GMP與無菌操作培訓(xùn)之十課件

十GMP與無菌操作相關(guān)要求

微生物概念存在于自然界的一群形體微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見，必須借助于顯微鏡才能觀察到的

微生物知識(shí)特點(diǎn)1.繁殖速度快：

大腸桿菌20min可繁殖一代1hrs1個(gè)》1624hrs1個(gè)》4*10E+24個(gè)2.變異快在進(jìn)化的壓力下，迅速產(chǎn)生適應(yīng)環(huán)境的新的變種3.許多細(xì)菌的生存能力很強(qiáng)，能以多種方式適應(yīng)外界環(huán)境微生物的分類按細(xì)胞結(jié)構(gòu)的有無，可分為兩大類群非細(xì)胞生物（如病毒）細(xì)胞生物（細(xì)菌、真菌等）按微生物的形態(tài)簡單分類：病毒、細(xì)菌、真菌

細(xì)菌生長繁殖條件

充足的營養(yǎng)

合適的pH值：7.2-7.6

適宜的溫度：嗜溫菌為20-40C

必要的氣體：CO2和氧氣

塵粒污染塵粒污染：是指產(chǎn)品因混入不屬于它的那些塵粒而變得不純凈。塵埃、污物、棉絨、纖維以及我們的頭發(fā)都是塵粒污染的潛在原因。臨床資料表明：如藥品被7－2μm的塵粒污染了，尤其是靜脈注射用藥，可以導(dǎo)致熱原反應(yīng)、肺動(dòng)脈炎、微血栓或異物肉芽腫等，嚴(yán)重的會(huì)致人死命。

微生物污染微生物污染是指因微生物產(chǎn)生、附著而給特定的環(huán)境帶來的不良影響。

如果細(xì)菌得到了必要的養(yǎng)料、一定量的水份和合適的溫度，它們就能迅速繁殖，它們繁殖的速度快得驚人。通常一個(gè)細(xì)菌在僅僅24小時(shí)后可產(chǎn)生出281兆(百萬)個(gè)的細(xì)菌。污染微生物對(duì)人體的危害

注射了污染的針劑會(huì)導(dǎo)致局部感染或敗血癥；使用了污染的軟膏或乳膏會(huì)引起皮膚和粘膜感染服用了污染大腸桿菌、沙門菌等致病菌的制劑會(huì)導(dǎo)致腸道傳染病的發(fā)生和流行微生物污染途徑

物體（設(shè)備容器、原輔料及包裝材料）空氣水操作人員人體的發(fā)塵——潔凈室操作人員是最主要的發(fā)塵源

著衣種類測(cè)定日期細(xì)菌數(shù)/100cm2上衣內(nèi)側(cè)外側(cè)使用5日后300200褲子內(nèi)側(cè)外側(cè)使用5日后45070★帽子內(nèi)側(cè)外側(cè)使用5日后100150★口罩內(nèi)側(cè)外側(cè)使用1日后2.2×104100襪子內(nèi)側(cè)外側(cè)使用1日后3×1042，800人員的發(fā)菌量潔凈室內(nèi)當(dāng)工作人員穿無菌服時(shí)，靜止時(shí)的發(fā)菌量為10～300個(gè)/(min·人)，軀體一般活動(dòng)時(shí)的發(fā)菌量為150～1000個(gè)(min·人)，快步行走時(shí)的發(fā)菌量為900～2500個(gè)(min·人)；咳嗽一次的發(fā)菌量為70～700個(gè)噴嚏一次的發(fā)菌量為4000～60000個(gè)；人員的發(fā)菌量穿平常衣服時(shí)發(fā)菌量為3300～62000個(gè)(min·人)；無口罩發(fā)菌量為(1:7)～(1:14)；發(fā)菌量︰發(fā)塵量為(1:500)～(1:1000)；可知潔凈室內(nèi)穿無菌衣人員的靜態(tài)發(fā)菌量一般不超過300個(gè)(min·人)，動(dòng)態(tài)發(fā)菌量一般不超過1000個(gè)(min·人)。人的頭發(fā)和皮膚

每分鐘從人類皮膚中要散發(fā)出約10,000個(gè)微生物?如果說，一小粒糖的空間中能裝載4億個(gè)微生物，那么，您想想看，在一股頭發(fā)中可以容納多少微生物呢?

我們的手，也擁有大量的微生物。此外，在人們正常的日常活動(dòng)中都接觸大量微生物。

水滴呼吸和咳嗽將產(chǎn)生出大量水滴，這種水滴既含有塵粒污染也含有微生物污染。口腔是對(duì)污染最為敏感的地區(qū)。一次咳嗽或噴嚏將把干百萬個(gè)微生物引入工作環(huán)境內(nèi)。

衣著從可洗滌的紡織物中，可能散發(fā)出棉絨和淀粉粒。而從羊毛、開士米和其它松軟的針紡織物中也可能散落出纖維和磨損下的微粒。污染也可能通過我們的鞋子進(jìn)入工作場(chǎng)所。

藥品生產(chǎn)人員衛(wèi)生注意事項(xiàng)新進(jìn)人員的健康檢查：藥品生產(chǎn)企業(yè)在招收新職工時(shí)，一定要對(duì)新職工進(jìn)行全面的健康檢查，要確保新進(jìn)廠的職工不患有急性或慢性傳染病。另外還要根據(jù)新進(jìn)職工安排的具體崗位性質(zhì)再確定其它具體檢查的項(xiàng)目。

建立生產(chǎn)人員健康檔案：藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對(duì)職工建立個(gè)人健康檔案，以便于檢查、了解、追蹤個(gè)人健康好壞的狀況

培養(yǎng)藥品生產(chǎn)人員良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣

潔凈區(qū)生產(chǎn)人員要求如何培養(yǎng)良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣勤洗手、勤剪指甲

定期洗澡、勤理發(fā)

勤換衣服、勤洗工作服

在生產(chǎn)區(qū)內(nèi)做到三個(gè)嚴(yán)禁：禁止吃東西、禁止吸煙、禁止大聲喧嘩潔凈區(qū)生產(chǎn)人員要求潔凈區(qū)工作人員要盡可能少而精，只有工作需要時(shí)才能進(jìn)入；操作人員在潔凈區(qū)動(dòng)作盡量要緩慢，避免劇烈運(yùn)動(dòng)，以減少人的發(fā)塵量；潔凈區(qū)的門應(yīng)關(guān)緊，避免不必要的移動(dòng)，以保持潔凈區(qū)的風(fēng)速、風(fēng)量、風(fēng)型和風(fēng)壓；如果是無菌區(qū)的話，操作人員的自我約束就更多，要嚴(yán)格按無菌操作規(guī)程執(zhí)行。

紫外線滅菌原理

1、254nm波長輻射對(duì)細(xì)菌有殺滅作用。

2、產(chǎn)生微量臭氧也有一定殺菌作用。特點(diǎn)穿透力較弱，僅適用于物體表面、空氣消毒。

使用時(shí)注意人員個(gè)人防護(hù)常用消毒劑乙醇碘伏甲醛苯扎溴銨(新潔爾滅）乳酸氯和次氯酸鹽消毒劑殺菌原理

酒精能使菌體蛋白質(zhì)脫水變性，常用酒精殺菌濃度為70-75%。氯的消毒作用，即是HCLO作用，HCLO是中性分子，可以擴(kuò)散至帶負(fù)電的細(xì)菌表面，并穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，由于氯原子的氧化作用，破壞某些酶系統(tǒng)，最終致細(xì)菌死亡。

表面活性劑作用：破壞細(xì)胞膜，使蛋白質(zhì)變性。

潔凈區(qū)操作常識(shí)人員要求

----進(jìn)入潔凈區(qū)不得化妝，佩戴飾物。----不得將工作服穿離工作區(qū)。----應(yīng)養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣，勤洗澡、修指甲、刮臉，進(jìn)入潔凈區(qū)不得佩帶戒指等首飾和手表、不得化妝?；加衅つw病、傳染病和呼吸道疾病的人員不宜上崗。----潔凈區(qū)各室之間、潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間嚴(yán)禁串崗。--潔凈區(qū)應(yīng)限制進(jìn)入該區(qū)域人員的數(shù)量。物料進(jìn)出潔凈區(qū)

將送入緩沖間，關(guān)閉緩沖間門，脫去外包或進(jìn)行清潔（去塵、擦凈）處理，開啟紫外燈照射30分鐘并填寫《紫外燈使用記錄》或在緩沖間用75%乙醇對(duì)物料表面進(jìn)行擦拭消毒。潔凈區(qū)接料人從緩沖間取出物料，關(guān)緩沖間門，將物料運(yùn)至?xí)捍骈g或指定地點(diǎn)。

物料出潔凈區(qū)時(shí)，將物料送入緩沖間，關(guān)緩沖間門。

取料人從緩沖間取出物料，關(guān)緩沖間門，即可將物料運(yùn)至指定地點(diǎn)。潔凈區(qū)生產(chǎn)管理對(duì)確認(rèn)已被污染的物品或懷疑被污染的物品、容器就地消毒或包裝嚴(yán)密后送出潔凈區(qū)，重新清洗滅菌，防止污染擴(kuò)散。經(jīng)常用75%乙醇消毒手。發(fā)生緊急情況，應(yīng)沉著鎮(zhèn)靜，迅速采取措施，保證人身安全，防止在線產(chǎn)生污染。GMP與無菌操作相關(guān)要求知識(shí)無菌藥品GMP管理的基本原則潔凈度級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)無菌藥品的廠房、設(shè)備設(shè)計(jì)環(huán)境監(jiān)測(cè)無菌操作培養(yǎng)基模擬灌裝滅菌方法無菌藥品GMP管理的基本原則為降低微生物、微粒和熱原污染的風(fēng)險(xiǎn)，無菌藥品的生產(chǎn)應(yīng)有各種特殊要求這在很大程度上取決于生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度質(zhì)量保證極為重要，無菌藥品的生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照精心制訂并經(jīng)驗(yàn)證的方法及規(guī)程進(jìn)行產(chǎn)品的無菌或其它質(zhì)量特性絕不能僅依賴于任何形式的最終操作或成品檢驗(yàn)潔凈度級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)32WHOGMP美國209E美國習(xí)慣分類ISO/TC（209）EECGMP中國新版GMPAM3.5100ISO5AABM3.5100ISO5BBCM4.510000ISO7CCDM6.5100000ISO8DD潔凈度級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)我國潔凈度級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)（新版GMP）A級(jí)區(qū)高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，如：灌裝區(qū)、放置膠塞桶、敞口注射劑瓶的區(qū)域及無菌裝配或連接操作的區(qū)域。通常用單向流操作臺(tái)（罩）來維護(hù)該區(qū)的環(huán)境狀態(tài)。單向流系統(tǒng)在其工作區(qū)必須均勻送風(fēng)，風(fēng)速為0.36-0.54m/s（指導(dǎo)值）。應(yīng)有數(shù)據(jù)證明單向流的狀態(tài)必須驗(yàn)證。在密閉的隔離操作器或手套箱內(nèi)，可使用較低的風(fēng)速。B級(jí)區(qū)指無菌配制和灌裝等高風(fēng)險(xiǎn)操作A級(jí)區(qū)所處的背景區(qū)域。C、D級(jí)區(qū)指生產(chǎn)無菌藥品過程中重要程度較低的潔凈操作區(qū)。潔凈度級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)

非最終滅菌產(chǎn)品的生產(chǎn)操作示例（新版GMP）B級(jí)背景下的A級(jí)處于未完全密封狀態(tài)下產(chǎn)品的操作和轉(zhuǎn)運(yùn)，如灌裝（或灌封）、分裝、壓塞、軋蓋等灌裝前無法除菌過濾的藥液或產(chǎn)品的配制直接接觸藥品的包裝材料、器具滅菌后的裝配以及處于未完全密封狀態(tài)下的轉(zhuǎn)運(yùn)和存放無菌原料藥的粉碎、過篩、混合、分裝B級(jí)處于未完全密封狀態(tài)下的產(chǎn)品置于完全密封容器內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)直接接觸藥品的包裝材料、器具滅菌后處于密閉容器內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)和存放C級(jí)灌裝前可除菌過濾的藥液或產(chǎn)品的配制產(chǎn)品的過濾D級(jí)直接接觸藥品的包裝材料、器具的最終清洗、裝配或包裝、滅菌潔凈度級(jí)別的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（新版GMP與98版比較）潔凈度級(jí)別（98版GMP）塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)潔凈度級(jí)別（新版GMP）懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米微生物監(jiān)測(cè)的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)靜態(tài)浮游菌/立方米沉降菌/皿靜態(tài)動(dòng)態(tài)浮游菌cfu/m3沉降菌（90mm）cfu/4小時(shí)(2)表面微生物≥0.5μm≥5μm≥0.5μm≥5μm≥0.5μm≥5μm接觸碟（55mm）

cfu/碟5指手套

cfu/手套100級(jí)3,500051A級(jí)352020352020<1<1<1<1/////B級(jí)35202935200029001055510,000級(jí)350,0002,0001003C級(jí)352,0002,900290001005025－100,000級(jí)3,500,00020,00050010D級(jí)3,520,00029,000不作規(guī)定不作規(guī)定20010050－300,000級(jí)10,500,00060,0001,00015無菌藥品的廠房、設(shè)備設(shè)計(jì)無菌藥品的廠房、設(shè)備設(shè)計(jì)最終目標(biāo)是批次中的每個(gè)產(chǎn)品都沒有活的微生物人是最大的污染源無菌操作過程中任何干預(yù)或中斷都可能增加污染的風(fēng)險(xiǎn)，用于無菌生產(chǎn)設(shè)備的設(shè)計(jì)應(yīng)限制人員對(duì)無菌過程干預(yù)的次數(shù)和復(fù)雜程度通常采用以下方法將人員與環(huán)境隔離限制人員接觸無菌物品使其完全離開（操作）環(huán)境上述方法結(jié)合使用無菌藥品各項(xiàng)生產(chǎn)操作所對(duì)應(yīng)的環(huán)境潔凈度等級(jí)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性、工藝和設(shè)備綜合考慮后合理選擇無菌藥品的廠房、設(shè)備設(shè)計(jì)

關(guān)鍵操作區(qū)氣流方向示例37MM滅菌包材0.45±20%m/s“A”級(jí)“B”級(jí)關(guān)鍵點(diǎn)操作者不能進(jìn)入“A”級(jí)別區(qū)域。環(huán)境監(jiān)測(cè)

環(huán)境監(jiān)測(cè)考慮以下方面潔凈度級(jí)別空調(diào)凈化系統(tǒng)驗(yàn)證中獲得的結(jié)果風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估合理確定取樣點(diǎn)的位置污染風(fēng)險(xiǎn)分析每個(gè)位置與工藝的關(guān)系對(duì)人流和物流有良好理解強(qiáng)調(diào)產(chǎn)品存在風(fēng)險(xiǎn)的區(qū)域無菌操作

當(dāng)無菌操作正在進(jìn)行時(shí)，應(yīng)特別注意減少潔凈區(qū)內(nèi)的各種活動(dòng)。工作人員要盡可能少而精，只有工作需要時(shí)才能進(jìn)入；人員走動(dòng)應(yīng)有控制并十分小心，以避免劇烈活動(dòng)散發(fā)過多的，潔凈區(qū)的門應(yīng)關(guān)緊，避免不必要的移動(dòng)，以保持潔凈區(qū)的風(fēng)速、風(fēng)量、風(fēng)型和風(fēng)壓；無菌操作

更衣要求正確的更衣要求在凈化室工作，必須遵守潔凈室內(nèi)每一個(gè)細(xì)節(jié)的工作規(guī)范不允許將任何有害的物質(zhì)帶入潔凈室；避免污染帶給產(chǎn)品可能的嚴(yán)重?fù)p害；人員的清潔和衛(wèi)生是很重要的；進(jìn)入潔凈室必須卸妝；工作服帽子大小要合適，必須遮蓋所有頭發(fā)，以防止皮膚碎片及頭發(fā)屑污染；不得將手機(jī)、手表及首飾帶入潔凈室；戴口罩是控制來自口腔污染的有效方法之一；潔凈工作服不得接觸地面；穿潔凈鞋或鞋套時(shí)，其他部位不得接觸地面；進(jìn)入潔凈室要正確著裝。無菌操作

無菌更衣程序驗(yàn)證

41無菌操作

在潔凈區(qū)內(nèi)工作的要求接觸物品前應(yīng)對(duì)手（手套）消毒工作時(shí)，不要觸摸口罩揉鼻子去更衣室，并更換手套和口罩操作時(shí)，不要坐著不要在層流下面的工作臺(tái)上休息休息時(shí)，站著，手臂順著身體下垂，不要把兩臂交叉，也不要放在臀部休息時(shí)，坐著，雙手放在膝蓋上，不要交叉雙手或雙腳工作中必要時(shí)才講話工作時(shí)，可使用電話，不可通過氣鎖講話。無菌操作

衛(wèi)生管理物料衛(wèi)生：符合要求的物料是生產(chǎn)合格產(chǎn)品的前提，因此用于生產(chǎn)的物料必須是符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的。一方面我們所使用的物料必須經(jīng)檢驗(yàn)合格，最重要的另一方面必須保證物料在使用的過程中不得受到污染。進(jìn)入潔凈區(qū)的物料必須對(duì)其外包裝處理。流轉(zhuǎn)過程的物料必須密閉。盛裝物料的容器具必須是經(jīng)過消毒的。設(shè)備衛(wèi)生：除了對(duì)設(shè)備保養(yǎng)外，更重要的目的是防止交叉污染。因此，每次使用完或使用前都要對(duì)設(shè)備進(jìn)行清潔，確保產(chǎn)品符合標(biāo)準(zhǔn)。清除清除文件、器具和殘余物料。清潔用飲用水、純化水或注射用水進(jìn)行沖洗。消毒對(duì)需要用消毒液對(duì)設(shè)備消毒的進(jìn)行消毒。無菌操作

衛(wèi)生管理生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生：如果我們所用的物料微生物指標(biāo)均符合要求，可生產(chǎn)出來的成品的微生物指標(biāo)檢測(cè)卻不符合要求，這就是未做好生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生管理的直接體現(xiàn)。生產(chǎn)前注意上批清場(chǎng)是否在效期內(nèi)，超過有效期應(yīng)重新清場(chǎng)且符合要求。生產(chǎn)過程中隨時(shí)保持現(xiàn)場(chǎng)的衛(wèi)生工作，不得出現(xiàn)臟、亂、差的場(chǎng)面，物料、設(shè)備應(yīng)符合要求。人員衛(wèi)生：要養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣，做到勤洗澡、勤洗手、勤刮胡子、勤剪指甲、勤換衣。手是我們工作時(shí)使用的最重要的工具之一，只要觸摸到污染的東西，微生物就會(huì)留在你手上或指甲里，因此