無公害農(nóng)藥殺蟲劑詳解演示文稿

無公害農(nóng)藥殺蟲劑詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有97頁\編輯于星期一（優(yōu)選）無公害農(nóng)藥殺蟲劑現(xiàn)在是2頁\一共有97頁\編輯于星期一農(nóng)藥與下列問題有關(guān)人口糧食健康資源能源環(huán)境現(xiàn)在是3頁\一共有97頁\編輯于星期一生物農(nóng)藥與四大工程有關(guān)基因工程酶工程蛋白質(zhì)工程發(fā)酵工程現(xiàn)在是4頁\一共有97頁\編輯于星期一糧食病蟲草鼠年損失1230億美元我國每年防治2.7億hm2次，挽回糧食損失3150萬噸，挽回經(jīng)濟損失300億元。發(fā)達國家，農(nóng)藥投入產(chǎn)出比為1：6-8，美國為1：4，我國為1：2.5-4?，F(xiàn)在是5頁\一共有97頁\編輯于星期一一.微生物殺蟲劑控制害蟲更為安全、有效的方法

微生物殺蟲劑的優(yōu)點：特異性高可進行生物降解昆蟲對它的抗性產(chǎn)生較慢

微生物殺蟲劑的不足：殺蟲效果較差，成本較高現(xiàn)在是6頁\一共有97頁\編輯于星期一健康與環(huán)境

安全：全世界每年農(nóng)藥中毒100萬人，死亡20萬人。我國投放自然界農(nóng)藥總量已達8000萬—1億噸。每年中毒人數(shù)已占世界同類中毒事故50%左右?，F(xiàn)在是7頁\一共有97頁\編輯于星期一生態(tài)生物多樣性減少人與自然和諧面臨很大挑戰(zhàn)生物安全、生態(tài)安全（除國防安全、政治安全、經(jīng)濟安全、信息安全外）很多污染世界前列：發(fā)展權(quán)？現(xiàn)在是8頁\一共有97頁\編輯于星期一棉鈴蟲

斜紋夜蛾甜菜夜蛾現(xiàn)在是9頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是10頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是11頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是12頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是13頁\一共有97頁\編輯于星期一二、生物農(nóng)藥的概念問題現(xiàn)在是14頁\一共有97頁\編輯于星期一生物農(nóng)藥分類

生物化學(xué)農(nóng)藥微生物農(nóng)藥轉(zhuǎn)基因農(nóng)藥天敵農(nóng)藥植物源農(nóng)藥現(xiàn)在是15頁\一共有97頁\編輯于星期一爭論點

化學(xué)農(nóng)藥專家：應(yīng)包括微生物活體、昆蟲天敵、部分植物源農(nóng)藥；不包括農(nóng)用抗生素、植物生長調(diào)節(jié)劑、轉(zhuǎn)基因農(nóng)藥。

國外：農(nóng)用抗生素列為化學(xué)農(nóng)藥的范疇?，F(xiàn)在是16頁\一共有97頁\編輯于星期一三、生物農(nóng)藥開發(fā)中的一些問題現(xiàn)在是17頁\一共有97頁\編輯于星期一1、標準①通用標準：昆蟲病原菌≠生物農(nóng)藥②質(zhì)量控制標準：用生物活性方法？用化學(xué)分析方法？植物源農(nóng)藥：用一個成分合理嗎？③商品化、產(chǎn)業(yè)化標準：小試？中試？產(chǎn)業(yè)化？商品化？現(xiàn)在是18頁\一共有97頁\編輯于星期一2、安全

①活體生物：致病菌？②代謝產(chǎn)物：幾種不同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似的同系物。③植物源農(nóng)藥：氨基甲酸酯類農(nóng)藥是由毒扁豆中的毒扁豆堿衍生合成而來的，但毒扁豆堿卻是一種對人畜高毒的物質(zhì)，使人瞳孔縮小，呼吸困難而死亡。煙堿對人畜高毒，魚藤酮對魚和豬劇毒。蓖麻毒素是從大戟科植物中提取的一類核糖體失活蛋白，可殺蚜、螨、小菜蛾、天幕毛蟲等，并可防治葡萄白粉病、霜霉病、銹病，但它是對人高毒的蛋白質(zhì)。④混配、復(fù)配：阿維菌素對人、畜、蜜蜂等高毒。⑤非有效成分：我國乳油（EC）占50-60%，年耗25萬噸，7.5-9億元；有機溶劑、二甲苯、甲醇等的毒性遠大于生物農(nóng)藥。

現(xiàn)在是19頁\一共有97頁\編輯于星期一生物農(nóng)藥無害嗎？

沒有任何依據(jù)：“凡是生物農(nóng)藥都安全，凡是化學(xué)農(nóng)藥都有害”的論斷。至今有上百種化學(xué)農(nóng)藥急性毒性比食鹽和阿斯匹林還低。生物有毒物質(zhì)與人工合成化學(xué)物質(zhì)并無不可逾越的鴻溝，完全可以人工合成。現(xiàn)在是20頁\一共有97頁\編輯于星期一3、效果

①田間應(yīng)用：后效性、生態(tài)效益、社會效益②成本：可持續(xù)發(fā)展的矛盾現(xiàn)在是21頁\一共有97頁\編輯于星期一四、國外微生物農(nóng)藥研發(fā)動態(tài)現(xiàn)在是22頁\一共有97頁\編輯于星期一微生物農(nóng)藥全球植保產(chǎn)品市值300億美元微生物農(nóng)藥5億美元主導(dǎo)產(chǎn)品：阿維、Bt、Spinosad刺糖菌素現(xiàn)在是23頁\一共有97頁\編輯于星期一微生物農(nóng)藥美國:3億美元。EPA登記微生物農(nóng)藥72個（細菌38，真菌23，病毒9，放線菌2）EPA登記新種類：地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、綠僵菌、曲霉菌、鏈霉菌等。植病生防制劑已成開發(fā)熱點，主要品種為芽孢桿菌和木霉。

現(xiàn)在是24頁\一共有97頁\編輯于星期一高毒農(nóng)藥的嚴格限制1999：FAO、UNEP及61個國家參加制定鹿特丹條約，PIC程序，提出27種限制的化學(xué)品，其中農(nóng)藥22種。2000.2：日內(nèi)瓦ICRC會議上又增加了三氯乙烷和環(huán)氧乙烷二種農(nóng)藥。2000.12：南非約翰內(nèi)斯堡，UNEP和122國家決議，通過了對某些持久性有機污染物進行限制的有法律約束的POPS公約，全面禁止限制DDT、滅蚊靈、氯丹等農(nóng)藥。現(xiàn)在是25頁\一共有97頁\編輯于星期一我國生物農(nóng)藥主要品種登記注冊近140種，產(chǎn)業(yè)化14種。殺蟲：6種（阿維、甲基阿維、Bt、苦參堿、煙堿、棉鈴蟲NPV）殺菌：6種（井岡、農(nóng)用鏈霉素、農(nóng)抗120、多氧霉素中生菌素、寧南霉素）生長調(diào)節(jié)劑：2種（赤霉素、蕓苔素內(nèi)酯）超億元4種：井岡霉素、阿維、Bt、赤霉素?，F(xiàn)在是26頁\一共有97頁\編輯于星期一新型生物農(nóng)藥品種寡糖丙烷脒激活蛋白多粘類芽孢桿菌地衣類芽孢桿菌海洋地衣芽孢桿菌嗜線蟲致病桿菌綠色木霉抑霉菌素放線菌新菌株植物活性物質(zhì)現(xiàn)在是27頁\一共有97頁\編輯于星期一病毒農(nóng)藥斜紋夜蛾NPV棉鈴蟲NPV現(xiàn)在是28頁\一共有97頁\編輯于星期一抗生素農(nóng)藥

1、殺蟲：殺蚜素A、韶光霉素、南昌霉素、梅嶺霉素、華光霉素、瀏陽霉素、滅蚊鏈霉素、阿維霉素2、抗?。壕畬顾亍⒖姑顾?20、公主嶺霉素、波拉霉素、武夷霉素、中生霉素、科生霉素、寧南霉素、多抗霉素。現(xiàn)在已不僅僅局限于從土壤中尋找抗生素，開始從高等植物中提取，或從地衣、藻類、被子植物和各種海洋生物中尋找新的抗生素。

現(xiàn)在是29頁\一共有97頁\編輯于星期一植物性農(nóng)藥植物中的殺蟲物質(zhì)是它自身防御，與昆蟲的適應(yīng)演變協(xié)同進化的結(jié)果。地球上植物種類約30萬種，植物中含有多種多樣的次生代謝物質(zhì)。借鑒中藥篩選現(xiàn)在是30頁\一共有97頁\編輯于星期一轉(zhuǎn)基因農(nóng)藥8100萬公頃。有17個國家的近825萬農(nóng)民種植，比2003年增加了125萬。新增農(nóng)民中90%來自發(fā)展中國家。發(fā)展中國家絕對增長幅度(720萬公頃)首次超過發(fā)達國家(610萬公頃)。中國370萬公頃轉(zhuǎn)基因棉花(占66%)，比2003年增加了32%，占全球生物技術(shù)作物種植面積總額的5%。

現(xiàn)在是31頁\一共有97頁\編輯于星期一基因來源

植物來源的基因：蛋白酶抑制劑、淀粉酶抑制劑和外源凝集素基因；微生物來源：蘇云金芽孢桿菌（Bt）。轉(zhuǎn)Bt基因成功的物種有玉米、棉花、水稻、小麥、大豆、油菜、花生、向日葵、馬鈴薯、番茄、茄子、芹菜、芥菜、萵苣、白菜、花椰菜、卷心菜、胡蘿卜、豌豆、豇豆、黃瓜、甜瓜、蘋果、梨、甜橙、柑橘、葡萄、草莓、山楂、番木瓜、板栗、楊樹、落葉松、白云杉、楓香、歐洲黑楊、石竹、田旋花、長春花、玫瑰、蘭花、矮牽牛、菊花、煙草、甜菜、苜蓿、薄荷、三葉草、甘蔗等。

動物來源：蝎毒、蜘蛛毒素基因?，F(xiàn)在是32頁\一共有97頁\編輯于星期一天敵生物農(nóng)藥北京、廣州：人造卵赤眼蜂生產(chǎn)線歐洲：英國、荷蘭現(xiàn)在是33頁\一共有97頁\編輯于星期一農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的應(yīng)用面對13億人口龐大的消耗體系，4億人進城。是生物資源最為豐富的國家之一。是世界上最大的生物技術(shù)產(chǎn)品消費市場之一。

1-2年內(nèi)若把轉(zhuǎn)基因水稻推向市場，每公頃節(jié)約投入600-1200元，挽回損失10%，每年減少21萬噸農(nóng)藥，農(nóng)民增收138億元，中國將成為世界上第一個轉(zhuǎn)基因水稻商品化種植的國家？生物工程在生物農(nóng)藥研究開發(fā)中大有可為！現(xiàn)在是34頁\一共有97頁\編輯于星期一1.前言

昆蟲病毒是引起昆蟲致病和死亡的重要病原體。最早關(guān)于昆蟲病毒的記載是中國，在1149年出版的《農(nóng)書》中，就記載有家蠶的“高節(jié)”“腳腫”病，這就是現(xiàn)在所稱的核型多角體病毒病?，F(xiàn)在是35頁\一共有97頁\編輯于星期一2昆蟲病毒的類群病毒virus：一類形態(tài)最小，結(jié)構(gòu)最簡單的微生物。由單一的核酸(RNA或DNA)組成中心核、核外包裹一層外殼蛋白組成。病毒病viraldisease：由病毒病原體引起的疾病?，F(xiàn)在是36頁\一共有97頁\編輯于星期一2.1昆蟲病毒的基本特征

昆蟲病毒的一般構(gòu)造：

-昆蟲病毒是一類沒有細胞構(gòu)造的生物體-主要組成是核酸和蛋白質(zhì)。-病毒個體稱為病毒粒子(virion)，由兩部分構(gòu)成：內(nèi)面是核心（core），成分為核酸；外層是衣殼(capsid)，成分是蛋白質(zhì)。有些衣殼外包被有囊膜。成分為脂類。

核酸的功能是攜帶遺傳信息，決定病毒的遺傳變異性和傳染性。

蛋白質(zhì)的功能是保護核酸，并決定病毒的抗原性?，F(xiàn)在是37頁\一共有97頁\編輯于星期一不同種類病毒的結(jié)構(gòu)現(xiàn)在是38頁\一共有97頁\編輯于星期一2.1昆蟲病毒的基本特征

昆蟲病毒的侵染活動：在寄主外存在時沒有代謝、生長和繁殖，只保留在適宜條件下侵染寄主的潛在能力。在不適宜的環(huán)境下活性較易喪失。

對溫度很敏感，在55℃－60℃時，病毒懸液幾分鐘內(nèi)就會變性。X-射線、γ-射線和紫外線照射能使病毒變性失活。有囊膜的病毒容易被脂肪溶劑破壞。一般常用甲醛等消毒劑來消毒被病毒污染的器皿和空氣。

現(xiàn)在是39頁\一共有97頁\編輯于星期一2.2昆蟲病毒的分類

2.2.1分類依據(jù)：

①形態(tài)學(xué)特征

囊膜的有無；病毒粒子的形狀、大小；亞顯微結(jié)構(gòu)等

②生物化學(xué)和生物物理學(xué)特征

核酸類型、核酸特性、蛋白質(zhì)構(gòu)成以及隔成分的含量、分子量、浮力密度和沉降系數(shù)等

③生物學(xué)特征病毒入侵生物體的復(fù)制過程、寄主范圍和傳遞方式等現(xiàn)在是40頁\一共有97頁\編輯于星期一2.2昆蟲病毒的分類2.2.2昆蟲病毒的類群：根據(jù)國際病毒分類委員會（ICTV）1981年通過的分類方案，所有已知病毒分為54個科和群，此外還包括5個建議的或可能的科和群。目前已經(jīng)明確分類地位的昆蟲病毒有11科。現(xiàn)在是41頁\一共有97頁\編輯于星期一2.3昆蟲病毒的診斷鑒定

一般的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)方法：根據(jù)染病蟲體的癥狀進行診斷。凡是產(chǎn)生多角體的病毒類型，用一般光學(xué)顯微鏡觀察而明確病毒的存在，并可采用某些染色方法來鑒別是哪一類具包涵體的病毒。

生物鑒定方法：

通過感染試驗方法鑒別病毒的存在，比如接種后能引起健蟲發(fā)生同樣疾病。現(xiàn)在是42頁\一共有97頁\編輯于星期一2.3昆蟲病毒的診斷鑒定電子顯微鏡觀察

通常包括超薄切片技術(shù)、負染色技術(shù)和投影技術(shù)等。

血清學(xué)方法

該法可確定各個分離株的親緣關(guān)系，鑒別用一般方法難以區(qū)分的病毒。生物化學(xué)及分子生物學(xué)研究鑒定

現(xiàn)在是43頁\一共有97頁\編輯于星期一3重要昆蟲病毒的概述到1986年前為止：國內(nèi)外已從約1100種昆蟲、螨類中分出約1690種病毒我國已從約7目26屬190種昆蟲中分離出234株病毒現(xiàn)在是44頁\一共有97頁\編輯于星期一3重要昆蟲病毒的概述已知昆蟲病毒的寄主有鱗翅目、膜翅目、雙翅目、鞘翅目、直翅目、半翅目、同翅目、脈翅目、革翅目、毛翅目、蜉蝣目、蜻蜓目等，尤以鱗翅目為主要寄主。昆蟲病毒中的包涵體病約占90％以上，其中鱗翅目寄主約為80％，雙翅目10％。在無包涵體病毒中，鱗翅目寄主占33％，雙翅目23％，鞘翅目18％，膜翅目2.5％現(xiàn)在是45頁\一共有97頁\編輯于星期一3重要昆蟲病毒的概述

目前已知至少有20余類的昆蟲病毒，但研究歷史最長、防治應(yīng)用最廣的是桿狀病毒科中的核型多角體病毒和顆粒體病毒以及呼腸孤病毒科中的質(zhì)型多角體病毒?，F(xiàn)在是46頁\一共有97頁\編輯于星期一3.1核型多角體病毒(NPV)

核型多角體病毒(nuclearpolyhedrosisviruse,簡稱NPV)是研究得最早和最為詳細的一類昆蟲病毒。到1986年為止，國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)464株，中國約124株，其中78株為首次發(fā)現(xiàn)。在分類上為桿狀病毒屬（Baculovirus）的A亞組?，F(xiàn)在是47頁\一共有97頁\編輯于星期一3.1核型多角體病毒(NPV)

一般形態(tài)特征：

-具有較大的包涵體，稱為多角體(polyhedra，簡稱IB或PIB)，在被感染的細胞核內(nèi)形成。-多角體大小常因寄主昆蟲種類的不同而不同，甚至在統(tǒng)一寄主細胞內(nèi)，多角體的形狀大小也有區(qū)別。常見的形狀有三角形、四角形、五角形、立方體、不規(guī)則形等?，F(xiàn)在是48頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是49頁\一共有97頁\編輯于星期一NPV病毒粒子的形態(tài)結(jié)構(gòu)

病毒粒子桿狀，所以又稱為病毒桿狀體。病毒粒子由外到內(nèi)：

囊膜（內(nèi)膜）——一層脂質(zhì)膜

衣殼（內(nèi)膜）——主要成分是蛋白質(zhì)

髓核——由DNA組成，呈螺旋狀后兩者加在一起成為核衣殼。在NPV中，通常一個囊膜內(nèi)由多個排列成束的核衣殼，稱為病毒束。一個品系的NPV，可能每個囊膜內(nèi)均只有一個核衣殼，也由可能每個囊膜內(nèi)由1到多個核衣殼而成為“病毒束”，前者稱為單粒包埋型病毒，后者稱為多粒包埋型病毒?，F(xiàn)在是50頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是51頁\一共有97頁\編輯于星期一NPV的理化性狀不溶于水及多種有機溶劑如乙醇、乙醚、三氯甲烷、苯、丙酮等強酸或強堿溶液處理，能使多角體蛋白質(zhì)溶解?，F(xiàn)在是52頁\一共有97頁\編輯于星期一NPV的理化性狀病毒粒子外有包涵體的保護，可在自然條件下存活多年仍不失效。對低溫有較高的忍受力。如家蠶NPV在–135℃～–150℃條件下反復(fù)凍結(jié)融解5次，其感染力不變。對高溫的抵抗力較差，如粉紋夜蛾NPV的失活溫度為82～88℃10min，棉鈴蟲NPV的失活溫度為75～80℃10min，粘蟲的NPV在100℃經(jīng)10min失活?，F(xiàn)在是53頁\一共有97頁\編輯于星期一NPV對昆蟲的侵染感病特征：以鱗翅目為例：

感病初期無明顯異常變化行動遲緩食欲減退，體色變淡或呈油光病蟲常爬向寄主植物高處，死前體軀變軟以腹足緊附枝葉倒掛而死皮膚則脆弱易裂，破后流出乳白色或褐色的濃稠液體，內(nèi)含大量新形成的核多角體。現(xiàn)在是54頁\一共有97頁\編輯于星期一現(xiàn)在是55頁\一共有97頁\編輯于星期一NPV的感染途徑卵期被病毒污染的蟲卵在幼蟲孵化時因吞食卵殼而感染。舞毒蛾剛孵化出的幼蟲常因食人染有LdNPV的卵殼而致死。病死的初孵幼蟲又為后期幼蟲提供接種源。在幼蟲期因LdNPV引起的死亡率常出現(xiàn)兩個高潮，一是在孵化后1～2周，一是在末齡幼蟲期。現(xiàn)在是56頁\一共有97頁\編輯于星期一NPV的感染途徑幼蟲被感染后直至出現(xiàn)癥狀和病征的這段潛伏期受多種因素的影響。接種量少則潛伏期長。幼蟲齡期越后易感性一般較小，潛伏期也延長。溫度顯著影響潛伏期長短，如家蠶在正常室溫下5～7天就出現(xiàn)病征，16℃～17時15天內(nèi)不出現(xiàn)病征。較高的相對濕度也能誘發(fā)某些昆蟲發(fā)生病毒病。現(xiàn)在是57頁\一共有97頁\編輯于星期一

NPV的選擇性與?；詶U狀病毒曾以選擇性和專化性高而著稱，但試驗證明一種昆蟲的桿狀病毒能感染其他昆蟲的事例并不少見。家蠶NPV能侵染柞蠶等11種昆蟲。歐洲云杉卷葉蛾(Choristoneuramurinana)的NPV能侵染云杉卷葉蛾(C．funiiferana)、蘋果囊蛾、李食心蟲、歐洲松梢卷葉蛾等。紅棕灰夜蛾(Sarcopoliailloba)NPV能侵染銀紋夜蛾、黃地老虎、粘蟲等12種夜蛾科害蟲。

現(xiàn)在是58頁\一共有97頁\編輯于星期一

NPV的交叉感染性一種昆蟲也可合并感染兩類不同的病毒，如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲、粉紋夜蛾、云杉卷葉蛾等可合并感染核型多角體病毒和顆粒體病毒。粘蟲合并感染NPV和GV時，GV能增強NPV的感染，有協(xié)同增效作用。有些合并感染則有干擾作用，如云杉卷葉蛾先感染的病毒妨礙后感染病毒的發(fā)展。

現(xiàn)在是59頁\一共有97頁\編輯于星期一3.2顆粒體病毒(GV)

顆粒體病毒（granulosisvirus，簡稱GV）在分類上屬桿狀病毒科B亞組，是有包涵體的昆蟲病毒。目前為止國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)GV約130株，中國發(fā)現(xiàn)約42株，其中26株為首次發(fā)現(xiàn)?，F(xiàn)在是60頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的一般形態(tài)特征包涵體稱顆粒體(granule)或莢膜(capsule)。先在被感染細胞的核內(nèi)形成，但當核膜破裂后可溢出到細胞質(zhì)內(nèi)。包涵體很小。在電子顯微鏡下觀察，顆粒體的形狀有卵形、橢圓形、長卵形等，通常直徑為0.1～0.3μm，長0.3～1.0μm。每個包涵體內(nèi)一般只有一個病毒粒子。有時也出現(xiàn)不正常的形狀。現(xiàn)在是61頁\一共有97頁\編輯于星期一

左圖：霜天蛾GV的形態(tài)

右圖：小菜蛾GV經(jīng)堿處理后的病毒粒子現(xiàn)在是62頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的理化性狀不溶于水和一般的有機溶劑如乙醚、乙醇、丙酮、二甲苯等。遇強酸或強堿，包涵體能迅速溶解，并可使病毒粒子變性而失去侵染力?，F(xiàn)在是63頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的理化性狀可在室溫下保存5年以上而不失侵染力。高溫可使其失活。冰凍無多大危害。較低的溫度有可能延長貯存的時期。紫外線或其他輻射線能使完整的病毒失活。用稀堿處理后可獲得完整和具侵染性的病毒粒子?，F(xiàn)在是64頁\一共有97頁\編輯于星期一GV對昆蟲的侵染感病特征：

感染初期無明顯病征之后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍和停止取食隨后蟲體顏色發(fā)生改變，血液漸變?nèi)榘赘胁∠x體可能膨大或收縮已死幼蟲體壁脆弱，破后流出大量顆粒體。染病幼蟲可存活較長時間。病死蟲體有時用腹足倒掛枝葉上，呈“Λ”形?，F(xiàn)在是65頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的感病特征染病幼蟲常于幼蟲期即死，有時也可活至蛹期或成蟲期。從染病到死亡所經(jīng)時間因蟲而異。一般4～5天，可長至34天，如粘蟲。幼蟲齡期、侵染劑量、溫度等因素也能影響這段時期的長短?，F(xiàn)在是66頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的感染途徑通過口服進入易感蟲體，顆粒體在中腸中溶解，游離的病毒粒子通過腸道柱形細胞的微絨毛而侵入，在這些細胞核中增殖，新形成的顆粒體病毒釋放于血淋巴中而導(dǎo)致對其他組織的繼發(fā)感染。蟲體外傷和寄生天敵產(chǎn)卵可引起GV對皮下感染，也可經(jīng)卵垂直傳播。現(xiàn)在是67頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的?；灶w粒體病毒的專化性較強，交叉感染的情況甚為少見，一般認為顆粒體病毒是包涵體病毒含DNA的各類中?；宰顝姷囊活悺Ｒ酝袩o顆粒體病毒能在植物或其他動物細胞中增殖的報道。近年我國用小菜蛾細胞系BCIRL-Px2-HNU3復(fù)制小菜粉蝶GV和用家蠶細胞系Bm-21E-HNU5復(fù)制小菜蛾GV成功。現(xiàn)在是68頁\一共有97頁\編輯于星期一GV的交叉感染現(xiàn)象鱗翅目幼蟲可合并感染NPV和GV兩種病毒。如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲等可同時感染顆粒體病毒和NPV。粘蟲的六齡幼蟲如單感染NPV，死亡率3.4％，單感染顆粒體病毒，死亡率20%，如二種合并感染，則死亡率為80％，死體為NPV病征，體內(nèi)主要是核型多角體，也有些同時存在顆粒體?，F(xiàn)在是69頁\一共有97頁\編輯于星期一3.3質(zhì)型多角體病毒(CPV)質(zhì)多角體病毒（cytoplasmicpolyhedrosisvirus，簡稱CPV）的發(fā)現(xiàn)比NPV和GV都要遲。日本蠶病學(xué)家石森直人早于1934年就觀察到家蠶的中腸上皮細胞內(nèi)存在有多角體，但當時并未確定是由一種新型病毒引起的。CPV可感染鱗翅目、雙翅目、膜翅目、鞘翅目、脈翅目5目昆蟲，但主要見于鱗翅目和雙翅目。到1986年前國內(nèi)外已發(fā)現(xiàn)CPV228株，代表種為家蠶CPV?，F(xiàn)在是70頁\一共有97頁\編輯于星期一CPV作為殺蟲劑應(yīng)用的不多，主要原因是只侵染中腸上皮細胞，在自然界中以慢性感染的地方病出現(xiàn)。如廣泛用于生物制劑尚須進一步進行安全試驗研究。當前CPV用于害蟲防治實踐的有日本赤松毛蟲(Dendrolimusspectabilis)CPV、?，F(xiàn)在是71頁\一共有97頁\編輯于星期一CPV的一般形態(tài)特征其包涵體和NPV相似，也是多角體，但只在被感染細胞的細胞質(zhì)內(nèi)形成。質(zhì)型多角體呈六角形、四角形、球形、橢圓形等。質(zhì)型多角體的直徑為0.5μm～25μm，1個多角體可包埋100～10000個病毒粒子。病毒粒子為球形二十面體，直徑為30nm～60nm，有內(nèi)、外兩個二十面殼，每個殼有12個小單位構(gòu)造?，F(xiàn)在是72頁\一共有97頁\編輯于星期一1BmCPV的包涵體形態(tài)，右下為該包涵體的模式圖

2家蠶質(zhì)型CPV的包涵體形態(tài)，右上角為此包涵體的模式圖

3揚雪毒蛾CPV的多角體掃描電鏡圖像

4舞毒蛾CPV包涵體的掃描電鏡圖像現(xiàn)在是73頁\一共有97頁\編輯于星期一CPV的理化性狀不溶于水，但在水中經(jīng)較長時間可被蝕刻，而從表面失去粒子。在堿液中的溶解度比NPV多角體的溶解度為小，如以稀Na2CO3液或其他稀堿液處理，能失去表面病毒粒子，剩下不溶解的多角體，呈多孔的海綿狀。在堿液中很快被破壞，在從多角體中分離提純時須加注意?，F(xiàn)在是74頁\一共有97頁\編輯于星期一CPV對昆蟲的侵染感病特征：

早期食欲不振、體軀變小，有時蟲體比例不當，頭部顯得大。中腸中多角體的大量增殖使體色改變?yōu)辄S色或淡白色等。中腸細胞液化后，多角體可被嘔出或由糞便排出。現(xiàn)在是75頁\一共有97頁\編輯于星期一

CPV的感染過程質(zhì)型多角體病毒被易感昆蟲口服后或?qū)⒂坞x的病毒粒子注射入蟲體血腔均可引起感染。病毒進入蟲體消化道后為堿性消化液溶解而釋放出粒子，繼而侵入中腸上皮細胞，在其細胞質(zhì)內(nèi)增殖，也可傳染至前后腸細胞。形成多角體后，有半數(shù)以上的病毒粒子不被包埋而游離，釋放到細胞間隙，再次感染健康細胞。最后細胞解體，多角體脫落在中腸腔。一般經(jīng)7～20天死亡?，F(xiàn)在是76頁\一共有97頁\編輯于星期一

CPV的?；?/p>

通常認為質(zhì)型多角體病毒只感染中腸上皮細胞。一般認為其寄主專化的程度似較多數(shù)含DNA病毒者為低。往往能超科感染，從不同寄主所獲分離毒株也有同種的可能?，F(xiàn)在是77頁\一共有97頁\編輯于星期一4昆蟲病毒的生產(chǎn)

病毒為專性寄生病原，至今尚未研究出能在人工培養(yǎng)基上生長，只能在活細胞中增殖。因此，目前國內(nèi)外應(yīng)用于害蟲防治的昆蟲病毒制劑主要是通過活蟲體增殖和細胞培養(yǎng)法繁殖。現(xiàn)在是78頁\一共有97頁\編輯于星期一4.1在昆蟲活體中大量增殖昆蟲病毒

3種途徑：直接在自然種群中繁殖

從野外采回大量活蟲接種繁殖

在室內(nèi)條件下飼育大量害蟲接種繁殖

可采用自然飼料或人工飼料。近年來，各種類型的昆蟲病毒包括NPV、CPV、GV和昆蟲痘病毒等通過人工飼料飼育昆蟲而增殖均獲得較好的成效?，F(xiàn)在是79頁\一共有97頁\編輯于星期一4.2在細胞系中大量增殖昆蟲病毒

用組織培養(yǎng)增殖的病毒在致病性、?；约捌渌匦苑矫嬗袩o變異，尚待進一步研究。同時，因組織培養(yǎng)法要求條件較嚴格，大量增殖病毒還存在不少問題，目前尚未達到實用階段。

現(xiàn)在是80頁\一共有97頁\編輯于星期一4.3昆蟲病毒殺蟲劑的生產(chǎn)實例1核多角體病毒殺蟲劑2顆粒體病毒殺蟲劑現(xiàn)在是81頁\一共有97頁\編輯于星期一4.3.1核多角體病毒殺蟲劑

目前，核型多角體病毒是應(yīng)用最廣泛的昆蟲病毒。在中國已進入大田試驗的生產(chǎn)示范的核多角體病毒殺蟲劑有：棉鈴蟲NPV、斜紋夜蛾NPV、油桐尺蠖NPV、茶黃毒蛾NPV、舞毒蛾NPV、美國白蛾NPV、楊尺蠖NPV、甘藍夜蛾NPV等。現(xiàn)以斜紋夜蛾NPV為例，介紹NPV殺蟲劑的生產(chǎn)工藝及流程。現(xiàn)在是82頁\一共有97頁\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV殺蟲劑的生產(chǎn)

斜紋夜蛾屬鱗翅目夜蛾科。分布很廣，遍及全國，危害植物達99科290種以上，在大田作物中，主要危害棉花、大豆、花生、芝麻、煙草、甘薯、甜菜、玉米、高粱、水稻等，在蔬菜中，主要危害甘藍、白菜等十字花科蔬菜和水生蔬菜，也危害芋頭，莧菜、馬鈴薯、番茄、辣椒、瓜類、豆類等?，F(xiàn)在是83頁\一共有97頁\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)工藝1健康斜紋夜蛾幼蟲的人工飼養(yǎng)和管理

①人工飼料的成分：黃豆粉100g，山梨酸1.6g，麩皮100g，泥泊金1.6g，酵母粉40g，水1000ml，瓊脂12g，L-抗壞血酸4g

②卵管理：在幼蟲孵化前一天，用5％福爾馬林溶液將卵塊浸泡15分鐘，無菌水漂洗3次，滅菌紙上晾干，移入盛有人工飼料的塑料盒里，放置25度條件下孵育。

現(xiàn)在是84頁\一共有97頁\編輯于星期一1健康斜紋夜蛾幼蟲的人工飼養(yǎng)和管理

③幼蟲管理：

根據(jù)以幼蟲的生活習(xí)性盒飼養(yǎng)密度的要求，把幼蟲分為兩階段進行飼養(yǎng)。①1－4齡幼蟲飼養(yǎng)密度可為300粒－500粒/盒；②蟲子養(yǎng)到4齡后，飼養(yǎng)密度要適當調(diào)小。由于4－6齡幼蟲蛻皮會吐水，造成容器濕度過大，影響生長發(fā)育。所以相對濕度也應(yīng)適度調(diào)低。現(xiàn)在是85頁\一共有97頁\編輯于星期一1健康斜紋夜蛾幼蟲的人工飼養(yǎng)和管理

④蛹的管理：將老熟幼蟲放入自制的沙營造蛹室（在已消毒的有紗蓋的木盒里，放入10cm高的已高溫消毒的沙子），待蛹體變黑后，挑取個體大，富有光澤，有活力的蛹，放入產(chǎn)卵箱羽化。

⑤成蟲管理：

將蛹放入墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，移入紙制養(yǎng)蟲籠內(nèi)，每籠放10對蛹，成蟲交配產(chǎn)卵后收剪卵塊。現(xiàn)在是86頁\一共有97頁\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)工藝2幼蟲感染和回收

將飼養(yǎng)至4齡的幼蟲，按一定的濃度進行涂毒感染，飼養(yǎng)24小時后換無毒飼料。從感染后的第5天開始收集病死蟲。收集的死蟲即使處理或放冰箱冷藏?，F(xiàn)在是87頁\一共有97頁\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)工藝3病毒提取干燥

將病蟲尸以1：10自來水混合，倒入電動勻漿機研磨過濾，濾液經(jīng)差速離心法，離心3－4次，收集沉淀，漿沉淀按1：1加入填充劑存放－20℃下保存。取凍結(jié)的沉淀物機械粉碎，便可獲多角體干粉。經(jīng)顯微鏡下細胞計數(shù)確定含量，存放于4℃冰箱備用。4產(chǎn)品的質(zhì)量檢測與藥效

含量－毒力測定－產(chǎn)品衛(wèi)生性檢測－產(chǎn)品安全性檢測現(xiàn)在是88頁\一共有97頁\編輯于星期一4.3.2顆粒體病毒殺蟲劑

我國在基礎(chǔ)和應(yīng)用方面研究較詳細的顆粒體病毒有菜粉蝶GV，小菜蛾GV，黃地老虎GV，茶小卷葉蛾GV等，其中菜粉蝶GV列入國家“七五”攻關(guān)項目進行研究，并完成了中試生產(chǎn)?，F(xiàn)在是89頁\一共有97頁\編輯于星期一菜粉蝶GV殺蟲劑的生產(chǎn)

菜粉蝶為世界性重要害蟲。其幼蟲又名菜青蟲，是我國分布最普遍，為害最嚴重，經(jīng)常成災(zāi)的害蟲，幼蟲偏嗜十字花科蔬菜，幼蟲將葉片咬成孔洞和缺刻，嚴重發(fā)生時可將葉片全部吃光?，F(xiàn)在是90頁\一共有97頁\編輯于星期一菜粉蝶GV的生產(chǎn)工藝1人工飼料飼養(yǎng)菜青蟲

將菜粉蝶卵于人工模擬產(chǎn)卵卡上孵化后，人工飼料飼養(yǎng)至3齡，大部分用來增殖病毒，小部分繼續(xù)飼養(yǎng)傳代，每代21－28天。2感染回收將飼養(yǎng)的3齡菜青蟲防于特制