藥物現(xiàn)代分析方法

藥物分析中最常用的分析方法是

色譜分析法光譜分析法色譜－光譜分析法聯(lián)用技術(shù)其中色譜分析法主要應(yīng)用毛細(xì)管GC、高效液相色譜法、高效毛細(xì)管電泳法光譜分析法主要應(yīng)用四大波譜

第一頁(yè)，共79頁(yè)。

毛細(xì)管電泳及其應(yīng)用超高效液相色譜及其應(yīng)用手性HPLC技術(shù)與應(yīng)用

GC-MS技術(shù)與應(yīng)用

LC-MS技術(shù)與應(yīng)用液相色譜-核磁共振聯(lián)用技術(shù)

本章主要內(nèi)容第二頁(yè)，共79頁(yè)。（一）簡(jiǎn)介

以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，以毛細(xì)管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的一種液相分離技術(shù)

電泳是電解質(zhì)中帶電粒子在電場(chǎng)作用下向電荷相反方向遷移的現(xiàn)象，利用這種現(xiàn)象對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離分析的方法，稱之為電泳法

在散熱率很高的毛細(xì)管內(nèi)進(jìn)行的電泳分析，稱為毛細(xì)管電泳法第一節(jié)毛細(xì)管電泳及其應(yīng)用第三頁(yè)，共79頁(yè)。主要特點(diǎn)

高效：n高達(dá)數(shù)十萬(wàn)塊/米，甚至數(shù)百萬(wàn)塊高速：可在3分鐘內(nèi)分離30種陰離子；1.7分鐘分離19種陽(yáng)離子;4分鐘可分離10種蛋白質(zhì)

微量：僅需nL（10-9L）級(jí)的進(jìn)樣量

儀器簡(jiǎn)單，低消耗：分析一個(gè)試樣僅需幾毫升流動(dòng)液采用空心毛細(xì)管，不易產(chǎn)生柱污染檢出靈敏度和精密度均不及HPLC第四頁(yè)，共79頁(yè)。（二）基本裝置與原理

電壓：0～30KV

分離柱不涂敷任何固定液紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器（可檢測(cè)：10-19～10-21mol/L）1基本裝置第五頁(yè)，共79頁(yè)。2基本原理

帶電粒子在電場(chǎng)作用下，以不同速度向其所帶電荷相反的電場(chǎng)方向遷移的現(xiàn)象，稱為電泳，速度vep

單位電場(chǎng)下的電泳速度稱電泳淌度電泳及電泳淌度第六頁(yè)，共79頁(yè)。

顯然，淌度是粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度、單位時(shí)間內(nèi)移動(dòng)的距離

∴對(duì)于給定的介質(zhì)和離子，淌度是該離子的特征常數(shù)

對(duì)于球形離子，淌度與該離子的半徑r、電荷q及溶液粘度η有關(guān)第七頁(yè)，共79頁(yè)。

由于玻璃表面存在硅羥基，pH>3時(shí),形成雙電層，在高電場(chǎng)的作用下水合陽(yáng)離子帶動(dòng)整體溶液向負(fù)極移動(dòng)的現(xiàn)象稱為電滲，速度veo單位電場(chǎng)下的電滲速度稱電滲淌度

因電滲現(xiàn)象引起的液體流動(dòng)叫電滲流

電滲及電滲流第八頁(yè)，共79頁(yè)。

帶電粒子的遷移速度

vap＝電泳和電滲流兩種速度的矢量和

石英毛細(xì)管：帶負(fù)電荷。電滲流流向陰極，通常veo約為vep的5－7倍第九頁(yè)，共79頁(yè)。

正離子：兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向一致，最先流出中性粒子:

無(wú)電泳現(xiàn)象，只受電滲流影響，在陽(yáng)離子后流出（不被分離）陰離子：兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向相反,最后流出

除中性粒子外,同種類離子由于受到的電場(chǎng)力大小不一樣被相互分離第十頁(yè)，共79頁(yè)。HPCE中電滲流的流形

電荷均勻分布，整體移動(dòng)，電滲流的流動(dòng)為平流，塞式流動(dòng)（譜帶展寬很小）液相色譜中的液流為拋物線流型，管中心處的速度為平均速度的2倍（譜帶展寬較大）第十一頁(yè)，共79頁(yè)。（三）主要分離模式最基本、應(yīng)用最廣的分離模式1毛細(xì)管區(qū)帶電泳CZE第十二頁(yè)，共79頁(yè)。2膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜

MECC

在緩沖溶液中加入超過(guò)臨界濃度的表面活性劑，形成荷電膠束，在電場(chǎng)力的作用下，膠束在柱中移動(dòng)第十三頁(yè)，共79頁(yè)。

系色譜與電泳分離模式的結(jié)合，中性分子在膠束相和溶液（水相）間分配，疏水性強(qiáng)的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時(shí)間長(zhǎng)

用于分離中性物質(zhì)，擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳法的應(yīng)用范圍第十四頁(yè)，共79頁(yè)。

凝膠具有多孔性，類似分子篩的作用，使試樣分子按大小分離。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高蛋白質(zhì)、DNA等的電荷/質(zhì)量比與分子大小無(wú)關(guān)，用CZE模式很難分離，采用CGE能獲得良好分離，DNA排序的重要手段。

3毛細(xì)管凝膠電泳

CGE第十五頁(yè)，共79頁(yè)。特點(diǎn)：抗對(duì)流性好，散熱性好，分離度極高。無(wú)膠篩分技術(shù)：采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺。柱便宜、易制備。第十六頁(yè)，共79頁(yè)。

毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)（合成的具有不同等電點(diǎn)范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物），當(dāng)施加直流電壓（6～8V）時(shí)，管內(nèi)將建立一個(gè)由陽(yáng)極到陰極逐步升高的pH梯度氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液pH有關(guān)，在電場(chǎng)力的作用下遷移，分別到達(dá)其等電點(diǎn)pH位置時(shí)，呈電中性，停止移動(dòng)，由此可使它們得到分離可分離等電點(diǎn)差異小于0.01pH單位的兩種蛋白質(zhì)根據(jù)等電點(diǎn)差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術(shù)4毛細(xì)管等電聚焦CIEF第十七頁(yè)，共79頁(yè)。

5毛細(xì)管電色譜

CEC

在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液，以電滲流為流動(dòng)相，試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動(dòng)色譜過(guò)程第十八頁(yè)，共79頁(yè)。毛細(xì)管等速電泳（CITP）微芯片毛細(xì)管電泳（microchipelectrophoresis）第十九頁(yè)，共79頁(yè)。（四）高效毛細(xì)管電泳應(yīng)用與進(jìn)展一、離子分析（CZE/MECC）二、藥物及代謝產(chǎn)物、生物材料分析

三、手性化合物分析

四、氨基酸分析

五、肽、蛋白質(zhì)、核酸分析及DNA測(cè)序六、單細(xì)胞、單分子監(jiān)測(cè)第二十頁(yè)，共79頁(yè)。采用MEKC模式，鑒定違禁藥物；第二十一頁(yè)，共79頁(yè)。Clicktoaddtitleinhere

自20世紀(jì)70年代以來(lái)，隨著高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)技術(shù)的不斷發(fā)展，美國(guó)Waters公司于2004年的匹茲堡會(huì)議上推出了最新研制的ACQUITY超高效液相色譜(UltraPerformanceLiquidChromatography，UPLC)，其采用1．7Ixm細(xì)粒徑的新型固定相，可獲得高達(dá)2萬(wàn)塊／m理論塔板數(shù)的超高柱效，并以系統(tǒng)整體設(shè)計(jì)的創(chuàng)新技術(shù)，全面提升了液相色譜的速度、靈敏度和分離度，造就了液相色譜性能上的飛躍和進(jìn)步并形成分離科學(xué)的一個(gè)新興領(lǐng)域。第二節(jié)超高效液相色譜第二十二頁(yè)，共79頁(yè)。超高效液相色譜（UPLC）的原理UPLC的理論基礎(chǔ)為：

范德米特(VanDeemeter)方程HETP=A(dP)+B／v+Cu(dP)2HETP：理論塔板高度A：渦流擴(kuò)散系數(shù)由該方程可得出結(jié)論：顆粒度越小柱效越高；每個(gè)顆粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速；更小的顆粒度使最高柱效點(diǎn)向更高流速(線速度)方向移動(dòng)，而且有更寬的線速度范圍所以降低顆粒度不但提高柱效，同時(shí)也提高速度。dP：填料粒徑B：分子徑向擴(kuò)散系數(shù)C：傳質(zhì)因子為流動(dòng)相線速度第二十三頁(yè)，共79頁(yè)。vanDeemter曲線的提示如果填料的顆粒繼續(xù)演變……第二十四頁(yè)，共79頁(yè)。未來(lái)的色譜:更小的顆粒度液相色譜30年的發(fā)展史是顆粒技術(shù)的發(fā)展史。顆粒度的改變直接影響到柱效，從而對(duì)分離結(jié)果產(chǎn)品直接影響。由上圖可知：隨著顆粒度的不斷降低，色譜分離度不斷提高。小顆粒分離的理論與科學(xué)基礎(chǔ)第二十五頁(yè)，共79頁(yè)。更小顆粒度所面臨的挑戰(zhàn)第二十六頁(yè)，共79頁(yè)。Clicktoaddtitleinhere小顆粒帶來(lái)生產(chǎn)力--------UPLC的優(yōu)點(diǎn)超高分離度UPLC與HPLC：分離度比較由下圖可見(jiàn)：UPLC可以大大提高分離度，同時(shí)色譜峰強(qiáng)度也得到了提高。第二十七頁(yè)，共79頁(yè)。小顆粒帶來(lái)生產(chǎn)力--------UPLC的優(yōu)點(diǎn)超高速度圖4:UPLC與HPLC：速度比較圖5：UPLC美國(guó)藥典有關(guān)物質(zhì)分析實(shí)例原有HPLC分析需要4個(gè)不同的方法、三根不同的色譜柱，至少需要65分鐘才能完成；UPLC使用了一根色譜柱、一種簡(jiǎn)單方法，在1分鐘內(nèi)即可完成。第二十八頁(yè)，共79頁(yè)。小顆粒帶來(lái)生產(chǎn)力--------UPLC的優(yōu)點(diǎn)超高靈敏度速度圖6:HPLC到UPLCTM：靈敏度的改善無(wú)需折衷UPLC使用小顆粒技術(shù)可以得到更高的柱效（因而改善了分離度）、更窄的色譜峰寬，即更高的靈敏度。第二十九頁(yè)，共79頁(yè)。

與UPLC匹配的色譜柱比較少峰面積的重復(fù)性欠佳

對(duì)高頻檢測(cè)儀器的需要超高效液相色譜的局限性盡管UPLC能顯著減少?gòu)?fù)雜樣品的分析分離時(shí)間，提高檢測(cè)的靈敏度和分離度，但目前UPLC的使用仍然存在局限性，其普及應(yīng)用可能仍然需要一些時(shí)間。色譜柱要能夠耐受由于粒徑減小而帶來(lái)的高反壓，而且粒徑的減小也給色譜柱充填技術(shù)帶來(lái)了挑戰(zhàn)。UPLC分析樣品時(shí)峰面積的重復(fù)性略遜于HPLC，特別是低濃度樣品時(shí)更加明顯，其峰面積重復(fù)性的RSD約為HPLC的2倍。UPLC分離樣品色譜峰擴(kuò)展很小，通常峰底寬度只有幾秒鐘，低濃度的樣品峰則更窄。使用UPLC測(cè)定低濃度樣品時(shí)，準(zhǔn)確度、精密度都比較差。第三十頁(yè)，共79頁(yè)。

第三節(jié)手性HPLC技術(shù)與應(yīng)用（一）概述

手性藥物現(xiàn)狀天然或半合成藥物

光學(xué)活性物98%無(wú)光學(xué)活性物2%全合成藥物非手性藥物60%手性藥物之外消旋體36%手性藥物之對(duì)映純化合物4%第三十一頁(yè)，共79頁(yè)。1對(duì)某些手性藥物進(jìn)行對(duì)映體的純度檢查；

2生物體液中藥物對(duì)映體的分離分析研究可探索血藥濃度與臨床療效的關(guān)系；

3在研制手性藥物過(guò)程中，可分別評(píng)價(jià)單個(gè)對(duì)映體的效價(jià)、毒性、不良反應(yīng)以及藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)；

4必要時(shí)，可進(jìn)行手性藥物對(duì)映體的制備分離（或拆分）

手性色譜分離的意義第三十二頁(yè)，共79頁(yè)。（二）手性藥物拆分方法的機(jī)理

引入不對(duì)稱中心（或光學(xué)活性分子）把手性混合物轉(zhuǎn)換成為非對(duì)映異構(gòu)體，然后利用其化學(xué)或物理化學(xué)性質(zhì)的差異使之分開(kāi)第三十三頁(yè)，共79頁(yè)。

色譜法拆分機(jī)理

三點(diǎn)手性識(shí)別模型B’A’C’DBACCDBA對(duì)映體手性選擇劑第三十四頁(yè)，共79頁(yè)。

HPLC拆分法

采用手性固定相或在流動(dòng)相中加入手性添加劑，分離分析立體異構(gòu)體的方法一般手性固定相與其相反構(gòu)型的對(duì)映體之間作用力強(qiáng)，易形成瞬間非對(duì)映體“配合物”，使手性組分得到保留手性固定相系將手性官能團(tuán)鍵合在載體上而成第三十五頁(yè)，共79頁(yè)。（三）手性HPLC拆分法分類1間接法手性衍生化試劑(CDR)法2手性流動(dòng)相拆分法（直接法）

CMP3手性固定相拆分法

CSP第三十六頁(yè)，共79頁(yè)。

柱前手性衍生化反應(yīng)的注意事項(xiàng)手性試劑必須是高光學(xué)純度的試劑衍生化反應(yīng)要定量完成（90-100%）手性待測(cè)物必須具有可反應(yīng)的活性基團(tuán)

如

-NH2、-OH、-COOH等手性試劑及產(chǎn)物應(yīng)穩(wěn)定，且具有不同的紫外或熒光特性生成的非對(duì)映異構(gòu)體應(yīng)具有較高的柱效1間接法手性衍生化試劑(CDR)法第三十七頁(yè)，共79頁(yè)。手性衍生化反應(yīng)(R)-SE+(R)-SE–(R)-SA

(R)-SE–(S)-SA

(R)-SA

(S)-SA

SE

光學(xué)活性試劑，也稱“選擇劑”

SA

手性溶質(zhì)，也稱“選擇靶”如醇類與手性酸或酰氯酯化第三十八頁(yè)，共79頁(yè)。

可使用價(jià)格便宜、柱效較高的非手性柱通過(guò)衍生化反應(yīng)可提高檢測(cè)靈敏度衍生化過(guò)程可同時(shí)純化樣品

缺點(diǎn)需要高純度的手性衍生化試劑操作復(fù)雜費(fèi)時(shí)，有時(shí)需嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間和溫度

優(yōu)點(diǎn)第三十九頁(yè)，共79頁(yè)。

在流動(dòng)相中加入手性添加劑，使其與待測(cè)物形成對(duì)映異構(gòu)體復(fù)合物，依據(jù)復(fù)合物的穩(wěn)定常數(shù)不同以及藥物與結(jié)合物在固定相上分配的差異而得到分離2手性流動(dòng)相拆分法（直接法）

CMP第四十頁(yè)，共79頁(yè)。

常用手性添加劑配基交換型手性添加劑（CLEC）用于分離氨基酸及其衍生物、多巴胺環(huán)糊精(CD)類添加劑常用-CD，－CD、改性CD

手性離子對(duì)絡(luò)合劑

常用(+)-10-樟腦磺酸、奎寧和奎尼丁第四十一頁(yè)，共79頁(yè)。

利用手性固定相與對(duì)映體消旋物相互作用，生成不穩(wěn)定的短暫的對(duì)映體復(fù)合物，使兩種異構(gòu)體在色譜柱上的保留時(shí)間不同，從而得到分離3手性固定相拆分法

CSP第四十二頁(yè)，共79頁(yè)。

常用的手性固定相

Pirkle型手性固定相

-堿型手性固定相、-酸型手性固定相和氨基酸類手性固定相蛋白質(zhì)類手性固定相環(huán)糊精鍵合相手性聚合物固定相第四十三頁(yè)，共79頁(yè)。

CSP特點(diǎn)適用范圍廣制備分離方便定量分析的可靠性高價(jià)格昂貴第四十四頁(yè)，共79頁(yè)。（四）CDR、CMP

和CSP的比較優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)

應(yīng)用條件簡(jiǎn)易，固定相和移動(dòng)相同普通HPLC，并有利于增加檢測(cè)靈敏度樣品須預(yù)分離，對(duì)衍生化手性試劑的光學(xué)純度要求高，異構(gòu)體對(duì)的衍生化速率不一CDR不必作柱前樣品衍生化，對(duì)固定相也無(wú)特殊要求，樣品的非對(duì)映異構(gòu)化絡(luò)合的可逆性有利于制備可拆分的化合物范圍有限，某些添加劑欠穩(wěn)定且往往干擾檢測(cè)CMP適用于各類化合物,無(wú)需高純?cè)噭?適于常規(guī)及生物樣品的分析測(cè)定,制備分離便利,定量分析可靠性較高樣品有時(shí)亦須作柱前衍生(但未必用手性試劑)，對(duì)樣品的結(jié)構(gòu)仍有一定限制，CSP柱昂貴，而適用性差CSP第四十五頁(yè)，共79頁(yè)。拆分實(shí)例

酰胺型手性固定相直接拆分克侖特羅對(duì)映體色譜柱：Chirex3005手性色譜柱（（R）-1-萘基甘氨酸和3,5-二硝基苯甲酸共價(jià)鍵合）流動(dòng)相：正己烷:二氯乙烷:甲醇＝54:38:8（V/V/V）流速：1ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：247nm柱溫：17℃第四十六頁(yè)，共79頁(yè)。（1）克侖特羅分子上的－NH與固定相萘乙基酰胺部分的－C=O形成氫鍵作用；（2）克侖特羅分子上的－OH與固定相3,5-二硝基苯甲酰胺的－NH形成氫鍵；（3）克侖特羅分子上的芳基與固定相上的3,5-二硝基苯基之間的電子授受作用力因?qū)τ丑w的構(gòu)型不同而不同，（＋）-S構(gòu)型對(duì)映體的空間位置有利于電子授受力的形成，而（－）-R構(gòu)型對(duì)映體上的芳基與3,5-二硝基苯基的距離遠(yuǎn)，不易發(fā)生上述作用。

所以，由于空間構(gòu)型的不同，使得S構(gòu)型的對(duì)映體有利于“三點(diǎn)相互作用”的形成，與固定相的作用力強(qiáng)，保留時(shí)間也長(zhǎng)，后洗脫出來(lái)；而R構(gòu)型的對(duì)映體僅能形成“兩點(diǎn)作用”，故而在柱上的保留時(shí)間短，先出峰。克侖特羅與酰胺型手性固定相的相互作用拆分機(jī)理第四十七頁(yè)，共79頁(yè)。第四節(jié)GC-MS技術(shù)與應(yīng)用

以GC為分離手段，以MS為檢測(cè)手段的分離分析方法第四十八頁(yè)，共79頁(yè)。1定性參數(shù)多，結(jié)果可靠；不僅有tR，還有質(zhì)譜圖

2定量精度高

3檢測(cè)靈敏度高

4分析方法建立容易：GC法有大量文獻(xiàn)

方法特點(diǎn)：第四十九頁(yè)，共79頁(yè)。（一）GC-MS聯(lián)用儀的組成質(zhì)量分析器接口離子源檢測(cè)器數(shù)據(jù)處理GC真空系統(tǒng)第五十頁(yè)，共79頁(yè)。

1色譜柱毛細(xì)管柱

2接口—聯(lián)用技術(shù)中的關(guān)鍵裝置接口的作用使柱出口壓力與質(zhì)譜離子源的壓力相匹配減小流量，分離除去大量的載氣，保留或濃縮樣品組分第五十一頁(yè)，共79頁(yè)。

要求載氣氦氣or氫氣柱出口流量<1ml/min（1）直接導(dǎo)入型第五十二頁(yè)，共79頁(yè)。（2）分流型接口（3）濃縮型—噴射式分子分離器第五十三頁(yè)，共79頁(yè)。（1）電子轟擊電離源（EI）特點(diǎn)：穩(wěn)定，操作方便；電離效率高，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好3離子源M+(M-R2)+(M-R3)+MassSpectrometer(M-R1)+第五十四頁(yè)，共79頁(yè)。電子轟擊離子化(electronimpactionization，EI)EI是最常用的一種離子源，有機(jī)分子被一束電子流(能量一般為70eV)轟擊，失去一個(gè)外層電子，形成帶正電荷的分子離子(M+)，M+進(jìn)一步碎裂成各種碎片離子、中性離子或游離基，在電場(chǎng)作用下，正離子被加速、聚焦、進(jìn)入質(zhì)量分析器分析。第五十五頁(yè)，共79頁(yè)。

特點(diǎn)：分子離子峰強(qiáng)度大，易得到分子量信息；譜圖簡(jiǎn)單；不適用難揮發(fā)試樣（2）化學(xué)電離源（CI）第五十六頁(yè)，共79頁(yè)。化學(xué)離子化(chemicalionization，CI)將反應(yīng)氣(甲烷、異丁烷、氨氣等)與樣品按一定比例混合，然后進(jìn)行電子轟擊，甲烷分子先被電離，形成一次、二次離子，這些離子再與樣品分子發(fā)生反應(yīng)，形成比樣品分子大一個(gè)質(zhì)量數(shù)的(M+1)離子，或稱為準(zhǔn)分子離子。準(zhǔn)分子離子也可能失去一個(gè)H2，形成(M-1)離子。++氣體分子試樣分子+準(zhǔn)分子離子電子(M+1)+;(M+17)+;(M+29)+;第五十七頁(yè)，共79頁(yè)。（二）定量方法

1總離子流色譜TIC

將質(zhì)譜儀每次掃描的質(zhì)譜峰的離子流全部加合，以總離子流強(qiáng)度對(duì)時(shí)間作圖所得的譜圖稱作總離子流色譜

TIC圖一般與GC譜圖是一致的第五十八頁(yè)，共79頁(yè)。2選擇離子檢測(cè)（SIM）

質(zhì)譜儀只對(duì)某個(gè)（或幾個(gè)）指定m/z

的離子進(jìn)行反復(fù)自動(dòng)掃描，用保留時(shí)間為橫坐標(biāo)，記錄特征離子碎片的強(qiáng)度所構(gòu)成的質(zhì)量圖譜，可以實(shí)現(xiàn)選擇性地測(cè)定復(fù)雜樣品中的某一組分的含量

SIM

比TIC

的靈敏度高2-3個(gè)數(shù)量級(jí)第五十九頁(yè)，共79頁(yè)。案例：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)保健品中的違禁藥物近年來(lái),保健品市場(chǎng)日益興旺,但暴露出來(lái)的問(wèn)題也十分嚴(yán)重。添加違禁合成藥物、假化學(xué)成分達(dá)到或增加其功效作用的行為更具隱蔽性、欺騙性和危害性,為一般消費(fèi)者所難以識(shí)別。因此,開(kāi)展保健品的安全檢測(cè)十分必要。保健品成分十分復(fù)雜,目前常規(guī)的檢測(cè)手段難以鑒別出各種添加的違禁藥物,本文應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)一批問(wèn)題保健膠囊進(jìn)行了準(zhǔn)確的定性分析,檢測(cè)出布洛芬、非那西丁等8種違禁添加藥物以及布洛芬甲酯、3-氯苯酰胺等6種藥物中間體或分解物。第六十頁(yè)，共79頁(yè)。HP6890/5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（EI源）第六十一頁(yè)，共79頁(yè)。

布洛芬、非那西丁、地巴唑、服他靈、安定、利心平、胃復(fù)寧、消炎痛8種為違禁添加的合成藥物另外6種藥物可疑中間體或分解產(chǎn)物四氯苯甲酸、布洛芬甲酯、3-氯苯酰胺、9-氯氮蒽、雙氯酚酸甲酯、2-2,6-二氯苯-氨基-苯乙酸,長(zhǎng)期攝入對(duì)身體健康無(wú)疑是有害無(wú)益的第六十二頁(yè)，共79頁(yè)。（一）概述方法特點(diǎn)：適用范圍廣檢測(cè)靈敏度高可提供結(jié)構(gòu)信息高樣品通量缺點(diǎn)：

第五節(jié)LC-MS技術(shù)與應(yīng)用對(duì)部分化學(xué)成分響應(yīng)差對(duì)色譜流動(dòng)相組成有限制第六十三頁(yè)，共79頁(yè)。++

樣品與溶劑脫離及電離

EIESIAPCILC/MS接口

離子源質(zhì)量分析器檢測(cè)離子HPLC數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)譜離子識(shí)別

QuadrapoleTimeofFlightFourierTransform

…+++++++離子檢測(cè)++-++++++-+++第六十四頁(yè)，共79頁(yè)。

作用將液相洗脫液及樣品氣化分離除去大量的洗脫液使樣品分子離子化（二）接口第六十五頁(yè)，共79頁(yè)。API主要包括

電噴霧電離ESI

大氣壓化學(xué)電離APCI

大氣壓電離技術(shù)（API）第六十六頁(yè)，共79頁(yè)。1ESI

接口（電噴霧離子化）

流出液在高電場(chǎng)下形成帶電噴霧，在電場(chǎng)力作用下穿過(guò)氣簾氣簾的作用：霧化；蒸發(fā)溶劑；阻止中性溶劑分子第六十七頁(yè)，共79頁(yè)。第六十八頁(yè)，共79頁(yè)。

通常只產(chǎn)生分子離子峰，故可用于不穩(wěn)定的極性化合物能形成多電荷離子，可用于分析分子量達(dá)幾十萬(wàn)u的化合物可用于流速1ml/minESI

的特點(diǎn)第六十九頁(yè)，共79頁(yè)。

在ESI

接口基礎(chǔ)上，增加了APCI

蒸發(fā)器和電暈放電針2APCI

接口（大氣壓化學(xué)離子化）電極真空樣品+溶劑霧化氣加熱管反應(yīng)氣等離子體Corona放電APCI電離原理第七十頁(yè)，共79頁(yè)。第七十一頁(yè)，共79頁(yè)。

特點(diǎn)：一般只給出化合物的分子量信息，通過(guò)源內(nèi)CID（碰撞誘導(dǎo)分解）可同時(shí)獲得