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微生物細(xì)胞的大小測(cè)定第1頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六
一、目的要求
1.學(xué)習(xí)并掌握用測(cè)微尺測(cè)定微生物大小的方法;2.了解目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的原理;第2頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六二、實(shí)驗(yàn)器材及用品1、菌種:酵母菌2、儀器或其它用具:
目鏡測(cè)微尺,鏡臺(tái)測(cè)微尺,顯微鏡。第3頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六
三、基本原理
微生物細(xì)胞大小,是微生物的形態(tài)特征之一,也是分類鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小,只能在顯微鏡下測(cè)量。用來測(cè)量微生物細(xì)胞大小的工具有目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺。鏡臺(tái)測(cè)微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片。一般將1mm等分為100格,每格長(zhǎng)度等于0.01mm(即10μm)。是專用于校正目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度的。第4頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六目鏡測(cè)微尺是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片,其中央刻有精確的刻度,有等分50小格或100小格兩種,每5小格間有一長(zhǎng)線相隔。由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同,目鏡測(cè)微尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度也就不同,因此,目鏡測(cè)微尺不能直接用來測(cè)量微生物的大小,在使用前必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺進(jìn)行校正,以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡下該目鏡測(cè)微尺每小格的相對(duì)值,然后才可用來測(cè)量微生物的大小。第5頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六四、操作步驟1、裝目鏡測(cè)微尺2、校正目鏡測(cè)微尺(1)放鏡臺(tái)測(cè)微尺將鏡臺(tái)測(cè)微尺刻度面朝上放在顯微鏡載物臺(tái)上。(2)先用低倍鏡觀察,將鏡臺(tái)測(cè)微尺有刻度的部分移至視野中央,調(diào)節(jié)焦距,當(dāng)清晰的看到鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度后,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡使目鏡測(cè)微尺的刻度與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行。利用移動(dòng)器移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺,使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩線完全重合,然后分別數(shù)出兩重合線之間鏡臺(tái)測(cè)微尺和目鏡測(cè)微尺所占格數(shù)。用同樣的方法換成高倍鏡和油鏡進(jìn)行校正,分別測(cè)出在高倍鏡和油鏡下,兩重合線之間兩尺分別所占格數(shù)。第6頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六
顯微測(cè)微尺第7頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六第8頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六(3)計(jì)算
由于已知鏡臺(tái)測(cè)微尺每格長(zhǎng)10um,根據(jù)公式
目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度(um)=兩條重合線間鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)×10/兩重合線間目鏡測(cè)微尺的格數(shù)
即可分別計(jì)算出在不同放大倍數(shù)下,目鏡測(cè)微尺每格所代表的長(zhǎng)度。第9頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六低倍鏡下-------倍目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度為----------高倍鏡下-------倍目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度為----------油鏡下----------倍目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度為----------第10頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六3、菌體大小測(cè)定先用低倍鏡和高倍鏡找到標(biāo)本后,換高倍鏡測(cè)定酵母菌的直徑。測(cè)定時(shí),通過轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺和移動(dòng)載玻片,測(cè)出酵母菌直徑或?qū)捄烷L(zhǎng)所占目鏡測(cè)微尺的格數(shù)。最后將所測(cè)得的格數(shù)乘以目鏡測(cè)微尺每格所代表的長(zhǎng)度,即為該菌的實(shí)際大小。第11頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六注意事項(xiàng)1、鏡臺(tái)測(cè)微尺的玻片很薄,在標(biāo)定油鏡時(shí),要格外注意,以免壓碎鏡臺(tái)測(cè)微尺或損壞鏡頭;2、標(biāo)定目鏡測(cè)微尺時(shí),一定要準(zhǔn)確對(duì)正目鏡測(cè)微尺與鏡臺(tái)測(cè)微尺的重合線。第12頁,共13頁,2023年,2月20日,星期六
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告
1.將目鏡測(cè)微尺校正結(jié)果填入表格中;2.在高倍鏡下測(cè)量酵母菌的大小,填入表
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