分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題

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考試必備復(fù)習(xí)材料

分子生物學(xué)思考題

一、名詞解釋

1、C值矛盾2、DNA的重排3、斷裂基因4、管家基因5、奢靡基因6、CpG島7、反式作用因子8、順式作用元件9、RNA編輯10、選擇性剪接11、CAP12、回文序列13、micRNA14、信號(hào)肽15、弱化子16、加強(qiáng)子17、絕緣體18、默然子19、魔斑20、上游啟動(dòng)子元件21、SD序列22、物理圖譜23、功能基因組學(xué)24、增效突變25、減效突變26、轉(zhuǎn)化27、轉(zhuǎn)導(dǎo)28、轉(zhuǎn)染29、基因打靶30、DNA芯片31、反義核酸技術(shù)32、終止子

33、轉(zhuǎn)座子34、模體35、鋅指36、亮氨酸拉鏈37、cDNA文庫(kù)38、基因組文庫(kù)39、啟動(dòng)子40、終止子41、分子伴侶42、同尾酶43、同裂酶

44、Southern印跡45、Northern印跡46、Western印跡47、原位雜交48、基因治療49、基因敲除50、副密碼子

二、問(wèn)答題

PCR的基本原理？

PCR引物設(shè)計(jì)的基本要求？

分子克隆中常用的工具酶及良好載體的條件？

核酸分子雜交的原理？

影響雜交的因素？

DNA芯片的原理？

某學(xué)生在用EcoRⅠ切割外源片段時(shí)，出現(xiàn)了星號(hào)活性，請(qǐng)分析可能的原因?在序列5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一個(gè)6bp的Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶的識(shí)別序列，該位點(diǎn)的序列可能是什么?

下面幾種序列中你認(rèn)為哪一個(gè)(哪些)最有可能是Ⅱ類酶的識(shí)別序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA?為什么?

當(dāng)兩種限制性內(nèi)切核酸酶的作用條件不同時(shí)，若要進(jìn)行雙酶切，應(yīng)采取什么措施?為什么?

按適當(dāng)?shù)捻樞?，列出將一種mRNA的cDNA克隆到表達(dá)載體所用到的酶。簡(jiǎn)述以粘粒為載體構(gòu)建基因文庫(kù)的原理

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用限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA后，經(jīng)電泳檢查，發(fā)現(xiàn)有拖尾現(xiàn)象，其可能的原因是什么?

病毒、原核、真核基因組的特點(diǎn)？

詳述大腸桿菌色氨酸操縱子的調(diào)控機(jī)理。

乳糖操縱子的作用機(jī)制？

真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制？

真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制？

表觀遺傳學(xué)研究?jī)?nèi)容是什么？

表達(dá)由一段DNA序列形成多種蛋白產(chǎn)物的機(jī)制。

原核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要區(qū)別？

原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的異同？

哪三個(gè)序列對(duì)原核生物mRNA的確切轉(zhuǎn)錄是必不可少的？

激活蛋白（CAP）對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用？

什么叫原癌基因？原癌基因是通過(guò)什么途徑活化的？

簡(jiǎn)述人類基因組計(jì)劃成果表達(dá)的四個(gè)圖譜。

列出真核生物mRNA與原核生物mRNA的區(qū)別。

在體內(nèi)，rRNA和tRNA都具有代謝的穩(wěn)定性，而mRNA的壽命卻很短,原因何在?為什么真核生物核糖體RNA基因具有好多拷貝?

為什么說(shuō)信使RNA的命名源自對(duì)真核基因表達(dá)的研究，比說(shuō)源自對(duì)原核基因表達(dá)的研究更為恰當(dāng)?

說(shuō)明為什么mRNA僅占細(xì)胞RNA總量的一小部分(3％一5％)。

起始tRNA具有哪兩種與其他tRNA不同的特性?

區(qū)別rRNA和mRNA在翻譯中的作用。

氨基酸分子如何與正確的tRNA分子連接?

DNA復(fù)制起始過(guò)程如何受DNA甲基化狀態(tài)影響?

描述滾環(huán)復(fù)制過(guò)程及其特征。

比較真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄起始的第一步有什么不同。

闡述原核生物的轉(zhuǎn)錄終止。

(1)轉(zhuǎn)錄終止的兩種主要的機(jī)制是什么?

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(2)描述翻譯怎樣能調(diào)理轉(zhuǎn)錄終止。

(3)為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少涉及到Rho因子?

(4)怎樣能阻止轉(zhuǎn)錄的終止?

概括說(shuō)明σ因子對(duì)啟動(dòng)子調(diào)理的輔助功能。

轉(zhuǎn)錄涉及模板鏈和編碼鏈的分開(kāi)，解釋在轉(zhuǎn)錄中單鏈DNA是怎樣被保護(hù)的。解釋因子是怎樣選擇專一性啟動(dòng)子共有序列而啟動(dòng)不同基因表達(dá)的(考慮對(duì)環(huán)境壓力的應(yīng)答)

說(shuō)明因RNA聚合酶—啟動(dòng)子不同的相互作用如何導(dǎo)致不同基因的轉(zhuǎn)錄。列舉兩種受調(diào)控蛋白控制的、與氨基酸的生物合成有關(guān)的操縱子。

什么是安慰誘導(dǎo)物?

葡萄糖是如何影響涉及糖代謝的操縱子(葡萄糖敏感型操縱子)的表達(dá)?

在大多數(shù)細(xì)菌操縱子中，結(jié)構(gòu)基因?qū)こ＞o靠在一起并由單個(gè)操縱序列—啟動(dòng)子區(qū)調(diào)控，而在一些例子中結(jié)構(gòu)基因分散在染色體上。請(qǐng)問(wèn)這些基因是如何以簡(jiǎn)單的方式達(dá)到協(xié)同調(diào)理的。

為什么基因組DNA在用限制性內(nèi)切核酸酶消化時(shí)，哺乳類的衛(wèi)星DNA會(huì)產(chǎn)生特異的帶?

加強(qiáng)子具有哪些特點(diǎn)?

哪些轉(zhuǎn)錄因子含有TBP?為什么它們被稱為定位因子?請(qǐng)用一個(gè)模型解釋為什么所有三種RNA聚合酶都能與TBP發(fā)生作用?

RNA聚合酶的內(nèi)部啟動(dòng)子位于起始位點(diǎn)下游50個(gè)核苷酸的位置，它是如何被定位并正確起始轉(zhuǎn)錄的?

真核生物中，基因的表達(dá)受不同水平的調(diào)控，請(qǐng)列舉其中3種。

甾醇類轉(zhuǎn)錄因子與鋅指蛋白類轉(zhuǎn)錄因子的區(qū)別是什么?

亮氨酸拉鏈蛋白所識(shí)別的DNA有何特點(diǎn)?如何理解亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子的二聚體結(jié)構(gòu)同識(shí)別位點(diǎn)的關(guān)系?

雖然同源異型蛋白與鋅指蛋白區(qū)別很大，但是它們識(shí)別DNA序列的結(jié)構(gòu)元件相像的，這個(gè)元件是什么?

舉例說(shuō)明單鏈核酸中形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)的重要性

比較RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ催化的轉(zhuǎn)錄終止過(guò)程和轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物3’端的形成

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簡(jiǎn)述真核細(xì)胞中翻譯終止的過(guò)程。

真核與原核核糖體的主要區(qū)別是什么?

簡(jiǎn)述真核與原核細(xì)胞中翻譯起始的主要區(qū)別。

氨酰tRNA合成酶的功能是什么?

欲將一真核生物的結(jié)構(gòu)基因克隆后轉(zhuǎn)移到原核生物(如Ecoli中進(jìn)行表達(dá)，克隆時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題?

Prokaryoticpromoter與Eukaryoticpromoter的基本結(jié)構(gòu)。

Enhancer與Attenuator的功能與原理。

paracodon與codonincodon的特點(diǎn)與功能。

三、證明分析題

1、試證明一個(gè)基因中只有一條DNA鏈作為模板被轉(zhuǎn)錄。

2、經(jīng)過(guò)測(cè)序分析，欲克隆的一段DNA序列如下:GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACAAGGGGCTCCTATAATAGGTGCATTTGTAGGGGATGTGGCCACATGATAGCGCGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGCATGCTGCAGCGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTAAAAAAAGAATATCAAATAGCCATCCACCCGAAAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTACCAGCACACACCACAGTCGCCAGTCTGTTACCAAATAATAAAGTTGATAATTAATTCACATCTACCTGGGTAACCCAGGTAGATGTGAATTTTTAGAATTC這段序列被克隆到某多拷貝質(zhì)粒的一個(gè)EcoRI限制性位點(diǎn)，并表達(dá)了一個(gè)小肽，請(qǐng)找出這段序列中所含有的以下幾個(gè)功能位點(diǎn):

(1)兩個(gè)EcoRI位點(diǎn)

（2）一個(gè)啟動(dòng)子

(3)一個(gè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)

(4)一個(gè)轉(zhuǎn)錄終止子

(5)一個(gè)核糖體結(jié)合位點(diǎn)

(6)一個(gè)翻譯起始密碼子

(7)一個(gè)翻譯終止子

另請(qǐng)標(biāo)出相應(yīng)的調(diào)控序列及編碼區(qū)的氨基酸。

3、現(xiàn)分開(kāi)了一DNA片段，可能含有編碼多肽的基因的前幾個(gè)密碼子。該片段的

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序列

組成如下:

5'CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG3'

3'GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC5'

(1)哪一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板鏈?

(2)mRNA的順序是什么?

(3)此mRNA能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)嗎?

(4)翻譯從哪里開(kāi)始?朝哪個(gè)方向進(jìn)行?

(5)此DNA最可能是從原核細(xì)胞還是真核細(xì)胞中分開(kāi)的?

4、用含中性碳源(例如甘油)的液體基本培養(yǎng)基培養(yǎng)E.coli不能誘導(dǎo)lacZ操縱子。一小時(shí)后在培養(yǎng)基中參與乳糖和再隔一段時(shí)間加人過(guò)量的葡萄糖分別會(huì)對(duì)lac操縱子的表達(dá)有什么影響?

5、當(dāng)lacZ-或lacY-突變體生長(zhǎng)在含乳糖的培養(yǎng)基上時(shí)lacZ操縱子中剩余的基因沒(méi)有被誘導(dǎo)，解釋是何原因。

6、TFⅢA是5SrRNA基因表達(dá)所需的轉(zhuǎn)錄因子，這個(gè)蛋白含有9個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域，與5SrRNA基因內(nèi)的一段序列和5SrRNA本身結(jié)合。

(1)如何定位TFTA蛋白的DNA結(jié)合位點(diǎn)?

(2)什么樣