微生物學藥學專業(yè)內(nèi)毒素致病菌

微生物學藥學專業(yè)內(nèi)毒素致病菌第1頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四內(nèi)毒素內(nèi)毒素存在于菌體內(nèi)，是菌體的結(jié)構(gòu)成份。細菌在生活狀態(tài)時不釋放出來，只有當菌體自溶或用人工方法使細菌裂解后才釋放，故稱內(nèi)毒素。大多數(shù)革蘭氏陰性都有內(nèi)毒素，如沙門氏菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、奈瑟氏球菌等第2頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四內(nèi)毒素的作用內(nèi)毒素對組織細胞的選擇性不強，不同革蘭氏陰性細菌的內(nèi)毒素，引起的病理變和臨床癥狀大致相同。

①發(fā)熱反應(yīng)

②糖代謝紊亂

③血管舒縮機能紊亂

④彌漫性血管內(nèi)凝血第3頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四沙門氏菌屬是一大群寄生于人類和動物腸道內(nèi)生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭氏陰性桿菌統(tǒng)稱為沙門氏桿菌。目前至少有67種O抗原和2000個以上血清型，所致疾病稱沙門氏菌病。根據(jù)其對宿主的致病性，可分為三類：①對人致?。虎趯θ撕蛣游锞虏。虎蹖游镏虏?。

與人類關(guān)系密切的沙門氏菌有：傷寒桿菌，甲、乙、丙型副傷寒桿菌，鼠傷寒桿菌，豬霍亂桿菌，腸炎桿菌。

第4頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四生物學性狀形態(tài)與染色

大小0.6～1.0×2～3um，無芽胞，一般有鞭毛，無莢膜，多數(shù)有菌毛，革蘭氏陰性桿菌。第5頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四第6頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四培養(yǎng)特性兼性厭氧菌在普通瓊脂平板上形成中等大小、半透明的S型菌落。在腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落。

第7頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四生化反應(yīng)不發(fā)酵乳糖和蔗糖不產(chǎn)生吲哚不分解尿素VP試驗陰性大多產(chǎn)生硫化氫發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖和甘露醇，除傷寒桿菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其他沙門氏菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

第8頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四第9頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四第10頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四抗原構(gòu)造與分類主要有O和H兩種抗原。少數(shù)菌具有表面抗原，一般認為與毒力有關(guān)，故稱Vi抗原。

第11頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四O抗原為脂多糖，性質(zhì)穩(wěn)定。能耐100℃達數(shù)小時，不被乙醇或0.1%石炭酸破壞。決定O型原特異性的是脂多糖中的多糖側(cè)鏈部分，以1、2、3等阿拉伯數(shù)字表示。其中有些O抗原是幾種菌所共有，將具有共同O抗原沙門氏菌歸為一組，這樣可將沙門桿氏菌屬分為A～Z、O51～O63、O65～O67共有42組。使人類致病的沙門氏桿菌大多屬于A～F組。O抗原刺激機體主要產(chǎn)生lgM抗體。

第12頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四H抗原為蛋白質(zhì)，對熱不穩(wěn)定，60℃經(jīng)15分鐘或乙醇處理被破壞。具有鞭毛的細菌經(jīng)甲醇液固定后，其O抗原全部被H抗原遮蓋，而不能與相應(yīng)抗O抗體反應(yīng)。H抗原的特異性取決于多肽鏈上氨基酸的排列順序和空間構(gòu)型。沙門氏桿菌的H抗原有兩種，稱為第1相和第2相。第1相特異性高，又稱特異相，用a、b、c等表示。第2相特異性低，為數(shù)種沙門氏桿菌所共有，也稱非特異相，用1、2、3等表示。具有第1相和第2相H抗原的細菌稱為雙相菌，僅有一相者稱單相菌。每一組沙門氏桿菌根據(jù)H抗原不同，可進一步分種或型。H抗原刺激機體主要產(chǎn)生lgG抗體。

第13頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四Vi抗原因與毒力有關(guān)而命名為Vi抗原。由聚-N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸組成。不穩(wěn)定，經(jīng)60℃加熱、石碳酸處理或人工傳代培養(yǎng)易破壞或丟失。新從患者標本中分離出的傷寒桿菌、丙型副傷寒桿菌等有此抗原。Vi抗原存在于細菌表面，可阻止O抗原與其相應(yīng)抗體的反應(yīng)。Vi抗原的抗原性弱。當體內(nèi)菌存在時可產(chǎn)生一定量抗體；細菌被清除后，抗體也隨之消失。故測定Vi抗體有助于對傷寒帶菌者的檢出。第14頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四抵抗力對熱抵抗力不強，60℃1小時或65℃經(jīng)15～20分鐘可被殺死。在水中能存活2～3周。糞便中可活1～2個月?？稍诒鶅鐾寥乐羞^冬。在一般食物中不僅能生存且繁殖。對氯霉素、呋喃唑酮、復方新諾明敏感。第15頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四致病性致病物質(zhì)

1．侵襲力：沙門氏桿菌侵入小腸粘膜上皮細胞，穿過上皮細胞層到達上皮下組織。細菌雖被細胞吞噬，但不被殺滅，并在其中繼續(xù)生長繁殖。這可能與Vi抗原和O抗原的保護作用有關(guān)。菌毛的粘附作用也是細菌侵襲力的一個因素。

2．內(nèi)毒素：引起發(fā)熱、白細胞減少。大劑量時可發(fā)生中毒性休克。內(nèi)毒素可激活補體系統(tǒng)釋放趨化因子，吸引粒細胞，導致腸道局部炎癥反應(yīng)。

3．腸毒素：有些沙門氏桿菌，如鼠傷寒桿菌可產(chǎn)生腸毒素，性質(zhì)類似腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的腸毒素。第16頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四人類的沙門氏菌病

1．腸熱癥：是傷寒病和副傷寒病的總稱，主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。2.急性腸炎(食物中毒)

：多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、腸炎桿菌等引起。3．敗血癥：常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。

第17頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四腸熱癥（傷寒和副傷寒）

細菌到達小腸后，侵入腸壁淋巴組織，在其中大量繁殖，并進血流，引起第一次菌血癥。病人有發(fā)熱、全身不適、乏力等。細菌隨血流至骨髓、肝、脾、腎、膽囊、皮膚等并在其中繁殖，并再次進入血流，引起第二次菌血癥。此期癥狀明顯，病人持續(xù)高熱，相對緩脈，肝脾腫大及全身中毒癥狀，皮膚出現(xiàn)玫瑰疹。血中的白細胞數(shù)量顯著下降。存于膽囊中的細菌隨膽汁排至腸道，一部分隨糞便排出體外。部分菌可再次侵入腸壁淋巴組織，出現(xiàn)超敏反應(yīng)，引起局部壞死和潰瘍，嚴重者發(fā)生腸出血和腸穿孔。腎臟中的細菌可隨尿排出。典型傷寒的病程約3～4周。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個月，稱恢復期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。副傷寒病與傷寒病癥狀相似，但一般較輕，病程較短，約1～3周即愈。主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。第18頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四急性腸炎(食物中毒)是最常見的沙門氏桿菌感染。多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、腸炎桿菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉類、蛋類而發(fā)病。潛伏期短，一般4～24小時，主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。細菌通常不侵入血流，病程較短，一般2～4天內(nèi)可完全恢復。

第19頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四敗血癥常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。病菌進入腸道后，迅速侵入血流，導致組織器官感染，如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、腎盂腎炎、心內(nèi)膜炎等。出現(xiàn)高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等。在發(fā)熱期，血培養(yǎng)陽性率高。

第20頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四免疫性傷寒或副傷寒病后有牢固的免疫性，很少再感染。主要依靠細胞免疫，表現(xiàn)為單核巨噬細胞系統(tǒng)在淋巴因子的作用下，胞內(nèi)酶數(shù)量增多，活性增強，從而殺死寄生在細胞內(nèi)的細菌。體液免疫方面，局部抗體較重要，尤其是SlgA具有特異性防止傷寒桿菌粘附于腸粘膜表面的能力?？筄和抗Vi抗體能抵抗病原菌的感染。血循環(huán)中l(wèi)gM、lgG抗體對胞內(nèi)寄生菌無免疫作用。第21頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四防治原則

主要通過消化道傳播,需加強飲水、食品衛(wèi)生的監(jiān)督和管理，對飲食加工及服務(wù)行業(yè)、制藥行業(yè)工作人員應(yīng)定期進行健康檢查，及時發(fā)現(xiàn)帶菌者并調(diào)離工作崗位。腸熱癥的特異性免疫，以往采用接種死菌苗，雖有一定的保護作用，但常引起局部和全身反應(yīng)。近年來，Sd株減毒口服活菌苗免疫效果好且較持久。此菌株安全、穩(wěn)定。對病人應(yīng)隔離治療?？刹捎寐让顾?、氨芐青霉素、羥氨芐青霉素等，中藥白花蛇舌草，穿心蓮等有效。第22頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀菌屬是人類細菌性痢疾（菌?。┑牟≡?。本屬細菌包括志賀痢疾桿菌、福氏痢疾桿菌、鮑氏痢疾桿菌和宋內(nèi)痢疾桿菌4個群。在我國以福氏和宋內(nèi)痢疾桿菌引起的菌痢較為多見。第23頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四生物學性狀

形態(tài)與染色

志賀氏菌屬細菌的形態(tài)與一般腸道桿菌無明顯區(qū)別，為革蘭氏陰性桿菌，長約2-3μm,寬0.5-0.7μm。不形成芽胞，無莢膜，無鞭毛，不運動，有菌毛。第24頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四第25頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四

志賀氏菌掃描電鏡照片

第26頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧。營養(yǎng)要求不高，能在普通培養(yǎng)基上生長，最適溫度為37℃，最適pH為6.4-7.8。37℃培養(yǎng)18-24小時后菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤、無色、半透明、邊緣整齊，直徑約2nm，宋內(nèi)氏菌菌落一般較大，較不透明，并常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長，無菌膜形成。麥康凱瓊脂平板，志賀氏菌的菌落為淺粉紅色，半透明。第27頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長第28頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四第29頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四第30頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的生化特性本菌屬都能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。大多不發(fā)酵乳糖，僅宋內(nèi)氏菌遲緩發(fā)酵乳糖。靛基質(zhì)產(chǎn)生不定甲基紅陽性VP試驗陰性不分解尿素不產(chǎn)生H2S根據(jù)生化反應(yīng)可進行初步分類。第31頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的抗原構(gòu)造與分型抗原結(jié)構(gòu)由菌體抗原（O）、表面抗原（K）及菌毛抗原組成。無鞭毛（H）抗原。主要抗原有三種：型特異性抗原、群特異性抗原、表面抗原（K抗原）。根據(jù)O抗原構(gòu)造的不同，按最新國際分類法，將本屬細菌分為四個群、39個血清型（包括亞型）。第32頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的抵抗力對理化因素抵抗力較弱。在外界環(huán)境中的生存力，以宋內(nèi)氏最強，福氏菌次之，志賀氏菌最弱。一般在潮濕土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在糞便內(nèi)（室溫）存活11天。日光直接照射30分鐘，56-60℃10分即被殺死，對酸、高溫和化學消毒劑很敏感，1%石炭酸中15-30分鐘即被殺死。對氯霉素、磺胺類、鏈霉素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。第33頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的變異性S-R型變異：菌落可由光滑型變?yōu)榇植谛?，同時常伴有生化反應(yīng)、抗原構(gòu)造和致病性的變異。耐藥性變異：自從廣泛使用抗菌素以來，志賀氏菌的耐藥菌株不斷增加，給防治工作帶來許多困難。國內(nèi)部分地區(qū)報道（1972-1974），志賀氏菌對四環(huán)素的耐藥率達74%、氯霉素73.6-97%、鏈霉素84-98%、合霉素75-100%、磺胺類97-100%，可見國內(nèi)對常用幾種抗菌素的耐藥率相當高。毒力變異：依鏈Sd株，口服預(yù)防痢疾。Sd株是一株必須有鏈霉素存在下才能生長的菌株，其毒力減弱但仍保持免疫原性。第34頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的流行病學人和靈長類是志賀氏菌的適宜宿主，營養(yǎng)不良的幼兒、老人及免疫缺陷者更為易感。志賀氏菌病常為食物爆發(fā)型或經(jīng)水傳播。和志賀氏菌病相關(guān)的食品包括色拉（土豆、金槍魚、蝦、通心粉、雞），生的蔬菜，奶和奶制品，禽，水果，面包制品，漢堡包，和有鰭魚類。志賀氏菌在擁擠和不衛(wèi)生條件下能迅速傳播，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)于人員大量集中的地方如餐廳、食堂。食源性志賀氏菌流行的最主要原因是從事食品加工行業(yè)人員患菌痢或帶菌者污染食品，食品接觸人員個人衛(wèi)生差，存放已污染的食品溫度不適當?shù)取?/p>

第35頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的致病性

志賀氏菌引起的細菌性痢疾，主要通過消化道途徑傳播。根據(jù)宿主的健康狀況和年齡，只需少量病菌（至少為10個細胞）進入，就有可能致病。致病因素：志賀氏菌的致病作用，主要是侵襲力、菌體內(nèi)毒素、個別菌株能產(chǎn)生外毒素。第36頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌的致病因素

侵襲力志賀氏菌進入大腸后，由于菌毛的作用粘附于大腸粘膜的上皮細胞上，繼而進入上皮細胞并在內(nèi)繁殖，擴散至鄰近細胞及上皮下層。目前認為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只有內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須侵入腸壁才能致病。因此，對粘膜組織的侵襲力是決定致病力的主要因素。第37頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四內(nèi)毒素志賀氏菌屬中各菌株都有強烈的內(nèi)毒素。內(nèi)毒素作用于腸壁，使通透性增高，從而促進毒素的吸收。內(nèi)毒素繼而作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)，引起臨床上一系列毒血癥癥狀，如發(fā)熱、神志障礙，甚至中毒性休克。內(nèi)毒素破壞粘膜，形成炎癥、潰瘍，呈現(xiàn)典型的痢疾膿血便。內(nèi)毒素作用于腸壁植物神經(jīng)，使腸道功能紊亂，腸蠕動共濟失調(diào)和痙攣，尤其直腸括約肌最明顯，因而發(fā)生腹痛、里急后重等癥狀。第38頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四外毒素（志賀毒素）志賀菌1型及部分2型菌株能產(chǎn)生強烈的外毒素。為蛋白質(zhì)，不耐熱，75-80℃1小時即可破壞。有細胞毒素，腸毒素和神經(jīng)毒素三種活性?？墒鼓c粘膜通透性增加，導致血管內(nèi)皮細胞損害，作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起神經(jīng)麻痹等癥狀。經(jīng)甲醛處理可脫毒成類毒素，能刺激機體產(chǎn)生抗毒素。具有外毒素的志賀菌引起的菌痢疾比較嚴重。第39頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四所致疾病志賀氏菌引起的細菌性痢疾是最常見的消化道傳染病，夏秋季多見。僅人和靈長類動物對志賀菌屬易感。傳染源是患者和帶菌者。經(jīng)口感染，潛伏期為數(shù)小時至7d。第40頁，共46頁，2023年，2月20日，星期四志賀氏菌引起的細菌性痢疾分類

細菌性痢疾可分為三種類型

A、急性細菌性痢疾B、慢性細菌性痢疾C、中毒性菌痢第41頁，共46頁，2023年，2