過(guò)敏原檢測(cè)(實(shí)驗(yàn)課教案)

第頁(yè)授課題目過(guò)敏原檢測(cè)教材歐蒙印跡法授課方式實(shí)驗(yàn)課學(xué)時(shí)4學(xué)時(shí)授課時(shí)間教學(xué)手段多媒體+操作教學(xué)目的掌握：過(guò)敏原檢測(cè)的原理、方法和結(jié)果判定。熟悉：免疫印跡試驗(yàn)的臨床應(yīng)用教學(xué)重點(diǎn)過(guò)敏原檢測(cè)的原理、方法教學(xué)難點(diǎn)試驗(yàn)原理教學(xué)過(guò)程及時(shí)間分配教學(xué)內(nèi)容教學(xué)方法15分40分講授+學(xué)生操作45分鐘學(xué)生操作30分鐘講授+實(shí)驗(yàn)操作10分鐘40分鐘免疫標(biāo)記技術(shù)食物過(guò)敏免疫印跡試驗(yàn)：過(guò)敏原檢測(cè)試驗(yàn)原理檢測(cè)膜條上平行包被了（20種）吸入性和食入性過(guò)敏原。經(jīng)緩沖液預(yù)處理的檢測(cè)膜條與患者樣本進(jìn)行第一步溫育。如果樣本陽(yáng)性，IgE類特異性抗體與相應(yīng)的過(guò)敏原結(jié)合。為檢測(cè)結(jié)合的抗體，加入酶標(biāo)單克隆抗人IgE抗體（酶結(jié)合物）進(jìn)行第二步溫育，然后加入酶底物，發(fā)生顏色反應(yīng)。材料：包被過(guò)敏原的檢測(cè)膜條、待檢血清、酶結(jié)合物、通用緩沖液、底物液、結(jié)果判斷膜條、溫育盤、塑封膜條、溫箱方法：1.預(yù)處理膜條置溫育槽，加入1.0ml緩沖液，室溫5分鐘2.血清溫育第一次在溫育槽中加入1.0ml樣本，在搖床上溫育60分鐘（未稀釋）或過(guò)夜（1:11稀釋，最少12小時(shí)）3.清洗手動(dòng)，吸去每個(gè)溫育槽內(nèi)液體，在搖床上洗滌3次，每次5分鐘（1.0ml通用緩沖液）4.酶結(jié)合物溫育第二次加入酶結(jié)合物1.0ml，搖床60分鐘5.清洗同步驟36.底物溫育第三次加入底物1.0ml，搖床10分鐘7.終止反應(yīng)吸去槽內(nèi)液體，用蒸餾水洗滌3次，每次1分鐘8.結(jié)果判定將膜條置模板中，風(fēng)干后判斷結(jié)果。結(jié)果判斷：在判斷結(jié)果時(shí)必須考慮到條帶的位置和顏色強(qiáng)度。通過(guò)比較結(jié)果判斷模板和已溫育的檢測(cè)膜條可確定抗相應(yīng)過(guò)敏原IgE抗體。條帶的顏色可分為4類。類別結(jié)果條帶特性0陰性，無(wú)臨床意義未出現(xiàn)條帶+低濃度抗過(guò)敏原IgE抗體部分臨床意義弱條帶++中等濃度抗過(guò)敏原IgE抗體通常具有臨床意義清晰的條帶+++高濃度抗過(guò)敏原IgE抗體許多病例出現(xiàn)臨床癥狀染色很深的條帶采用軟件判斷結(jié)果參考范圍如下：類別（濃度：略）結(jié)果0未檢出特異性抗體1弱特異性抗體無(wú)癥狀2弱特異性抗體有癥狀3特異性抗體濃度明顯，通常出現(xiàn)癥狀4高濃度特異性抗體，總是出現(xiàn)癥狀5特異性抗體濃度很高6特異性抗體濃度很高方法評(píng)價(jià)、臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)小結(jié)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告導(dǎo)入新課講授法結(jié)合PPT結(jié)合臨床畫簡(jiǎn)圖舉例降低難度結(jié)合臨床指導(dǎo)操作講授啟發(fā)式指導(dǎo)結(jié)合臨床講授法結(jié)合臨床本課題方面的新進(jìn)展免疫印跡技術(shù)例題Ⅰ型超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制作業(yè)題1.Ⅰ型超敏反應(yīng)的發(fā)生特點(diǎn)？2.過(guò)敏原檢測(cè)結(jié)果如何判定？專業(yè)外語(yǔ)詞匯hypersensitivity;allergic,rhinitis，hayfever,asthmafoodallergy主要參考資料免疫學(xué)教材及免疫學(xué)