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普通微生物緒論第1頁/共62頁教學(xué)參考書第2頁/共62頁教學(xué)參考雜志第3頁/共62頁學(xué)時(shí)安排以及成績(jī)?cè)u(píng)定:共32學(xué)時(shí)考勤成績(jī):10%作業(yè)+提問:30%期末考試:60%第4頁/共62頁第5頁/共62頁第6頁/共62頁第7頁/共62頁第8頁/共62頁第9頁/共62頁第10頁/共62頁第11頁/共62頁第12頁/共62頁第13頁/共62頁豬流感病毒豬流感(Swineinfluenza,SI)現(xiàn)已改名為“甲型H1N1”或“A(H1N1)”是由A型流感病毒引起的一種豬的急性呼吸道傳染病。第14頁/共62頁第15頁/共62頁緒論一、微生物及其種類二、微生物學(xué)及其分支學(xué)科三、微生物特點(diǎn)四、微生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史五、微生物學(xué)的展望六、微生物與農(nóng)業(yè)關(guān)系第16頁/共62頁一、什么是微生物

WhatareMicroorganisms?

※定義:微生物是所有形體微小、單細(xì)胞或結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單的多細(xì)胞生物、甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物的通稱?!N類:微生物類群十分龐雜,包括:原核生物:細(xì)菌、放線菌、立克次氏體、衣原體等,真核生物:酵母菌和霉菌,單細(xì)胞藻類、原生動(dòng)物等。無細(xì)胞結(jié)構(gòu):病毒、類病毒、擬病毒等。第17頁/共62頁微生物在生物分類中的位置五界系統(tǒng):1969年,R.H.Whittaker在Science雜志上發(fā)表“生物界級(jí)分類的新觀點(diǎn)”。(見表)三界(域)生物系統(tǒng):70年代,Woese根據(jù)16SrRNA核苷酸序列的同源性提出。(見表)

三界生物細(xì)菌bacteria古生菌achaea真核生物eukarya第18頁/共62頁Whittaker五界系統(tǒng)*

細(xì)胞型生物動(dòng)物界Animalia植物界Plantae原生生物界Protista:原生動(dòng)物、單細(xì)胞藻類等真菌界Fungi:酵母菌、霉菌等原核生物界Monera:細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌等非細(xì)胞生物:病毒界1979年,我國學(xué)者補(bǔ)充*摘自周德慶,1997第19頁/共62頁綠色非硫細(xì)菌greennonsulfurbacteriaG菌grampositives紫色硫細(xì)菌purplebacteria藍(lán)細(xì)菌cyanobacteria黃桿菌屬flavobacteriathemotogaleskorarchaeota熱網(wǎng)菌屬pyrodictum熱變形菌屬thermoproteus

熱球菌屬thermococctus甲烷球菌屬methanococcus甲烷桿菌屬methanobacteriacrenarcaeoya甲烷八疊球菌methanosarcina嗜鹽菌halophilesentanoebae

粘菌類

Slimemolds動(dòng)物animal真菌fungi植物plants纖毛類ciliates鞭毛類flagellates三分體trichononds微擔(dān)孢體microsporidia二分體diplononods細(xì)菌bacteria古菌achaca真核生物cukarya按16SrRNA堿基順序比較細(xì)菌、古菌核真核生物的系統(tǒng)發(fā)育樹的綜合圖摘自T.D.Brlck.BiologyofMicroorganisms.1997第20頁/共62頁

微生物世界細(xì)胞生物非細(xì)胞生物原核生物真核細(xì)胞病毒類病毒朊病毒單細(xì)胞藻類

原生動(dòng)物真菌細(xì)菌古生菌第21頁/共62頁二、微生物學(xué)及其分支學(xué)科微生物學(xué)是研究微生物的學(xué)科。在水平上研究微生物的等基本規(guī)律。

細(xì)胞群體分子形態(tài)結(jié)構(gòu)生理代謝遺傳變異生態(tài)分布分類進(jìn)化

并將其應(yīng)用到工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)學(xué)衛(wèi)生、生物工程、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域。其主要任務(wù)是發(fā)掘、利用和改善有益微生物,控制、消滅或改造有害微生物。第22頁/共62頁二、微生物學(xué)分支學(xué)科按基本問題分:普通微生物學(xué)、微生物分類學(xué)、微生物生理學(xué)、微生物生態(tài)學(xué)、微生物遺傳學(xué)等。按應(yīng)用領(lǐng)域分:工業(yè)~、農(nóng)業(yè)~、醫(yī)學(xué)~、食品~、石油~、土壤~、海洋~、環(huán)境~、發(fā)酵微生物學(xué)等等。按研究對(duì)象分:細(xì)菌學(xué)、真菌學(xué)、病毒學(xué)、噬菌體學(xué)等。第23頁/共62頁三、微生物的特點(diǎn)體積小、面積大吸收多、轉(zhuǎn)化快生長(zhǎng)旺、繁殖快適應(yīng)強(qiáng)、易變異分布廣、種類多第24頁/共62頁1、體積小、面積大個(gè)體微小一般個(gè)體大小<0.1mm細(xì)胞:μm級(jí),光學(xué)顯微鏡下可見病毒、細(xì)胞器:nm級(jí),電子顯微鏡下可見第25頁/共62頁1、體積小、面積大(比表面積大)球體積:1/6πD3面積:πD2比表面積=

=πD21/6πD36D立方體體積:L3面積:6L2比表面積==6L2L36L1cm:61.0μm:6×104比表面積極大是微生物與大型動(dòng)物相區(qū)別的關(guān)鍵所在,也是賦予微生物其他共性的本質(zhì)所在。大面積系統(tǒng)必然有一個(gè)巨大的物質(zhì)交換面,可以促進(jìn)營養(yǎng)物的吸收、代謝物的排泄、環(huán)境信息的接收等。第26頁/共62頁1、體積小、面積大(比表面積大)

乳酸桿菌120,000豌豆6.0體重200磅的人0.3比表面積大是賦予微生物其他共性的本質(zhì)所在。決定了有一個(gè)巨大的物質(zhì)交換面,進(jìn)行物質(zhì)和能量代謝。第27頁/共62頁2、吸收多、轉(zhuǎn)化快呼吸速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于高等動(dòng)植物組織。比呼吸速率OUR(OxygenUtilizationRate)※Pseudomonas(假單胞菌屬)30oC1200腎和肝組織37oC10~20根和葉組織20oC0.4~4※單位:ml-O2/mg-drycell.h第28頁/共62頁2、吸收多、轉(zhuǎn)化快發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)就可以分解相當(dāng)于其自身重量1,000~10,000倍的乳糖,產(chǎn)生乳酸1公斤酵母菌體,在一天內(nèi)可發(fā)酵幾千公斤的糖,生成酒精大腸桿菌每小時(shí)消耗2000倍于體重的糖。以同等體積算,其1小時(shí)所消耗的糖,即可相當(dāng)于人在500年所消耗的糧食。第29頁/共62頁3、生長(zhǎng)旺、繁殖快微生物的代時(shí)(generationtime)倍加時(shí)間(doublingtime)大腸桿菌18min(每日分裂80次)指數(shù)分裂2n增加率1.2×1024繁殖快意義:在科研以及工業(yè)上的應(yīng)用(發(fā)酵)上,降低生產(chǎn)周期。注意:細(xì)菌的指數(shù)分裂只能維持很短的時(shí)間。在液體培養(yǎng)基中,細(xì)菌濃度一般僅能達(dá)到108~109cell/ml。第30頁/共62頁若干微生物的代時(shí)及每日增殖率

微生物名稱

代時(shí)

每日分裂次數(shù)

溫度

每日增殖率

細(xì)菌乳酸菌大腸桿菌根瘤菌枯草桿菌光合細(xì)菌

38分18分110分31分

144分

388013461025372530302.7×10111.2×10248.2×1037.0×10131.0×103釀酒酵母

120分

12

304.1×103藻

小球藻念珠藻*硅藻

7小時(shí)23小時(shí)

17小時(shí)

2.41.041.425252010.62.12.64草履蟲

10.4小時(shí)2.326

4.92*為念珠藍(lán)菌屬(Nostoc)的舊稱。與細(xì)菌同屬原核生物。

第31頁/共62頁4、適應(yīng)強(qiáng)、易變異微生物對(duì)環(huán)境條件,特別是“極端環(huán)境”具有驚人的適應(yīng)力。耐高溫菌:80~90oC條件下能正常生長(zhǎng)。耐低溫菌:在-80oC條件下大多數(shù)細(xì)菌仍能保持生命。耐干燥:能產(chǎn)生芽孢的細(xì)菌可在干燥條件保藏幾十年。耐酸菌:氧化硫硫桿菌pH0.5耐堿菌:脫氮硫桿菌pH10.7耐鹽、耐輻射菌、耐毒物菌:如Cr6+、HCN第32頁/共62頁4、適應(yīng)強(qiáng)、易變異突變頻率一般為10-5~10-10,因繁殖快,數(shù)量多,與外界環(huán)境直接接觸,因而在短時(shí)間內(nèi)可出現(xiàn)大量變異的后代。例如,青霉素生產(chǎn)菌1943年為20U/ml青霉素,40多年來,經(jīng)過世界各國微生物遺傳育種工作者的不懈努力該菌產(chǎn)量變異逐漸積累,加上發(fā)酵條件的改進(jìn),目前發(fā)酵水平已超過50kU/ml,甚至接近10萬單位。微生物的數(shù)量性狀變異和育種使產(chǎn)量提高的幅度之大,是動(dòng)植物育種工作中絕對(duì)不可能達(dá)到的。正因?yàn)槿绱?,幾乎所有微生物發(fā)酵工廠都十分重視菌種選育工作。第33頁/共62頁5、分布廣、種類多任何有其它生物生存的環(huán)境中,都能找到微生物。而在其它生物不可能生存的極端環(huán)境中也有微生物存在。分布廣:如:萬米深海、85公里高空、地層下128米和427米沉積巖中都發(fā)現(xiàn)微生物存在。第34頁/共62頁5、分布廣、種類多廣泛分布于土壤、空氣和水體等自然環(huán)境中。微生物小而輕可以到處傳播和定居。適應(yīng)能力強(qiáng)也廣泛的存在于生物體內(nèi)。人體腸道中經(jīng)常聚居著100~400種不同種類的微生物(總重量約等于糞便干重的1/3左右)第35頁/共62頁5、分布廣、種類多目前已發(fā)現(xiàn)的微生物大約有10萬種以上。(見表)就目前的分離、培養(yǎng)技術(shù)只能培養(yǎng)出所存在微生物的1-20%左右。有一些是不能被培養(yǎng)的微生物。VBNC/VNC(Viablebutnon-culturable)(見表)目前發(fā)現(xiàn)的微生物僅僅是冰山的一角。第36頁/共62頁主要微生物的種數(shù)*

類型

數(shù)

低限

傾向性種數(shù)

高限

病毒與立克次氏體支原體細(xì)菌與放線菌藍(lán)細(xì)菌藻類真菌原生動(dòng)物

121742>100012271505137175240681217421500150023100473002406812174215002500231006893930000總計(jì)

79780

98727

127298*本表參考Whittaker,R.H.etal.BiologyDataBook,2nded.,Vol.1,1972.P.529。第37頁/共62頁由種類多而派生出來的特點(diǎn)代謝類型多能利用自然中各種有機(jī)物和無機(jī)物,甚至許多有毒物(氰、酚、多環(huán)芳炔)。產(chǎn)能方式多:光合作用、化能合成作用代謝產(chǎn)物種類多大腸桿菌E.coli:能產(chǎn)生2000~3000種蛋白質(zhì)目前發(fā)現(xiàn)的抗生素達(dá)上萬種,其中97%以上來自細(xì)菌和放線菌第38頁/共62頁四、微生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史1、史前期(公元1676年以前):古代對(duì)微生物利用2、初創(chuàng)期(1676-1860):微生物的發(fā)現(xiàn)及形態(tài)學(xué)3、奠基期(1861-1896):生理學(xué)發(fā)展階段4、發(fā)展期(1897-1952):微生物生化階段5、成熟期(1953---):分子生物學(xué)的發(fā)展第39頁/共62頁1、史前期※考古推測(cè):我國在8000年以前就曲糵釀酒。4000年以前,釀酒已經(jīng)很普遍?!蔽簳r(shí)期賈思勰《齊民要術(shù)》記載了制曲、釀酒制醬、釀醋等工藝?!?~10世紀(jì),鼻苗法種痘預(yù)防天花?!箍浦参锱c其他作物輪作提高產(chǎn)量。第40頁/共62頁2、初創(chuàng)期---形態(tài)學(xué)發(fā)展時(shí)期荷蘭商人,列文虎克(AntonyVanLeeuwenhoek1632-1723)第41頁/共62頁3、奠基期--生理學(xué)發(fā)展時(shí)期巴斯德(LouisPasteur1822-1895)法國人柯赫(RobertKoch1843-1910)德國人第42頁/共62頁巴斯德徹底否定“自生說”學(xué)說免疫學(xué)-預(yù)防接種證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的其他-提出巴斯德消毒法等第43頁/共62頁否定“自生說”(Spontaneousgeneration)利用曲頸瓶試驗(yàn)徹底否定了“自生說”,證實(shí)空氣中含有微生物,他們引起了有機(jī)質(zhì)的變質(zhì)。推動(dòng)了微生物學(xué)的發(fā)展。第44頁/共62頁巴斯德的曲頸瓶試驗(yàn)第45頁/共62頁第46頁/共62頁柯赫提出了柯赫法則(炭疽桿菌、結(jié)核分支桿菌)配制培養(yǎng)基技術(shù)固體培養(yǎng)基分離純化技術(shù)第47頁/共62頁柯赫法則第48頁/共62頁柯赫法則第49頁/共62頁柯赫法則第50頁/共62頁柯赫法則第51頁/共62頁病原物來自患病肌體。在患病肌體可分離到病原物,并且可培養(yǎng)。病原物接種進(jìn)一個(gè)健康的肌體,引發(fā)相同疾病。從生病肌體可再分離到該病原物。

科赫法則第52頁/共62頁拜耶林克(Beijerinck),病毒學(xué)分離培養(yǎng)根瘤菌(1888)、好氧固氮菌(1901)維諾格拉德斯基(Winograsky.俄),生態(tài)學(xué).土壤微生物學(xué)氮素和硫素轉(zhuǎn)化首次分離到自生固氮細(xì)菌(1893)第53頁/共62頁4、發(fā)展期:微生物生物化學(xué)※微生物學(xué)進(jìn)入酶學(xué)研究和生物化學(xué)時(shí)期,許多酶、輔酶、抗生素以及許多生化反應(yīng)都是在這時(shí)期發(fā)現(xiàn)的。至此,形成了研究微生物基本生命活動(dòng)規(guī)律的學(xué)科------普通微生物

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