生物必修一實驗檢測生物組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì)

生物必修一實驗檢測生物組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì)第1頁/共19頁檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實驗第二章組成細(xì)胞的分子第2頁/共19頁

應(yīng)用某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。實驗原理還原糖（葡萄糖、果糖、麥芽糖）+斐林試劑→磚紅色沉淀Cu2O脂肪+

蘇丹Ⅲ→橘黃色

蘇丹IV→紅色蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑→紫色絡(luò)合物實質(zhì)：在堿性條件下，蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng)生成紫色或紫紅色絡(luò)合物。第3頁/共19頁基本步驟選材→樣液制備→加入試劑→顏色反應(yīng)→觀察→結(jié)果→結(jié)論選材的原則實驗現(xiàn)象明顯（富含檢測之物，避免干擾）；便于處理，易獲得；經(jīng)濟節(jié)約；第4頁/共19頁實驗一：還原性糖的鑒定1、選材：

含糖較高、顏色為白色或近于白色的植物組織，蘋果、梨最好。2、制樣：

蘋果切塊→研磨→過濾→濾液4、檢測：

3、試劑：

甲液：0.1g/mLNaOH

乙液：0.05g/mLCuSO4

組織樣液（2ml）→斐林試劑（1ml）→

振蕩混勻→50℃~65℃水浴加熱2min；

→觀察試管中溶液顏色的變化第5頁/共19頁實驗一：還原性糖的鑒定第6頁/共19頁注意事項1.斐林試劑不穩(wěn)定，需混勻后使用！2.本實驗對試管中的溶液進行加熱時，試管底部不要接觸燒杯底部；3.另外，試管口不要朝向?qū)嶒炚撸悦夥序v的溶液沖出試管，造成燙傷。實驗一：還原性糖的鑒定第7頁/共19頁還原糖的檢測結(jié)果第8頁/共19頁檢測方法實驗二：脂肪的鑒定方法一：用蘇丹染液檢測組織樣液方法二：制作子葉臨時切片，顯微觀察子葉細(xì)胞的著色情況。特別提醒：

實驗用的花生種子需提前浸泡3-4h,浸泡時間太短，不易切片;浸泡時間太長，則組織太軟，切下的薄片不易成形。第9頁/共19頁取材：花生種子(浸泡3～4h），將子葉削成薄片制片①取最理想的薄片②在薄片上滴蘇丹Ⅲ染液（2～3min）③去浮色（如何去浮色）④制成臨時裝片實驗二：脂肪的鑒定1-2滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液觀察低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，然后用高倍鏡觀察結(jié)果及結(jié)論：圓形小顆粒呈橘黃色，說明有脂肪存在。第10頁/共19頁脂肪的檢測結(jié)果第11頁/共19頁1、選材：

2、制樣：

4、檢測：

3、試劑：

實驗三：蛋白質(zhì)的鑒定

浸泡1-2天的黃豆種子（或用豆?jié){）或用雞蛋蛋白黃豆浸泡切片→研磨→過濾→濾液A液：0.1g/mLNaOH

B液：0.01g/mLCuSO4

組織樣液（2ml）→雙縮脲試劑A

（1ml）

→雙縮脲試劑B

（4滴）→觀察溶液顏色的變化第12頁/共19頁實驗三：蛋白質(zhì)的鑒定第13頁/共19頁以造成堿性環(huán)境思考：為什么要先加入A液再入B液？注意事項：1、如果用雞蛋清，應(yīng)加以稀釋，若稀釋不夠，與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不徹底，且試管不易洗干凈。2、鑒定之前,可以留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色變化作對比,這樣可以增強說服力。作對照第14頁/共19頁蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果第15頁/共19頁還原糖蛋白質(zhì)淀粉脂肪來自那種生物材料A+++-----梨B--++++++黃豆C++++++--馬鈴薯D--++++++花生成分待側(cè)樣品實驗記錄第16頁/共19頁1、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加3～4滴而不能過量？

過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。2、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？

時間太長，Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。深化第17頁/共19頁比較斐林試劑與雙縮脲試劑不同點斐林試劑雙縮脲試劑成分甲液乙液A液B液鑒定物質(zhì)使用方法反應(yīng)條件反應(yīng)現(xiàn)象0.1g/mlNaOH蛋白質(zhì)等量混合，現(xiàn)配現(xiàn)用先加A液1ml,創(chuàng)造堿性環(huán)境，再加B液