免疫增殖病及其檢測1

免疫增殖病及其檢測1第一頁，共62頁。免疫增殖性疾病的免疫損傷機制免疫球蛋白異常升高的臨床疾患免疫球蛋白異常升高的常用的免疫檢測方法第二頁，共62頁。概述免疫增殖病(immunoproliferativedisease):是指淋巴系統(tǒng)異常增殖所引起的疾病。按細胞表面標志分類的免疫增殖性疾病第三頁，共62頁。第四頁，共62頁。免疫增殖性疾病的免疫損傷機制一、漿細胞異常增殖第五頁，共62頁。第六頁，共62頁。骨髓瘤患者的骨髓體外培養(yǎng)→瘤細胞自發(fā)性增殖，培養(yǎng)上清液瘤細胞所分泌的IL-6明顯↑。抗IL-6抗體能消除瘤細胞的自發(fā)增殖，IL-6為骨髓瘤自分泌增殖因子。IL-6↑→IL-4↓二、正常體液免疫抑制第七頁，共62頁。三、異常免疫球蛋白增生所造成的病理損傷四、溶骨性病變第八頁，共62頁。第九頁，共62頁。免疫球蛋白異常升高的臨床疾患：惡性單克隆丙種球蛋白病多發(fā)性骨髓瘤巨球蛋白血癥重鏈病輕鏈病良性單克隆丙種球蛋白病非特異性免疫球蛋白增殖癥第十頁，共62頁。單克隆丙種球蛋白病的突出特點是患者血清存在異常增多的單克隆蛋白(monoclonalprotein,M蛋白)，其理化性質(zhì)十分均一，但是多無免疫活性，所以又稱副蛋白(paraprotein)。第十一頁，共62頁。常見免疫球蛋白增殖病一、多發(fā)性骨髓瘤第十二頁，共62頁。第十三頁，共62頁。免疫球蛋白:IgMIgGIgAIgEIgD重鏈μγαεδ輕鏈κ(kappa)λ(lamda)

第十四頁，共62頁。第十五頁，共62頁。

“輕鏈失衡理論”的提出第十六頁，共62頁。漿細胞產(chǎn)生Ig模式圖輕鏈214aa10′重鏈450-570aa18′第十七頁，共62頁。輕鏈的代謝腎臟10%排出90%腎小管降解、重吸收游離輕鏈等電點PH5.9與腎小管PH接近→腎小管損害第十八頁，共62頁。1873年Rutzky首先報道多發(fā)性骨髓瘤并命名。1900年Wright證實其瘤細胞為漿細胞，故又稱為漿細胞骨髓瘤。在免疫增殖病中較常見，發(fā)病率（2～4）例/10萬人。第十九頁，共62頁。臨床表現(xiàn)骨骼表現(xiàn)腎臟表現(xiàn)血液學(xué)表現(xiàn)高粘滯度綜合征易感染性淀粉樣變其他第二十頁，共62頁。多發(fā)性骨髓瘤臨床分型IgG：多見，占50%～60%，又分IgG1、IgG2、IgG3、IgG4型。典型癥狀。IgA：占25%，又分IgA1、IgA2型。高黏綜合征多見。IgD：很少見，僅占1.5%，瘤細胞分化較差，幾乎100%生存期短。IgM(7S)：少見，易發(fā)生高粘滯血癥或雷諾氏現(xiàn)象IgE：很罕見。非分泌型：溶骨病變較少，神經(jīng)系統(tǒng)癥狀多見第二十一頁，共62頁。檢驗項目

一、血清免疫球蛋白定量

IgG、IgA、IgM二、血、尿輕鏈的定量

κ、λ鏈第二十二頁，共62頁。免疫濁度測定分類透射濁度法散射濁度法第二十三頁，共62頁。透射濁度法和散射濁度法的光路檢測器A(透射濁度法)檢測器B(散射濁度法)I0I渾濁樣品光源第二十四頁，共62頁。免疫濁度測定分類終點法速率法第二十五頁，共62頁。321TimeScatter抗體加入后測定速率

速率散射法1.加入緩沖液2.加入樣本3.加入抗體Rate第二十六頁，共62頁?？乖瓭舛葴y定范圍抗體過剩抗原過剩Ag*Ab抗原抗體的平衡平衡點第二十七頁，共62頁。三、血清區(qū)帶電泳第二十八頁，共62頁。第二十九頁，共62頁。HYDRASYS電泳\點樣艙控制面板染脫色艙第三十頁，共62頁。全自動電泳儀主要特點1.瓊脂糖凝膠作為電泳介質(zhì)2.采用國際專利的一次性加樣梳3.電泳速度快4.自動進行點樣、孵育、染色、脫色、干燥5.所有膠片可長期保存6.可做項目豐富，達16項第三十一頁，共62頁。phoresis第三十二頁，共62頁。第三十三頁，共62頁。一次性加樣梳一次性加樣梳是法國SEBIA公司獨創(chuàng)的國際專利產(chǎn)品,具有加樣量準確、均勻、樣品使用量少，每次(10μl）。絕對沒有樣品間交叉污染。（一次性加樣梳在試劑盒中配備）。第三十四頁，共62頁。電泳介質(zhì)為瓊脂糖凝膠。注意每次使用時膠片的正面永遠面對自己操作中,不要碰觸膠片的正面.第三十五頁，共62頁。第三十六頁，共62頁。肝硬化第三十七頁，共62頁。胃腸道蛋白缺失第三十八頁，共62頁。腎病綜合癥第三十九頁，共62頁。急性炎癥期升高：各類急性炎癥、感染、組織損傷、壞死、惡性腫瘤、口服避孕藥時第四十頁，共62頁。慢性炎癥期升高：各類急性炎癥、感染、組織損傷、壞死、惡性腫瘤、口服避孕藥時第四十一頁，共62頁。多克隆抗體增生癥第四十二頁，共62頁。第四十三頁，共62頁。四、免疫電泳第四十四頁，共62頁。五、免疫固定電泳第四十五頁，共62頁。六、冷球蛋白檢測第四十六頁，共62頁。巨球蛋白血癥(macroglobulinemia)不同于漿細胞瘤和其他漿細胞惡性增殖的臨床疾病，與淋巴瘤疾病相似，表現(xiàn)為淋巴結(jié)、肝脾腫大。

本病骨髓侵潤、骨質(zhì)破壞、骨痛骨折表現(xiàn)少，主要表現(xiàn)為骨髓外侵潤（淋巴結(jié)、肝脾腫大）。五聚體的IgM(19S)異常增高→血粘滯度過高綜合征。第四十七頁，共62頁。起病隱匿，進展緩慢細胞異常增殖所致癥狀：最常見的癥狀-----疲勞、乏力、體重減輕M蛋白所致癥狀

第四十八頁，共62頁。10%～30%患者出現(xiàn)本周蛋白，但發(fā)生腎損害者較少僅20%。免疫學(xué)檢查血清免疫電泳示單克隆IgM增高，一般>10g/L，是該病的特點。其他可能存在冷球蛋白，類風(fēng)濕因子或冷凝集素。第四十九頁，共62頁。發(fā)病年齡大、血清中單克隆IgM>10g/L和骨髓中淋巴細胞樣漿細胞浸潤是該病診斷的必要依據(jù)。

第五十頁，共62頁。輕鏈病是突變的單克隆漿細胞產(chǎn)生的大量輕鏈，血漿及尿中輕鏈含量異常增加。部分過多的輕鏈蛋白沉積于腎臟和其他內(nèi)臟組織引起淀粉樣變性。第五十一頁，共62頁。本病發(fā)病年齡較輕，常以發(fā)熱、貧血、嚴重的腎功能損害為主要癥狀。免疫學(xué)檢測：血清中Ig水平可明顯降低或處于正常低限，但有異常的輕鏈水平升高，κ/λ型比值明顯異常，血清及尿中往往可同時檢測出相同類型的Ig輕鏈片段。第五十二頁，共62頁。重鏈病根據(jù)重鏈的類別分類，目前已報道了、、、四種重鏈病，但型極為罕見。

第五十三頁，共62頁。3種重鏈病的特征特點γHCDαHCDμHCD好發(fā)年齡（歲）平均50歲10～30歲成年（中老年）臨床特點淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大、腭（懸雍）垂紅腫、細菌感染貧血等吸收不良征候群、散腹部淋巴結(jié)腫大、呼吸道炎癥等。內(nèi)臟淋巴結(jié)腫大組織特征易變，多形態(tài)淋巴樣細胞在淋巴結(jié)和骨髓中浸潤小腸和腸系膜淋巴結(jié)有淋巴樣細胞浸潤骨髓漿細胞有空泡，常以淋巴樣細胞出現(xiàn)乙酸纖維膜電泳不均一的小M峰M帶可有，多數(shù)不明顯正?；虻捅N球蛋白血癥血清免疫電泳自由γ鏈80%有自由α鏈自由μ鏈本周蛋白無無多數(shù)有，屬κ鏈骨質(zhì)破壞罕見無約1/3有預(yù)后不良，死于細菌感染良好慢性淋巴細胞型較好第五十四頁，共62頁。療效評價及預(yù)后監(jiān)測IgG重鏈病預(yù)后較差，患者死于細菌感染，通常在幾個月至5年之內(nèi)病情進行性惡化。IgA重鏈病預(yù)后較好。IgM重鏈病至今僅發(fā)現(xiàn)19例。IgD重鏈病僅見1例。

第五十五頁，共62頁。四種漿細胞疾病的比較疾病多發(fā)性骨髓瘤巨球蛋白血癥重鏈病輕鏈病性別男60%男80%男100%男50%視力障礙+++-+淋巴結(jié)腫大少見多見多見多見肝脾腫大少見多見多見少見溶骨性改變多見少見不見少見腎功能損害+++-++M蛋白種類IgG，IgA，IgD或EIgM重鏈（γ，α或μ）輕鏈（κ，λ）診斷后平均生存期2年4年＜1年Κ型：＞2年Λ型：＜1年第五十六頁，共62頁。良性單克隆丙球蛋白病--------又名原因不明的單克隆丙球蛋白病，血中出現(xiàn)單克隆丙球蛋白，但不伴有漿細胞惡性增殖。此病發(fā)病率明顯與年齡有關(guān)：Kochwa報道21歲以上獻血員發(fā)病率0.1～0.3%70歲以上發(fā)病率3%90歲以上發(fā)病率14%第五十七頁，共62頁。241例BMG20～35年跟蹤結(jié)果：①穩(wěn)定者46例（19%）；②死亡者113例（47%）；③M蛋白增高（＞30g/L），但未發(fā)生其他疾病者23例（9.5%）；④發(fā)展為惡性疾病者59例（24.5%）：多發(fā)性骨髓瘤39例、巨球蛋白血癥7例、惡性淋巴增殖性疾病5例、系統(tǒng)性淀粉樣變8例此病無惡變時無需特殊治療第五十八頁，共62頁。惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別診斷惡性單克隆丙種球蛋白病良性單克隆丙種球蛋白病癥狀骨髓瘤或淋巴瘤的癥狀無癥狀貧血幾乎都出現(xiàn)一般無骨損害溶骨性損害很普遍不常見骨髓象漿細胞＞10%，形態(tài)正?；虍惓{細胞＜10%，形態(tài)一般正常M蛋白常高于20g/dl低于20g/dl正常Ig降低增高或正常游離輕鏈常出現(xiàn)陰性第五十九頁，共62頁。病人

IgGIgAIgMKAPLAMK/L（g/l)姓名8～150.85～3.00.5～2.51.72～3.830.81～1.921.47～2.95顧佩佩46.2↑0.23↓0.17↓0.26↓16.80↑0.02↓陳國良7.36↓0.31↓26.90↑5.11↑1.025.01↑