血漿蛋白質(zhì)以及非蛋白含氮化合物的代謝紊亂

血漿蛋白質(zhì)以及非蛋白含氮化合物的代謝紊亂第1頁(yè)/共64頁(yè)第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)及其異常第2頁(yè)/共64頁(yè)（一）、血漿蛋白質(zhì)的功能和分類①營(yíng)養(yǎng)作用，修補(bǔ)組織蛋白;②維持血漿膠體滲透壓；③作為激素、維生素、脂類、代謝產(chǎn)物、離子、藥物等的載體；④作為PH緩沖系統(tǒng)的一部分；⑤抑制組織蛋白酶；第3頁(yè)/共64頁(yè)⑥一些酶在血漿中起催化作用；⑦代謝調(diào)控作用；⑧參與凝血與纖維蛋白溶解；⑨作為免疫球蛋白與補(bǔ)體等免疫分子，組成體液免疫防御系統(tǒng)。第4頁(yè)/共64頁(yè)

（二）、血漿蛋白質(zhì)的分類最簡(jiǎn)單的是將血漿蛋白質(zhì)分為清蛋白和球蛋白兩大類，目前仍較實(shí)用的是通過乙酸纖維素薄膜電泳或瓊脂糖凝膠電泳獲得血漿蛋白質(zhì)概貌的圖譜。第5頁(yè)/共64頁(yè)電泳分類法：利用乙酸纖維素薄膜電泳將血漿蛋白質(zhì)分為清蛋白和α1

、α2

、β、γ球蛋白5個(gè)主要區(qū)帶。功能分類法第6頁(yè)/共64頁(yè)第7頁(yè)/共64頁(yè)第8頁(yè)/共64頁(yè)二、血清蛋白質(zhì)電泳組分的臨床分析（一）血清蛋白質(zhì)電泳的正常組分清蛋白α1球蛋白α2球蛋白β球蛋白γ球蛋白第9頁(yè)/共64頁(yè)

用乙酸纖維素薄膜電泳測(cè)得血清各區(qū)帶蛋白質(zhì)的參考值為清蛋白（Alb）：57％~68％、α1球蛋白：1.0％~5.7％、α2球蛋白：4.9％~11.2％、β球蛋白：7％~13%、γ球蛋白：9.8％~18.2％。若以g/L表示，則Alb和α1

、α2

、β、γ球蛋白分別為35~52g/L、1.0~4.0g/L、4.0~8.0g/L、5.0~10.0g/L、6.0~13.0g/L。第10頁(yè)/共64頁(yè)（二）異常電泳圖譜的臨床意義異常血清蛋白電泳圖譜分型在疾病情況下血清蛋白質(zhì)可以出現(xiàn)多種變化。根據(jù)它們?cè)陔娪緢D譜上的異常特征，不少學(xué)者將其進(jìn)行分型，使其有助于臨床疾病的判斷。第11頁(yè)/共64頁(yè)典型異常血清蛋白電泳圖譜在以上異常電泳圖譜中，腎病綜合征、肝硬化和多發(fā)性骨髓瘤(M蛋白血癥型)最具有特征性，在臨床上診斷意義最大。第12頁(yè)/共64頁(yè)第13頁(yè)/共64頁(yè)三、血漿蛋白質(zhì)及其異常前清蛋白（PA）生理功能：作為組織修補(bǔ)材料和運(yùn)載蛋白，可結(jié)合大約10%的T4和T3，對(duì)T3親和力更大，還具有運(yùn)載維生素A的作用。第14頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義①作為營(yíng)養(yǎng)不良的指標(biāo)。②作為肝功能不全的指標(biāo)。③在急性炎癥、惡性腫瘤、創(chuàng)傷等任何急需合成蛋白質(zhì)的情況下，血清PA均迅速下降，PA是負(fù)性急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。第15頁(yè)/共64頁(yè)清蛋白（ALB）

生理功能（1）血漿中主要的載體蛋白

（2）維持血漿膠體滲透壓（3）具有緩沖酸堿的能力（4）重要的營(yíng)養(yǎng)蛋白第16頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義（1）低清蛋白血癥常見于以下疾?。?/p>

1）清蛋白合成不足

2）清蛋白丟失

3）清蛋白分解代謝增加

4）清蛋白的分布異常

5）無清蛋白血癥第17頁(yè)/共64頁(yè)（2）血漿清蛋白增高（3）由清蛋白含量估計(jì)其配體的存在形式和作用（4）作為個(gè)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的評(píng)價(jià)指標(biāo)：血漿清蛋白作為營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：>35g/L正常，28-34g/L輕度缺乏，21-27g/L中度缺乏，<21g/L嚴(yán)重缺乏。當(dāng)清蛋白濃度低于28g/L時(shí)，會(huì)出現(xiàn)水腫。第18頁(yè)/共64頁(yè)α1-抗胰蛋白酶（AAT）生理功能：是蛋白酶的抑制物，含量雖比另一蛋白酶抑制物α2-巨球蛋白低，但AAT占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右。第19頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義①AAT缺陷：ZZ表型、SS型甚至

MS表型常伴有早年(20-30歲)出現(xiàn)的肺氣腫。②急性時(shí)相反應(yīng)時(shí)AAT增加。第20頁(yè)/共64頁(yè)α1-酸性糖蛋白（AAG）生理功能：AAG是主要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在急性炎癥時(shí)增高，與免疫防御功能有關(guān)。第21頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義①AAG目前主要作為急性時(shí)相反應(yīng)的指標(biāo)，在風(fēng)濕病、惡性腫瘤及心肌梗死等炎癥或組織壞死時(shí)一般增加3-4倍，3-5天時(shí)出現(xiàn)濃度高峰；AAG增高是活動(dòng)性潰瘍性結(jié)腸炎最可靠的指標(biāo)之一。第22頁(yè)/共64頁(yè)結(jié)合珠蛋白（Hp）在醋纖膜電泳及瓊脂糖凝膠電泳中位于a2區(qū)帶。第23頁(yè)/共64頁(yè)結(jié)合珠蛋白（Hp）生理功能：Hp的主要功能是能與紅細(xì)胞中釋放出的游離血紅蛋白結(jié)合，每分子Hp可結(jié)合兩分子Hb。Hp可以防止Hb從腎丟失而為機(jī)體有效地保留鐵，并能避免Hb對(duì)腎臟的損傷。第24頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義：①溶血性疾病如溶血性貧血、輸血反應(yīng)、瘧疾時(shí)Hp含量明顯下降。②當(dāng)燒傷和腎病綜合征引起大量清蛋白丟失的情況下，血Hp常明顯增加。③在嚴(yán)重肝病患者Hp合成降低。第25頁(yè)/共64頁(yè)α2-巨球蛋白（AMG）

a2巨球蛋白是血漿中分子量最大的蛋白質(zhì)。a2-MG是由肝細(xì)胞與單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)合成。第26頁(yè)/共64頁(yè)α2-巨球蛋白（AMG）生理功能：AMG的主要特性是能與多種離子和分子結(jié)合，特別是能與蛋白水解酶如纖維蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及組織蛋白酶D結(jié)合而影響這些酶的活性。第27頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義：低清蛋白血癥，尤其是腎病綜合征時(shí)，AMG含量可顯著增高，可能系一種代償機(jī)制以保持血漿膠體滲透壓。第28頁(yè)/共64頁(yè)銅藍(lán)蛋白（Cp）生理功能：Cp的主要生理功能與氧化還原反應(yīng)有關(guān)，根據(jù)其他物質(zhì)的性質(zhì)，它既能起氧化作用又能起抗氧化作用。Cp的生理功能還有抑制膜脂質(zhì)氧化的作用。第29頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義：①協(xié)助Wilson病的診斷。②Cp也屬于一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在感染、創(chuàng)傷和腫瘤時(shí)血漿濃度增加。第30頁(yè)/共64頁(yè)轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin,TRF)分子量約79.5kD，電泳位置在β區(qū)帶，TRF主要由肝細(xì)胞合成，半壽期為7天。第31頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義：（１）用于貧血的鑒別診斷。（２）TRF在急性時(shí)相反應(yīng)中含量往往降低。（３）作為營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo)，在營(yíng)養(yǎng)不良及慢性肝臟疾病時(shí)下降。第32頁(yè)/共64頁(yè)C-反應(yīng)蛋白（CRP）在急性炎癥病人血清中出現(xiàn)的可以結(jié)合肺炎球菌細(xì)胞壁Ｃ-多糖的蛋白質(zhì)，命名為C-反應(yīng)蛋白（CRP）。第33頁(yè)/共64頁(yè)生理功能：CRP不僅結(jié)合多種細(xì)胞、真菌及原蟲等體內(nèi)的多糖物質(zhì)，在鈣離子存在下，還可以結(jié)合卵磷脂和核酸。CRP可以引發(fā)對(duì)侵入細(xì)胞的免疫調(diào)理作用和吞噬作用，結(jié)合后的復(fù)合體具有對(duì)補(bǔ)體系統(tǒng)的激活作用，表現(xiàn)炎癥反應(yīng)。第34頁(yè)/共64頁(yè)臨床意義：CRP是第一個(gè)被認(rèn)識(shí)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，作為急性時(shí)相反應(yīng)一個(gè)極靈敏的指標(biāo)，血漿中CRP濃度在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術(shù)、腫癌浸潤(rùn)時(shí)迅速顯著增高，可達(dá)正常水平的2000倍。CRP是非特異性指標(biāo)，主要用于結(jié)合臨床病史監(jiān)測(cè)疾病。第35頁(yè)/共64頁(yè)四、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

在急性炎癥性疾病如手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染、腫瘤等，AAT、AAG、Hp、Ｃp、CRP，以及α1-抗糜蛋白酶、血紅素結(jié)合蛋白、C4、C3、纖維蛋白原等，這些血漿蛋白濃度顯著升高或升高；而血漿PA、ALB、TRF則出現(xiàn)相應(yīng)的低下。這些血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（APRP），這種現(xiàn)象稱為急性時(shí)相反應(yīng)。PA、ALB、TRF一般稱為負(fù)性急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。第36頁(yè)/共64頁(yè)

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白升高的速度不同，CRP和α1-抗糜蛋白酶首先升高，在1２小時(shí)內(nèi)AAG也升高，然后AAT、Hp、C4和纖維蛋白原升高，最后是C3和Cp升高，這些APR通常在２～５天內(nèi)達(dá)到最高值。檢測(cè)APR有助于對(duì)炎癥進(jìn)程的監(jiān)測(cè)和對(duì)治療反應(yīng)的判斷，尤其是檢測(cè)那些升高最早和最多的蛋白質(zhì)。

第37頁(yè)/共64頁(yè)第二節(jié)氨基酸代謝紊亂第38頁(yè)/共64頁(yè)一、苯丙酮酸尿癥（PKU）

是主要由苯丙氨酸羥化酶缺乏引起的常染色體隱性遺傳病。我國(guó)新生兒PKU發(fā)病率為1/10000～1/16000,與國(guó)外報(bào)道的數(shù)字接近。第39頁(yè)/共64頁(yè)臨床表現(xiàn)及治療

PKU患者有智力缺陷，其嚴(yán)重程度與血苯丙氨酸升高的水平和持續(xù)時(shí)間有關(guān)，可能由于苯丙氨酸與其他氨基酸競(jìng)爭(zhēng)載體，干擾了其他氨基酸通過血-腦屏障，因氨基酸不平衡而影響了腦正常功能和發(fā)育。PKU患者還表現(xiàn)有毛發(fā)和皮膚色素較正常人略淺。第40頁(yè)/共64頁(yè)Ⅰ型酪氨酸血癥：是由于延胡索酰乙酰乙酸酶活性降低所致，另外，對(duì)-羥苯丙酮酸氨化酶活性也有下降。二、酪氨酸血癥第41頁(yè)/共64頁(yè)Ⅱ型酪氨酸血癥：由于肝臟胞漿酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶缺乏所致，血液酪氨酸水平增高，并從尿中排出。該癥患者有流淚、懼光、角膜混濁、皮膚過度老化、智力發(fā)育不全等癥狀。第42頁(yè)/共64頁(yè)三、含硫氨基酸代謝紊亂

含硫氨基酸代謝紊亂最多見的是同型胱氨酸尿癥，該癥者先是同型半胱氨酸增加，隨之引起同型胱氨酸增加，因此同型半胱氨酸代謝紊亂與同型胱氨酸尿癥密切相關(guān)。第43頁(yè)/共64頁(yè)同型半胱氨酸代謝紊亂目前國(guó)內(nèi)外逐漸把血漿HCY水平檢測(cè)作為心腦血管病臨床常規(guī)檢查指標(biāo)。特別是對(duì)于那些血脂正常，膽固醇又不高的人群；有嚴(yán)重AS性疾病和家族史人群；有早期（<50歲）CHD、腦血管或外周血管病癥狀的人群，應(yīng)進(jìn)行血漿HCY檢測(cè)。第44頁(yè)/共64頁(yè)四、繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂

繼發(fā)性高氨基酸血癥或氨基酸尿癥主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患以及燒傷等，其氨基酸異常是該類患者機(jī)體物質(zhì)代謝普遍異常的一部分，體液氨基酸測(cè)定對(duì)診治有參考意義。第45頁(yè)/共64頁(yè)第三節(jié)核苷酸代謝紊亂

嘌呤核苷酸合成和分解中最多見的代謝紊亂是高尿酸血癥，并由此導(dǎo)致痛風(fēng)。嘧啶核苷酸從頭合成途徑中的酶缺陷可引起乳清酸尿癥。第46頁(yè)/共64頁(yè)一、嘌呤核苷酸代謝紊亂高尿酸血癥高尿酸血癥由嘌呤代謝紊亂或尿酸排泄障礙引起。

1.尿酸排泄障礙

2.尿酸生成過多第47頁(yè)/共64頁(yè)痛風(fēng)發(fā)生機(jī)制痛風(fēng)是一組疾病，由于遺傳性和（或）獲得性的尿酸排泄減少和（或）嘌呤代謝障礙，導(dǎo)致高尿酸癥及尿酸鹽結(jié)晶形成和沉積，從而引起特征性急性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)石、間質(zhì)性腎炎，嚴(yán)重者呈關(guān)節(jié)畸形及功能障礙；常伴尿酸性尿路結(jié)石。高尿酸血癥只有10%～20%發(fā)生痛風(fēng)。第48頁(yè)/共64頁(yè)二、嘧啶核苷酸代謝紊亂第49頁(yè)/共64頁(yè)第四節(jié)檢測(cè)方法評(píng)價(jià)第50頁(yè)/共64頁(yè)一、血清總蛋白測(cè)定凱氏定氮法凱氏定氮法于1883年建立，是經(jīng)典的蛋白質(zhì)測(cè)定方法。根據(jù)蛋白質(zhì)平均含氮量16%計(jì)算蛋白濃度。該法結(jié)果準(zhǔn)確性好，精密度高，靈敏度高，是公認(rèn)的參考方法，目前用于標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的定值和校正其他方法等。

第51頁(yè)/共64頁(yè)雙縮脲法該法對(duì)各種蛋白質(zhì)呈色基本相同，特異性和準(zhǔn)確度好，精密度好；顯色穩(wěn)定性好，試劑單一，方法簡(jiǎn)便；靈敏度雖不高，但對(duì)血清總蛋白定量較為適用。對(duì)蛋白質(zhì)含量很低的其他體液如腦脊液、胸腹水和尿液等，不是合適的定量方法。第52頁(yè)/共64頁(yè)酚試劑法本法測(cè)定純單一蛋白質(zhì)較合適，如測(cè)定組織中某一蛋白抽提物；又如血清大部分蛋白經(jīng)高氯酸沉淀去除后，上清夜再被磷鎢酸沉淀分離得到的粘蛋白，也常用此法測(cè)定。本法易受還原性化合物的干擾。第53頁(yè)/共64頁(yè)紫外分光光度法芳香族氨基酸在280nm處有一吸收峰，可用于蛋白質(zhì)測(cè)定。方法的準(zhǔn)確性受蛋白質(zhì)分子中該種氨基酸的含量影響甚大。尿酸和膽紅素在280nm附近有干擾，所以不適合血清等組成復(fù)雜的蛋白質(zhì)溶液測(cè)定，常用于較純的酶、免疫球蛋白等蛋白質(zhì)測(cè)定。第54頁(yè)/共64頁(yè)染料結(jié)合法在酸性環(huán)境下，蛋白質(zhì)分子可解離出帶有正電荷的-NH3+

，它可與染料的陰離子產(chǎn)生顏色反應(yīng)。常用的染料有氨基黑、麗春紅、考馬斯亮藍(lán)、鄰苯三酚紅鉬等。前兩種常作為血清蛋白乙酸纖維素薄膜電泳或瓊脂糖凝膠電泳的染料。第55頁(yè)/共64頁(yè)

考馬斯亮藍(lán)常用于需更高呈色靈敏度的蛋白電泳中，也可以用于測(cè)定尿液、腦脊液等的蛋白質(zhì)，優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速、靈敏，缺點(diǎn)是不同蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合力不一致，且試劑對(duì)比色杯有吸附作用。鄰苯三酚紅鉬可用于測(cè)定尿液、腦脊液等蛋白質(zhì)。第56頁(yè)/共64頁(yè)比濁法該法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、靈敏度高。缺點(diǎn)是影響濁度大小的因素較多，包括加入試劑的手法、混勻技術(shù)、反應(yīng)溫度等，且各種蛋白質(zhì)形成的濁度亦有較大的差別。一般用于測(cè)定尿液、腦脊液等蛋白質(zhì)濃度較低的樣品，其標(biāo)準(zhǔn)品推薦使用含正常清/球蛋白比值的血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)品作適當(dāng)稀釋。第57頁(yè)/共64頁(yè)二、血清清蛋白測(cè)定

目前測(cè)定清蛋白的方法有電泳法、免疫法和