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文檔簡介

回歸本位理性備考第1頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一回歸本位理性備考——2011年安徽高考生物試題背景分析與思考2023/4/272安慶一中何呂163.com第2頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一專家之言:普適計算技術(shù)將不斷深入教育教學(xué)的各個領(lǐng)域,在未來數(shù)年內(nèi),泛在學(xué)習(xí)必將在包括現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育在內(nèi)的許多領(lǐng)域得到迅速發(fā)展和普及。引子2023/4/27第3頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一泛在學(xué)習(xí)(UbiquitousLearning)其實并不是一個新名詞,從廣義上看學(xué)習(xí)本身就是無處不在的。首先,學(xué)習(xí)的發(fā)生無處不在;其次,學(xué)習(xí)的需求無處不在;第三,學(xué)習(xí)的資源無處不在。然而,無處不在的學(xué)習(xí)并不一定能無處不在地得到學(xué)習(xí)支持,無處不在的學(xué)習(xí)并不一定能無處不在地產(chǎn)生相應(yīng)的學(xué)習(xí)效果。第4頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一目前備考的現(xiàn)狀——無奈之舉思考2023/4/27教師能做些什么——題海游泳鑒別錯題

……

第5頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一成因2023/4/27教師指導(dǎo)仍是學(xué)生學(xué)習(xí)的依賴途徑高考仍然是學(xué)校家庭社會關(guān)注熱點于是:狼煙四起、硝煙彌漫……第6頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2011年高考生物試題(安徽卷)——“漫談”“閑談”試題背景2023/4/27第7頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一1.AUG是甲硫氨酸的密碼子,又是肽鏈合成的起始密碼子。人體血清白蛋白的第一個氨基酸并不是甲硫氨酸,這是新生肽鏈經(jīng)加工修飾的結(jié)果。加工修飾的場所是()A.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體 B.高爾基體和溶酶體C.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核糖體 D.溶酶體和核糖體

第8頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一第9頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一蛋白質(zhì)前體加工初級產(chǎn)物多肽鏈天然蛋白質(zhì)殘基的去除、AA側(cè)鏈的修飾、多肽鏈折疊成二級、三級甚至四級結(jié)構(gòu)第10頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2.干細(xì)胞移植現(xiàn)已成為冶療糖尿病的一種臨床技術(shù)。自體骨髓干細(xì)胞植入胰腺組織后可分化為胰島樣細(xì)胞,以替代損傷的胰島B細(xì)胞,達(dá)到治療糖尿病的目的。下列敘述正確的是()A.骨髓干細(xì)胞與胰島樣細(xì)胞的基因組成不同,基因表達(dá)產(chǎn)物不同B.骨髓干細(xì)胞與胰島樣細(xì)胞的基因組成相同,基因表達(dá)存在差異C.胰腺組織微環(huán)境造成骨髓干細(xì)胞基因丟失,分化成為胰島樣細(xì)胞D.胰腺組織微環(huán)境對骨髓干細(xì)胞分化無影響,分化是由基因決定的第11頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一干細(xì)胞移植術(shù)是世界生命科學(xué)在21世紀(jì)初所取得的巨大成就,被譽(yù)為生命科學(xué)研究史上一座里程碑,代表著生命科學(xué)研究的方向。國際自然科學(xué)頂級刊物《科學(xué)》雜志連續(xù)多年將干細(xì)胞的研究進(jìn)展評為“十大科學(xué)進(jìn)展”之一,《時代》雜志也多次將干細(xì)胞研究進(jìn)展列為年度“十大科學(xué)進(jìn)展”之一。干細(xì)胞移植在治療糖尿病方面,該技術(shù)可廣泛治療1型、2型糖尿病及相關(guān)并發(fā)癥。采用干細(xì)胞移植療法治療糖尿病,不僅可以修復(fù)患者受損的胰島細(xì)胞,恢復(fù)胰島功能,還能防止并發(fā)癥的發(fā)生。第12頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一3.某種蔬菜離體葉片在黑暗中不同溫度條件下呼吸速率和乙烯產(chǎn)生量的變化如圖所示,t1、t2表示10~30°C之間的兩個不同溫度。下列分析正確的是()A.與t1相比,t2時呼吸速率高峰出現(xiàn)時間推遲且峰值低,不利于葉片貯藏

B.與t2相比,t1時乙烯產(chǎn)生量高峰出現(xiàn)時間提前且峰值高,有利于葉片貯藏C.t1、t2條件下呼吸速率的變化趨勢相似,t1>t2,t1時不利于葉片貯藏D.t1、t2條件下乙烯產(chǎn)生量的化趨勢相似,t1<t2,t1時不利于葉片貯藏第13頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一識圖能力理論原理有效對接自變量與因變量間關(guān)系,曲線趨勢變化乙烯的生理作用以及呼吸作用與蔬菜儲藏之間的關(guān)系綜合分析第14頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一4.人體甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞具有很強(qiáng)的攝碘能力。臨床上常用小劑量的放射性同位素131I治療某些甲狀腺疾病,但大劑量的131I對人體會產(chǎn)生有害影響。積聚在細(xì)胞內(nèi)的131I可能直接()A.插入DNA分子引起插入點后的堿基序列改變B.替換DNA分子中的某一堿基引起基因突變C.造成染色體斷裂、缺失或易位等染色體結(jié)構(gòu)變異D.誘發(fā)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞基因突變并遺傳給下一代第15頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一131I輻射物理因素體細(xì)胞突變?nèi)旧w變異堿基第16頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一5.甲、乙圖示真核細(xì)胞內(nèi)兩種物質(zhì)的合成過程,下列敘述正確的是()A.甲、乙所示過程通過半保留方式進(jìn)行,合成的產(chǎn)物是雙鏈核酸分子B.甲所示過程在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行,乙在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行C.DNA分子解旋時,甲所示過程不需要解旋酶,乙需要解旋酶D.一個細(xì)胞周期中,甲所示過程在每個起點只起始一次,乙可起始多次0.56第17頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一真核生物DNA分子復(fù)制具有多個復(fù)制子,多個復(fù)制眼;半不連續(xù)復(fù)制:前導(dǎo)鏈(leadingstrand)后隨鏈(laggingstrand)岡崎片段(Okazakifragment)復(fù)制叉移動的方向第18頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一轉(zhuǎn)錄泡:RNApol結(jié)合和轉(zhuǎn)錄的DNA模板區(qū)域,有12-17bp左右DNA形成解鏈區(qū)。★轉(zhuǎn)錄泡處形成很短RNA-DNA雜交雙鏈。

第19頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一RNA合成過程中,轉(zhuǎn)錄泡兩端要發(fā)生拓?fù)滢D(zhuǎn)變;由DNA旋轉(zhuǎn)酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶I完成;RNA-DNA雜交鏈也作旋轉(zhuǎn)運動。旋轉(zhuǎn)酶第20頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一6.某島嶼由海底火山噴發(fā)形成,現(xiàn)已成為旅游勝地,島上植被茂盛,風(fēng)景優(yōu)美。下列敘述不正確的是()A.該島嶼不同地段物種組成上的差異是群落水平結(jié)構(gòu)的體現(xiàn)B.該島嶼形成后最初進(jìn)行的群落演替屬于次生演替C.旅游可能使島上的群落演替按照不同于自然演替的速度進(jìn)行D.該島嶼一定發(fā)生過漫長的群落演替過程第21頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一火山爆發(fā)群落演替人類活動結(jié)構(gòu)特點第22頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一29.(18分)Ⅰ(10分)保水劑是一類高分子聚合物,可提高土壤持水能力及水肥利用率。某生物興趣小組為探究“保水劑和氮肥對小麥光合作用的影響”,進(jìn)行了以下實驗:

材料用具:相同土壤基質(zhì)栽培的小麥幼苗若干,保水劑,氮肥等。

方法步驟:

①選取長勢一致的小麥幼苗若干,平均分為A、B、C三組,分別施用適量的保水劑(60kg·hm-2)、氮肥(255kg·hm-2)、保水劑(60kg·hm-2)+氮肥(255kg·hm-2),置于相同的輕度干旱條件下培養(yǎng),其它培養(yǎng)條件相同且適宜。②在小麥灌漿期選擇晴朗無風(fēng)的上午,于10:00-11:00從每組選取相同數(shù)量的葉片,進(jìn)行CO2吸收量及葉綠素含量的測定,結(jié)果(均值)如下表:

第23頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一沒有對照組,應(yīng)另設(shè)一組不施保水劑和氮肥作為對照

取材方法不科學(xué),選取的葉片還應(yīng)取自植株的相同部位.

實驗結(jié)論:適量的保水劑與氮肥配施有利于提高小麥光合作用強(qiáng)度。(1)請指出上述方法步驟的缺陷并改正:①②第24頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一提高了光合作用有關(guān)酶的含量與活性小于

實驗測得的CO2

吸收量是光合作用過程中的CO2實際消耗量與呼吸作用CO2釋放量之差

O2(2)如不考慮方法步驟中的缺陷,從影響光合作用的內(nèi)在因素分析,保水劑與氮肥配施提高了CO2吸收量的原因可能是

。實驗測得的CO2

吸收量

(大于、等于、小于)光合作用過程中CO2實際消耗量,理由是。光合作用強(qiáng)度可通過測定CO2吸收量,也可以通過測定

釋放量計算。第25頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一大熊貓比華南虎的營養(yǎng)級低,獲得的能量相對較多

化學(xué)信息

基因交流

K值II.(8分)大熊貓和華南虎都是我國的珍稀保護(hù)動物,它們體型相近,曾經(jīng)同城分布,一度都有較大的種群數(shù)量。由于棲息地破壞導(dǎo)致它們的數(shù)量銳減,目前野生大熊貓僅有1600只左右,而華南虎在野外已基本絕跡。(1)從生態(tài)系統(tǒng)能量流動的特點分析,大熊貓比華南虎優(yōu)異的生存優(yōu)勢的原因是(2)成年大熊貓經(jīng)常用尿液和肛腺的分泌物在巖石或樹干上進(jìn)行標(biāo)記,這種行為傳遞的信息類型屬于

。(3)目前,野生大熊貓分布在六個彼此隔離的種群中,通過建立生態(tài)廊道溝通各種群,可以使種群間發(fā)生

。(4)建立自然保護(hù)區(qū),改善棲息環(huán)境,以提高

,是提高大熊貓種群密度的根本措施。第26頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一30.(15分)人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)受神經(jīng)和體液因素調(diào)節(jié)。請據(jù)圖回答:(1)某人一次性飲1000mL清水,1h內(nèi)尿量顯著增加,這是由于______________降低,對相關(guān)感受器刺激導(dǎo)致下丘腦神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的神經(jīng)沖動減少,其軸突末梢釋放的___

___

,降低了腎小管和集合管對水的___________,使水量吸收減少。飲水1h后,通過圖中a所示的___________調(diào)節(jié)機(jī)制,尿量逐漸恢復(fù)正常。細(xì)胞外液滲透壓

抗利尿激素減少

通透性

負(fù)反饋“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動:歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品,版權(quán)所有,不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日,漢水丑生標(biāo)記。第27頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一突觸小泡

特異性受體

肝糖原

胰島素

“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動:歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品,版權(quán)所有,不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日,漢水丑生標(biāo)記。30.(15分)人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)受神經(jīng)和體液因素調(diào)節(jié)。請據(jù)圖回答:(2)在劇烈運動狀態(tài)下,體內(nèi)會啟動一些列調(diào)節(jié)機(jī)制,其中支配腎上腺髓質(zhì)的內(nèi)臟神經(jīng)興奮增強(qiáng),其末梢內(nèi)__________釋放的神經(jīng)遞質(zhì)與腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞膜上的__________結(jié)合,導(dǎo)致腎上腺素分泌增多,從而促進(jìn)_______分解,抑制_________分泌,引起血糖濃度升高,以滿足運動時能量需要。“漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動:歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品,版權(quán)所有,不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日,漢水丑生標(biāo)記。第28頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一1/23/16

31.21分)Ⅰ.(12分)雄家蠶的性染色體為ZZ,雌家蠶為ZW。已知幼蠶體色正常基因(T)與油質(zhì)透明基因(t)是位于Z染色體上的一對等位基因,結(jié)天然綠色繭基因(G)與白色繭基因(g)是位于常染色體上的一對等位基因,T對t、G對g為顯性。(1)現(xiàn)有一雜交組合:ggZTZTXGGZtW,F(xiàn)1中結(jié)天然綠色蠶的雄性個體所占比例為_______,F(xiàn)2中幼蠶體色油質(zhì)透明且結(jié)天然綠色蠶的雄性個體所占比例為__________。第29頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一(2)雄蠶產(chǎn)絲多,天然綠色蠶絲銷路好?,F(xiàn)有下列基因型的雌、雄親本:GGZtW、GgZtW、ggZtW、GGZTZt、ggZTZt、ggZtZt、GgZtZt,請設(shè)計一個雜交組合,利用幼蠶體色油質(zhì)透明區(qū)別的特點,從F1中選擇結(jié)天然綠色繭的雄蠶用于生產(chǎn)(用遺傳圖解和必要的文字表述)。第30頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一胰蛋白(或膠原蛋白)

啟動子終止子對干擾素基因特異的DNA引物對

TaqDNA聚合酶

Ⅱ.(9分)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用______________________酶短時處理幼蠶組織,以便獲得單個細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的__________和_________之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_________________和_____________________________。第31頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長的附著面積

Ⅱ.(9分)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時,貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以__________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。第32頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一吃透《考試說明》,認(rèn)真分析研究近幾年的高考試題?!犊荚囌f明》是怎么界定的、考題是如何體現(xiàn)的。把《考試說明》、高考題與教材進(jìn)行對比研究,我們就會對高考考什么,高考如何考有一定的了解。那么我們的高三備考復(fù)習(xí)就會變得有效。有效復(fù)習(xí)第33頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一教學(xué)策略——指向?qū)W生構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)

教師引導(dǎo)自主構(gòu)建核心概念和主干知識知識體系學(xué)生內(nèi)化《考試說明》中,“考試范圍”所框定的知識內(nèi)容第34頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一把學(xué)生從“被復(fù)習(xí)”中解脫出來如何在復(fù)習(xí)教學(xué)中讓學(xué)生學(xué)會自主構(gòu)建知識、自主解決問題、自己學(xué)會學(xué)習(xí),從“被復(fù)習(xí)”中解脫出來,是我們思考的主要問題——該交給學(xué)生什么?能交給學(xué)生什么?……

一節(jié)課的復(fù)習(xí),不在于老師講了多少,而在于學(xué)生理解了多少,學(xué)生掌握了多少。因此高三復(fù)習(xí)課,讓學(xué)生課堂樂于動腦、動手、參與教學(xué)就顯得非常重要。調(diào)動學(xué)生主體參與就成為有效復(fù)習(xí)的最佳方式。第35頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一共同探討幾個問題目的——切磋交流共進(jìn)2023/4/27第36頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題1:基因工程核心——目的基因與運載體結(jié)合使用同一限制酶進(jìn)行酶切,連接酶處理有3種結(jié)果!使用同一限制酶進(jìn)行酶切,連接酶處理后目的基因存在方向問題嗎?有怎樣的解決方案?第37頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一BamHⅠ切割反應(yīng)

GGATCCCCTAGGT4

DNA連接酶15oCGATCCGGCCTAG+目的基因用BamHⅠ切割載體DNA用BamHⅠ切割重組體載體自連目的基因自連同一限制酶切位點連接3種結(jié)果:第38頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一5'

5'GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGEcoRI5'GCTTAAAATTCG5'5'

GCTTAA5'5'

AATTCG5'

退火GCTTAAAATTCG5'

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AATTCGT4-DNAligaseGAATTCCTTAAG5'

5'GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAG5'

5'GAATTCCTTAAG方向?啟動子終止子啟動子終止子啟動子終止子第39頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一用不同限制酶進(jìn)行切后連接!EcoRⅠ切割位點BglⅡ切割位點+EcoRⅠ+BglⅡ雙酶切EcoRⅠ+BglⅡ雙酶切T4

DNA連接酶15oC重組體第40頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/2741★關(guān)于體內(nèi)DNA復(fù)制問題2:體內(nèi)DNA復(fù)制的有關(guān)背景知識引發(fā)體/解旋酶岡崎片段SSBP后隨鏈的模板前導(dǎo)鏈的模板DNA旋轉(zhuǎn)酶核心酶滑動鉗RNA引物第41頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一DNA聚合酶的引物(primer)DNA復(fù)制為什么需要引物?DNA聚合酶只能催化dNTP到已有核酸鏈的游離3’-OH上,而不能從游離核苷酸起始DNA鏈的合成。DNA聚合酶需要引物來提供3’-OH末端,然后在其上加入核苷酸來延伸DNA鏈。細(xì)胞通常先在模板上合成一段RNA序列,然后通過DNA聚合酶延伸RNA鏈的3’-OH。為什么需要一段RNA序列作為引物來進(jìn)行DNA復(fù)制呢?

這可能盡量減少DNA復(fù)制起始處的突變有關(guān)。第42頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一DNA連接酶(DNALigase)基本性質(zhì):能將兩段DNA拼接起來的酶,催化DNA相鄰的5’-磷酸基團(tuán)和3’-羥基末斷之間形成磷酸二酯鍵,封閉DNA單鏈缺口。第43頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一解旋酶(helicase)功能特點:解旋酶可以促使DNA在復(fù)制叉處打開雙鏈,解開氫鍵,形成單鏈。利用ATP水解獲得的能量來打斷氫鍵第44頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/2745★關(guān)于體內(nèi)DNA復(fù)制聚合酶III核心酶聚合酶I聚合酶III核心酶滯后鏈前導(dǎo)鏈解旋酶引物合成酶RNA引物引發(fā)體拓?fù)洚悩?gòu)酶II-夾子-聚體-夾子-復(fù)合物RNA引物單鏈結(jié)合蛋白(SSB)大腸桿菌DNA復(fù)制體結(jié)構(gòu)示意圖第45頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/2746★關(guān)于體內(nèi)DNA復(fù)制真核生物DNA復(fù)制體結(jié)構(gòu)示意圖第46頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一DNA復(fù)制與染色體復(fù)制第47頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/27481

緩沖液10mmol/LTris-HCl,50mmol/LKCl,pH=8.3-9.0(室溫時約為7.2),還可有添加劑、共溶劑等。Mg2+是DNA聚合酶的激活劑。Mg2+濃度過低會使Taq酶活性喪失、PCR產(chǎn)量下降;Mg2+過高影響反應(yīng)特異性?!镉嘘P(guān)PCR反應(yīng)體系常識2、脫氧三磷酸核苷(dNTPs)

dATP、dGTP、dCTP、dTTP四種的等量混合物。

3、引物

使用濃度為0.1-0.5mol/L。濃度過低則產(chǎn)量低,過高則易導(dǎo)致錯配。問題3:PCR技術(shù)之ABC第48頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/27494、模板單、雙鏈DNA均可。一個PCR反應(yīng)中104至107個模板分子可獲得較理想的效果,但由于PCR較靈敏,更少的模板分子數(shù)在循環(huán)數(shù)增加時也會得到大量擴(kuò)增。不能混有蛋白酶、核酸酶、DNA聚合酶抑制劑、DNA結(jié)合蛋白類,模板純度不高往往是限制PCR擴(kuò)增的重要因素。5、耐熱性的DNA聚合酶有多種,均從耐熱性的細(xì)菌中分離出來,均耐高溫,普遍具有5’→3’聚合酶和5’→3’外切酶活性。常用的有:1)TaqDNA聚合酶2)TthDNA聚合酶

3)VentDNA聚合酶4)PwoDNA聚合酶5)PfuDNA聚合酶

6)混合DNA聚合酶。第49頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/2750引物長度一般以18~30bp為宜,過短降低特異性,過長會引起退火時結(jié)合的模板數(shù)減少,降低反應(yīng)效率。解鏈溫度(Tm值)很重要,直接決定了擴(kuò)增中可使用的退火溫度(Ta值)的高低,兩條引物間的Tm值越接近越好。避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免序列內(nèi)有較長的回文結(jié)構(gòu)。引物3’端為關(guān)鍵堿基,是PCR延伸的起始端,不能進(jìn)行任何修飾,也不能形成二級結(jié)構(gòu)的可能。★PCR引物的設(shè)計一般原則第50頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2023/4/2751要避免兩個引物間堿基序列互補(bǔ)以及同一引物自身堿基序列互補(bǔ)。引物5’末端堿基可添加與模板無關(guān)的序列(如限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列、ATG起始密碼子或啟動子序列等),便于克隆和表達(dá)。引物的堿基順序不能與非擴(kuò)增區(qū)有同源性。引物與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列均應(yīng)無明顯同源性,以免造成不必要的非特異性擴(kuò)增?!颬CR引物的設(shè)計一般原則第51頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一★PCR應(yīng)用舉例1、在PCR產(chǎn)物兩端添加限制性酶切位點在PCR引物的5’加上根據(jù)需要而設(shè)計的酶切位點,PCR產(chǎn)物內(nèi)部無該切點。在酶切位點的5’加3個左右的保護(hù)堿基,其數(shù)目多少取決該酶的性質(zhì)。PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳回收后,直接用限制酶進(jìn)行切割,純化后與目標(biāo)載體連接重組。該法適用于直接將PCR產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體進(jìn)行功能研究,但構(gòu)建好的表達(dá)載體必須測序才能證明PCR產(chǎn)物的身份正確且沒有突變。第52頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一2、反向PCR(reversePCR)

是用反向的互補(bǔ)引物來擴(kuò)增兩引物以外的DNA片段對某個已知DNA片段兩側(cè)的未知序列進(jìn)行擴(kuò)增??蓪ξ粗蛄袛U(kuò)增后進(jìn)行分析,如探索鄰接已知DNA片段的序列;用于僅知部分序列的全長cDNA的克隆,擴(kuò)增基因文庫的插入DNA;建立基因組步移文庫。已知序列未知序列未知序列第53頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一已知序列未知序列未知序列限制酶限制酶連接酶第54頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一能從成千上萬種蛋白質(zhì)混合物中純化出一種蛋白質(zhì)的原因是不同蛋白質(zhì)在許多理化性質(zhì)上有著極大的不同。這些理化性質(zhì)的不同是由于氨基酸的數(shù)目和序列不同造成的。問題4:蛋白分離的方法第55頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一與蛋白質(zhì)分離相關(guān)的理化特性分子大小大小蛋白質(zhì)的分子大小主要取決于蛋白質(zhì)肽鏈的數(shù)目及每條肽鏈的氨基酸殘基數(shù)目。常用方法透析超濾凝膠過濾離心溶解特性分子形狀帶電特性形狀形狀的不同會導(dǎo)致蛋白質(zhì)在離心通過溶液時,或通過膜、凝膠過濾填料顆?;螂娪灸z中的小孔運動時,都會受到它的形狀的影響。方法梯度離心的影響電泳的影響原理蛋白質(zhì)的凈電荷取決于氨基酸殘基所帶正、負(fù)電荷總和。若天冬氨酸和谷氨酸占優(yōu)勢,在pH7.0時帶凈負(fù)電荷,稱為酸性蛋白質(zhì)。若賴氨酸和精氨酸占優(yōu)勢,在pH7.0時帶凈正電荷,稱為堿性蛋白質(zhì)。方法電泳離子交換層析原理由于蛋白質(zhì)分子表面親水性和疏水性帶電基團(tuán)不同,因此在溶劑中的溶解度不同。方法:通過改變pH、離子強(qiáng)度或加入有機(jī)試劑,促進(jìn)蛋白質(zhì)分子的凝聚進(jìn)而形成沉淀。沉淀法鹽析法有機(jī)溶劑沉淀法第56頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題5:真核mRNA的加工和成熟5’加帽3’加尾特殊堿基的修飾內(nèi)含子的切除第57頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一5’端加帽第58頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一5’端帽子結(jié)構(gòu)的功能:a.翻譯起始的必要結(jié)構(gòu),為IFⅢ(起始因子)和核糖體對mRNA的識別提供信號,b.增加mRNA的穩(wěn)定性,保護(hù)mRNA免遭5’外切核酸酶的攻擊。c.運輸,有助于mRNA越過核膜,進(jìn)入胞質(zhì);第59頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一3’端加尾a大多數(shù)的真核mRNA都有3’端的多聚尾巴(polyA),約為200bp。

最近研究發(fā)現(xiàn),原核生物的RNA轉(zhuǎn)錄后也有3’添加poly(A)的現(xiàn)象。

bpoly(A)的生成

RNA末端腺苷酸轉(zhuǎn)移酶(poly(A)聚合酶,PAP

)催化前體--ATP

polyA加尾信號:AATAAA序列。第60頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一第61頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一polyA尾巴的功能與mRNA從細(xì)胞核轉(zhuǎn)送到細(xì)胞質(zhì)有關(guān)。穩(wěn)定mRNA結(jié)構(gòu),保持生物半衰期。與真核mRNA的翻譯效率有關(guān):

缺失可抑制體外翻譯的起始,含poly(A)的mRNA失去poly(A)會減弱其翻譯。第62頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一

poly(A)在分子生物學(xué)實驗中有很大應(yīng)用價值a、可將oligo(dT)與載體相連,從總體RNA中分離純化mRNAb、用寡聚dT(oligo(dT))為引物,反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第63頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一第64頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一加工后的原核生物和真核生物mRNA結(jié)構(gòu)的比較核糖體結(jié)合位點編碼區(qū)非編碼區(qū)終止密碼子第65頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念抗原(AntigensAg):是指能誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答,通過與TCR或者BCR特異結(jié)合而激活T或B淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的物質(zhì)。具有免疫原性(特異性與免疫細(xì)胞抗原受體間的相互作用)和免疫反應(yīng)性(與抗體或效應(yīng)T細(xì)胞受體分子間的相互作用)。主要包括:①異種物質(zhì):如病原微生物、異種動物血清、細(xì)菌外毒素等。②同種異體物質(zhì):如ABO血型抗原、組織相容性抗原等。③自身抗原:變性的自身物質(zhì),或自身隱蔽成分。第66頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一抗原決定簇(antigenicdeterminant

:抗原這一大分子物質(zhì)中真正與抗體分子結(jié)合的化學(xué)基團(tuán)僅僅是抗原分子的一小部分,這種抗原分子中能與抗體或淋巴細(xì)胞抗原受體特異性結(jié)合的特殊化學(xué)基團(tuán),即抗原決定簇。抗原的分類

:(1)依賴性抗原:需要T細(xì)胞輔助,主要是大分子蛋白質(zhì),如:血清球蛋白、血清白蛋白、類毒素和外毒素,組織相容性抗原等。誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫。(2)非依賴性抗原:不需要T細(xì)胞輔助,可直接刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,如肺炎菌莢膜多糖和聚多鞭毛素等,誘導(dǎo)體液免疫,不能誘導(dǎo)細(xì)胞免疫。不引起記憶應(yīng)答。

問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第67頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一抗體(antibody,Ab):

B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所分泌的,能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白稱為抗體。

細(xì)胞因子(cytokine,CK):由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞(如血管內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等)經(jīng)刺激而合成分泌的一類小分子量可溶性糖蛋白。免疫細(xì)胞之間的信息交換及相互調(diào)節(jié)依賴于細(xì)胞因子。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的為淋巴因子。細(xì)胞因子還包括白細(xì)胞介素、干擾素等。細(xì)胞因子具有抗細(xì)菌、抗病毒、調(diào)節(jié)特異性免疫反應(yīng)、誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡等多種生物學(xué)活性。

問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第68頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一主要組織相容性復(fù)合體(MHC):一類與抗原提呈密切相關(guān)的、細(xì)胞表面的穿膜糖蛋白??煞譃棰窈廷騼煞N類型,其膜外部分的肽鏈折疊為免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域樣的立體結(jié)構(gòu),能與抗原衍生的肽段結(jié)合,為適當(dāng)?shù)腡細(xì)胞所識別。

功能:1.參與對抗原的處理和提呈。2.約束免疫細(xì)胞相互作用。

3.輔助T細(xì)胞的活化。4.在移植排斥反應(yīng)中起作用。問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第69頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一T淋巴細(xì)胞T-Lymphocyte:(1)初始T細(xì)胞:從未接受抗原刺激的成熟T細(xì)胞。功能:識別抗原,無免疫效應(yīng)功能。最終分化為效應(yīng)T細(xì)胞和記憶性T細(xì)胞。(2)效應(yīng)T細(xì)胞:高水平表達(dá)能力,與初始T細(xì)胞不同,不參與淋巴循環(huán),而是向外周炎癥組織遷移。(3)記憶T細(xì)胞:與初始T相似,存活期長,可達(dá)數(shù)年,與效應(yīng)T細(xì)胞相似亦具有表達(dá)能力及向外周炎癥組織遷移。記憶性T細(xì)胞介導(dǎo)再次免疫應(yīng)答。問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第70頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一T淋巴細(xì)胞T-Lymphocyte:問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第71頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一B淋巴細(xì)胞B-Lymphocyte

:來源于骨髓前B細(xì)胞,人及哺乳動物的B細(xì)胞在骨髓內(nèi)分化成熟,故稱骨髓依賴性淋巴細(xì)胞,B細(xì)胞定居在淋巴結(jié)和脾臟內(nèi);外周血中,占淋巴細(xì)胞總數(shù)的10%-15%;具有介導(dǎo)體液免疫,抗原遞呈作用;除少數(shù)B記憶細(xì)胞可存活較長時間,一般B細(xì)胞壽命較短,僅為數(shù)日至數(shù)周。

問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第72頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一抗原提呈PresentationofAntigen

:T細(xì)胞受體(TCR)只能識別抗原分子中很小的片段,抗原提呈細(xì)胞最重要的功能就是將抗原分子降解并加工處理成多肽片段,以抗原肽-MHC復(fù)合物的形式表達(dá)于抗原提呈細(xì)胞的表面(此過程統(tǒng)稱為抗原處理);在與T細(xì)胞接觸的過程中,被T細(xì)胞識別,從而將抗原信息傳遞給T細(xì)胞(此過程統(tǒng)稱為抗原提呈)。

問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第73頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一抗原提呈問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第74頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第75頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第76頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一非特異性免疫問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第77頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一非特異性免疫問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第78頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一特異性免疫——體液免疫問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第79頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第80頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第81頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一效應(yīng)T細(xì)胞:產(chǎn)生的細(xì)胞因子的作用有多方面,表現(xiàn)出一定的非特異性效應(yīng)。問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第82頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一問題6:準(zhǔn)確把握免疫學(xué)的概念第83頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一

人類的起源與發(fā)展:轉(zhuǎn)基因生物及其爭論;

21世紀(jì)生物質(zhì)能源;基因敲除與基因治療;人類基因組計劃和性染色體;生命起源和人造細(xì)胞;問題7:生命科學(xué)若干領(lǐng)域研究新進(jìn)展第84頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一轉(zhuǎn)基因植物大事記首例轉(zhuǎn)基因作物(煙草)問世延長番茄保鮮期基因序列獲得專利權(quán)首例轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米問世轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第85頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一普茲泰事件

1998年8月10日,英國生物學(xué)家阿曼德·普茲泰(ArmandPutztai)在接受電視臺采訪時稱,他用轉(zhuǎn)基因土豆喂大鼠后發(fā)現(xiàn),大鼠體重和器官重量減輕,免疫系統(tǒng)受到了破壞。此言一出引起了國際轟動。綠色和平組織等環(huán)保組織把這種轉(zhuǎn)基因土豆說成是“殺手”。1999年5月英國皇家學(xué)會組織專家對該實驗展開同行評審。評審報告指出普斯泰的實驗包含6方面的失誤和缺陷:不能確定轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的化學(xué)成分有差異;對食用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的大鼠,未補(bǔ)充蛋白質(zhì)以防止饑餓;供實驗用的動物數(shù)量少,飼喂幾種不同的食物,且都不是大鼠的標(biāo)準(zhǔn)食物,欠缺統(tǒng)計學(xué)意義;實驗設(shè)計差,未作雙盲測定;統(tǒng)計方法不當(dāng);實驗結(jié)果無一致性。轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第86頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一帝王蝶事件(1)1999年5月20日美國康乃爾大學(xué)教授洛希(Losey)在《Nature》雜志上報道,帝王蝶幼蟲吃了沾有轉(zhuǎn)Bt基因的玉米花粉的牛奶草(馬利筋)葉子,發(fā)現(xiàn)這些幼蟲生長緩慢,死亡率高達(dá)44%。這則消息立即引起軒然大波,各種評論洶涌而來。轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第87頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一帝王蝶事件(2)不久之后,美國環(huán)境保護(hù)局(EPA)組織昆蟲專家對帝王蝶問題展開專題研究。認(rèn)為轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米花粉在田間對帝王蝶并無威脅:玉米花粉大而重,因此擴(kuò)散不遠(yuǎn)。在田間,距玉米田5米遠(yuǎn)的馬利筋雜草上,每平方厘米草葉上只發(fā)現(xiàn)有一粒玉米花粉;帝王蝶幼蟲通常不吃玉米花粉;在所調(diào)查的美國中西部田間,轉(zhuǎn)抗蟲基因玉米地占總玉米地面積的25%,但田間帝王蝶數(shù)量卻很大;美國環(huán)保局在另一項報告中指出,評價轉(zhuǎn)基因作物對非靶標(biāo)昆蟲的影響,應(yīng)以野外實驗為準(zhǔn),不能僅僅依靠實驗室數(shù)據(jù)。轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第88頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一中國抗蟲棉事件2003年,南京環(huán)境科學(xué)研究所與綠色和平組織在北京發(fā)表“轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉環(huán)境影響研究綜合報告”,認(rèn)為:

棉鈴蟲寄生性天敵-寄生蜂的種群數(shù)量大大減少;棉蚜、紅蜘蛛、盲蝽象、甜菜夜蛾等次要害蟲上升為主要害蟲;Bt棉田中昆蟲群落的穩(wěn)定性低,害蟲爆發(fā)的可能性高;室內(nèi)觀察和田間監(jiān)測都表明,棉鈴蟲對Bt棉可產(chǎn)生抗性;Bt棉在后期對棉鈴蟲的抗性降低,棉農(nóng)還是要噴2-3次農(nóng)藥;

棉鈴蟲少了,導(dǎo)致寄生蜂數(shù)量減少,屬正?,F(xiàn)象;抗蟲棉不是“無蟲棉”,

Bt基因主要是針對鱗翅目的某些害蟲,并不殺死所有害蟲,只要適當(dāng)噴灑一般農(nóng)藥,即可控制這些害蟲;抗蟲棉棉田中的節(jié)肢動物多樣性比普通棉田中有所增加;室內(nèi)經(jīng)多代人工選擇,棉鈴蟲對Bt棉的抗性提高,但經(jīng)我國五大棉區(qū)23個點的田間監(jiān)測,尚未發(fā)現(xiàn)棉鈴蟲已經(jīng)對Bt棉產(chǎn)生抗性;如果不種Bt棉,噴藥次數(shù)高達(dá)15-20次;轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第89頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一轉(zhuǎn)乙肝疫苗馬鈴薯

人體試驗初步成功

2005年2月美國州立亞利桑那大學(xué)生物學(xué)家CharlesArntzen及其同事培育出了一種無需冷藏、可以食用的含乙肝疫苗馬鈴薯。33名志愿者進(jìn)行臨床試驗,其中19人在吃了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯后體內(nèi)產(chǎn)生了乙肝抗體,1人的抗體水平上升了56倍

。轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第90頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一美科學(xué)家培育出首只“人羊”

英國《每日電訊報》2007年3月25日報道,美國內(nèi)華達(dá)大學(xué)的伊斯梅爾·贊加尼教授等經(jīng)過7年努力,耗資約1000萬美元,將人類骨髓干細(xì)胞注入綿羊胚胎腹膜中,培育出世界首只體內(nèi)含有15%人類細(xì)胞的綿羊(“chimera”)。它的主要用途是為人類提供可供移植的器官。

器官移植者必須放棄生育權(quán)轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第91頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一科學(xué)技術(shù)是一把雙刃劍,它可以造福人類,也可以給人類帶來災(zāi)難轉(zhuǎn)基因生物及其爭論第92頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一*可再生;*清潔能源,低污染;*容易儲存、運輸;*廣布世界各地;新能源太陽能、生物能源、風(fēng)能、水能…發(fā)展可再生能源燃料酒精,生物柴油,生物氫能21世紀(jì)生物質(zhì)能源第93頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一

能源生物技術(shù)生物質(zhì)能源是綠色植物通過葉綠素將太陽能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能而貯存在生物質(zhì)內(nèi)部的能量。生物轉(zhuǎn)換利用:生物質(zhì)在微生物的發(fā)酵作用下,生成酒精、柴油、沼氣、氫氣等能源產(chǎn)品;熱化學(xué)轉(zhuǎn)換利用:生物質(zhì)經(jīng)高溫處理生成木炭、焦油和可燃?xì)怏w等品位較高的能源產(chǎn)品;物理加工利用:將生物質(zhì)壓制成一定型狀的燃料(如塊型、棒型燃料),以便集中利用和提高熱效率。21世紀(jì)生物質(zhì)能源第94頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一生物能源的來源太陽能真核植物糖類物質(zhì)發(fā)酵制氫酒精發(fā)酵藍(lán)綠藻光解水制氫系統(tǒng)耐氧氫酶系統(tǒng)光合受體系統(tǒng)生物能源生物廢棄物熱解甲烷發(fā)酵氫氣酒精甲烷生物油可燃?xì)?1世紀(jì)生物質(zhì)能源2023/4/27第95頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一生物質(zhì)制酒精關(guān)鍵技術(shù)生物質(zhì)高效降解技術(shù)(纖維素、淀粉);高效產(chǎn)酒精工程菌株(耐高溫、耐高糖、耐高酒精度);發(fā)酵技術(shù);高效、低能耗的酒精分離技術(shù);酒精廢液處理技術(shù);21世紀(jì)生物質(zhì)能源第96頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一美國

舊金山

海灣的

杜氏藻

養(yǎng)殖場21世紀(jì)生物質(zhì)能源第97頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一澳大利亞

利用濃縮海水大面積養(yǎng)殖杜氏藻21世紀(jì)生物質(zhì)能源2023/4/27第98頁,共107頁,2023年,2月20日,星期一開發(fā)杜氏藻生物質(zhì)能源示意圖陽光海水杜氏藻熱解大氣可燃?xì)馍镔|(zhì)油21世紀(jì)生物質(zhì)能源第99頁,共107

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