億佰億3-婦科保健課件

陰道益生菌制劑及其應(yīng)用大連醫(yī)科大學(xué)微生態(tài)學(xué)研究所大連億佰億生態(tài)產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司康白袁杰力左振軍

醫(yī)學(xué)思想領(lǐng)域的革命第一次革命：機械醫(yī)學(xué)（治療醫(yī)學(xué)）第二次革命：生物醫(yī)學(xué)（預(yù)防醫(yī)學(xué)）第三次革命：生態(tài)醫(yī)學(xué)（保健醫(yī)學(xué)）微生態(tài)學(xué)發(fā)展的歷史回顧1681leeuwenhoek直接鏡檢1881Koch純培養(yǎng)技術(shù)1857Paster細菌發(fā)酵作用1886Escheric發(fā)現(xiàn)大腸桿菌群,嬰兒主導(dǎo)菌群1845-1916梅挈尼克夫斯基腸道菌群有害作用1890D?derlein發(fā)現(xiàn)德氏乳桿菌，奠定陰道微生態(tài)學(xué)的基礎(chǔ)1899Tisser發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌1900Moro發(fā)現(xiàn)乳酸桿菌,研究腸菌群分布，提出相關(guān)理論1935Eggerth發(fā)現(xiàn)類桿菌1945Fleming發(fā)現(xiàn)抗生素1945Reynier無菌動物飼養(yǎng)成功（悉生動物學(xué)的提出）1957Haenel改進厭氧培養(yǎng)技術(shù)1960Dubus原籍菌群與外籍菌群觀點的引入2002東京會議正常微生物群是人（動物）生存必須的一個系統(tǒng)

微生態(tài)學(xué)科的建立1977年，由西德的VolkerRush首先提出：微觀生態(tài)學(xué)，簡稱微生態(tài)學(xué)（microecology）概念1977年，康白、魏曦提出：生態(tài)防治（菌群調(diào)整理論）1979Vanderwaaij.提出：定植抗力理論1981kangbai提出：生物奪氧理論1985VolkerRush提出：微生態(tài)學(xué)是細胞水平或分子水平的生態(tài)學(xué)1988Xiangjinmin提出：分子生態(tài)學(xué)概念微生態(tài)學(xué)研究的意義微生態(tài)學(xué)是研究人體正常微生物群的結(jié)構(gòu)功能、及其與宿主相互關(guān)系的學(xué)說正常微生物群是生命的重要組成部分正常微生物群能增強宿主的免疫功能，增加營養(yǎng)，幫助消化，拮抗致病菌的定植和入侵正常菌群分布于全身各部位，其中陰道微生態(tài)是人體第二大的微生態(tài)系統(tǒng)人體微生態(tài)系統(tǒng)人體正常菌群種類達500余種數(shù)量達100萬億個（人體體細胞只有10萬億個）重量約1271克，相當(dāng)于肝臟的重量

99.9%是以雙歧桿菌和類桿菌為主的專性厭氧菌

0.1%是以腸桿菌科細菌為主的兼性厭氧菌1g1000g(78.67%)20g200g20g10g20g健康人腸道菌生理性演替腸道菌群的生理功能腸道菌群在腸肝循環(huán)中起重要作用腸道菌對營養(yǎng)代謝的影響腸道菌群的生物拮抗作用腸道菌群的免疫防衛(wèi)機制腸道菌群與有毒物質(zhì)的產(chǎn)生及清除陰道微生態(tài)生理學(xué)背景陰道道微生物菌群是一具龐大復(fù)雜性的生態(tài)系統(tǒng)10萬億個微生物100種類型大部分是未知的效果健康提升潛在的副作用微妙平衡可能被多樣因素所擾亂陰道微生物菌群對健康是重要的健康婦女陰道生理及微生態(tài)演替特征懷孕期及新生兒期青春期前青春期后閉經(jīng)期雌激素水平+++++++++pH酸性中性酸性中性O(shè)-R電位上升下降上升下降糖原含量+++++++++專性厭氧菌不利于其生長有利不利有利G-需氧菌不利于其生長有利不利有利細菌總數(shù)上升下降上升下降細菌總類上升下降上升下降陰道微生態(tài)平衡是菌群特點從總體上來說，專性厭氧菌的含菌量總數(shù)比需氧菌和兼性厭氧菌兩者菌數(shù)總和要高出10倍。專性厭氧菌中乳桿菌含量占優(yōu)勢。滴蟲在正常婦女陰道亦有檢出。臨床特點為無癥狀帶蟲現(xiàn)象。革蘭氏陰性桿菌：如陰道嗜血桿菌，類桿菌和梭桿菌在健康婦女的分離率為14—40%。這些菌與細菌性陰道病的發(fā)生有關(guān)。細菌性陰道病時這些菌比正常水平高100-1000倍。LacticacidH2O2VFAenzymesNH3、H2SIndolePhenolAminesnutrientsYYYYYMucosalimmunesystem陰道正常菌菌群的作用陰道微生態(tài)失調(diào)致病菌條件致病菌陰道乳桿菌在數(shù)量上處于絕對優(yōu)勢地位，是維持陰道微生態(tài)平衡的前提和基礎(chǔ)乳桿菌乳桿菌微生態(tài)平衡微生態(tài)失調(diào)內(nèi)源性感染外源性感染陰道菌群失調(diào)的生態(tài)防治微生態(tài)防治是指順應(yīng)機體微生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)及規(guī)律，因勢利導(dǎo)，通過綜合生態(tài)防治措施，改善宿主的微生態(tài)環(huán)境，重新建立微生態(tài)平衡。微生態(tài)防治的主要措施，原則上包括改善微生態(tài)環(huán)境；增強宿主的適應(yīng)性；合理、有效、短期的抗生素使用；提高宿主的定植抗力；使用益生菌制劑微生態(tài)調(diào)節(jié)劑等。其中益生菌制劑是微生態(tài)防治過程中使用的最有效手段和武器。1、盡量選用不干擾或少干擾機體定植抗力的抗生素

2、應(yīng)選擇有針對性的窄譜抗生素，短療程適當(dāng)劑量使用

3、盡量選用胃腸道外給藥途徑

4、在使用抗生素的同時使用益生菌制劑（邊抗邊調(diào)）

5、使用抗生素后應(yīng)用益生菌調(diào)整（先扛后調(diào)）合理應(yīng)用抗生素原則

應(yīng)用益生菌制劑

益生菌制劑能直接補充機體的正常菌群或選擇性刺激正常菌群的生長繁殖，從而競爭性抑制潛在致病菌的過度生長及定植，提高腸道的定植抗力，防治細菌和/或內(nèi)毒素移位。又稱益生菌制劑的生態(tài)療法。益生菌的定義益生菌(Probiotics)又稱生態(tài)制品、活菌制劑。1977年Spert把益生菌描述為能促進腸道菌群平衡的微生物或促進物質(zhì)。1989年，F(xiàn)uller把益生菌定義為能夠促進腸內(nèi)菌群生態(tài)平衡，對宿主起有益作用的活的微生物制劑。2002年，益生菌是活的微生物，通過攝入充足的數(shù)量，對宿主產(chǎn)生一種或多種特殊且經(jīng)論證的功能性健康益處。（歐洲食品與飼料菌種協(xié)會2002）陰道益生菌生產(chǎn)菌株的篩選益生菌菌株的分離和選種益生菌菌株的活性和活存能力對菌株生產(chǎn)性能的考察益生菌對體內(nèi)環(huán)境耐受能力黏附和定植能力的研究抗微生物能力的研究健康效果國內(nèi)治療用益生菌制劑的狀況陰道益生菌藥用制劑德氏乳桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌。陰道生態(tài)消毒劑雙歧因子、含菌制劑、代謝產(chǎn)物、中藥制劑陰道乳桿菌活菌制劑早在1915年，就有人提倡用乳桿菌培養(yǎng)物進行膀胱灌洗治療重度膀胱炎，并獲得較好的療效。在抗生素時代之前，不論是在民間或是在醫(yī)療界，使用乳桿菌培養(yǎng)物沖洗陰道法治療急性淋菌性外陰陰道炎成功的例子是很多的。70年代，80年代英國，美國等發(fā)達國家也相繼有了關(guān)于使用乳桿菌治療陰道炎的報道。1978年德國報道用乳桿菌治療滴蟲性陰道炎，應(yīng)用乳桿菌治療一年后96%再檢查，92.5%臨床完全治愈。近年來，我國關(guān)于乳桿菌制劑治療各種陰道炎的報道也較多。1999年北京協(xié)和醫(yī)院用乳桿菌活菌膠囊治療細菌性陰道炎與滅滴靈相比較。結(jié)果提示：乳桿菌活菌膠囊是治療細菌性陰道病的安全有效藥物，治療效果肯定，與滅滴靈相比無顯著性差異。乳桿菌制劑在細菌性陰道病治療中的應(yīng)用細菌性陰道病（BV)是陰道微生態(tài)環(huán)境內(nèi)菌群與分泌物生化性質(zhì)變化引起的常見陰道疾病，表現(xiàn)為正常陰道乳桿菌數(shù)量減少而代之以陰道加德納氏菌等兼性厭氧菌、厭氧菌數(shù)量增加并伴隨分泌物pH升高等重要生化成分變化的臨床癥候群。1915年newmen提倡用乳桿菌培養(yǎng)物治療重癥膀胱炎。1933年用人利用doderlleins菌治療外陰陰道炎。80年代以后有大量利用乳桿菌治療BV的實例。1999年，中國第一個用于治療BV的德氏乳桿菌制劑獲國家新藥證書。乳桿菌新藥研究的目的陰道炎是婦女常見病、多發(fā)病，臨床上常以抗生素治療，但效果不理想。抗生素的應(yīng)用本身即可引起菌群失調(diào)，致使此病遷延不愈，給患者帶來巨大痛苦。從微生態(tài)學(xué)的角度出發(fā)，通過生態(tài)制劑調(diào)整療法扶正和保護陰道內(nèi)的正常菌群的組成和比例，恢復(fù)其自然的抵抗外來菌侵擾的能力，促進其本身的自凈作用是治療此類疾病的一種方向。本研究目的是調(diào)查婦女陰道的菌群情況、闡明陰道菌群與婦女陰道疾病的關(guān)系、開發(fā)出一種用于防治婦女陰道細菌病及陰道菌群失調(diào)的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑。研究成果的意義把德氏乳桿菌乳酸亞種作為陰道益生菌制劑，從立題、實驗設(shè)計、立項到微生物學(xué)、微生態(tài)學(xué)、藥效學(xué)、藥代動力學(xué)、生產(chǎn)工藝及臨床學(xué)研究，國外雖有報導(dǎo)，但正式把乳桿菌作為國家級類新生物制品用于陰道病的治療，這還是首次。該項研究對健康陰道的微群落及微生態(tài)系(microecosystem)進行了比較全面和系統(tǒng)的研究。乳桿菌是陰道優(yōu)勢微種群，其他微種群如腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、酵母菌及支原體均為劣勢種群，研究指出在妊娠的早期、中期及晚期，陰道內(nèi)的乳桿菌逐漸增加。陰道乳桿菌是妊娠過程中重要生理指標之一，并且是防御感染一個手段。本研究為陰道細菌病的防治提供理論指導(dǎo)。本研究成功的分離出一株產(chǎn)乳酸和過氧化氫的德氏乳桿菌并闡明其防治陰道細菌病的作用機制。為乳桿菌在防治陰道疾病方面提供了新的實例。本研究開發(fā)出一個用于治療細菌性陰道炎、非特異性陰道炎或菌群失調(diào)性陰道炎及滴蟲性陰道的國家生物制品新藥。可大規(guī)模應(yīng)用于臨床為廣大病人解除痛苦并可產(chǎn)生巨大的社會和經(jīng)濟效益。國內(nèi)外技術(shù)對比據(jù)本成果完成后查新結(jié)果表明國外雖有多篇報導(dǎo)，但正式把德氏乳桿菌作為國家級生物制品新藥用于陰道病的治療，這還是首次。國內(nèi)有關(guān)微生態(tài)調(diào)節(jié)劑治療陰道細菌病的研究報道多數(shù)是本研究成果的報道。少數(shù)單位也在開展此方面的研究。2009年本制劑研究目前已獲國家發(fā)明專利。研究的簡要過程

對不同年齡健康婦女的正常陰道菌群進行定性及定量分析;對各種確診的陰道炎患者陰道菌群進行定性與定量分析;由健康陰道分離優(yōu)勢細菌種群，篩選生產(chǎn)菌種進行菌種分離、鑒定、生物特性、代謝產(chǎn)物、耐藥性、代謝物、過氧化氫產(chǎn)生及質(zhì)粒檢測等;微生物學(xué)研究包括粘附、定植、生物拮抗、模型試驗、安全試驗、穩(wěn)定試驗和刺激試驗;微生態(tài)調(diào)節(jié)劑的生產(chǎn)工藝研究包括種子、發(fā)酵、凍干和制劑產(chǎn)品穩(wěn)定性及工藝穩(wěn)定性等方面的研究;臨床研究共進行500余例的人體觀察;本研究取得的主要成就（1）

該項研究對健康陰道的微群落及微生態(tài)系進行了比較全面和系統(tǒng)的研究。研究結(jié)果作為此項總課題的基礎(chǔ)資料。研究結(jié)果證明，乳桿菌是陰道優(yōu)勢微種群，其他微種群如腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、酵母菌及支原體均為劣勢種群。研究結(jié)果表明，在妊娠的早期、中期及晚期，陰道內(nèi)的乳桿菌逐漸增加。陰道乳桿菌是妊娠過程中重要生理指標之一，并且是防御感染一個手段。細菌性陰道炎(BV)、非特異性陰道炎(NSV)或菌群失調(diào)性陰道炎(DV)都出現(xiàn)一定的陰道菌群失調(diào)現(xiàn)象，其主要表現(xiàn)是乳桿菌減少或消失，其他種增多或比例失調(diào)。本研究取得的主要成就（2）

作用機制研究闡明DM8909菌株與以下4個因素有關(guān)：

1）粘附占位：DM8909菌株在陰道上皮細胞表面特異性占位，可以阻礙陰道其他種群對粘膜上皮細胞的粘附。DM8909在酸性環(huán)境下更易粘附于陰道上皮細胞表面。2）粘附抑制：DM8909菌株對其他陰道種群的粘附有抑制作用。可以將已粘附的大腸桿菌排斥掉。3）乳酸的產(chǎn)生：DM8909菌株能產(chǎn)生大量乳酸、降低陰道pH，抑制其他陰道種群，保持陰道清潔度。4）H2O2的產(chǎn)生：DM8909菌株能產(chǎn)生H2O2它具有“保護自己排除異已”的作用，是乳桿菌在陰道內(nèi)保持優(yōu)勢地位的重要因素之一。本研究取得的主要成就（3）5藥代動力學(xué)、藥效學(xué)及安全性研究指出：“億佰億”是一個無毒、無害、安全且有效的生態(tài)制劑。6生產(chǎn)工藝研究表明：“億佰億”生產(chǎn)菌種DM8909菌株可以進行大罐發(fā)酵，并投入工業(yè)化生產(chǎn)。7臨床研究證明：“億佰億”是一個局部及全身(肝、腎、血檢查)無副作用的生態(tài)制劑。對細菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎均有較好的療效。與現(xiàn)行的滅滴靈(對照組)比較，其療效優(yōu)于或不亞于滅滴靈，而且復(fù)發(fā)率低，無抗生素固有的耐藥性、引起菌群失調(diào)及毒性反應(yīng)等副作用。“億佰億”對細菌性陰道炎的總有效率達92.0%；而滅滴靈為83.7%，對滴蟲性陰道炎的總有效率達96.7%。8乳桿菌抗生素敏感試驗天然耐藥（與耐藥性質(zhì)粒無關(guān)）

滅滴靈、SMZ-co、頭孢甲氧霉素、克霉唑高度敏感麥迪霉素、慶大霉素、妥布霉素、青霉素、氨芐青霉素、鏈霉素、新霉素、四環(huán)素、痢特靈、氯霉素中度敏感

多粘菌素、羧芐青霉素、丁胺卡那霉素本研究取得的主要成就（4）乳桿菌制劑對滴蟲性陰道炎的治療應(yīng)用1977年德國報道444例滴蟲性陰道炎患者應(yīng)用乳桿菌治療一年后，96%人檢查有92.5%臨床完全治愈。1997年鄧燕杰用乳桿菌制劑治療滴蟲性陰道炎起3個月治愈率高于甲硝唑。陰道生態(tài)平衡與艾滋病的預(yù)防許多報告證明，不同種類的乳桿菌具有不同水平的保護陰道的作用。L.Martin報告用乳桿菌制劑“幸福來客”的肯尼亞妓女，有1/3無乳桿菌定植的人攜帶HIV。然而只有不帶產(chǎn)生H2O2的乳桿菌的婦女發(fā)生一定水平的HIV感染率。Hillier提出，陰道正常生態(tài)平衡有防止