醫(yī)療器械無(wú)菌檢查

1醫(yī)療器械-無(wú)菌檢查

江蘇省醫(yī)療器械檢驗(yàn)所

2主要內(nèi)容無(wú)菌定義及無(wú)菌檢查定義無(wú)菌檢驗(yàn)依據(jù)試驗(yàn)主要設(shè)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件及人員要求培養(yǎng)基種類及配制要求培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn)菌種及菌液制備無(wú)菌檢查方法驗(yàn)證供試品無(wú)菌檢查及結(jié)果判斷

3

無(wú)菌定義:無(wú)活微生物的狀態(tài)。無(wú)菌檢查定義：無(wú)菌檢查法系用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、原料、輔料及其他品種是否無(wú)菌的一種方法。若供試品符合無(wú)菌檢查法的規(guī)定，僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。（1）無(wú)菌定義4

（2）無(wú)菌檢驗(yàn)依據(jù)本規(guī)范選用于《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄XIH無(wú)菌檢查法。GB/T14233.2-2005《醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法，第二部分：生物試驗(yàn)方法中規(guī)定的無(wú)菌試驗(yàn)方法。5（3）試驗(yàn)主要設(shè)備超凈工作臺(tái)細(xì)菌培養(yǎng)箱霉菌培養(yǎng)箱立式高壓蒸汽滅菌器臺(tái)式高壓蒸汽滅菌器顯微鏡生物安全柜電熱恒溫干燥箱集菌儀6

試驗(yàn)儀器（1）-超凈工作臺(tái)7

試驗(yàn)設(shè)備（2）--隔水式恒溫培養(yǎng)箱8

試驗(yàn)設(shè)備（3）----霉菌培養(yǎng)箱9試驗(yàn)設(shè)備（4）-立式高壓蒸汽滅菌器10試驗(yàn)設(shè)備（5）--臺(tái)式蒸汽滅菌器11試驗(yàn)設(shè)備（6）--顯微鏡12試驗(yàn)設(shè)備（7）-生物安全柜13試驗(yàn)設(shè)備（8）Equinox全自動(dòng)無(wú)菌檢驗(yàn)系統(tǒng)14

（4）實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件要求：

無(wú)菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行，其全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。隔離系統(tǒng)按相關(guān)的要求進(jìn)行驗(yàn)證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無(wú)菌檢查的要求。15

（4）實(shí)驗(yàn)人員要求：

菌檢人員必須具備微生物專業(yè)知識(shí)，并經(jīng)過無(wú)菌技術(shù)培訓(xùn)。

16（5）培養(yǎng)基種類及要求

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基2012年12月1717（5）培養(yǎng)基種類及要求

無(wú)菌檢查：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基2012年12月1818（5）培養(yǎng)基種類及要求

無(wú)菌檢查：改良馬丁培養(yǎng)基：19（5）培養(yǎng)基種類及要求

保存時(shí)間：

制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在：2℃～25℃、避光非密閉容器中：一般在三周內(nèi)使用密閉容器中：一般可在一年內(nèi)使用20（5）培養(yǎng)基種類及要求

一般采用商品脫水培養(yǎng)基，臨用時(shí)按照使用說明書進(jìn)行配制，配制時(shí)須迅速，以免吸潮影響稱量的準(zhǔn)確性，同時(shí)需注意滅菌后培養(yǎng)基的pH值應(yīng)符合規(guī)定，否則必須校正后滅菌使用。新鮮配制的培養(yǎng)基，應(yīng)符合《中國(guó)藥典》規(guī)定的配方，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行挑選。21（5）培養(yǎng)恨基種類及妄要求硫乙醇酸私鹽培養(yǎng)基熱：屬于流誦體培養(yǎng)載基，即當(dāng)在液體貝培養(yǎng)基己中加入0.05外%～0.0匙7%的瓊脂，增加了吳培養(yǎng)基的于粘度，降飾低培養(yǎng)基查中的含氧燭量，使培容養(yǎng)基在一蔥段時(shí)間內(nèi)搜保持厭氧桌的條件，抱有利于厭衫氧菌的生篩長(zhǎng)。硫乙脅醇酸鹽培攤養(yǎng)基分裝敬在適宜的瘦容器中，科其粉紅色檔的氧化層適合需氣削菌的生長(zhǎng)稿，在供試饑品接種前激，培養(yǎng)基千的氧化層縣的顏色不扔得超過培乓養(yǎng)基深度猛的1／5，調(diào)PH值滅菌捉后為7.1沃±0.意2，分裝云，滅菌杏。硫乙醇柴酸鹽培丹養(yǎng)管置君：30～35℃培養(yǎng)14天。22（5）培養(yǎng)基種類及脾要求改良馬以丁培養(yǎng)史基：取培養(yǎng)基睬成分混合虛，微溫溶鄙解，調(diào)節(jié)PH值約為6.8，煮沸膨，搖勻琴，調(diào)PH值滅菌饒后為6.4悟±0.桶2，分裝怎，滅菌仿。改良馬丁鑰培養(yǎng)基：置23～28℃培養(yǎng)14天。23（5）培養(yǎng)懼基種類及要鐵求培養(yǎng)基裝姥量：對(duì)于采餓用直接青接種法配檢查的液體樣品，培擦養(yǎng)基的裝給量與供試釘品裝量相新關(guān)，應(yīng)根黎據(jù)供試品公接種量確卻定培養(yǎng)基辭的裝量，杏使供試品部接種體積征不大于培茂養(yǎng)基的10%。對(duì)于采族用直接尚接種法宮檢查的固體樣品，培李養(yǎng)基的裝斷量均為100瞞ml；一次性悉醫(yī)用材料票及醫(yī)療器授具，若醫(yī)妥療器具體叮積過大，受培養(yǎng)基的賢裝量可200辭0ml以上，撒已將其然完全浸姻沒為準(zhǔn)坊。對(duì)于采用薄膜過濾獅法檢查的委樣品，攤封閉式哈薄膜濾敘器的培割養(yǎng)基裝爛量為100配ml。24（6）培養(yǎng)基欣適用性制檢查新購(gòu)的培什養(yǎng)基或自籮配的新鮮坡培養(yǎng)基要墻求：無(wú)菌性截檢查：每批培縫養(yǎng)基隨舉機(jī)取不望少于5支（瓶）久，培養(yǎng)14天，應(yīng)游無(wú)菌生時(shí)長(zhǎng)。靈敏度檢棕查：其質(zhì)量辯均應(yīng)符科合靈敏度櫻檢查要邁求。用于僑培養(yǎng)基獻(xiàn)靈敏度截檢查的臨菌種如跑下：菌廣種的傳慘代的次牲數(shù)不得駁超過5代（從菌蕩種保存摸中心獲謎得的冷道凍干燥絲式菌種為0代）。25（6）培養(yǎng)基渴適用性努檢查菌種：砌試驗(yàn)用蜓菌株及樹菌液制域備：金黃色削葡萄球車菌[CMC家C(B)源2600狂3銅綠色競(jìng)假單胞朱菌[CMC倆C(B)眨1010鋼4]大腸埃杰希菌[CM麗CC(凳B)4愉410纖2]枯草桿菌[CMC炎C(B)跌6350洗1]生孢梭筒菌[CMC箏C(B)孩6494狼1]白色念壓珠菌[CM微CC(毒F)9潑800薦1]黑曲霉[CM暫CC(緣瑞F)9會(huì)800吩3]菌種的要蓋求：不得超過5代。采用創(chuàng)適宜的方惡法保存；烈并以保證斗試驗(yàn)菌株葵的生物學(xué)譽(yù)特性。26（6）培養(yǎng)基適磨用性檢查菌液制季備一般當(dāng)汪日使用街。取金黃色葡萄妖球菌、銅綠假單胞腦菌、枯草芽孢桿扒菌，少割許接種判至營(yíng)養(yǎng)濱肉湯基跨中，生孢梭菌的夏新鮮培編養(yǎng)物少討許接種墓至硫乙啄醇酸鹽蟲流體培散養(yǎng)基中恐，30～35℃培養(yǎng)18～24h；白色念珠菌的徐新鮮培養(yǎng)課物接種改勻良馬丁培留養(yǎng)基中，23～28℃培養(yǎng)24～48h，上述汪培養(yǎng)物名用0.9%無(wú)菌氯牙化鈉溶遇液制成染含菌量懼小于100叮cfu括/ml菌懸液；黑曲霉菌斜兼面的新鮮凝培養(yǎng)物接某種至改良傭馬丁瓊脂晝斜面培養(yǎng)雅基上，23～28℃培養(yǎng)5～7天，使梳大量的饑孢子成企熟。加接入3～5ml含0.0摟5%（ml/抖ml）聚山銷梨酯80的0.9%無(wú)菌氯化辮鈉溶液，誼將孢子洗中脫。然后閃用適宜的兇方法吸出貫孢子懸液晌至無(wú)菌試識(shí)管中，用奇含0.05鐵%（ml/m執(zhí)l）聚山倘梨酯80的0.9持%無(wú)菌氯化享鈉溶液制姻成小于100c好fu/m此l的孢子榮懸液。象（見表捐）27（6）培養(yǎng)基適道用性檢查《中國(guó)藥停典》201亡0年無(wú)菌攔檢查驗(yàn)京證試驗(yàn)材中使用7株菌見寸下表菌種接種培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度℃培養(yǎng)時(shí)間金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)肉湯或者普通斜面30～35

18～24h銅綠假單孢菌

枯草芽孢桿菌大腸埃希菌（無(wú)）生孢梭菌硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基白色念珠菌改良馬丁或者普通斜面23～28

24～48h黑曲霉改良馬丁斜面23～285～7d28（6）培養(yǎng)基別適用性鍬檢查培養(yǎng)基接私種金黃色葡挖萄球菌2支銅綠假絲式單胞菌2支硫乙醇掉酸鹽流韻體培養(yǎng)烤基縮慧枯草芽宮孢桿菌2支生孢梭菌2支9支培掙養(yǎng)基裝耗量12m倘l，空白對(duì)照1支。分別接尸種小于100c河fu/m摔l金葡、銅牌綠、枯草冶、生孢各2管，另1支不接種虧做空白對(duì)肚照，培養(yǎng)3天，逐嶄日觀察旁結(jié)果。29（5）培養(yǎng)基匆適用性駐檢查培養(yǎng)基可接種白色念株剃菌2支改良馬丁徹培養(yǎng)黑曲霉2支（5支培養(yǎng)基夜裝量9ml，其中1支做空圣白對(duì)照棄）分別接種括小于100蜜cfu偽/ml白色、滿黑曲各掉兩支，另1支不接種泥做空白對(duì)驅(qū)照。培養(yǎng)5天，逐日閱觀察結(jié)果脖。30（6）培養(yǎng)基適維用性檢查結(jié)果判績(jī)斷空白對(duì)照眼管應(yīng)無(wú)菌紫生長(zhǎng)，若管加菌的培痰養(yǎng)管均生紡長(zhǎng)良好，經(jīng)判該培養(yǎng)務(wù)基的靈敏劇度檢查符蓋合規(guī)定。31（7）試驗(yàn)(驗(yàn)證)菌種及菌連液制備菌種：試扭驗(yàn)用菌株聲及菌液制幼備：金黃色葡狐萄球菌[CMC披C(B)找2600飛3大腸埃坦希菌[CM編CC(邪B)4跳410洲2]枯草桿菌[CMC想C(B)久6350巡壽1]生孢梭菌[CM偶CC(站B)6騰494宇1]白色念呢珠菌[CMC露C(F)慨9800敲1]黑曲霉[CM盤CC(艘F)9沒800娛3]32（6）試驗(yàn)菌仗種及菌液寬制備10倍堵梯度稀胸釋選擇適響宜的3尼個(gè)稀釋乓級(jí)別要求＜1兩00cf該u/ml33（7）無(wú)菌檢趴查方法驗(yàn)與證驗(yàn)證準(zhǔn)知備條件展：稀釋液吉、沖洗慨液及其王制備方趙法0.1％蛋白馬胨水溶皆液pH7.軍0氯化鈉—蛋白胨緩訪沖液制備的廳菌液，鐮?wèi)?yīng)當(dāng)日放使用。34（7）無(wú)菌檢趙查方法驗(yàn)換證目的:證明所增采用的商方法適其合于該傲供試品某的無(wú)菌篩檢查確認(rèn)供控試品在纖該實(shí)驗(yàn)?zāi)珬l件下帝無(wú)抑菌窮活性或竹其抑菌返活性可芽以忽略異不計(jì)。確保在實(shí)饒際檢驗(yàn)條沾件下，該敗供試品的立無(wú)菌檢查嗚法的準(zhǔn)確敵性、有效邀性和重現(xiàn)雪性。驗(yàn)堡證時(shí)，按“供試品身的無(wú)菌鑒檢查”的規(guī)定及楚下列要求硬進(jìn)行操作衛(wèi)。對(duì)每一釘試驗(yàn)菌應(yīng)蛛逐一進(jìn)行撈驗(yàn)證。35（7）無(wú)菌辛檢查方耍法驗(yàn)證菌種及菌梢液制備宜：除大腸埃膀希菌（Esch鐘eric樓hia逗coli）[CMC宿C(B)喬44臘102〕外，金黃妖色葡萄球原菌、枯草芽孢隸桿菌、生孢梭菌江、白色念背珠菌、作黑曲霉飲同培養(yǎng)幻玉基靈敏投度檢查應(yīng)。大腸地埃希菌才的菌液瓶制備同諸金黃色鐮葡萄球系菌。方法驗(yàn)證唉試驗(yàn)與靈季敏度檢驗(yàn)粘所有菌種晃區(qū)別：大腸埃希點(diǎn)菌代替銅綠假號(hào)單胞菌駛。36（7）無(wú)菌檢備查方法驗(yàn)撐證菌液制納備：金黃色逐葡萄球虧菌（大伯腸埃希葡菌、枯休草芽孢匙桿菌)接種營(yíng)養(yǎng)域肉湯（或拒營(yíng)養(yǎng)瓊脂奸培養(yǎng)基）生孢梭菌腹接種硫乙淚醇酸鹽流巷體培養(yǎng)基30～35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)；白色念珠扇菌接種改誓良馬丁培雀養(yǎng)基（或捆改良馬丁專瓊脂培養(yǎng)爬基）23～28℃培養(yǎng)24～48小時(shí)上述培養(yǎng)適物用0.9％無(wú)菌賢氯化鈉米溶液制正成每1ml含菌數(shù)彼小于l00貨cfu餐(菌落形成岡單位)的菌懸喝液。黑曲霉殲接種改練良馬丁白瓊脂斜暴面培養(yǎng)恭基上，23～28℃培養(yǎng)5～7天，加柱入3～5ml潤(rùn)0.券9％無(wú)菌企氯化鈉患溶液，笛將孢子縣洗吸撞出孢子士懸液(用管口寨帶有薄間的無(wú)菌兇棉花或福紗布能毅過濾菌送絲的無(wú)葛菌毛細(xì)蒙吸管)至無(wú)菌籮試管內(nèi)洗用0.9％無(wú)菌氯韻化鈉溶液滲制成每lml含孢子劑數(shù)小于l00蔑cfu的孢子鑄懸液。37（7）無(wú)菌爪檢查方肺法驗(yàn)證薄膜過濾辟法將規(guī)定量靈的供試品棚按薄膜過抓濾法過濾闖，沖洗，謙在最后一扒次的沖洗印液中加入送試驗(yàn)菌（務(wù)小于100c商fu），過濾甚。取出濾拉膜接種至壞相應(yīng)的培否養(yǎng)基中，星或?qū)⑴囵B(yǎng)念基加至濾督筒內(nèi)。另頑取一濾桶務(wù)，不過濾蓄供試品，恨其它操作已同上，作勵(lì)為對(duì)照.將含培內(nèi)養(yǎng)基的塌容器按帖規(guī)定溫努度培養(yǎng)3～5天。智各試驗(yàn)終菌及相擴(kuò)應(yīng)的培激養(yǎng)基逐極一進(jìn)行想驗(yàn)證。（如下洞圖示）38（7）無(wú)菌檢瘡查方法驗(yàn)場(chǎng)證薄膜過淚濾法規(guī)定量的沖供試品過濾硫乙醇酸丸鹽流體培匙養(yǎng)基濾膜接種改良馬丁圣培養(yǎng)基沖洗▲每種菌籮均作1管不含供摩試品管作聲為對(duì)照加入試演驗(yàn)菌過濾39（7）無(wú)菌姻檢查方擔(dān)法驗(yàn)證直接接王種法取符合直話接接種法拌培養(yǎng)基用會(huì)量要求的墊硫乙醇酸組鹽流體培飛養(yǎng)基8管，分別接接人小于l00c養(yǎng)fu的金黃色滿葡萄球菌月、銅綠假亞單胞菌、脆枯草芽孢抹桿菌、生究孢梭菌各2管；取符彈合直接接沾種法培養(yǎng)岸基用量要豪求的改良乏馬丁培養(yǎng)稅基4管，分證別接入翁小于l00兩cfu的白色念膊珠菌、黑監(jiān)曲霉各2管。其施中1管接人德規(guī)定量?jī)龅墓┰嚩ㄆ?，?管作為俊對(duì)照，趕按規(guī)定揀的溫度利培養(yǎng)3～5天。（如朽下表）40（7）無(wú)菌檢旗查方法驗(yàn)柜證-直接接種毅法方法驗(yàn)證所用菌種（藥典2010版規(guī)定）金黃色葡萄球菌分別接種各菌種新鮮培養(yǎng)物至相應(yīng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，將培養(yǎng)物用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成菌懸液，濃度小100cfu/mL硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8支：分別接種小于100cfu的金葡、大腸、枯草、生孢各2支，其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對(duì)照，培養(yǎng)3天。大腸埃希菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌改良馬丁培養(yǎng)基4支：分別接種小于100cfu的白念、黑曲霉各2支，其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對(duì)照，培養(yǎng)5天。黑曲霉41（7）無(wú)菌電檢查方俘法驗(yàn)證結(jié)果判斷與對(duì)照商管比較顧，如含兵供試品漢各容器印中的試夕驗(yàn)菌均馳生長(zhǎng)良像好，則貍供試品爸的該檢麥驗(yàn)量在汽該檢驗(yàn)熊條件下漆無(wú)抑菌極作用或鈴其抑菌拜作用可痰以忽略煎不計(jì)，縮慧照此檢居查法和些檢驗(yàn)條胸件進(jìn)行包供試品顯的無(wú)菌巷檢查。止如含供會(huì)試品的澡任一容珍器中微亮生物生正長(zhǎng)微弱誘、緩慢挪或不生她長(zhǎng)，則努供試品籃的該檢鋼驗(yàn)量在縣該檢驗(yàn)箏條件下腦有抑菌鞋作用。卵可采用卷：1)增加沖祖洗量，派或增加剝培養(yǎng)基貓的用量溉；2)使用中踐和劑或藝滅活劑蹄、更換蓋濾膜品甲種等方赴法，消依除供試是品的抑翠菌作用毫，并重印新進(jìn)行釣方法驗(yàn)皂證。42（8）供試品絡(luò)無(wú)菌檢查在100級(jí)超凈臺(tái)呢內(nèi)，應(yīng)在疼酒精燈火轟焰周圍，壩以無(wú)菌操符作法將規(guī)傾定量的供拘試品分別印接種至含愚硫乙醇酸閉鹽流體培瓶養(yǎng)基（不亦少于15m優(yōu)l/管）和晝改良馬嘴丁培養(yǎng)壩基（不勉少于10ml核/管）的容鄰器中。注意事年項(xiàng)：嚴(yán)格遵鏈?zhǔn)責(zé)o菌蓄技術(shù)操幕作，切艷勿人為篩造成污憤染；試驗(yàn)器鼠具溫度省不可過愁高以免段將可能時(shí)存在的醬菌燙死。43（8）供試品令無(wú)菌檢查供試品包抓裝須完好申無(wú)損，尤姿其是只有麻一層包裝譽(yù)的樣品。供試品若勉有兩層（琴或兩層以用上）包裝陽(yáng)的，進(jìn)入貸無(wú)菌檢驗(yàn)帥室需將外龜包裝在傳智遞窗（或偉緩沖間）約拆除后，鉗傳入實(shí)驗(yàn)化室。開啟潔魔凈區(qū)紫扮外燈和散空氣過毅濾裝置跌并其工孤作1小時(shí)以烏上。操作人因員準(zhǔn)備倘：帶口望罩、帽拒子、穿勺專用無(wú)謹(jǐn)菌服、三鞋進(jìn)入鉛無(wú)菌室禽。每次試藏驗(yàn)中所糞用物品栽必須計(jì)翅劃好，久并有備冠用44（8）供試品主無(wú)菌檢查無(wú)菌檢叉查法包等括：薄膜過濾糠法和直接頭接種法。只要供逮試品性良狀允許濱，應(yīng)采習(xí)用薄膜享過濾法撫。進(jìn)行沈供試品席無(wú)菌檢潛查時(shí)，套所采用令的檢驗(yàn)沸方法和司檢驗(yàn)條漂件應(yīng)與灰驗(yàn)證的傻方法相提同。45（8）供試品杠無(wú)菌檢查細(xì)菌檢測(cè)排管：硫乙醇臺(tái)酸鹽流戚體培養(yǎng)內(nèi)基+供試品真菌檢末測(cè)管：改良馬丁其培養(yǎng)基+供試品陽(yáng)性對(duì)霧照管：對(duì)應(yīng)陽(yáng)三性菌+對(duì)應(yīng)培扇養(yǎng)基+供試品陰性對(duì)照筑管：應(yīng)取相稼應(yīng)的溶磨劑和稀逮釋液或番沖洗液+培養(yǎng)基46（8）供試陵品無(wú)菌著檢查檢驗(yàn)數(shù)蠶量：是指一次婆試驗(yàn)所用成供試品最擠小包裝容戒器的數(shù)量餡。一般情況時(shí)下，供試迷品無(wú)菌檢局查若采用薄膜過籃濾法，應(yīng)增跌加最小宗檢驗(yàn)數(shù)腔量的1/2作陽(yáng)性吸對(duì)照用及；若采駁用直接節(jié)接種法環(huán)，應(yīng)增才加供試端品無(wú)菌漠檢查時(shí)隱每個(gè)培列養(yǎng)基容邊器接種鍬的樣品鐵量做陽(yáng)許性對(duì)照臂用。47（8）供試品暗無(wú)菌檢查檢驗(yàn)量：是指一蔽次試驗(yàn)傳所用的批供試品戒總量（g或ml）。采用直接喂接種法時(shí)殺：若每支（屢瓶）供試瓣品的裝量牛按規(guī)定足糟夠接種兩隆份培養(yǎng)基卸，則應(yīng)分眠別接種硫衣乙醇酸鹽泳流體培養(yǎng)其基和改良花馬丁培養(yǎng)虧基。采用薄矮膜過濾譽(yù)法時(shí)：檢驗(yàn)量應(yīng)煙不少于直渴接接種法牌的供試品睬總接種量墾，只要供勞試品特性污允許，應(yīng)掀將所有容換器內(nèi)的全行部?jī)?nèi)容物書過濾。48（8）供試?yán)ζ窡o(wú)菌洋檢查直接接絡(luò)種法：每個(gè)容坊器中培展養(yǎng)基的旅用量應(yīng)鑰符合接踩種的供初試品體偉積不得期大于培妥養(yǎng)基體刷積的10％，同犧時(shí)硫乙哨醇酸鹽拖流體培走養(yǎng)基每于管裝量沉不少于15ml，改良湊馬丁培塞養(yǎng)基每喪管裝量僻不少于10ml。培養(yǎng)尼基的用兔量和高稠度同方安法驗(yàn)證姐試驗(yàn)；綿每種培犧養(yǎng)基接使種的管子數(shù)同供趴試品的嗓檢驗(yàn)數(shù)揚(yáng)量。4949（8）供試品竹無(wú)菌檢查陰性對(duì)彩照：供試品蛙無(wú)菌檢噴查時(shí)，解應(yīng)取相獲應(yīng)溶劑夢(mèng)和稀釋梳液同法羨操作，控作為陰顧性對(duì)照押。陰性喚對(duì)照不煙得有菌塵生長(zhǎng)。陰性對(duì)照漫：目的是挖驗(yàn)證相掠應(yīng)溶劑鉗和稀釋雁液本身繩是否存腫在污染橋，防止底假陽(yáng)性啄。5050（8）供試每品無(wú)菌標(biāo)檢查陽(yáng)性對(duì)屢照：應(yīng)根據(jù)供偏試品特性卻選擇陽(yáng)性伍對(duì)照菌；消無(wú)抑菌作跪用供試品殲以金黃色紐奉葡萄球菌朝為陽(yáng)性對(duì)象照菌。陽(yáng)睛性對(duì)照試范驗(yàn)的菌液著制備同方差法驗(yàn)證試旬驗(yàn)，加菌贏量小于100挎cfu芳/ml，供試監(jiān)品用量義同供試亂品無(wú)菌燒檢查每田份接種樹量相同棄。陽(yáng)性帥對(duì)照管特培養(yǎng)48~72小時(shí)應(yīng)生蛇長(zhǎng)良好。陽(yáng)性對(duì)勝照：目的是撫驗(yàn)證試妄驗(yàn)結(jié)果標(biāo)可靠性焰，防止棋假陰性傷。5151（8）供試品退無(wú)菌檢查薄膜過濾逆法：2010年版《中國(guó)藥葵典》規(guī)定:只要供阻試品性自狀允許伴，應(yīng)采武用薄膜離過濾法榜。供試透品無(wú)菌卷檢查所困采用的浸檢查方葛法和檢捎驗(yàn)條件蠟應(yīng)與驗(yàn)狂證的方績(jī)法相同械。在蠕動(dòng)喜泵的作騙用下，尤被測(cè)產(chǎn)朗品通過晌裝有帶謀空氣過檢濾器的尺針頭及器無(wú)菌管誦路直接蓄從樣品瓜容器中烤進(jìn)入濾術(shù)筒中，留免去了賺通常膜裁轉(zhuǎn)移過掌程中易近產(chǎn)生的嘩污染。無(wú)菌檢查獎(jiǎng)法中薄膜器過濾法所冊(cè)用的濾膜脅孔徑應(yīng)不冰大于0.4繁5μm，直徑嬌約為50mm。5252（8）供試品囑無(wú)菌檢查水溶液么供試品取規(guī)定山量的供斬試液，率直接過質(zhì)濾，或碎混合至片適量稀四釋液的霜無(wú)菌容裳器內(nèi)，析混勻，猜立即過輪濾。供試液經(jīng)金薄膜過濾屈后，若需嶄要用沖洗桃液沖洗濾代膜，每張覽濾膜每次琴?zèng)_洗量為100震ml，總沖洗旅量不得超型過100遲0mL，以免分濾膜上鈔微生物膜受損傷遭。沖洗后姑分別將100m闖L硫乙醇酸旱鹽流體培變養(yǎng)基及改標(biāo)良馬丁培蹤蝶養(yǎng)基加入舊相應(yīng)的濾鉗筒內(nèi)，進(jìn)行培籃養(yǎng)。5353（8）供試四品無(wú)菌脾檢查直接接種忙與薄膜過內(nèi)濾培養(yǎng)結(jié)開果：54表2上市抽驗(yàn)崇樣品(液體制遮劑)的最少合檢驗(yàn)量55表3上市抽驗(yàn)到樣品（固喉體制劑）往的最少檢價(jià)驗(yàn)量56（8）無(wú)菌檢伸查結(jié)果判番斷培養(yǎng)及觀絡(luò)察按規(guī)定獎(jiǎng)的溫度輕培養(yǎng)1