衣原體醫(yī)學(xué)知識講座專家講座

衣原體Chlamydiae第二十七章衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第1頁第一節(jié)概述定義：

一類嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生，含有獨特發(fā)育周期，并能經(jīng)過細(xì)菌濾器原核細(xì)胞型微生物，歸屬于細(xì)菌學(xué)范圍。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第2頁

共同特征

有細(xì)胞壁，G－，呈圓形或橢圓形，含有獨特發(fā)育周期，類似細(xì)菌二分裂方式繁殖。

有DNA和RNA兩種核酸，含核糖體；含有嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生性，對各種抗生素敏感。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第3頁衣原體科衣原體屬(3個種)沙眼衣原體鼠衣原體豬衣原體嗜衣原體屬(6個種)肺炎嗜衣原體鸚鵡熱嗜衣原體獸類嗜衣原體流產(chǎn)嗜衣原體貓嗜性衣原體豚鼠嗜性衣原體衣原體分類衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第4頁四種衣原體性狀比較衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第5頁（一）發(fā)育周期與形態(tài)染色

包含原體和網(wǎng)狀體

原體（Elementarybody,EB）：呈球形、橢圓形或梨形，直徑0.2～0.4

μm，是發(fā)育成熟衣原體。含有強(qiáng)感染性，在宿主細(xì)胞外較穩(wěn)定，無繁殖能力。當(dāng)進(jìn)入宿主易感細(xì)胞后，宿主細(xì)胞膜圍于原體外形成空泡，原體在空泡中逐步發(fā)育，增殖成為網(wǎng)狀體。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈紅色。一、生物學(xué)性狀衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第6頁

網(wǎng)狀體，亦稱始體（Initialbody）：體積較大，直徑0.5～1.0μm，圓形或橢圓形，電子致密度較低，無胞壁，代謝活躍，以二分裂方式繁殖，在空泡內(nèi)增殖成許多子代原體。成熟子代原體從被破壞感染細(xì)胞中釋放，再感染新易感細(xì)胞，開始新發(fā)育周期，每個發(fā)育周期約48～72h。網(wǎng)狀體是衣原體發(fā)育周期中繁殖型，不具感染性，Macchivello染色呈藍(lán)色。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第7頁衣原體發(fā)育周期衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第8頁原體和始體比較性狀原體始體大?。é蘭）0.2～0.40.5～1.0細(xì)胞壁＋-代謝活性-＋胞外穩(wěn)定性強(qiáng)弱感染性強(qiáng)無繁殖能力無強(qiáng)RNA:DNA比1:13:1衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第9頁（二）培養(yǎng)特征

雞胚接種：6～8日齡雞胚卵黃囊中繁殖，感染后3～6天致雞胚死亡，并可在卵黃囊膜中找到包涵體、原體和始體顆粒。

組織細(xì)胞培養(yǎng)：可在HeLa、McCoy或HL等細(xì)胞中生長良好，可將接種有標(biāo)本細(xì)胞培養(yǎng)管離心沉淀以促使衣原體穿入細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)管中加入代謝抑制物。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第10頁（三）抗原結(jié)構(gòu)屬特異性抗原：位于胞壁共同抗原為脂多糖，類似于G－菌脂蛋白-脂多糖復(fù)合物，可用補(bǔ)體結(jié)合試驗檢測。種特異性抗原：大多數(shù)衣原體種特異性抗原位于主要外膜蛋白（majoroutermembraneprotein,MOMP）上，可用補(bǔ)體結(jié)合試驗和中和試驗檢測判別不一樣種衣原體。型特異性抗原：依據(jù)MOMP可變區(qū)氨基酸序列不一樣，可將每種衣原體分為不一樣血清型或生物型（biovar）。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第11頁（四）抵抗力衣原體耐冷不耐熱，60℃僅能存活5～10

min；在-60℃感染性可保持5年，液氮內(nèi)可保留10年以上，冷凍干燥保留30年以上仍可復(fù)蘇。對慣用消毒劑敏感，紫外線照射可快速滅活。四環(huán)素、氯霉素、強(qiáng)力霉素和紅霉素等抗生素有抑制衣原體繁殖作用。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第12頁（一）致病性能產(chǎn)生類似G－菌內(nèi)毒素毒性物質(zhì)，能抑制宿主細(xì)胞代謝，直接破壞宿主細(xì)胞。

MOMP能阻止吞噬體與溶酶體融合，表位易變異，在體內(nèi)可逃避特異性抗體中和作用而繼續(xù)感染細(xì)胞。熱休克蛋白（HSP）能刺激機(jī)體巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-1、IL-6等炎癥性細(xì)胞因子。二、致病性與免疫性衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第13頁二、致病性與免疫性（二）免疫性

產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫，以細(xì)胞免疫為主。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第14頁第二節(jié)沙眼衣原體衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第15頁衣原體發(fā)覺

1956年湯飛凡等首次分離培養(yǎng)出沙眼衣原體，無可爭辯地結(jié)束了半個多世紀(jì)關(guān)于沙眼病原爭論。他是世界上發(fā)覺主要病原體第一個中國人。生物分型沙眼生物型（Biovartrachoma）性病淋巴肉芽腫生物型（biovarlymphogramulomavenereum,LGV）衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第16頁一、生物學(xué)性狀衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第17頁（一）形態(tài)染色原體為圓形或橢圓形，Giemsa染色呈紫紅色。原體能合成糖原，故被碘溶液染成棕褐色。網(wǎng)狀體核質(zhì)分散，Giemsa染色為深藍(lán)或暗紫色。碘染色沙眼衣原體始體鏡下形態(tài)（Giemsa染色）衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第18頁（二）血清學(xué)分型依據(jù)MOMP表位氨基酸序列差異，將沙眼衣原體分為19個血清型，其中沙眼生物型包含15個血清型；LGV生物型包含L1、L2、L2a和L3共4個血清型。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第19頁二、致病性與免疫性衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第20頁所致疾病

1.沙眼經(jīng)過眼-手-眼路徑直接或間接親密接觸傳輸。由A、B、Ba和C血清型引發(fā)。早期流淚，后期結(jié)膜瘢痕、瞼內(nèi)翻、倒睫及角膜血管翳引發(fā)角膜損害，影響視力或致盲。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第21頁2.包涵體結(jié)膜炎嬰兒結(jié)膜炎，引發(fā)急性化膿性結(jié)膜炎（包涵體膿漏眼），不侵犯角膜，能自愈；成人結(jié)膜炎可經(jīng)兩性接觸、經(jīng)手至眼或污染游泳池水感染，引發(fā)濾泡性結(jié)膜炎，又稱游泳池結(jié)膜炎，普通經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈，無后遺癥。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第22頁3.泌尿生殖道感染沙眼生物型D～K血清型引發(fā)，男性多表現(xiàn)為非淋菌性尿道炎，并可合并附睪炎、前列腺炎、直腸炎等；女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎等。4.嬰幼兒肺炎5.性病淋巴肉芽腫侵犯男性腹股溝淋巴結(jié)，引發(fā)化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會陰、肛門、直腸，引發(fā)會陰-肛門-直腸組織狹窄。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第23頁三、微生物學(xué)檢驗法衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第24頁（一）直接涂片鏡檢

取結(jié)膜刮片，Giemsa或碘液及熒光抗體染色鏡檢，觀察上皮細(xì)胞漿內(nèi)有沒有包涵體。沙眼衣原體感染宮頸刮取物直接圖片（熒光染色）沙眼衣原體包涵體鏡下形態(tài)（碘染色）衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第25頁（二）分離培養(yǎng)取感染組織滲出液或刮取物，接種于雞胚卵黃囊或傳代細(xì)胞，再用IFA或ELISA檢測培養(yǎng)物中衣原體。（三）衣原體抗原與核酸組分檢測ELISA：檢測沙眼衣原體LPS和MOMP

PCR和LCR（鏈接酶鏈反應(yīng)）等擴(kuò)增技術(shù)檢測沙眼衣原體DNA衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第26頁預(yù)防重點是注意個人衛(wèi)生，防止直接或間接接觸傳染。治療藥品選取強(qiáng)力霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等。當(dāng)前尚無有效沙眼衣原體疫苗，MOMP是其主要候選抗原。因為MOMP多型性，其疫苗不易對全部型別沙眼衣原體都產(chǎn)生保護(hù)性，故增加了MOMP作為疫苗難度。四、防治標(biāo)準(zhǔn)衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第27頁第三節(jié)肺炎嗜衣原體肺炎嗜衣原體是衣原體屬一個新種。最初分離兩株病原體：1965年自一名臺灣小學(xué)生眼結(jié)膜中分離得到一株TW-183（Taiwan-183）。1983年自美國西雅圖一位急性呼吸道感染病人咽部分離出另一株AR-39（acuterespiratory-39)，后發(fā)覺這兩株衣原體為同一菌株，乃命名為TWAR。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第28頁（一）形態(tài)染色

原體直徑為0.38μm，電鏡下呈經(jīng)典梨形，并有清楚周漿間隙，Giemsa染色呈紫紅色，該法對細(xì)胞內(nèi)包涵體定位比碘染法敏感。一、生物學(xué)性狀衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第29頁一、生物學(xué)性狀（二）細(xì)胞培養(yǎng)

McCoy和HeLa細(xì)胞，但都極難用于連續(xù)傳代。當(dāng)前慣用HEp-2和HL細(xì)胞系，其在培養(yǎng)肺炎嗜衣原體敏感性方面要高于前二者。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第30頁所致疾病易引發(fā)肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病遲緩，臨床癥狀與肺炎支原體相同，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)燒等，普通癥狀較輕。肺炎嗜衣原體與冠心病、動脈粥樣硬化等慢性病發(fā)生親密相關(guān)，但其詳細(xì)機(jī)制尚待深入研究。二、致病性與免疫性衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第31頁病原學(xué)檢驗

先直接涂片，觀察包涵體；以熒光或酶標(biāo)識種特異性單克隆抗體直接檢測標(biāo)本中肺炎嗜衣原體抗原。三、微生物學(xué)檢驗法衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第32頁三、微生物學(xué)檢驗法

血清學(xué)方法

微量免疫熒光試驗（micro-immunofluorescencetest,MIF）被稱為“金標(biāo)準(zhǔn)”。

凡雙份血清抗體滴度增高4倍或以上，或單份血清IgM抗體滴度≥1:16，或IgG抗體滴度≥1:512，可確定為急性感染，IgG≥1:16表示為既往感染。衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第33頁第四節(jié)鸚鵡熱嗜衣原體衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第34頁生物學(xué)性狀原體呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體呈球形或不規(guī)則形態(tài)。原體在細(xì)胞空泡中增殖，形成結(jié)構(gòu)疏松、不含糖原、碘染色呈陰性包涵體。最少能夠分為6個血清型致病性經(jīng)呼吸道、破損皮膚、粘膜或結(jié)膜感染臨床表現(xiàn)多為非經(jīng)典性肺炎衣原體醫(yī)學(xué)知識講座第35頁微生物檢驗取患者血、痰標(biāo)本或咽拭子直接涂片染色觀察包涵體。IFA或EL