微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全課件

第3章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全潘建平教授第一節(jié)消毒滅菌常用術(shù)語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物

的方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的

病原微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細菌

生長繁殖的方法。清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污

穢以減少微生物數(shù)量的過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的

意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細菌進入人體

或其它物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。第二節(jié)消毒滅菌的方法一、物理消毒滅菌法

（一）熱力滅菌法

1.干熱滅菌法

焚燒；燒灼；干烤；紅外線

2.濕熱滅菌法

巴氏消毒法(pasteurization)；煮沸

法；流動蒸汽消毒法；間歇蒸汽滅菌

法(fractionalsterilization)；高壓蒸

汽滅菌法(autoclaving)（二）輻射殺菌法

1.紫外線：265～266nm最強

可使DNA鏈上兩個相鄰的胸腺嘧啶共價結(jié)合，形成二聚體，干擾DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。

2.電離輻射

3.微波（microwave）（三）濾過除菌法

1.濾菌器(filter）

液體除菌

2.空氣除菌采用生物潔凈技術(shù)（四）干燥與低溫抑菌法濾器和層流室二、化學消毒滅菌法（一）高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑；

3.醛類消毒劑；4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑（intermediate-leveldisinfectants）

1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）低效消毒劑（low-leveldisinfectants）

1.季銨鹽類；2.氯己定；3.高錳酸鉀固體二氧化氯消毒劑二、室內(nèi)空氣消毒滅菌

1.物理消毒法

①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2m的高效過濾裝置以除去細菌和帶菌塵埃。

2．化學消毒法

包括化學消毒劑噴霧和熏蒸：①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點燃煙熏。三、手和皮膚的消毒

用肥皂和流動水經(jīng)常并正確洗手

病原微生物污染時應(yīng)用消毒劑消毒。四、黏膜的消毒

五、病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

六、病人污染物品的消毒

七、飲水的消毒

八、環(huán)境的消毒

第四節(jié)病原微生物實驗室生物安全

生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。

狹義：指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。

廣義：指與生物有關(guān)的各種因素對社會、經(jīng)濟、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風險。

病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會所面臨的最現(xiàn)實的生物安全問題。

病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。

關(guān)于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任等。

一、病原微生物的分類

根據(jù)傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類：

第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物（29種）。

第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物（70種）。

二、病原微生物實驗室的分級級別處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。三級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。

一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。

從事高致病性病原微生物相關(guān)實驗活動應(yīng)當有２名以上的工作人員共同進行。在同一個實驗室的同一個獨立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實驗活動。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度。

實驗室工作人員應(yīng)掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護知識和實際操作技能。應(yīng)有符合要求的防護用品，應(yīng)建立健康檔案；進行預(yù)防接種。

實驗室應(yīng)有科學、嚴格的管理制度，定期對實驗室設(shè)施設(shè)備、材料等進行檢查、維護和更新，應(yīng)對廢水、廢氣以及其他廢物進行合理處置，防止環(huán)境污染。三、實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任

實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。

實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，預(yù)防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；②開展流行病學調(diào)查；③對病人進行隔離治療，對相關(guān)人員進行醫(yī)學檢查；④對密切接觸者進行醫(yī)學觀察；⑤進行現(xiàn)場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。

監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實驗室執(zhí)行國家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國家標準和要求的記錄、檔案及報告的情況。

法律責任的核心是承擔造成傳染病傳播、流行或者其他嚴重后果的法律責