微生物專題知識講座專家講座

C9、C10學(xué)習(xí)目標(biāo)1、不發(fā)酵革蘭陰性菌特征及分群依據(jù)、常見菌屬、微檢普通程序2、銅綠假單胞菌判定依據(jù)、致病原因與所致疾病3、其它各菌判定特點(diǎn)，所致疾病4、解釋：“咳碟法”、“衛(wèi)星現(xiàn)象”？微生物專題知識講座第1頁

Chapter9不發(fā)酵革蘭陰性菌一、不發(fā)酵革蘭陰性菌特征：

糖O/-，G-桿菌，需氧或兼性，不產(chǎn)芽胞；劃歸不一樣種、屬，生理生化特征相同；多條件致病,醫(yī)院感染主要菌群。二、分群依據(jù)：

葡O/F、氧化酶試驗(yàn)、動力、MAC生長情況等微生物專題知識講座第2頁三、主要菌屬判別表━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━屬名假無黃不產(chǎn)叢莫金軍────────────────────氧化酶+++/--++/-+/-++/-葡O/FO/-OOO/----弱F-MAC++不易++?-不定-動力+/-+/-+/--+---+H極周周端或側(cè)━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

微生物專題知識講座第3頁第一節(jié)假單胞菌屬

主要種類：rRNAI銅綠、熒光、惡臭、斯氏、產(chǎn)堿rRNAII偽/馬勒伯克霍爾德菌、洋蔥rRNAIII食酸叢毛單胞菌rRNAIV微小假單胞菌rRNAV嗜麥芽窄食單胞菌……微生物專題知識講座第4頁生物學(xué)特征G-直或微彎較細(xì)長散在排列，端或叢H（除馬）無芽胞；專需氧，35℃（少數(shù)4℃/42℃+)；普平長,產(chǎn):綠/紅/青/黑膿素;對理化原因耐受性較強(qiáng),易耐藥

微生物學(xué)檢驗(yàn)程序判定:葡+觸+氧+I-M-V-……AST微生物專題知識講座第5頁銅綠假單胞菌

一、臨床意義

原因：菌毛黏附素、多糖莢膜樣物質(zhì)，內(nèi)毒素、外毒素(PA毒素)，胞外酶(卵磷脂酶C、彈性蛋白酶、膠原酶)，綠膿菌素

疾?。憾嗦窂絺魅荆瑮l件致病─皮膚、呼吸道、泌尿道、燒傷感染，醫(yī)院感染主要病原菌之一二、生物學(xué)特征

形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特征、生化反應(yīng)、抗原結(jié)構(gòu)微生物專題知識講座第6頁

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)1、檢驗(yàn)程序2、標(biāo)本采集3、標(biāo)本直接檢驗(yàn)：顯微鏡檢驗(yàn)抗原檢驗(yàn)：血清學(xué)分型、噬菌體分型核酸檢測：質(zhì)粒指紋圖分析、脈沖電場凝膠電泳分析、其它快速分子生物學(xué)判定

4、分離培養(yǎng)與判定判定主要靠:菌落特點(diǎn)+動力檢驗(yàn)+生化反應(yīng)5、檢驗(yàn)結(jié)果分析與匯報(bào)微生物專題知識講座第7頁直接涂片G染色┌G-球桿，動+單H膿┐│生┌氧+觸+葡O痰│(普血SS麥)│化├葡木+乳蔗-腦脊液│→分離→可疑→├反┼尿+明+I-M-LOA--+滲出液│培養(yǎng)菌落│應(yīng)└C+N+乙酰胺酶+穿刺液┘↑├生長試驗(yàn):

42℃+4℃-MAC+SS+血液─→增菌培養(yǎng)(肉湯)└玻片凝集試驗(yàn)肉湯:均勻混濁+菌膜;普/血:邊不齊,毛玻璃樣,金屬光澤,生姜?dú)馕叮?黃、藍(lán))綠色,溶血環(huán)透明,光合色素-，綠膿素+熒光素+SS/麥:小無色無光澤半透,48h后心棕綠色;微生物專題知識講座第8頁

5、檢驗(yàn)結(jié)果分析與匯報(bào)

血、尿、無菌體液分離（尤其是重復(fù)檢出）+臨床感染癥狀——確定為病原菌；無臨床感染癥狀，雖分離G-菌——正常菌群銅綠假單胞菌具多重耐藥特征（原因？）因易耐藥變異，需測試重復(fù)分離菌株藥敏性，以指導(dǎo)臨床用藥；嚴(yán)重感染，用最大劑量藥品治療。微生物專題知識講座第9頁偽/馬勒伯克霍爾德菌

“可能成為生物恐怖細(xì)菌”經(jīng)：傷口、黏膜、呼吸道感染致：鼻疽病和類鼻疽病G-鈍圓桿菌，馬/偽：動-/+，42℃-/+嗜麥芽窄食單胞菌G-端1~8H；42℃+/-,4℃-，青膿素-熒+，不溶血黃色菌落，氧-明+七+L+麥+硝-,

；條件致?。悍尾?、傷口、泌尿道感染微生物專題知識講座第10頁其它假單胞菌:

熒光假單胞菌:

42℃-,4℃+，叢H>3，綠膿素-熒光素+，明+氧-動+硝-/+；血庫血污染——輸血后不可逆性休克惡臭假單胞菌:

42℃-,4℃-，叢H>3，動++，明-卵磷脂酶-熒光素+；培養(yǎng)物腥臭味，皮膚、泌尿道感染、骨髓炎斯氏假單胞菌：

單H4℃-

42℃+,6.5%高鹽+,粗糙有皺紋菌落,黃色素+熒光素-；傷口、泌尿道感染、肺炎、心內(nèi)膜炎微生物專題知識講座第11頁第二節(jié)不動桿菌屬1、常分離菌種：醋酸鈣、洛菲、溶血、鮑曼、瓊氏、約翰遜不動桿菌。2、不發(fā)酵糖類、氧化酶-、動力-、G-桿菌無芽；專需氧,普平/MAC+SS部分+；觸+尿-硝-,PG+多粘菌素+；3、皮膚呼吸道泌尿道正常菌，條件致病，醫(yī)院感染常見菌。第三節(jié)產(chǎn)堿桿菌屬1．常分離菌種：糞、皮喬特、糞亞、木糖氧化產(chǎn)堿桿菌2、球桿周H無芽莢，專需氧,普平SS麥+，溴甲酚紫牛乳/蛋白胨水:產(chǎn)氨，PH〉8.6呈堿性色為本菌特征；氧+觸+U-糖-(堿)；3、皮膚黏膜正常菌，醫(yī)院感染菌之一，條件致病。微生物專題知識講座第12頁

第四節(jié)黃桿菌屬

1、短黃桿菌、腦膜炎敗血性黃桿菌、芳香、水田……2、G-細(xì)長無動無芽無莢；專需氧，普血平黃色菌落，MAC+（部分）SS-；葡O氧+觸+磷酸酶+；3、自然界與食品中，口腔黏膜上呼吸道皮膚菌，條件致病，醫(yī)院感染病菌之一；致：術(shù)后感染、菌血癥、新生兒嬰幼兒化膿性腦膜炎。

第五節(jié)莫拉菌屬1、種類：腔隙、卡他、非液化、奧斯陸莫拉菌……2、G-球桿多形,幼細(xì)桿老球狀；高求，普MAC部分+，SS-不溶血菌落；氧+觸+,IMVCS---+-，糖-動-；3、院內(nèi)感染菌;眼結(jié)膜炎氣管炎肺炎腦膜炎腦膿腫心包炎心內(nèi)膜炎……

微生物專題知識講座第13頁

第六節(jié)軍團(tuán)菌屬

簡史:1976、7，美賓夕法尼亞州費(fèi)城第58屆退伍軍人大會。期間及后短時(shí)間，突發(fā)疾?。喊l(fā)燒、寒戰(zhàn)、咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困難及腹瀉等。90%病例胸部X線片顯示肺炎征象。1978年命名嗜肺軍團(tuán)菌。一、分類嗜肺軍團(tuán)菌（1、4、6血清群）、米克戴德、長灘、杜莫夫、波茲曼軍團(tuán)菌等二、臨床意義經(jīng)：供水系統(tǒng)、溶洞和霧化吸入致：肺炎型和非肺炎型感染致病原因：內(nèi)毒素和各種酶、裂解RBC作用、消化卵黃囊能力（外毒素？）微生物專題知識講座第14頁三、生物學(xué)特征1、G-著色淺端鈍圓小桿狀多形,端/側(cè)H,菌體含磷、分枝脂肪酸；2.嚴(yán)格需氧,氧少或無-,普平-,2.5%~5%CO2長好,慢3~5d(10d),用F-G、CYE、BCYE、MH-LH等培養(yǎng)基,PH6.7～7.0,42℃〉T〉25℃；針尖大小菌落，有熒光；3.淀粉利用+,觸氧馬明乳酸酶+,U-N-動+,4.生存能力強(qiáng)，敏熱和消毒劑；微生物專題知識講座第15頁四、微生物學(xué)檢驗(yàn)1、檢驗(yàn)程序2、標(biāo)本采集及處理3、標(biāo)本直接檢驗(yàn)顯微鏡檢驗(yàn)核酸檢測：DNA探針、PCR擴(kuò)增

4、分離培養(yǎng)與判定最終判定：形態(tài)結(jié)構(gòu)生化性狀（培養(yǎng)特征、色素產(chǎn)生試驗(yàn)、生化反應(yīng)）分子生物學(xué)檢測抗體檢測色素產(chǎn)生試驗(yàn)：MH-LH瓊脂——褐色色素、細(xì)胞外/內(nèi)熒光5、藥品敏感試驗(yàn)及結(jié)果解釋微生物專題知識講座第16頁第十章其它G-桿菌嗜血桿菌屬鮑特菌屬巴斯德菌屬弗朗西斯菌屬布魯菌屬……微生物專題知識講座第17頁

第一節(jié)嗜血桿菌屬

一、分類副/流感、副/溶血性、杜克雷、埃及、副/嗜沫嗜血桿菌二、臨床意義主要菌種常棲部位及所致疾?。篜175表10-1

呼吸道感染,內(nèi)+莢菌毛,致繼發(fā)呼吸道炎癥,非流感病原體三、生物學(xué)特征G-球桿多形態(tài)無H芽有莢，高求需加血、X、V因子（X：為高鐵血紅素，酶輔基，傳遞電子；V：為輔酶I或II，遞氫），可用巧克力瓊脂（+萬古霉素桿菌肽克林霉素），需CO2，PH7.6~7.8；抵抗力弱。微生物專題知識講座第18頁四、微生物學(xué)檢驗(yàn)1、檢驗(yàn)程序2、標(biāo)本采集顯微鏡檢驗(yàn)3、標(biāo)本直接檢驗(yàn)抗原檢測核酸檢測：DNA雜交法

4、分離培養(yǎng)與判定最終判定：對V、X因子需求菌落（溶血？）、形態(tài)

衛(wèi)星現(xiàn)象生化特征（葡+乳蔗甘-,N+,I多+U多+,膽汁溶菌+;）

莢膜腫脹試驗(yàn)5、藥品敏感試驗(yàn)微生物專題知識講座第19頁

第二節(jié)鮑特菌屬百日咳鮑特菌

一、臨床意義：致病原因：百日咳毒素（PT）、絲狀血細(xì)胞凝集素、腺嘌呤環(huán)酶毒素（ACT）、氣管細(xì)胞毒素、皮膚壞死毒素致：百日咳，（卡他期、痙攣期、恢復(fù)期）;

二、生物學(xué)特征1、G-小桿菌無H芽有莢,甲苯胺蘭端濃染;具O、K抗原2.專需氧高求鮑金培養(yǎng)基：2~3d細(xì)小光滑有光澤不透明露滴狀菌落；CCBA+血普麥-，cb+糖-I-動-U-N-C+谷-微生物專題知識講座第20頁三、微生物學(xué)檢驗(yàn)1、檢驗(yàn)程序2、標(biāo)本采集：咳碟法、鼻咽拭子法3、標(biāo)本直接檢驗(yàn)顯微鏡檢驗(yàn)抗原檢測：直接熒光抗體檢測、單克隆抗體檢測（ELISA測PT、FHA及特異性LPS）核酸檢測：PCR擴(kuò)增

4、分離培養(yǎng)特征與判定：營養(yǎng)需求、菌落特征、生化反應(yīng)幾個(gè)致病性鮑特菌生化特征P182表10-4

百日咳鮑特菌─血普麥-

cb+糖-I-動-U-N-C+谷-

副百日咳鮑特菌─動-血普麥+cb-U+N-C+谷-

支氣管鮑特菌─周H動+血普麥+cb+U+N+C+谷+5、藥品敏感試驗(yàn)及結(jié)果解釋

微生物專題知識講座第21頁

第三節(jié)布魯氏菌屬

一、分類與臨床意義種類：羊、牛、豬、綿羊、狗、森林鼠布魯菌；人獸共患微生物；經(jīng)：皮膚呼吸道消化道感染；致：動物流產(chǎn)與死胎；人：“波浪熱”（發(fā)燒多汗關(guān)節(jié)痛全身乏力疼痛）致病原因：內(nèi)毒素、透明質(zhì)酸酶、過氧化氫酶及遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)

二、生物學(xué)特征G-球桿,無H芽莢；需氧+CO2,PH6.7，普平難長,用肝浸液瓊脂,慢長；氧+觸+N+S-/+U+I-明-甘-;含A、M、G、Vi、L、Y、C抗原；

羊牛豬A：M1：2020：12：1微生物專題知識講座第22頁三、微生物學(xué)檢驗(yàn)1、檢驗(yàn)程序2、標(biāo)本采集3、標(biāo)本直接檢驗(yàn)?zāi)磻?yīng)：玻片和試管（瑞特氏反應(yīng)）PCR檢測

4、分離培養(yǎng)與判定菌落特征、Coomb‘s（查Ab）、染料抑制、H2S產(chǎn)生、A及M因子血清++、∮裂解等判別試驗(yàn)5、藥品敏感試驗(yàn)與結(jié)果解釋微生物專題知識講座第23頁第四節(jié)巴斯德菌屬一、分類與臨床意義種類：多殺、嗜肺、溶血、犬、產(chǎn)氣巴斯德菌；致：動物敗血癥、雞霍亂等，經(jīng)：動物（狗貓）抓咬傷感染；肺部感染、支氣管炎、菌血癥腦膜炎腦膿腫化膿性關(guān)節(jié)炎……二、生物學(xué)特征與判定G-球桿端濃染,無H芽；巧克力+（白色不溶血），MAC/SS/HE-，觸+氧+葡+乳-N+臨床診療：有動物咬抓傷病史+經(jīng)典癥狀+試驗(yàn)室診療微生物專題知識講座第24頁第五節(jié)弗朗西斯菌屬一、分類與臨床意義種類：土拉弗朗西斯菌、新兇手弗朗西斯菌2個(gè)種。經(jīng)：接觸患病動物感染或消化道、呼吸道或昆蟲叮咬致病表現(xiàn)：急、高熱、猛烈頭痛、關(guān)節(jié)痛，甚至衰竭及休克、全身中毒癥狀；接觸/叮咬部位皮膚潰瘍、淋巴結(jié)腫大壞死。二、生物學(xué)特征G-小桿常呈多形性，無芽H莢；需氧，普平-，選卵黃或胱氨酸血瓊脂；<20℃-，PH6.8~7.2;自然界生存力強(qiáng),敏熱、消毒劑，具Vi、OAg；微生物專題知識講座第25頁三、微生物學(xué)檢驗(yàn)分離培養(yǎng)難！血清學(xué)檢驗(yàn)慣用。直接鏡