糖類藥物進展專家講座

Welcometo化學(xué)生物學(xué)!Prof.Dr.YujianHe糖類藥物進展第1頁AdvancesinCarbohydrateDrugsandCarbohydrateVaccines糖類藥品與疫苗研究進展依據(jù)葉新山教授講義修改糖類藥物進展第2頁Partone糖類藥品研究進展糖類藥物進展第3頁糖類藥品概念糖類藥品概念由普通糖類藥品拓展到以糖類為基礎(chǔ)藥品；含糖結(jié)構(gòu)糖藥品作用于糖類、糖相關(guān)結(jié)合蛋白、糖加工酶藥品糖類藥物進展第4頁Carbohydrate-baseddrugs,Carbohydratedrugs:糖類或類似物組成；Carbohydrate-modifieddrugs:糖修飾藥品（蛋白、多肽、生物堿、抗生素）；iii.Carbohydratesusedindrugtargetinganddelivery用于藥品尋靶和藥品轉(zhuǎn)運糖類化合物.含糖結(jié)構(gòu)糖類藥品糖類藥物進展第5頁i.基于糖類藥品(Carbohydrate-baseddrugs)肝素抗凝藥品、多糖疫苗、氨基糖苷抗生素、糖尿病藥品等糖類藥物進展第6頁ii.糖修飾藥品(Carbohydrate-modifiedDrugs)糖基化現(xiàn)象是十分普遍現(xiàn)象；糖基作用：增加溶解性、調(diào)整血漿半衰期、提升結(jié)合特異性；改變母體藥品藥理活性糖修飾藥品一些例子

蛋白、多肽糖基化修飾；重組糖蛋白酶催化修飾技術(shù)，蛋白質(zhì)藥品糖類藥物進展第7頁iii.含有藥品轉(zhuǎn)運作用糖類化合物(Carbohydratesasdrugdeliveryagents)藥品尋靶(Drugtargeting)藥品轉(zhuǎn)運(Drugdelivery)多糖：生物兼容性、物理性質(zhì)黏合劑、填充劑；微囊包裹，緩釋環(huán)糊精特點及藥品轉(zhuǎn)運糖類藥物進展第8頁糖類藥品作用位點胃腸道受體(Gastrointestinalreceptors)血清受體(Serumreceptors)糖苷（水解）酶－－直鏈淀粉酶、蔗糖酶、乳糖酶糖尿病治療藥品糖結(jié)合蛋白免疫球蛋白：超級免疫排斥抗凝血酶、凝血因子：肝素作用靶點細(xì)胞生長因子：硫酸化多糖糖類藥物進展第9頁細(xì)胞表面受體(Cell-surfacereceptors)細(xì)胞表面糖蛋白糖鏈細(xì)胞與細(xì)胞，細(xì)胞與胞外間質(zhì)，小分子與細(xì)胞糖鏈與糖鏈、與蛋白相互作用炎癥反應(yīng)－抗炎藥品腫瘤轉(zhuǎn)移和預(yù)后標(biāo)志信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，信號通道，基因表示改變凝集素葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白離子通道糖蛋白重新攝取相關(guān)糖類藥物進展第10頁細(xì)菌和病毒受體(Bacterialandviralreceptors)細(xì)胞表面糖鏈?zhǔn)俏⑸铩⒉《菊掣轿稽c深入引發(fā)宿主感染模擬細(xì)胞表面糖結(jié)構(gòu)、作用糖類分子---預(yù)防、減輕感染例：唾液酸結(jié)構(gòu)---神經(jīng)氨酸酶抑制劑感冒病毒糖類抗感染藥品不易引發(fā)微生物、病毒抗藥性與傳統(tǒng)抗感染藥品作用機理不一樣HIV對宿主細(xì)胞感染抑制；SARS病毒對呼吸道和肺部細(xì)胞感染；將細(xì)菌、病毒侵害抑制在第一時間糖類藥物進展第11頁細(xì)胞內(nèi)受體(Intracellularreceptors)細(xì)胞外間質(zhì)(Extracellarmatrix)糖加工酶，控制細(xì)胞內(nèi)代謝反應(yīng)糖基轉(zhuǎn)移酶溶酶體水解酶糖類化合物調(diào)控腫瘤、病毒感染、基因缺點癥RNA,DNA靶點氨基糖苷類抗生素、烯二炔類抗生素高分子量多糖：透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、硫酸角質(zhì)素、硫酸皮膚素慢性疾病：骨關(guān)節(jié)炎，視網(wǎng)膜黃斑變性細(xì)胞外間質(zhì)多糖降解：腫瘤轉(zhuǎn)移信號酶抑制劑糖類藥物進展第12頁二、糖類藥品類型1、按起源分類：天然起源糖類藥品：來自植物和真菌等微生物多糖；各種糖苷類化合物，中藥中有效成份，含糖抗菌素等；來自動物體內(nèi)寡糖、糖復(fù)合物及其降解產(chǎn)物；以糖、糖蛋白、糖酶為靶天然藥品，如凝集素，糖酶抑制劑等合成起源糖類藥品：在天然糖類結(jié)構(gòu)上進行化學(xué)修飾、半合成糖類藥品；全合成糖苷、寡糖及糖綴合物藥品；糖類藥物進展第13頁2、依據(jù)組成份類：簡單糖類藥品：相對復(fù)合糖類而言，不含有糖類以外其它成份；不一樣起源多糖、寡糖和糖苷糖類藥物進展第14頁簡單糖類藥品糖類藥物進展第15頁糖苷類藥品：中藥、植物藥有效成份－強心苷、皂苷、黃酮苷、氰苷等氨基糖苷類抗生素等糖類藥物進展第16頁人參皂苷結(jié)構(gòu)糖苷類藥品糖類藥物進展第17頁糖苷類藥品部分糖苷類藥品有效成份為苷元(配糖體)；而大部分糖苷類藥品生物效應(yīng)是糖基和苷元協(xié)同作用結(jié)果。糖類藥物進展第18頁糖蛋白類藥品：這類藥品中，發(fā)揮生物學(xué)作用主要是蛋白質(zhì)部分，而不是糖部分，但糖部分對于糖蛋白作用也是十分主要，如決定了蛋白部分構(gòu)象穩(wěn)定性，影響蛋白質(zhì)在體內(nèi)吸收和代謝，假如去除糖基部分，則蛋白藥品活性會下降或喪失。蛋白、多肽糖基化修飾；重組糖蛋白酶催化修飾技術(shù)；EPO酶催化糖基修飾技術(shù)糖類藥物進展第19頁蛋白聚糖類藥品：肝素類藥品(HeparinandHeparanSulfate)Heparin重復(fù)序列Heparansulfate重復(fù)序列糖類藥物進展第20頁擬糖復(fù)合物藥品(neoglycoconjugates)：以糖鏈或含糖片斷修飾蛋白、糖脂、蛋白聚糖等大分子，形成新結(jié)構(gòu)、新功效擬糖復(fù)合物。擬糖脂擬蛋白聚糖Glycodanderimer糖高聚物(glycopolymers)糖類藥物進展第21頁三、糖類藥品幾個發(fā)展趨勢1、開辟廣泛糖類藥品起源糖類化合物庫和復(fù)雜糖鏈合成生物大分子核酸肽和蛋白質(zhì)糖類化合物DNA庫(數(shù)據(jù)庫和分子庫)RNA庫(數(shù)據(jù)庫和分子庫)基因組學(xué)隨機肽庫蛋白質(zhì)組學(xué)糖庫(數(shù)據(jù)庫和分子庫)糖組學(xué)？糖類藥物進展第22頁Glycomics糖組學(xué)(I)---CarbohydrateMicroarry糖類化合物固載化方法糖類藥物進展第23頁Glycomics糖組學(xué)(I)---CarbohydrateMicroarry糖類藥物進展第24頁構(gòu)建糖庫路徑和方法天然起源糖類化合物：天然多糖酶解、化學(xué)降解、部分水解法合成方法化學(xué)合成酶促合成糖肽庫構(gòu)建糖庫構(gòu)建難度；糖庫表征難度(單一分子結(jié)構(gòu)確證，組成均一性)；糖類藥物進展第25頁糖類藥品模擬糖類化合物合成難度極大！隨機肽庫DNA,RNA庫篩選糖類模擬物小分子化合物庫SialylLex

模擬物1和2與E-selectin親和力比sLex分別高10和20倍.糖類藥物進展第26頁開發(fā)海洋糖類藥品資源藻類資源：海藻膠，卡拉膠酸性多糖－凝集素配體－抗炎藥品－抗腫瘤活性－抗病毒，抗HIV活性糖類藥物進展第27頁2、改造已經(jīng)有藥品多價糖綴合物設(shè)計、合成“成簇效應(yīng)”Cluster,Dendrimer糖類化合物與受體(糖、蛋白、脂類)結(jié)協(xié)力普通較弱，結(jié)合常數(shù)也較小，所以，很多情況下，糖表現(xiàn)為經(jīng)過多位點共價作用而實現(xiàn)一個強相互作用－－多價糖綴合物糖類藥物進展第28頁例：含有粘附抑制和抗休克作用乳糖綴合物成簇效應(yīng)乳糖PEG綴合物L(fēng)actosidecluster糖類藥物進展第29頁使用糖類化合物導(dǎo)向和定位作用糖類(半乳糖，甘露糖等)糖類激素(促甲狀腺素，促黃體酮激素等)微生物(幽門螺旋桿菌)微生物、植物毒素特定結(jié)構(gòu)糖類或特異性凝集素靶向或定位輸送作為新藥及基因轉(zhuǎn)運劑糖基膽酸酯及酰胺類化合物，它們脂水兩親性使其能降低細(xì)胞膜穩(wěn)定性而發(fā)揮定向轉(zhuǎn)運作用

半乳糖－半乳糖結(jié)合蛋白(肝實質(zhì)細(xì)胞)肝趨向性糖類藥物進展第30頁使用糖類修飾，改變藥品ADME,延長半衰期蛋白質(zhì)藥品－酶切位點引入糖鏈－延長半衰期胰島素－葡萄糖修飾－與CoA形成復(fù)合物－顆粒－緩釋糖類藥物進展第31頁3、開發(fā)新型糖類農(nóng)藥糖類化合物作用于植物細(xì)胞－－綠色糖類農(nóng)藥比如：寡糖素，植保素－－植物激素生物效應(yīng)含長鏈不飽和脂肪酸甲殼寡聚糖植物根毛彎曲根瘤合成、分泌外多糖影響結(jié)瘤和成瘤后固氮能力固氮菌與植物共生結(jié)瘤過程糖類藥物進展第32頁4、基于結(jié)構(gòu)或作用靶點糖類藥品設(shè)計因為糖類藥品作用位點大多還不清楚，所以糖類藥品研發(fā)中，這種有針對性設(shè)計尚不多見。例1.針對糖苷(水解)酶過渡態(tài)設(shè)計糖苷酶抑制劑糖類藥物進展第33頁例2.基于唾液酸抗流感病毒藥品設(shè)計神經(jīng)氨酸酶：斷裂唾液酸單元，使病毒釋放模擬酶底物唾液酸構(gòu)象糖類藥物進展第34頁面臨難題：復(fù)雜寡糖、糖綴合物制備，連續(xù)、快速、低成本；糖類化合物血清去除速度快、口服給藥生物利用度差；藥理、毒理、藥品代謝評價模型，安全性、有效性.五、糖類藥品研究關(guān)鍵技術(shù)和存在難題糖類化合物分離、純化技術(shù)；糖類化合物結(jié)構(gòu)分析技術(shù)；糖類化合物化學(xué)、生物合成水平提升；糖類化合物生物學(xué)研究、藥理學(xué)評價方法完善和提升.關(guān)鍵技術(shù)糖類藥物進展第35頁六、當(dāng)前處于不一樣研究階段糖類藥品1、已上市糖類藥品(Carbohydrate-beseddrugstomarket)2、處于臨床研究糖類藥品(Carbohydrate-basedTherapeuticsinDevelopment)3、處于臨床前研究糖類藥品(AgentsinResearch)糖類藥物進展第36頁GenerialName(BrandName)IndicationComponyApprovalCountryandYearAcarbose(Precose,Glucobay,Prandase)DiabetesBayerAGU.S.in1995Voglibose(Basen,Glustat,AO-128)DiabetesTakedaandAbbottJapanin1994Miglitol(Glyset,Baym1099)DiabetesBayerU.S.in1996Dolsamate(Flavalfate,F3616M)GastriculcerationFaesSpaininTopiramate(Topamax)Anti-convulsantAnti-epilepticOrtho-McNeil,Johson&JohnsonU.S.in1996,1999Arbekacin(Habekacin)Anti-microbialMeijiSeikaJapanin1997Zanamivir(Relenza,GG167)Anti-ViralGlaxoSmithKlinesU.S.in1999Oseltamivir(Tamiflu)Anti-ViralHoffmann-LaRoche,GileadU.S.in1999已上市糖類藥品(Carbohydrate-beseddrugstomarket)糖類藥物進展第37頁GenerialName(BrandName)IndicationComponyApprovalCountryandYearPneumococcal(HeptavalentVaccine,Prevnar)ConjugatevaccineWyethU.S.inHaemophilusb(ActHIB,OmniHIB)ConjugatevaccineSmithKlineBeecham,PasteurMerieuxFrancein1996TyphoidVi(TyphimVi)ConjugatevaccinePasteurMerieuxU.S.in1995Drotrecoginalfa(Xigris)SepsisLillyU.S.inDalteparin(Fragmin)Anti-coagulant,antithromboticPharmaciaUpjohnU.S.inEnoxaparine(Lovenox)Anti-coagulant,antithromboticAventisU.S.in1998Nadroparine(Fraxiparine)Anti-coagulant,antithromboticSanofi-synthelaboFrancein1986Ardeparin(Normiflo)Anti-coagulant,antithromboticOrganonU.S.in(Continued)已上市糖類藥品(Carbohydrate-beseddrugstomarket)糖類藥物進展第38頁GenerialName(BrandName)IndicationComponyApprovalCountryandYearDanaparoid(Orgaran)Anti-coagulant,antithromboticOrganonU.S.inFondaparinux(Arixtra)Anti-coagulant,antithromboticOrganonandSanofi-synthelaboU.S.inHyaluronicacid(Orthovisc)ViscoelasticSupplementAnlka,ZimmerEuropeEuropeandCanadain1998Imiglucerase(Cerezyme)Gaucher’sdiseaseGenzymerU.S.in1994Agalsidasealfa(Replaga)Fabry’sdiseaseTranskaryoticTherapiesEuropein(Continued)已上市糖類藥品(Carbohydrate-beseddrugstomarket)糖類藥物進展第39頁Name

Generic(Code)IndicationComponyDevelopmentMitemcinal(GM-11)Gastroparesis;gastroesophagealreflexChugaiPhaseIIEM-574Chronicgastritis;gastroesophogealreflexTakeda,KitazatoPhaseIISygen(GM-1)Parkinson’sdisease,spinalcordinjuryFidiaPhaseIIEverninomicin(Ziracin,SCH27899)AntibioticSchering-PloughDiscontinued(PhaseII)NE-1530PediatricearinfectionNeoseDiscontinued(PhaseII)NE-0080HelicobacterpyloriinfectionNeoseDiscontinued(PhaseI)SynsorbPkE.ColiO157:H7HemolyticuremicsyndromeSynsorbDiscontinued(PhaseIII)處于臨床研究糖類藥品(Carbohydrate-basedTherapeuticsinDevelopment)糖類藥物進展第40頁Name

Generic(Code)IndicationComponyDevelopmentSynsorbCdC.DifficileassociateddiarrheaSynsorbDiscontinued(PhaseIII)Peramivir(RWJ-270201)Anti-viralJohnson&JohnsonBiocrystPhaseIIISC48334(N-Butyl-deoxynojirimycin)HIV/ARCSearleDiscontinued(PhaseII)Celgosivir(MDL-28574,DRG-0202)HIVAventisDiscontinued(PhaseII)E.ColiO157VaccineE.ColiO157infectionNICHHDPhaseIHeparinaseI(Neutralase)Anti-coagulationreversalBioMarinPhaseIIDeligoparin(OP)Antithrombosis,InflammatoryboweldiseaseOpocrin,Incara,ElanPhaseIII(Continued)處于臨床研究糖類藥品(Carbohydrate-basedTherapeuticsinDevelopment)糖類藥物進展第41頁Name

Generic(Code)IndicationComponyDevelopmentCylexinReperfusioninjuryCytelDiscontinued(PhaseII)rPSGL-Ig,PSGL-1HeartattackWyethDiscontinued(PhaseII)Theratope(SialylTnAgconjugatevaccine)Metastaticcolorectal,breastcancerBiomiraPhaseIIIGloboHconjugatevaccineBreast,postatecancerMemorialSloan-KetteringcancerCenterPhaseIGMK(GM2KLH/QS-21conjugatevaccineMalignantmelanomaProgenics,Bristol-MyersSquibbDiscontinued(PhaseIII)MGV(GM2/GD2KLHQS-21conjugatevaccineColorectal,gastric,small-celllung,cancerProgenics,Bristol-MyersSquibbDiscontinued(PhaseII)PI-88Multiplemyeloma,TumorangiogenesisProgen,MedigenPhaseII(Continued)處于臨床研究糖類藥品(Carbohydrate-basedTherapeuticsinDevelopment)糖類藥物進展第42頁Name

Generic(Code)IndicationComponyDevelopmentGCS100(GBC-590)PancreaticcanceradenocarcinomaSafeSciencePhaseIIGD0039(Swainsonine)Renal,colorectal,breastcancerGlycoDesignPhaseIIVevesca15(OGT918,N-butyldeoxy-nojirimycin)Fabry’s,Gaucher’sdiseaseOxford,GlycoSciencesPhaseIIIAlpha-L-iduronidase(Aldurazyme)MPSIBioMarin,GenzymePhaseIGMK(GM2KLH/QS-21conjugatevaccineMalignantmelanomaProgenics,Bristol-MyersSquibbPhaseIIIArylsulfataseBMPSVIBioMarinPhaseII(Continued)處于臨床研究糖類藥品(Carbohydrate-basedTherapeuticsinDevelopment)糖類藥物進展第43頁Name

Generic(Code)IndicationMechanismCompony/InstitutionDYN12DiabetesAmadorase/fructoseamine-3-kinaseinhibitionDynamisTherapeuticsVancomycinanalogesAnti-bacterialCellwallbiosynthesisinhibitionPrincetonUniversityOlivomycinAAnti-bacterialAnti-cancerDNAminogroovebindingUniversityofMichiganS.Aureusvaccine,(NSG,poly-N-succinyl--1-6glucosamine),Anti-bacterialVaccineHarvardMedicalSchoolNIAIDpolysialicacid,nppolySA,KLH,QS-21Meningitis,cancerVaccineMemorialSloan-KetteringCancerCenterN-nonyldeoxynojirimycin(NN-DNJ)Anti-viralInhibitionofglycoproteinfoldingIgXOxfordHepatitis處于臨床前研究糖類藥品(AgentsinResearch)糖類藥物進展第44頁Name

Generic(Code)IndicationMechanismCompony/InstitutionTnMBR1LewisYKLHAnti-cancerMulti-antigenic,UnimolecularvaccineMemorialSloan-KetteringCancerCenterGalactopyranosyl--D-mannopyranosideAnti-inflammatoryLeukocytetrafficUCSanDiegoLewisyepitopeAnti-cancerLewisyclusteringvaccineMemorialSloan-KetteringCancerCenter-1,6-GlcNAc-branchedN-glycanAnti-cancerGlcNAc-TVmodulation,Mgat5geneUniversityofTorontoManLevAnti-cancerToxinsorimmunerecognitionGlycoDesignUCBerkeley(Continued)處于臨床前研究糖類藥品(AgentsinResearch)糖類藥物進展第45頁4、當(dāng)前處于不一樣研究階段糖類藥品適應(yīng)癥類型Diabetes糖尿病Acarbose,Voglibose,miglitol－－-glucosidase抑制劑Non-insulin-dependentdiabetes(Type2)GastrointestinalSystem胃腸道系統(tǒng)藥品Dosmalfate–gastric,duodenal,esophagealulcers胃，十二指腸，食道潰瘍糖類藥物進展第46頁Centralnervoussystem中樞神經(jīng)藥品糖類藥品可作用于CNS?。侵峙湎禂?shù)可調(diào)整Topiramate—anti-convulsantandepilepsy抗驚厥和抗癲癇Infectin抗感染藥品Antibiotics—aminoglycosideantibioticsAntiviralDrugs—influenza/Sepsis(膿毒癥)/antiviralGlycoconjugateVaccine—肺炎、腦膜炎；細(xì)菌莢膜多糖HibVaccine:上市了4中這類疫苗糖類藥物進展第47頁Thrombosis抗血栓藥品－anticoagulant(AT,FactorXa)Heparin(1937’s)LMWHeparinDaltrparinEnoxaparinNadroparineArdeparinDanaparoidFondaparinux:合成肝素五糖Inflammation抗炎藥品－細(xì)胞外間質(zhì)(Extracellarmatrix)Hyaluronicacid透明質(zhì)酸－Osteoarthritis骨關(guān)節(jié)炎糖類藥物進展第48頁EnzymeReplacement酶置換療法治療代謝疾病GeneticCause–Saccharide-processingenzyme--Saccharide/glycoconjugatemetabolitesGlycolipidstoragedisease溶酶體蓄積癥糖類藥物進展第49頁Carbohydrate-basedVaccines糖類疫苗Gaucher’sdisease—缺乏glucerbrosidaseFabry’sdisease—缺乏-galactosidaseA補充酶制劑：Imiglucerase(Gaucher’s)AgalsidaseAlfa(Fabry’s)糖類藥物進展第50頁PartTwoAdvancedinCarbohydrate-basedVaccine糖疫苗研究進展糖類藥物進展第51頁因為糖基化是生命過程中普遍存在現(xiàn)象，而承載主要生物學(xué)功能糖綴合物之糖鏈在病理過程中異常和高表示以及異種生物糖鏈特殊性，使糖類化合物作為抗原決定簇而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，已為試驗所證實?；诖颂穷愐呙缪芯吭诮鼛啄陙砣〉昧送黄菩越Y(jié)果，已經(jīng)有針對新生兒、幼兒肺炎和腦膜炎Hib疫苗上市，有針對瘧疾、腫瘤、艾滋病和各種真菌、細(xì)菌和原生物感染糖類疫苗處于不一樣研究階段，顯示出了誘人前景。為何糖類化合物能夠作為疫苗分子？特異性抗原決定簇存在Immunodominantepitopes糖疫苗形成球狀質(zhì)脂體epitopeslinkercarries糖類藥物進展第52頁Chemical&EngineeringNews,August9,

Volume82,Number32,pp.31-35

糖類疫苗研究已取得主要進展，引發(fā)廣泛關(guān)注！糖類藥物進展第53頁糖類疫苗研究已取得主要進展，引發(fā)廣泛關(guān)注！糖類藥物進展第54頁腫瘤相關(guān)糖抗原TACA疾病相關(guān)糖抗原存在是研制糖類疫苗基礎(chǔ)在病理過程中，細(xì)胞表面糖綴合物之糖鏈異常和高表示以及異種生物糖鏈特異性和高表示，使利用糖類化合物作為抗原決定簇而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，研制糖類疫苗成為可能.腫瘤細(xì)胞表面糖鏈異常表達糖類藥物進展第55頁腫瘤細(xì)胞表面部分糖抗原結(jié)構(gòu)糖類藥物進展第56頁已判定結(jié)構(gòu)血吸蟲糖抗原結(jié)構(gòu)(I)寄生蟲糖鏈結(jié)構(gòu)與人體細(xì)胞表面糖鏈結(jié)構(gòu)存在很大差異！糖類藥物進展第57頁已判定結(jié)構(gòu)血吸蟲糖抗原結(jié)構(gòu)(II)糖類藥物進展第58頁糖類疫苗研究進展1、Capsularpolysaccharideproteinconjugate-basedvaccines/Bacterialcapsularpolysaccharidevaccines細(xì)菌莢膜多糖疫苗HaemophilusInfluenzaeTypeB(Hib)—polysaccharideHib+conjugatedtodifferentproteincarries致病原體外殼：弱免疫原性多糖，逃避宿主免疫監(jiān)控基于這種多糖結(jié)構(gòu)疫苗：感染性疾病控制糖類藥物進展第59頁ApproachesKBacterialPolysaccharides(PS)BacterialPS-proteinconjugateSyntheticantigen-proteinconjugateBacterialPS-syntheticT-cellepitopesSpecifficproductnamePneumovaxMenomunaMenactraTMVaem-HibHiberixQuimi-HibTheratopePADREProsConsEasyaccessImmunityonlylast2-5years,potentialcontaminationbybacterialcomponentsImmunitylast10-15yearsComplexanalysis/purificationLargescaleaccess,easeofqualitycontrolHereogeneousintheproteincomplexSpecificimmuneresponseHerteogeneousinthecarbohydrateconplexGroupsandcompaniesusingitMerck&Co