自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展詳解演示文稿

自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有41頁\編輯于星期二優(yōu)選自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展現(xiàn)在是2頁\一共有41頁\編輯于星期二全自動(dòng)自身抗體分析儀自動(dòng)化檢測(cè)檢測(cè)定量化單個(gè)項(xiàng)目隨時(shí)檢測(cè)多個(gè)項(xiàng)目同時(shí)檢測(cè)45-90分鐘報(bào)告結(jié)果原廠質(zhì)控和校正血清精確溫度調(diào)控系統(tǒng)五點(diǎn)定標(biāo)、三重檢測(cè)現(xiàn)在是3頁\一共有41頁\編輯于星期二現(xiàn)在是4頁\一共有41頁\編輯于星期二風(fēng)濕病的實(shí)驗(yàn)室診斷血清學(xué)檢查

自身抗體——特異性非特異的免疫相關(guān)指標(biāo)滑液分析一般的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目現(xiàn)在是5頁\一共有41頁\編輯于星期二項(xiàng)目檢驗(yàn)方法SLE四項(xiàng)

ANA間接免疫熒光抗DS－DNA抗體間接免疫熒光抗組蛋白抗體ELISA抗核小體抗體ELISAENA系列

抗RNP免疫印跡、ELISA抗SM免疫印跡、ELISA抗SSA免疫印跡、ELISA抗SSB免疫印跡、ELISA抗JO-1免疫印跡、ELISA抗SCL-70免疫印跡、ELISA抗核糖體P蛋白免疫印跡、ELISARA三項(xiàng)

AKA（抗角質(zhì)蛋白抗體）間接免疫熒光抗RA33ELISA抗CCP（抗環(huán)瓜氨酸肽抗體）ELISAANCA四項(xiàng)

P-ANCA（熒光模型為核周模型）間接免疫熒光C-ANCA（熒光模型為細(xì)胞質(zhì)模型）間接免疫熒光MPO-ANCA（髓過氧化酶抗體）ELISAPR3-ANCA（抗蛋白酶3抗體）ELISA常見的自身抗體及其檢測(cè)方法(1)現(xiàn)在是6頁\一共有41頁\編輯于星期二(2)自身免疫肝炎七項(xiàng)

ANA間接免疫熒光抗LMA抗（肝細(xì)胞膜抗體）間接免疫熒光ASMA（抗平滑肌抗體）間接免疫熒光抗LKM（抗肝腎微粒體抗體）間接免疫熒光抗SLA（抗可溶性肝抗原抗體）間接免疫熒光AMA（線粒體抗體）間接免疫熒光抗LSP（抗肝臟特異性蛋白抗體）間接免疫熒光RF三項(xiàng)

RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂綜合征三項(xiàng)（ASP）ELISAPT-IgG（凝血素抗體）ELISAPT-IgMELISA抗β2-糖蛋白1抗體ELISA常見的自身抗體及其檢測(cè)方法現(xiàn)在是7頁\一共有41頁\編輯于星期二抗Ku抗體（Ku)抗Mi抗體（Mi-2）抗PM-Scl抗體抗JO-1抗體（JO-1）多發(fā)性肌炎、皮肌炎抗線粒體抗體M2型（AMA-M2）原發(fā)性膽汁性肝硬化抗nRNP抗體（U1-snRNP）混合性結(jié)締組織?。∕CTD）抗Scl-70抗體（Scl-70）抗著絲點(diǎn)B抗體（CENP-B）系統(tǒng)性硬化抗SSB/La抗體抗SSA/R052抗體抗SS-A/R060抗體干燥綜合征/系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核糖體P蛋白（PO）抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（PCNA)抗Sm抗體抗組蛋白抗體抗核小體抗體抗雙鏈DNA抗體IgG抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡項(xiàng)目名稱疾病

ANA譜17項(xiàng)（免疫印跡法）(3)常見的自身抗體及其檢測(cè)方法現(xiàn)在是8頁\一共有41頁\編輯于星期二(一)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）

類風(fēng)濕因子（RF）早期診斷的系列指標(biāo)抗RA33/36抗體 抗核周因子（APF）抗角蛋白抗體（AKA）抗Sa抗體抗環(huán)瓜氨酸抗體（抗CCP）

現(xiàn)在是9頁\一共有41頁\編輯于星期二抗角蛋白抗體（AKA）抗角蛋白抗體(AKA)，1979年Young等發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)血清中有一種能與鼠食管角質(zhì)層反應(yīng)的抗體，并對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)具有特異性，命名為AKA。1989年Vincent等提出應(yīng)將AKA更名為抗角質(zhì)層抗體更為恰當(dāng)。AKA可以在RA發(fā)病以前若干年出現(xiàn)，所以有早期診斷價(jià)值。AKA檢測(cè)方法：取6周齡雄性Wistar大鼠食管中下1/3段作為抗原，做冰凍切片，厚4μm～5μm-70℃保存?zhèn)溆?。?∶20稀釋血清，濕盒內(nèi)37℃孵育30分鐘，PBS漂洗，吹干，加1∶20稀釋的熒光素標(biāo)記羊抗人IgG，37℃孵育30分鐘，漂洗，吹干，緩沖甘油封片熒光顯微鏡下觀察。判定標(biāo)準(zhǔn)：以角質(zhì)層出現(xiàn)典型的規(guī)則的線狀或板層狀熒光為陽性。現(xiàn)在是10頁\一共有41頁\編輯于星期二geneFilaggrin現(xiàn)在是11頁\一共有41頁\編輯于星期二現(xiàn)在是12頁\一共有41頁\編輯于星期二類風(fēng)濕因子（RF）抗人IgG分子Fc片段上抗原決定簇的特異性抗體,分為IgM、G、A、E型RF在RA中的陽性率為70%~８０％，是診斷RA的重要標(biāo)準(zhǔn)之一RF含量與病情的活動(dòng)性和嚴(yán)重性成正比，持續(xù)高滴度的RF常提示RA病情活動(dòng)，骨侵蝕發(fā)生率高，常可伴有皮下結(jié)節(jié)或血管炎等關(guān)節(jié)外表現(xiàn)，提示預(yù)后不良?，F(xiàn)在是13頁\一共有41頁\編輯于星期二類風(fēng)濕因子（RF）RF并非RA獨(dú)有的特異性抗體，對(duì)RA的診斷不具特異性

SLE30%SS70%~90%SSc20%~30%MCTD50%~60%

非風(fēng)濕性疾病

5%以下的正常人RF陽性不等于一定就是RARF陰性也不等于一定就不是RA現(xiàn)在是14頁\一共有41頁\編輯于星期二現(xiàn)在是15頁\一共有41頁\編輯于星期二RF常用檢測(cè)方法RF 1：40陽性乳膠凝集法（測(cè)IgM-RF）RF256Iu/ml雙抗夾心ElISA法(測(cè)總RF）RF-IgG 110IU/ml -IgA 18IU/ml ELISA法

-IgM200IU/ml現(xiàn)在是16頁\一共有41頁\編輯于星期二RA早期診斷的系列指標(biāo)

敏感性特異性抗RA33/36抗體35.8%99.6%APF40%-80%70%-90%AKA40%-55%85%-95%抗Sa抗體40%-60%98.6%抗CCP46%-70%96%現(xiàn)在是17頁\一共有41頁\編輯于星期二抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP）瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微絲蛋白相關(guān)抗體的主要抗原決定簇對(duì)RA診斷具有高度特異性（98%）可在RA早期出現(xiàn)預(yù)測(cè)早期關(guān)節(jié)炎發(fā)展為RARA關(guān)節(jié)侵蝕破壞的早期識(shí)別及預(yù)測(cè)現(xiàn)在是18頁\一共有41頁\編輯于星期二(二)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種臨床表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害癥狀的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其血清有以抗核抗體為主的大量不同的自身抗體自身抗體（1）抗核抗體譜——ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗體（2）抗磷脂抗體（3）抗組織細(xì)胞抗體——抗RBC抗體抗血小板相關(guān)抗體抗神經(jīng)元抗體（4）其它——RF、p-ANCA現(xiàn)在是19頁\一共有41頁\編輯于星期二抗核抗體（ANA）定義——以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原的抗體臨床意義①SLE的篩查抗體:

95%陽性，但滴度與SLE活動(dòng)性無相關(guān)陰性基本可排除SLE②陽性并非SLE特異陽性并非風(fēng)濕病特異:——風(fēng)濕?。⊿LE、SSc、SS、RA)

非風(fēng)濕性疾?。ǜ腥?、慢肝、肺纖維化、腫瘤）服用某些藥物（INH、苯妥英鈉、肼苯達(dá)嗪、普魯卡因酰胺）

現(xiàn)在是20頁\一共有41頁\編輯于星期二抗核抗體（ANA）方法——間接免疫熒光法結(jié)果判斷:①滴度〉1：100為陽性②常見核型——5種不同核型的臨床意義不同

現(xiàn)在是21頁\一共有41頁\編輯于星期二

核膜型與抗ds-DNA有關(guān)，多見于SLE，特別是有腎炎者

均質(zhì)型與AHA（抗組蛋白抗體）、抗DNA有關(guān)，引起LE形成主要見于SLE、藥物性狼瘡現(xiàn)在是22頁\一共有41頁\編輯于星期二

斑點(diǎn)型與抗ENA有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體核仁型多見于硬皮病現(xiàn)在是23頁\一共有41頁\編輯于星期二

著絲點(diǎn)型多見于CREST綜合征現(xiàn)在是24頁\一共有41頁\編輯于星期二ANA常見五種核型及臨床意義核膜型——與抗ds-DNA有關(guān)，多見于SLE，特別是有腎炎者均質(zhì)型——與AHA、抗DNA有關(guān)，引起LE形成主要見于SLE、藥物性狼瘡斑點(diǎn)型——與抗ENA有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體核仁型——多見于硬皮病著絲點(diǎn)型——多見于CREST綜合征現(xiàn)在是25頁\一共有41頁\編輯于星期二ANA檢測(cè)方法間接免疫熒光法印跡法ELISA法現(xiàn)在是26頁\一共有41頁\編輯于星期二

抗核抗體譜（ANAs）定義：以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原的抗體

抗DNA抗體——抗ss-DNA

抗ds-DNA

抗組蛋白抗體——H1，H2A，H2B，H3，H4

抗非組蛋白抗體——抗ENA抗體抗著絲點(diǎn)抗體抗核仁抗體其它——線粒體、溶酶體、高爾基體等

現(xiàn)在是27頁\一共有41頁\編輯于星期二抗ds-DNA抗體臨床意義①對(duì)SLE的診斷有較高特異性②滴度與SLE活動(dòng)相關(guān)，可作為病情監(jiān)測(cè)及療效觀察指標(biāo)③與SLE腎損害有關(guān)檢測(cè)方法①放免法（Farr)——敏感，有利于早期預(yù)測(cè)檢測(cè)高親合力的抗ds-DNA②間接免疫熒光法(IF)——特異③ELISA——可檢測(cè)低親合力的抗ds-DNA

有助于中樞狼瘡的病情監(jiān)測(cè)④金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法現(xiàn)在是28頁\一共有41頁\編輯于星期二抗ENA抗體抗RNPMCTD100%陽性，且滴度高 雙手腫脹，雷諾現(xiàn)象，肌炎，指（趾）端硬化 腎臟保護(hù)性抗體？抗SmSLE的標(biāo)記性抗體，陽性率30%

有助于早期、不典型及治療緩解后SLE的回顧性診斷 抗Sm陽性一定伴抗RNP陽性，但抗RNP陽性可單獨(dú)存在抗SSA①原發(fā)性SS：60-75%SLE:40-50% ②與皮損、光過敏、白細(xì)胞減少、淋巴結(jié)腫大、血管炎、紫癜相關(guān)③可造成新生兒狼瘡、嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯抗SSB ①原發(fā)性SS：40%，較抗SSA更特異 ②其它CTD伴抗SSB者常伴繼發(fā)性SS現(xiàn)在是29頁\一共有41頁\編輯于星期二抗ENA抗體抗Scl-70硬皮病標(biāo)記性抗體抗Jo-1多肌炎/皮肌炎標(biāo)記性抗體抗Rib 胞漿抗原——核糖體位于胞漿內(nèi)

臨床意義①是SLE的又一特異性抗體，陽性率10-20%②多見于SLE活動(dòng)期與抗ds-DNA抗體的消長(zhǎng)相平行但不會(huì)隨病情緩解立即消失可持續(xù)1-2年后才轉(zhuǎn)陰現(xiàn)在是30頁\一共有41頁\編輯于星期二抗核小體抗體（AnuA）核小體是細(xì)胞染色質(zhì)中的一種成分，它是由DNA和組蛋白以特殊的方式相連而組成，在SLE的誘導(dǎo)和致病中起重要作用對(duì)SLE的早期診斷有重要意義比抗ds-DNA、抗組蛋白抗體更早出現(xiàn)陽性率：50%~90%特異性﹥98%現(xiàn)在是31頁\一共有41頁\編輯于星期二(三)皮肌炎/多發(fā)性肌炎（PM/DM）免疫學(xué)檢查ANAENA——抗Jo-1陽性其它檢查——肌酶譜肌酸磷酸激酶（CPK）:MM-心肌和骨骼肌

MB-心肌

BB-平滑肌和腦內(nèi)乳酸脫氫酶（LDH）谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）堿性磷酸酶（ALP）現(xiàn)在是32頁\一共有41頁\編輯于星期二(四)干燥綜合征（SS）ANA——陽性率40%~70%ENA——抗SSA抗體陽性率70%~96%

抗SSB抗體陽性率50%~87%抗α-Fordrin——對(duì)于pSS或sSS的診斷有一定意義，但特異性和敏感性并不理想。RF——陽性率75%~100%高球蛋白血癥WBC下降現(xiàn)在是33頁\一共有41頁\編輯于星期二(五)系統(tǒng)性硬化?。╬SS）ANA——陽性率50%~55%ENA——抗Scl-70陽性率15%~40%抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)陽性現(xiàn)在是34頁\一共有41頁\編輯于星期二(六)混合性結(jié)締組織?。∕CTD）ANA陽性ENA——抗RNP高滴度陽性現(xiàn)在是35頁\一共有41頁\編輯于星期二（七）血管炎

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）熒光圖譜分型主要抗原成分胞漿型cANCA核周型pANCA蛋白酶3（PR3）髓過氧化物酶（MPO）非典型型（cANCA）不清現(xiàn)在是36頁\一共有41頁\編輯于星期二ANCA的臨床意義c-ANCA和PR3-ANCA

對(duì)韋格納肉芽腫有高度特異性（95%），敏感性80%

與病情活動(dòng)性相關(guān)常作為判斷藥物療效和病情復(fù)發(fā)的指標(biāo)p-ANCA和MPO-ANCA

不如c-ANCA具有診斷特異性陽性者血管炎程度較高，其滴度也與病情活動(dòng)相關(guān)主要與顯微鏡下多血管炎

壞死性新月體腎小球腎炎

變應(yīng)性肉芽腫性血管炎相關(guān)現(xiàn)在是37頁\一共有41頁\編輯于星期二（八）抗磷脂抗體綜合征（APS）是一種非炎癥性自身免疫病，臨床上以動(dòng)/靜脈血栓形成、習(xí)慣性流產(chǎn)和血小板減少等癥狀為表現(xiàn)，血清中存在抗