無(wú)公害農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑詳解演示文稿

無(wú)公害農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一（優(yōu)選）無(wú)公害農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一農(nóng)藥與下列問(wèn)題有關(guān)人口糧食健康資源能源環(huán)境現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一生物農(nóng)藥與四大工程有關(guān)基因工程酶工程蛋白質(zhì)工程發(fā)酵工程現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一糧食病蟲(chóng)草鼠年損失1230億美元我國(guó)每年防治2.7億hm2次，挽回糧食損失3150萬(wàn)噸，挽回經(jīng)濟(jì)損失300億元。發(fā)達(dá)國(guó)家，農(nóng)藥投入產(chǎn)出比為1：6-8，美國(guó)為1：4，我國(guó)為1：2.5-4?，F(xiàn)在是5頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一一.微生物殺蟲(chóng)劑控制害蟲(chóng)更為安全、有效的方法

微生物殺蟲(chóng)劑的優(yōu)點(diǎn)：特異性高可進(jìn)行生物降解昆蟲(chóng)對(duì)它的抗性產(chǎn)生較慢

微生物殺蟲(chóng)劑的不足：殺蟲(chóng)效果較差，成本較高現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一健康與環(huán)境

安全：全世界每年農(nóng)藥中毒100萬(wàn)人，死亡20萬(wàn)人。我國(guó)投放自然界農(nóng)藥總量已達(dá)8000萬(wàn)—1億噸。每年中毒人數(shù)已占世界同類(lèi)中毒事故50%左右。現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一生態(tài)生物多樣性減少人與自然和諧面臨很大挑戰(zhàn)生物安全、生態(tài)安全（除國(guó)防安全、政治安全、經(jīng)濟(jì)安全、信息安全外）很多污染世界前列：發(fā)展權(quán)？現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一棉鈴蟲(chóng)

斜紋夜蛾甜菜夜蛾現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一二、生物農(nóng)藥的概念問(wèn)題現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一生物農(nóng)藥分類(lèi)

生物化學(xué)農(nóng)藥微生物農(nóng)藥轉(zhuǎn)基因農(nóng)藥天敵農(nóng)藥植物源農(nóng)藥現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一爭(zhēng)論點(diǎn)

化學(xué)農(nóng)藥專(zhuān)家：應(yīng)包括微生物活體、昆蟲(chóng)天敵、部分植物源農(nóng)藥；不包括農(nóng)用抗生素、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、轉(zhuǎn)基因農(nóng)藥。

國(guó)外：農(nóng)用抗生素列為化學(xué)農(nóng)藥的范疇?，F(xiàn)在是16頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一三、生物農(nóng)藥開(kāi)發(fā)中的一些問(wèn)題現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一1、標(biāo)準(zhǔn)①通用標(biāo)準(zhǔn)：昆蟲(chóng)病原菌≠生物農(nóng)藥②質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)：用生物活性方法？用化學(xué)分析方法？植物源農(nóng)藥：用一個(gè)成分合理嗎？③商品化、產(chǎn)業(yè)化標(biāo)準(zhǔn)：小試？中試？產(chǎn)業(yè)化？商品化？現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2、安全

①活體生物：致病菌？②代謝產(chǎn)物：幾種不同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似的同系物。③植物源農(nóng)藥：氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥是由毒扁豆中的毒扁豆堿衍生合成而來(lái)的，但毒扁豆堿卻是一種對(duì)人畜高毒的物質(zhì)，使人瞳孔縮小，呼吸困難而死亡。煙堿對(duì)人畜高毒，魚(yú)藤酮對(duì)魚(yú)和豬劇毒。蓖麻毒素是從大戟科植物中提取的一類(lèi)核糖體失活蛋白，可殺蚜、螨、小菜蛾、天幕毛蟲(chóng)等，并可防治葡萄白粉病、霜霉病、銹病，但它是對(duì)人高毒的蛋白質(zhì)。④混配、復(fù)配：阿維菌素對(duì)人、畜、蜜蜂等高毒。⑤非有效成分：我國(guó)乳油（EC）占50-60%，年耗25萬(wàn)噸，7.5-9億元；有機(jī)溶劑、二甲苯、甲醇等的毒性遠(yuǎn)大于生物農(nóng)藥。

現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一生物農(nóng)藥無(wú)害嗎？

沒(méi)有任何依據(jù)：“凡是生物農(nóng)藥都安全，凡是化學(xué)農(nóng)藥都有害”的論斷。至今有上百種化學(xué)農(nóng)藥急性毒性比食鹽和阿斯匹林還低。生物有毒物質(zhì)與人工合成化學(xué)物質(zhì)并無(wú)不可逾越的鴻溝，完全可以人工合成?，F(xiàn)在是20頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3、效果

①田間應(yīng)用：后效性、生態(tài)效益、社會(huì)效益②成本：可持續(xù)發(fā)展的矛盾現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一四、國(guó)外微生物農(nóng)藥研發(fā)動(dòng)態(tài)現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一微生物農(nóng)藥全球植保產(chǎn)品市值300億美元微生物農(nóng)藥5億美元主導(dǎo)產(chǎn)品：阿維、Bt、Spinosad刺糖菌素現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一微生物農(nóng)藥美國(guó):3億美元。EPA登記微生物農(nóng)藥72個(gè)（細(xì)菌38，真菌23，病毒9，放線菌2）EPA登記新種類(lèi)：地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、綠僵菌、曲霉菌、鏈霉菌等。植病生防制劑已成開(kāi)發(fā)熱點(diǎn)，主要品種為芽孢桿菌和木霉。

現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一高毒農(nóng)藥的嚴(yán)格限制1999：FAO、UNEP及61個(gè)國(guó)家參加制定鹿特丹條約，PIC程序，提出27種限制的化學(xué)品，其中農(nóng)藥22種。2000.2：日內(nèi)瓦ICRC會(huì)議上又增加了三氯乙烷和環(huán)氧乙烷二種農(nóng)藥。2000.12：南非約翰內(nèi)斯堡，UNEP和122國(guó)家決議，通過(guò)了對(duì)某些持久性有機(jī)污染物進(jìn)行限制的有法律約束的POPS公約，全面禁止限制DDT、滅蚊靈、氯丹等農(nóng)藥。現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一我國(guó)生物農(nóng)藥主要品種登記注冊(cè)近140種，產(chǎn)業(yè)化14種。殺蟲(chóng)：6種（阿維、甲基阿維、Bt、苦參堿、煙堿、棉鈴蟲(chóng)NPV）殺菌：6種（井岡、農(nóng)用鏈霉素、農(nóng)抗120、多氧霉素中生菌素、寧南霉素）生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑：2種（赤霉素、蕓苔素內(nèi)酯）超億元4種：井岡霉素、阿維、Bt、赤霉素?，F(xiàn)在是26頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一新型生物農(nóng)藥品種寡糖丙烷脒激活蛋白多粘類(lèi)芽孢桿菌地衣類(lèi)芽孢桿菌海洋地衣芽孢桿菌嗜線蟲(chóng)致病桿菌綠色木霉抑霉菌素放線菌新菌株植物活性物質(zhì)現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一病毒農(nóng)藥斜紋夜蛾NPV棉鈴蟲(chóng)NPV現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一抗生素農(nóng)藥

1、殺蟲(chóng)：殺蚜素A、韶光霉素、南昌霉素、梅嶺霉素、華光霉素、瀏陽(yáng)霉素、滅蚊鏈霉素、阿維霉素2、抗?。壕畬顾亍⒖姑顾?20、公主嶺霉素、波拉霉素、武夷霉素、中生霉素、科生霉素、寧南霉素、多抗霉素。現(xiàn)在已不僅僅局限于從土壤中尋找抗生素，開(kāi)始從高等植物中提取，或從地衣、藻類(lèi)、被子植物和各種海洋生物中尋找新的抗生素。

現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一植物性農(nóng)藥植物中的殺蟲(chóng)物質(zhì)是它自身防御，與昆蟲(chóng)的適應(yīng)演變協(xié)同進(jìn)化的結(jié)果。地球上植物種類(lèi)約30萬(wàn)種，植物中含有多種多樣的次生代謝物質(zhì)。借鑒中藥篩選現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一轉(zhuǎn)基因農(nóng)藥8100萬(wàn)公頃。有17個(gè)國(guó)家的近825萬(wàn)農(nóng)民種植，比2003年增加了125萬(wàn)。新增農(nóng)民中90%來(lái)自發(fā)展中國(guó)家。發(fā)展中國(guó)家絕對(duì)增長(zhǎng)幅度(720萬(wàn)公頃)首次超過(guò)發(fā)達(dá)國(guó)家(610萬(wàn)公頃)。中國(guó)370萬(wàn)公頃轉(zhuǎn)基因棉花(占66%)，比2003年增加了32%，占全球生物技術(shù)作物種植面積總額的5%。

現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一基因來(lái)源

植物來(lái)源的基因：蛋白酶抑制劑、淀粉酶抑制劑和外源凝集素基因；微生物來(lái)源：蘇云金芽孢桿菌（Bt）。轉(zhuǎn)Bt基因成功的物種有玉米、棉花、水稻、小麥、大豆、油菜、花生、向日葵、馬鈴薯、番茄、茄子、芹菜、芥菜、萵苣、白菜、花椰菜、卷心菜、胡蘿卜、豌豆、豇豆、黃瓜、甜瓜、蘋(píng)果、梨、甜橙、柑橘、葡萄、草莓、山楂、番木瓜、板栗、楊樹(shù)、落葉松、白云杉、楓香、歐洲黑楊、石竹、田旋花、長(zhǎng)春花、玫瑰、蘭花、矮牽牛、菊花、煙草、甜菜、苜蓿、薄荷、三葉草、甘蔗等。

動(dòng)物來(lái)源：蝎毒、蜘蛛毒素基因?，F(xiàn)在是32頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一天敵生物農(nóng)藥北京、廣州：人造卵赤眼蜂生產(chǎn)線歐洲：英國(guó)、荷蘭現(xiàn)在是33頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的應(yīng)用面對(duì)13億人口龐大的消耗體系，4億人進(jìn)城。是生物資源最為豐富的國(guó)家之一。是世界上最大的生物技術(shù)產(chǎn)品消費(fèi)市場(chǎng)之一。

1-2年內(nèi)若把轉(zhuǎn)基因水稻推向市場(chǎng)，每公頃節(jié)約投入600-1200元，挽回?fù)p失10%，每年減少21萬(wàn)噸農(nóng)藥，農(nóng)民增收138億元，中國(guó)將成為世界上第一個(gè)轉(zhuǎn)基因水稻商品化種植的國(guó)家？生物工程在生物農(nóng)藥研究開(kāi)發(fā)中大有可為！現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一1.前言

昆蟲(chóng)病毒是引起昆蟲(chóng)致病和死亡的重要病原體。最早關(guān)于昆蟲(chóng)病毒的記載是中國(guó)，在1149年出版的《農(nóng)書(shū)》中，就記載有家蠶的“高節(jié)”“腳腫”病，這就是現(xiàn)在所稱的核型多角體病毒病。現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2昆蟲(chóng)病毒的類(lèi)群病毒virus：一類(lèi)形態(tài)最小，結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物。由單一的核酸(RNA或DNA)組成中心核、核外包裹一層外殼蛋白組成。病毒病viraldisease：由病毒病原體引起的疾病。現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2.1昆蟲(chóng)病毒的基本特征

昆蟲(chóng)病毒的一般構(gòu)造：

-昆蟲(chóng)病毒是一類(lèi)沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造的生物體-主要組成是核酸和蛋白質(zhì)。-病毒個(gè)體稱為病毒粒子(virion)，由兩部分構(gòu)成：內(nèi)面是核心（core），成分為核酸；外層是衣殼(capsid)，成分是蛋白質(zhì)。有些衣殼外包被有囊膜。成分為脂類(lèi)。

核酸的功能是攜帶遺傳信息，決定病毒的遺傳變異性和傳染性。

蛋白質(zhì)的功能是保護(hù)核酸，并決定病毒的抗原性。現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一不同種類(lèi)病毒的結(jié)構(gòu)現(xiàn)在是38頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2.1昆蟲(chóng)病毒的基本特征

昆蟲(chóng)病毒的侵染活動(dòng)：在寄主外存在時(shí)沒(méi)有代謝、生長(zhǎng)和繁殖，只保留在適宜條件下侵染寄主的潛在能力。在不適宜的環(huán)境下活性較易喪失。

對(duì)溫度很敏感，在55℃－60℃時(shí)，病毒懸液幾分鐘內(nèi)就會(huì)變性。X-射線、γ-射線和紫外線照射能使病毒變性失活。有囊膜的病毒容易被脂肪溶劑破壞。一般常用甲醛等消毒劑來(lái)消毒被病毒污染的器皿和空氣。

現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2.2昆蟲(chóng)病毒的分類(lèi)

2.2.1分類(lèi)依據(jù)：

①形態(tài)學(xué)特征

囊膜的有無(wú)；病毒粒子的形狀、大?。粊嗭@微結(jié)構(gòu)等

②生物化學(xué)和生物物理學(xué)特征

核酸類(lèi)型、核酸特性、蛋白質(zhì)構(gòu)成以及隔成分的含量、分子量、浮力密度和沉降系數(shù)等

③生物學(xué)特征病毒入侵生物體的復(fù)制過(guò)程、寄主范圍和傳遞方式等現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2.2昆蟲(chóng)病毒的分類(lèi)2.2.2昆蟲(chóng)病毒的類(lèi)群：根據(jù)國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)（ICTV）1981年通過(guò)的分類(lèi)方案，所有已知病毒分為54個(gè)科和群，此外還包括5個(gè)建議的或可能的科和群。目前已經(jīng)明確分類(lèi)地位的昆蟲(chóng)病毒有11科?，F(xiàn)在是41頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2.3昆蟲(chóng)病毒的診斷鑒定

一般的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)方法：根據(jù)染病蟲(chóng)體的癥狀進(jìn)行診斷。凡是產(chǎn)生多角體的病毒類(lèi)型，用一般光學(xué)顯微鏡觀察而明確病毒的存在，并可采用某些染色方法來(lái)鑒別是哪一類(lèi)具包涵體的病毒。

生物鑒定方法：

通過(guò)感染試驗(yàn)方法鑒別病毒的存在，比如接種后能引起健蟲(chóng)發(fā)生同樣疾病?，F(xiàn)在是42頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一2.3昆蟲(chóng)病毒的診斷鑒定電子顯微鏡觀察

通常包括超薄切片技術(shù)、負(fù)染色技術(shù)和投影技術(shù)等。

血清學(xué)方法

該法可確定各個(gè)分離株的親緣關(guān)系，鑒別用一般方法難以區(qū)分的病毒。生物化學(xué)及分子生物學(xué)研究鑒定

現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3重要昆蟲(chóng)病毒的概述到1986年前為止：國(guó)內(nèi)外已從約1100種昆蟲(chóng)、螨類(lèi)中分出約1690種病毒我國(guó)已從約7目26屬190種昆蟲(chóng)中分離出234株病毒現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3重要昆蟲(chóng)病毒的概述已知昆蟲(chóng)病毒的寄主有鱗翅目、膜翅目、雙翅目、鞘翅目、直翅目、半翅目、同翅目、脈翅目、革翅目、毛翅目、蜉蝣目、蜻蜓目等，尤以鱗翅目為主要寄主。昆蟲(chóng)病毒中的包涵體病約占90％以上，其中鱗翅目寄主約為80％，雙翅目10％。在無(wú)包涵體病毒中，鱗翅目寄主占33％，雙翅目23％，鞘翅目18％，膜翅目2.5％現(xiàn)在是45頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3重要昆蟲(chóng)病毒的概述

目前已知至少有20余類(lèi)的昆蟲(chóng)病毒，但研究歷史最長(zhǎng)、防治應(yīng)用最廣的是桿狀病毒科中的核型多角體病毒和顆粒體病毒以及呼腸孤病毒科中的質(zhì)型多角體病毒。現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3.1核型多角體病毒(NPV)

核型多角體病毒(nuclearpolyhedrosisviruse,簡(jiǎn)稱NPV)是研究得最早和最為詳細(xì)的一類(lèi)昆蟲(chóng)病毒。到1986年為止，國(guó)內(nèi)外發(fā)現(xiàn)464株，中國(guó)約124株，其中78株為首次發(fā)現(xiàn)。在分類(lèi)上為桿狀病毒屬（Baculovirus）的A亞組。現(xiàn)在是47頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3.1核型多角體病毒(NPV)

一般形態(tài)特征：

-具有較大的包涵體，稱為多角體(polyhedra，簡(jiǎn)稱IB或PIB)，在被感染的細(xì)胞核內(nèi)形成。-多角體大小常因寄主昆蟲(chóng)種類(lèi)的不同而不同，甚至在統(tǒng)一寄主細(xì)胞內(nèi)，多角體的形狀大小也有區(qū)別。常見(jiàn)的形狀有三角形、四角形、五角形、立方體、不規(guī)則形等。現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是49頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一NPV病毒粒子的形態(tài)結(jié)構(gòu)

病毒粒子桿狀，所以又稱為病毒桿狀體。病毒粒子由外到內(nèi)：

囊膜（內(nèi)膜）——一層脂質(zhì)膜

衣殼（內(nèi)膜）——主要成分是蛋白質(zhì)

髓核——由DNA組成，呈螺旋狀后兩者加在一起成為核衣殼。在NPV中，通常一個(gè)囊膜內(nèi)由多個(gè)排列成束的核衣殼，稱為病毒束。一個(gè)品系的NPV，可能每個(gè)囊膜內(nèi)均只有一個(gè)核衣殼，也由可能每個(gè)囊膜內(nèi)由1到多個(gè)核衣殼而成為“病毒束”，前者稱為單粒包埋型病毒，后者稱為多粒包埋型病毒。現(xiàn)在是50頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是51頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一NPV的理化性狀不溶于水及多種有機(jī)溶劑如乙醇、乙醚、三氯甲烷、苯、丙酮等強(qiáng)酸或強(qiáng)堿溶液處理，能使多角體蛋白質(zhì)溶解。現(xiàn)在是52頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一NPV的理化性狀病毒粒子外有包涵體的保護(hù)，可在自然條件下存活多年仍不失效。對(duì)低溫有較高的忍受力。如家蠶NPV在–135℃～–150℃條件下反復(fù)凍結(jié)融解5次，其感染力不變。對(duì)高溫的抵抗力較差，如粉紋夜蛾NPV的失活溫度為82～88℃10min，棉鈴蟲(chóng)NPV的失活溫度為75～80℃10min，粘蟲(chóng)的NPV在100℃經(jīng)10min失活。現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一NPV對(duì)昆蟲(chóng)的侵染感病特征：以鱗翅目為例：

感病初期無(wú)明顯異常變化行動(dòng)遲緩食欲減退，體色變淡或呈油光病蟲(chóng)常爬向寄主植物高處，死前體軀變軟以腹足緊附枝葉倒掛而死皮膚則脆弱易裂，破后流出乳白色或褐色的濃稠液體，內(nèi)含大量新形成的核多角體?，F(xiàn)在是54頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一NPV的感染途徑卵期被病毒污染的蟲(chóng)卵在幼蟲(chóng)孵化時(shí)因吞食卵殼而感染。舞毒蛾剛孵化出的幼蟲(chóng)常因食人染有LdNPV的卵殼而致死。病死的初孵幼蟲(chóng)又為后期幼蟲(chóng)提供接種源。在幼蟲(chóng)期因LdNPV引起的死亡率常出現(xiàn)兩個(gè)高潮，一是在孵化后1～2周，一是在末齡幼蟲(chóng)期?，F(xiàn)在是56頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一NPV的感染途徑幼蟲(chóng)被感染后直至出現(xiàn)癥狀和病征的這段潛伏期受多種因素的影響。接種量少則潛伏期長(zhǎng)。幼蟲(chóng)齡期越后易感性一般較小，潛伏期也延長(zhǎng)。溫度顯著影響潛伏期長(zhǎng)短，如家蠶在正常室溫下5～7天就出現(xiàn)病征，16℃～17時(shí)15天內(nèi)不出現(xiàn)病征。較高的相對(duì)濕度也能誘發(fā)某些昆蟲(chóng)發(fā)生病毒病?，F(xiàn)在是57頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一

NPV的選擇性與專(zhuān)化性桿狀病毒曾以選擇性和專(zhuān)化性高而著稱，但試驗(yàn)證明一種昆蟲(chóng)的桿狀病毒能感染其他昆蟲(chóng)的事例并不少見(jiàn)。家蠶NPV能侵染柞蠶等11種昆蟲(chóng)。歐洲云杉卷葉蛾(Choristoneuramurinana)的NPV能侵染云杉卷葉蛾(C．funiiferana)、蘋(píng)果囊蛾、李食心蟲(chóng)、歐洲松梢卷葉蛾等。紅棕灰夜蛾(Sarcopoliailloba)NPV能侵染銀紋夜蛾、黃地老虎、粘蟲(chóng)等12種夜蛾科害蟲(chóng)。

現(xiàn)在是58頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一

NPV的交叉感染性一種昆蟲(chóng)也可合并感染兩類(lèi)不同的病毒，如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲(chóng)、粉紋夜蛾、云杉卷葉蛾等可合并感染核型多角體病毒和顆粒體病毒。粘蟲(chóng)合并感染NPV和GV時(shí)，GV能增強(qiáng)NPV的感染，有協(xié)同增效作用。有些合并感染則有干擾作用，如云杉卷葉蛾先感染的病毒妨礙后感染病毒的發(fā)展。

現(xiàn)在是59頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3.2顆粒體病毒(GV)

顆粒體病毒（granulosisvirus，簡(jiǎn)稱GV）在分類(lèi)上屬桿狀病毒科B亞組，是有包涵體的昆蟲(chóng)病毒。目前為止國(guó)內(nèi)外發(fā)現(xiàn)GV約130株，中國(guó)發(fā)現(xiàn)約42株，其中26株為首次發(fā)現(xiàn)。現(xiàn)在是60頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的一般形態(tài)特征包涵體稱顆粒體(granule)或莢膜(capsule)。先在被感染細(xì)胞的核內(nèi)形成，但當(dāng)核膜破裂后可溢出到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。包涵體很小。在電子顯微鏡下觀察，顆粒體的形狀有卵形、橢圓形、長(zhǎng)卵形等，通常直徑為0.1～0.3μm，長(zhǎng)0.3～1.0μm。每個(gè)包涵體內(nèi)一般只有一個(gè)病毒粒子。有時(shí)也出現(xiàn)不正常的形狀?，F(xiàn)在是61頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一

左圖：霜天蛾GV的形態(tài)

右圖：小菜蛾GV經(jīng)堿處理后的病毒粒子現(xiàn)在是62頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的理化性狀不溶于水和一般的有機(jī)溶劑如乙醚、乙醇、丙酮、二甲苯等。遇強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，包涵體能迅速溶解，并可使病毒粒子變性而失去侵染力。現(xiàn)在是63頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的理化性狀可在室溫下保存5年以上而不失侵染力。高溫可使其失活。冰凍無(wú)多大危害。較低的溫度有可能延長(zhǎng)貯存的時(shí)期。紫外線或其他輻射線能使完整的病毒失活。用稀堿處理后可獲得完整和具侵染性的病毒粒子。現(xiàn)在是64頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV對(duì)昆蟲(chóng)的侵染感病特征：

感染初期無(wú)明顯病征之后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍和停止取食隨后蟲(chóng)體顏色發(fā)生改變，血液漸變?nèi)榘赘胁∠x(chóng)體可能膨大或收縮已死幼蟲(chóng)體壁脆弱，破后流出大量顆粒體。染病幼蟲(chóng)可存活較長(zhǎng)時(shí)間。病死蟲(chóng)體有時(shí)用腹足倒掛枝葉上，呈“Λ”形。現(xiàn)在是65頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的感病特征染病幼蟲(chóng)常于幼蟲(chóng)期即死，有時(shí)也可活至蛹期或成蟲(chóng)期。從染病到死亡所經(jīng)時(shí)間因蟲(chóng)而異。一般4～5天，可長(zhǎng)至34天，如粘蟲(chóng)。幼蟲(chóng)齡期、侵染劑量、溫度等因素也能影響這段時(shí)期的長(zhǎng)短。現(xiàn)在是66頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的感染途徑通過(guò)口服進(jìn)入易感蟲(chóng)體，顆粒體在中腸中溶解，游離的病毒粒子通過(guò)腸道柱形細(xì)胞的微絨毛而侵入，在這些細(xì)胞核中增殖，新形成的顆粒體病毒釋放于血淋巴中而導(dǎo)致對(duì)其他組織的繼發(fā)感染。蟲(chóng)體外傷和寄生天敵產(chǎn)卵可引起GV對(duì)皮下感染，也可經(jīng)卵垂直傳播?，F(xiàn)在是67頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的專(zhuān)化性顆粒體病毒的專(zhuān)化性較強(qiáng)，交叉感染的情況甚為少見(jiàn)，一般認(rèn)為顆粒體病毒是包涵體病毒含DNA的各類(lèi)中專(zhuān)化性最強(qiáng)的一類(lèi)。以往尚無(wú)顆粒體病毒能在植物或其他動(dòng)物細(xì)胞中增殖的報(bào)道。近年我國(guó)用小菜蛾細(xì)胞系BCIRL-Px2-HNU3復(fù)制小菜粉蝶GV和用家蠶細(xì)胞系Bm-21E-HNU5復(fù)制小菜蛾GV成功。現(xiàn)在是68頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一GV的交叉感染現(xiàn)象鱗翅目幼蟲(chóng)可合并感染NPV和GV兩種病毒。如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲(chóng)等可同時(shí)感染顆粒體病毒和NPV。粘蟲(chóng)的六齡幼蟲(chóng)如單感染NPV，死亡率3.4％，單感染顆粒體病毒，死亡率20%，如二種合并感染，則死亡率為80％，死體為NPV病征，體內(nèi)主要是核型多角體，也有些同時(shí)存在顆粒體?，F(xiàn)在是69頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一3.3質(zhì)型多角體病毒(CPV)質(zhì)多角體病毒（cytoplasmicpolyhedrosisvirus，簡(jiǎn)稱CPV）的發(fā)現(xiàn)比NPV和GV都要遲。日本蠶病學(xué)家石森直人早于1934年就觀察到家蠶的中腸上皮細(xì)胞內(nèi)存在有多角體，但當(dāng)時(shí)并未確定是由一種新型病毒引起的。CPV可感染鱗翅目、雙翅目、膜翅目、鞘翅目、脈翅目5目昆蟲(chóng)，但主要見(jiàn)于鱗翅目和雙翅目。到1986年前國(guó)內(nèi)外已發(fā)現(xiàn)CPV228株，代表種為家蠶CPV?，F(xiàn)在是70頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一CPV作為殺蟲(chóng)劑應(yīng)用的不多，主要原因是只侵染中腸上皮細(xì)胞，在自然界中以慢性感染的地方病出現(xiàn)。如廣泛用于生物制劑尚須進(jìn)一步進(jìn)行安全試驗(yàn)研究。當(dāng)前CPV用于害蟲(chóng)防治實(shí)踐的有日本赤松毛蟲(chóng)(Dendrolimusspectabilis)CPV、?，F(xiàn)在是71頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一CPV的一般形態(tài)特征其包涵體和NPV相似，也是多角體，但只在被感染細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成。質(zhì)型多角體呈六角形、四角形、球形、橢圓形等。質(zhì)型多角體的直徑為0.5μm～25μm，1個(gè)多角體可包埋100～10000個(gè)病毒粒子。病毒粒子為球形二十面體，直徑為30nm～60nm，有內(nèi)、外兩個(gè)二十面殼，每個(gè)殼有12個(gè)小單位構(gòu)造。現(xiàn)在是72頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一1BmCPV的包涵體形態(tài)，右下為該包涵體的模式圖

2家蠶質(zhì)型CPV的包涵體形態(tài)，右上角為此包涵體的模式圖

3揚(yáng)雪毒蛾CPV的多角體掃描電鏡圖像

4舞毒蛾CPV包涵體的掃描電鏡圖像現(xiàn)在是73頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一CPV的理化性狀不溶于水，但在水中經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間可被蝕刻，而從表面失去粒子。在堿液中的溶解度比NPV多角體的溶解度為小，如以稀Na2CO3液或其他稀堿液處理，能失去表面病毒粒子，剩下不溶解的多角體，呈多孔的海綿狀。在堿液中很快被破壞，在從多角體中分離提純時(shí)須加注意。現(xiàn)在是74頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一CPV對(duì)昆蟲(chóng)的侵染感病特征：

早期食欲不振、體軀變小，有時(shí)蟲(chóng)體比例不當(dāng)，頭部顯得大。中腸中多角體的大量增殖使體色改變?yōu)辄S色或淡白色等。中腸細(xì)胞液化后，多角體可被嘔出或由糞便排出?，F(xiàn)在是75頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一

CPV的感染過(guò)程質(zhì)型多角體病毒被易感昆蟲(chóng)口服后或?qū)⒂坞x的病毒粒子注射入蟲(chóng)體血腔均可引起感染。病毒進(jìn)入蟲(chóng)體消化道后為堿性消化液溶解而釋放出粒子，繼而侵入中腸上皮細(xì)胞，在其細(xì)胞質(zhì)內(nèi)增殖，也可傳染至前后腸細(xì)胞。形成多角體后，有半數(shù)以上的病毒粒子不被包埋而游離，釋放到細(xì)胞間隙，再次感染健康細(xì)胞。最后細(xì)胞解體，多角體脫落在中腸腔。一般經(jīng)7～20天死亡。現(xiàn)在是76頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一

CPV的專(zhuān)化性

通常認(rèn)為質(zhì)型多角體病毒只感染中腸上皮細(xì)胞。一般認(rèn)為其寄主專(zhuān)化的程度似較多數(shù)含DNA病毒者為低。往往能超科感染，從不同寄主所獲分離毒株也有同種的可能。現(xiàn)在是77頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一4昆蟲(chóng)病毒的生產(chǎn)

病毒為專(zhuān)性寄生病原，至今尚未研究出能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，只能在活細(xì)胞中增殖。因此，目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用于害蟲(chóng)防治的昆蟲(chóng)病毒制劑主要是通過(guò)活蟲(chóng)體增殖和細(xì)胞培養(yǎng)法繁殖?，F(xiàn)在是78頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一4.1在昆蟲(chóng)活體中大量增殖昆蟲(chóng)病毒

3種途徑：直接在自然種群中繁殖

從野外采回大量活蟲(chóng)接種繁殖

在室內(nèi)條件下飼育大量害蟲(chóng)接種繁殖

可采用自然飼料或人工飼料。近年來(lái)，各種類(lèi)型的昆蟲(chóng)病毒包括NPV、CPV、GV和昆蟲(chóng)痘病毒等通過(guò)人工飼料飼育昆蟲(chóng)而增殖均獲得較好的成效。現(xiàn)在是79頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一4.2在細(xì)胞系中大量增殖昆蟲(chóng)病毒

用組織培養(yǎng)增殖的病毒在致病性、專(zhuān)化性及其他特性方面有無(wú)變異，尚待進(jìn)一步研究。同時(shí)，因組織培養(yǎng)法要求條件較嚴(yán)格，大量增殖病毒還存在不少問(wèn)題，目前尚未達(dá)到實(shí)用階段。

現(xiàn)在是80頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一4.3昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)實(shí)例1核多角體病毒殺蟲(chóng)劑2顆粒體病毒殺蟲(chóng)劑現(xiàn)在是81頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一4.3.1核多角體病毒殺蟲(chóng)劑

目前，核型多角體病毒是應(yīng)用最廣泛的昆蟲(chóng)病毒。在中國(guó)已進(jìn)入大田試驗(yàn)的生產(chǎn)示范的核多角體病毒殺蟲(chóng)劑有：棉鈴蟲(chóng)NPV、斜紋夜蛾NPV、油桐尺蠖NPV、茶黃毒蛾NPV、舞毒蛾NPV、美國(guó)白蛾NPV、楊尺蠖NPV、甘藍(lán)夜蛾NPV等?，F(xiàn)以斜紋夜蛾NPV為例，介紹NPV殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)工藝及流程?，F(xiàn)在是82頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)

斜紋夜蛾屬鱗翅目夜蛾科。分布很廣，遍及全國(guó)，危害植物達(dá)99科290種以上，在大田作物中，主要危害棉花、大豆、花生、芝麻、煙草、甘薯、甜菜、玉米、高粱、水稻等，在蔬菜中，主要危害甘藍(lán)、白菜等十字花科蔬菜和水生蔬菜，也危害芋頭，莧菜、馬鈴薯、番茄、辣椒、瓜類(lèi)、豆類(lèi)等?，F(xiàn)在是83頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)工藝1健康斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的人工飼養(yǎng)和管理

①人工飼料的成分：黃豆粉100g，山梨酸1.6g，麩皮100g，泥泊金1.6g，酵母粉40g，水1000ml，瓊脂12g，L-抗壞血酸4g

②卵管理：在幼蟲(chóng)孵化前一天，用5％福爾馬林溶液將卵塊浸泡15分鐘，無(wú)菌水漂洗3次，滅菌紙上晾干，移入盛有人工飼料的塑料盒里，放置25度條件下孵育。

現(xiàn)在是84頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一1健康斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的人工飼養(yǎng)和管理

③幼蟲(chóng)管理：

根據(jù)以幼蟲(chóng)的生活習(xí)性盒飼養(yǎng)密度的要求，把幼蟲(chóng)分為兩階段進(jìn)行飼養(yǎng)。①1－4齡幼蟲(chóng)飼養(yǎng)密度可為300粒－500粒/盒；②蟲(chóng)子養(yǎng)到4齡后，飼養(yǎng)密度要適當(dāng)調(diào)小。由于4－6齡幼蟲(chóng)蛻皮會(huì)吐水，造成容器濕度過(guò)大，影響生長(zhǎng)發(fā)育。所以相對(duì)濕度也應(yīng)適度調(diào)低?，F(xiàn)在是85頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一1健康斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的人工飼養(yǎng)和管理

④蛹的管理：將老熟幼蟲(chóng)放入自制的沙營(yíng)造蛹室（在已消毒的有紗蓋的木盒里，放入10cm高的已高溫消毒的沙子），待蛹體變黑后，挑取個(gè)體大，富有光澤，有活力的蛹，放入產(chǎn)卵箱羽化。

⑤成蟲(chóng)管理：

將蛹放入墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，移入紙制養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)，每籠放10對(duì)蛹，成蟲(chóng)交配產(chǎn)卵后收剪卵塊。現(xiàn)在是86頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)工藝2幼蟲(chóng)感染和回收

將飼養(yǎng)至4齡的幼蟲(chóng)，按一定的濃度進(jìn)行涂毒感染，飼養(yǎng)24小時(shí)后換無(wú)毒飼料。從感染后的第5天開(kāi)始收集病死蟲(chóng)。收集的死蟲(chóng)即使處理或放冰箱冷藏?，F(xiàn)在是87頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)工藝3病毒提取干燥

將病蟲(chóng)尸以1：10自來(lái)水混合，倒入電動(dòng)勻漿機(jī)研磨過(guò)濾，濾液經(jīng)差速離心法，離心3－4次，收集沉淀，漿沉淀按1：1加入填充劑存放－20℃下保存。取凍結(jié)的沉淀物機(jī)械粉碎，便可獲多角體干粉。經(jīng)顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)確定含量，存放于4℃冰箱備用。4產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)與藥效

含量－毒力測(cè)定－產(chǎn)品衛(wèi)生性檢測(cè)－產(chǎn)品安全性檢測(cè)現(xiàn)在是88頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一4.3.2顆粒體病毒殺蟲(chóng)劑

我國(guó)在基礎(chǔ)和應(yīng)用方面研究較詳細(xì)的顆粒體病毒有菜粉蝶GV，小菜蛾GV，黃地老虎GV，茶小卷葉蛾GV等，其中菜粉蝶GV列入國(guó)家“七五”攻關(guān)項(xiàng)目進(jìn)行研究，并完成了中試生產(chǎn)?，F(xiàn)在是89頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一菜粉蝶GV殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)

菜粉蝶為世界性重要害蟲(chóng)。其幼蟲(chóng)又名菜青蟲(chóng)，是我國(guó)分布最普遍，為害最嚴(yán)重，經(jīng)常成災(zāi)的害蟲(chóng)，幼蟲(chóng)偏嗜十字花科蔬菜，幼蟲(chóng)將葉片咬成孔洞和缺刻，嚴(yán)重發(fā)生時(shí)可將葉片全部吃光。現(xiàn)在是90頁(yè)\一共有97頁(yè)\編輯于星期一菜粉蝶GV的生產(chǎn)工藝1人工飼料飼養(yǎng)菜青蟲(chóng)

將菜粉蝶卵于人工模擬產(chǎn)卵卡上孵化后，人工飼料飼養(yǎng)至3齡，大部分用來(lái)增殖病毒，小部分繼續(xù)飼養(yǎng)傳代，每代21－28天。2感染回收將飼養(yǎng)的3齡菜青蟲(chóng)防于特制