Mpa98℃時，進入實罐滅菌操作，在培育基溫度在80～90℃時可以適當(dāng)?shù)臏p慢升溫速度，在本溫度區(qū)域可以殺滅大局部的微生物。P0〔關(guān)緊底閥P0P02排出即可。實罐滅菌〔A或BA消毒，其余可用“B”種消毒〕A：外源蒸汽消過濾器：微開過濾器上排冷凝水閥V02、V12，開過濾S02V02、V12100VT1S02，維0.12～0.16Mpa100℃時，培育基中的溶氧接近零?？梢詷硕ㄈ苎醯牧泓c。過濾器上排冷凝水閥V02、V12，當(dāng)有罐壓時，罐內(nèi)蒸汽經(jīng)空氣管罐內(nèi)三V02、V12100℃兩分鐘后，關(guān)閉排氣閥VT1。調(diào)整冷凝水閥V02、V12量蒸汽排出為宜。當(dāng)罐溫到達100℃時，培育基中的溶氧接近零，可以標定溶氧為零點。假設(shè)升溫速度比較慢可以開罐底閥P01，蒸汽進入發(fā)酵罐。VT1S01P01〔開閥時觀看視鏡處培育基翻整蒸汽閥S02、S03。閥門調(diào)整宜微調(diào)應(yīng)避開大幅度開關(guān)。當(dāng)反響器罐壓或罐溫維持在預(yù)定的范圍內(nèi)開頭計時。上的罐體局部尤其罐蓋達不到消毒溫度。保溫階段應(yīng)旋松接種口蓋至有少量蒸氣冒出。移種管線消毒〔適用于多級發(fā)酵閥P03V04，保溫完畢前關(guān)V03。滅菌完成及降溫〔先開后關(guān)，后開先關(guān)〕保溫完畢首先旋緊接種口蓋.旋緊罐底閥P0S03。抬起過濾器使三通閥A03SS02，調(diào)整過濾器冷凝水閥以有微量排氣為宜。S01V01W01管線切斷閥W02.在掌握器中將溫度掌握方式設(shè)定為“自動”并對溫度進展設(shè)定，發(fā)酵罐進入自動降溫。按下攪拌開關(guān)，設(shè)定攪拌轉(zhuǎn)速并“自動”掌握。0