專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)

專腎功效及早期腎損傷檢驗(yàn)專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第1頁本章教學(xué)要求：

掌握:腎功效試驗(yàn)中慣用內(nèi)生肌酐去除試驗(yàn)、血尿素、肌酐及尿酸測定等。

熟悉:腎臟功效、腎功效評價方法

了解:腎臟基本結(jié)構(gòu)；尿液總蛋白、微量蛋白測定。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第2頁一、腎臟結(jié)構(gòu)（一）解剖學(xué)結(jié)構(gòu)腎臟髓質(zhì)皮質(zhì)腎小球腎小管腎錐體髓袢集合管乳頭管第一節(jié)概述專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第3頁（二）腎臟組織學(xué)結(jié)構(gòu)1、腎小體:腎小球、腎小囊2、腎小管:近端小管、髓袢、遠(yuǎn)端小管（三

）腎臟血供3、集合管腎動脈血流來自于腹主動脈,以每克組織計算，腎臟是全身血流量最多器官

專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第4頁二、腎臟生物化學(xué)功效尿液生成腎小管內(nèi)分泌功效主要生化功效專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第5頁（一）尿液生成1、腎小球?yàn)V過血液腎小球?yàn)V過腎小管重吸收腎小管與集合管分泌尿液血液流經(jīng)腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)時，血液中水、小分子溶質(zhì)和分子量較小血漿蛋白質(zhì)，均能夠經(jīng)過腎小球?yàn)V過膜進(jìn)入腎球囊囊腔中，形成原尿。

影響原尿生成原因腎小球?yàn)V過膜通透性有效濾過壓（effectivefiltrationpressure）腎血流量（renalplasmaflow）專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第6頁2．腎小管重吸收（1）近端小管：腎小管重吸收作用主要在此段進(jìn)行。（2）髓袢：此段在尿液濃縮稀釋中起主要作用。（3）遠(yuǎn)端小管：此段參加機(jī)體對體液和酸堿平衡調(diào)整，在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起主要作用。經(jīng)過腎小管重吸收以后，最終進(jìn)入集合管濾液不到原尿2％。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第7頁3．腎小管與集合管分泌（1）H+、K+、NH4+

：為腎小管與集合管分泌機(jī)體正常代謝產(chǎn)物；（2）對氨基馬尿酸、肌酐等都是正常機(jī)體代謝產(chǎn)物，既能從腎小球?yàn)V過，又能從腎小管、集合管分泌。（3）進(jìn)入體內(nèi)一些外來物質(zhì)，如酚紅、青霉素等藥品也由腎小管與集合管分泌到尿液中。

腎小管和集合管上皮細(xì)胞能夠?qū)⒓?xì)胞或血液中一些物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到管腔中專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第8頁（二）腎臟內(nèi)分泌功效1．腎素-血管擔(dān)心素-醛固酮系統(tǒng)（renin-angiotension-aldosteronesystem）2．激肽釋放酶-激肽-前列腺素（killikrein-kinin-prostaglandin）系統(tǒng)3．促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）4．1α，25-二羥維生素D3

另外，腎臟也是一些激素代謝場所靶器官專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第9頁第二節(jié)腎臟功效試驗(yàn)血清尿素、肌酐、尿酸測定尿液總蛋白、微量蛋白測定其它尿液pH、相對密度及滲透量測定專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第10頁一、血清尿素、肌酐、尿酸測定非蛋白氮化合物：尿素、尿酸、肌酐、肌酸、氨、氨基酸、核苷酸等測定意義：非蛋白氮化合物是體內(nèi)蛋白質(zhì)、肌酸、核酸等代謝產(chǎn)物，均由腎臟排泄，在一定程度上反應(yīng)了腎臟功效，是臨床慣用腎功效指標(biāo)。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第11頁（一）血清尿素測定血清尿素水平在一定程度上反應(yīng)了腎小球?yàn)V過能力。1．測定方法直接法：二乙酰一肟(wò)法間接法：脲酶法專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第12頁（1）二乙酰一肟法（直接法）：540nm處有吸收峰（Fearon反應(yīng)）專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第13頁（2）脲酶法（間接法）第一步：，

首先利用脲酶催化尿素水解生成銨鹽，銨鹽在堿性條件下釋放出氨。然后再用不一樣方法測定銨鹽或氨，在測定過程中需預(yù)防外源性氨污染。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第14頁酶偶聯(lián)速率法：第二步：納氏試劑顯色法：或酚-次氯酸鹽顯色法：（波氏法）

或?qū)ＤI功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第15頁2、方法學(xué)評價二乙酰一肟法：

靈敏度高、操作較為簡便、線性范圍較窄（＜150mmol/L）特異性不高；本法難以實(shí)現(xiàn)自動化，當(dāng)前臨床上已極少使用。脲酶法：特異性強(qiáng)，反應(yīng)專一，易受體液及環(huán)境中氨干擾，所以測定時需嚴(yán)防外源性氨污染。普通用于手工操作測定，適合基層單位開展；但試劑穩(wěn)定性差。酶偶聯(lián)速率法：準(zhǔn)確度和靈敏度較高，多用于自動分析系統(tǒng)，試劑較貴電導(dǎo)法：準(zhǔn)確性高，反應(yīng)所需時間很短，適合自動化分析，但規(guī)范試驗(yàn)條件有一定困難。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第16頁

【參考范圍】

血清3.0～7.2mmol／L（速率法）尿液357～535mmol／24h（速率法）【臨床意義】

因?yàn)槟I臟有強(qiáng)大貯備能力，所以，僅在腎小球?yàn)V過率下降至正常50％以下時，血漿或血清中尿素濃度才會升高，故該指標(biāo)靈敏度不高，不能作為早期腎功效指標(biāo)。尿素作為腎臟功效指標(biāo)，還會受到許多腎外原因影響。各種原因如肝功效衰竭等造成血清氨水平升高，都會使各種測定尿素方法結(jié)果偏高。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第17頁血清尿素和血清肌酐濃度與GFR關(guān)系見圖14-2。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第18頁（二）血清肌酐測定外源性肌酐內(nèi)源性肌酐在控制外源性肌酐攝取時，測定血清肌酐可作為腎濾過功效指標(biāo)。1．測定方法

（2）Jaffe反應(yīng)法（苦味酸法）：肌酐與堿性苦味酸作用，生成黃紅色化合物，在510nm處比色分析。（1）肌氨酸氧化酶法：專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第19頁（2）酶偶聯(lián)速率法：在340nm處監(jiān)測吸光度值降低，可測量肌酐含量。（3）肌氨酸氧化酶法：專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第20頁2．方法學(xué)評價Jaffe反應(yīng)法是測定肌酐慣用方法，適合用于血、尿標(biāo)本檢測。但最大問題是非特異性干擾大（假肌酐）。特異性高，適合用于自動化分析。但試劑價格昂貴且不易保留。酶偶聯(lián)速率法專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第21頁假肌酐：一些含有還原性能與堿性苦味酸生成紅色物質(zhì)維生素C、丙酮、乙酰乙酸、α-酮酸、葡萄糖、蛋白質(zhì)以及頭孢菌素類抗生素、強(qiáng)心甙、甲基多巴等排除假肌酐干擾：①吸附法②速率法③二次讀數(shù)法④在手工操作中制備無蛋白濾液或加入十二烷基硫酸鈉去除蛋白質(zhì)干擾，在連續(xù)流動自動化生化分析儀中可采取透析器去除蛋白質(zhì)。⑤在緩沖液中加入硼酸鹽消除葡萄糖、維生素C干擾。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第22頁

【參考范圍】血清44～133μmol／L（速率法）尿液（苦味酸法）嬰兒88～176mmol／kg·24h兒童44～352mmol／kg·24h成人男7～18mmol／24h女5.3～16mmol／24h【臨床意義】血清肌酐濃度較血清尿素濃度更能準(zhǔn)確地反應(yīng)腎小球功效。在臨床上同時測定血清肌酐濃度和血清尿素濃度，在判別腎前性或腎后性尿毒癥上有一定意義。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第23頁3．內(nèi)生肌酐去除率在控制外源性肌酐攝取情況下，體內(nèi)肌酐產(chǎn)量恒定，而且因?yàn)榍笆黾◆谀I臟中排泄方式，故臨床上經(jīng)過內(nèi)生肌酐去除率近似地反應(yīng)腎小球?yàn)V過功效，稱為內(nèi)生肌酐去除率。內(nèi)生肌酐去除率腎去除率：指單位時間內(nèi)多少毫升血漿中某物質(zhì)經(jīng)腎臟去除。若某物質(zhì)由腎小球?yàn)V過后，既不被腎小管重吸收又不被腎小管所分泌，那么它腎去除率能夠反應(yīng)腎小球?yàn)V過率（GFR）。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第24頁（1）測定方法①受試者禁食肉類三天，試驗(yàn)日禁用茶、咖啡，停用利尿劑，試驗(yàn)前防止猛烈運(yùn)動，飲用足量水，使尿量不少于1ml／min。②準(zhǔn)確搜集24小時尿，統(tǒng)計尿量、身高、體重。③在搜集尿液同時，最好在搜集尿液中期，搜集血樣。④對搜集尿樣及血樣進(jìn)行肌酐測定。⑤按照以下公式計算內(nèi)生肌酐去除率。

U：尿液肌酐濃度（μmol／L）V：每分鐘尿量（ml／min）P：血肌酐濃度（μmol／L）1.73：標(biāo)準(zhǔn)體表面積（m2）A：實(shí)際體表面積（m2）專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第25頁【參考范圍】80～120ml／min·1.73m2

（2）方法學(xué)評價：操作簡便,及時檢測或?qū)⒛驑?biāo)本冷藏可降低此誤差。測定前應(yīng)充分飲水，使尿量不少于1ml／min【臨床意義】Ccr降低可反應(yīng)腎小球早期損害，并可依據(jù)其降低程度來判斷腎小球?yàn)V過功效損傷程度：Ccr也用于指導(dǎo)治療。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第26頁（三）血清尿酸測定來自體內(nèi)和食物中嘌呤代謝最終產(chǎn)物，主要從腎臟排泄。血尿酸濃度受腎小球?yàn)V過功效、腎小管重吸收及分泌功效影響1．測定方法

（1）磷鎢酸還原法：無蛋白濾液中尿酸在堿性條件下使磷鎢酸還原生成藍(lán)色鎢藍(lán)，可在650～700nm波長下進(jìn)行比色測定。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第27頁（2）尿酸酶法：尿酸可在尿酸酶作用下氧化生成尿囊素、CO2、及H2O2。

依據(jù)測定方法可分為三類：酶聯(lián)紫外分光法紫外分光法：尿酸酶催化前后吸光度差值與尿酸濃度成正比。酶聯(lián)比色法：專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第28頁2．方法學(xué)評價尿酸酶－酶聯(lián)紫外分光法適合于自動化分析磷鎢酸法試劑易得、費(fèi)用低廉，但靈敏度較低尿酸酶-紫外分光法簡單、快速、特異性好、靈敏度高、易于自動化，但需要精密儀器，標(biāo)本中蛋白質(zhì)會提升空白管吸光度?！緟⒖挤秶垦宄扇四?10～430μmol／L女150～370μmol／L尿液15～45mmol／24h【臨床意義】專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第29頁二、尿液總蛋白、微量蛋白測定尿液總蛋白測定2．尿蛋白定量測定1．尿蛋白定性檢驗(yàn)3．尿液蛋白質(zhì)電泳4．方法學(xué)評價【參考范圍】兒童＜40mg／24h成人30～130mg／24h【臨床意義】用于泌尿系統(tǒng)疾病及一些全身性疾病篩選、療效觀察等5．蛋白尿選擇性指數(shù)專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第30頁三、尿液pH、相對密度及滲透量測定（一）尿液pH值測定（二）尿液相對密度測定（三）尿液滲透量測定專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第31頁四、其它（一）尿液酶測定（二）尿液氨基酸測定（三）腎功效指標(biāo)新進(jìn)展專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第32頁1．尿微量清蛋白測定2．α１-微球蛋白3．β2-微球蛋白4．Tamm-Horsfall蛋白腎臟髓袢升支與腎遠(yuǎn)曲小管上皮細(xì)胞分泌一個糖

蛋白,為一個腎特異性蛋白質(zhì)5．纖維蛋白降解產(chǎn)物6．視黃醇結(jié)合蛋白第三節(jié)早期腎損傷檢驗(yàn)專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第33頁第四節(jié)腎功效特殊檢驗(yàn)在控制外源性肌酐攝取情況下，體內(nèi)肌酐產(chǎn)量恒定，而且因?yàn)榍笆黾◆谀I臟中排泄方式，故臨床上經(jīng)過內(nèi)生肌酐去除率近似地反應(yīng)腎小球?yàn)V過功效，稱為內(nèi)生肌酐去除率。內(nèi)生肌酐去除率一、反應(yīng)腎小球?yàn)V過功效試驗(yàn)?zāi)I去除率：指單位時間內(nèi)多少毫升血漿中某物質(zhì)經(jīng)腎臟去除。若某物質(zhì)由腎小球?yàn)V過后，既不被腎小管重吸收又不被腎小管所分泌，那么它腎去除率能夠反應(yīng)腎小球?yàn)V過率（GFR）。專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第34頁（1）測定方法①受試者禁食肉類三天，試驗(yàn)日禁用茶、咖啡，停用利尿劑，試驗(yàn)前防止猛烈運(yùn)動，飲用足量水，使尿量不少于1ml／min。②準(zhǔn)確搜集24小時尿，統(tǒng)計尿量、身高、體重。③在搜集尿液同時，最好在搜集尿液中期，搜集血樣。④對搜集尿樣及血樣進(jìn)行肌酐測定。⑤按照以下公式計算內(nèi)生肌酐去除率。

U：尿液肌酐濃度（μmol／L）V：每分鐘尿量（ml／min）P：血肌酐濃度（μmol／L）1.73：標(biāo)準(zhǔn)體表面積（m2）A：實(shí)際體表面積（m2）專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第35頁胱抑素（Cys-C）:

特征:胱氨酸蛋白酶抑制劑，可全部由腎小球?yàn)V過且全部在腎小管分解，不被重吸收及分泌測定方法：免疫學(xué)方法參考區(qū)間：臨床意義專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第36頁二、反應(yīng)腎小管重吸收功效試驗(yàn)：（一）尿酶檢驗(yàn)1、腎損害和抗生素毒性酶：NAG2、尿路感染：NAG、GRS3、腎腫瘤：LDH、ALP、GRS4、腎排斥反應(yīng)：LYS、GRD、NAG、GGT(二)酚紅排泄試驗(yàn)（PSP）方法：注射一定量酚紅，測定2小時內(nèi)尿中排泄量（尿液加堿即可）參考值即臨床意義：腎小管排泄功效專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第37頁三、尿蛋白電泳：不一樣分子量尿蛋白與腎疾病關(guān)系專腎功能和早期腎損傷檢驗(yàn)第38頁1.多項(xiàng)指標(biāo)綜合分析(1)尿素氮（BUN）；肌酐（Cr）；尿酸(UA)；內(nèi)生肌酐去除率(Ccr)；(