高二生物微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

高二生物微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)第1頁/共70頁是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。一、微生物第2頁/共70頁微生物病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動物原核生物界原生生物界真菌界病毒界是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。一、微生物1.分類第3頁/共70頁特點(diǎn)：小簡低微生物病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動物原核生物界原生生物界真菌界病毒界是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。1.分類一、微生物第4頁/共70頁病毒的結(jié)構(gòu)2.病毒第5頁/共70頁病毒

第6頁/共70頁SARS冠狀病毒、禽流感病毒第7頁/共70頁朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）第8頁/共70頁病毒的增殖第9頁/共70頁細(xì)菌的外形與大小3.細(xì)菌A.球菌B.桿菌C.弧菌常見的細(xì)菌三種典型形態(tài)ABC第10頁/共70頁細(xì)菌的結(jié)構(gòu)第11頁/共70頁芽孢：細(xì)菌形成的橢圓形的休眠體第12頁/共70頁芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌。第13頁/共70頁異養(yǎng)菌：腐生菌寄生菌大部分病原菌細(xì)菌的營養(yǎng)類型根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型。

自養(yǎng)菌：第14頁/共70頁異養(yǎng)菌：腐生菌寄生菌大部分病原菌光能自養(yǎng)型：光合細(xì)菌細(xì)菌的營養(yǎng)類型根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型。

自養(yǎng)菌：第15頁/共70頁異養(yǎng)菌：腐生菌寄生菌大部分病原菌光能自養(yǎng)型：光合細(xì)菌化能自養(yǎng)型：硝化細(xì)菌，鐵細(xì)菌，硫細(xì)菌細(xì)菌的營養(yǎng)類型根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型。

自養(yǎng)菌：第16頁/共70頁菌落單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。菌落是鑒定菌種的

重要依據(jù)。第17頁/共70頁細(xì)菌的菌落特征因種而異菌落第18頁/共70頁4.放線菌⑴結(jié)構(gòu)：單細(xì)胞原核生物分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）第19頁/共70頁（2）繁殖孢子絲

|孢子第20頁/共70頁鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的⑶應(yīng)用:第21頁/共70頁5.真菌第22頁/共70頁酵母菌酵母菌和霉菌青霉第23頁/共70頁生殖腐生生活孢子生殖第24頁/共70頁6.營養(yǎng)及功能微生物化學(xué)元素組成：第25頁/共70頁6.營養(yǎng)及功能微生物化學(xué)元素組成：C、H、O、N、P、S第26頁/共70頁6.營養(yǎng)及功能五大營養(yǎng)物質(zhì)碳源氮源生長因子水無機(jī)鹽微生物化學(xué)元素組成：C、H、O、N、P、S第27頁/共70頁二、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。第28頁/共70頁

（1）按物理狀態(tài)分：固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。（2）按功能分：選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。（3）按成分分：天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。1.培養(yǎng)基的類型第29頁/共70頁固體培養(yǎng)基：菌落第30頁/共70頁液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長第31頁/共70頁半固體培養(yǎng)基：第32頁/共70頁2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方第33頁/共70頁2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方3.不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、碳源、和氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。第34頁/共70頁1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成培養(yǎng)基組分提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素蛋白胨10g氮源和維生素NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容在1000mL氫元素、氧元素第35頁/共70頁4.培養(yǎng)基的用途第36頁/共70頁4.培養(yǎng)基的用途液體培養(yǎng)基：增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基：純化（分離），

鑒定、活菌計(jì)數(shù)、

保藏菌種第37頁/共70頁三、無菌技術(shù)第38頁/共70頁三、無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。第39頁/共70頁1.無菌技術(shù)的概念無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。成功地培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵。三、無菌技術(shù)第40頁/共70頁（1）消毒定義：2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別（2）滅菌的定義：第41頁/共70頁（1）消毒定義：2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別（2）滅菌的定義：3.常用的消毒與滅菌的方法第42頁/共70頁滅菌的方法：第43頁/共70頁1.灼燒滅菌滅菌的方法：第44頁/共70頁1.灼燒滅菌滅菌的方法：第45頁/共70頁2.干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3.高壓蒸氣滅菌100kPa、121℃下維持15-30min.第46頁/共70頁第47頁/共70頁1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？旁欄思考第48頁/共70頁1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？

答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。旁欄思考第49頁/共70頁2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手第50頁/共70頁2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手

答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。第51頁/共70頁微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1.器具的滅菌2.培養(yǎng)基的配制3.培養(yǎng)基的滅菌4.倒平板5.微生物接種6.恒溫箱中培養(yǎng)7.菌種的保存第52頁/共70頁四、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌)第53頁/共70頁四、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g將上述物質(zhì)溶解后，添加自來水，定

容至1000mL第54頁/共70頁1．計(jì)算、稱量2．溶化3．調(diào)pH：pH7．6

4．過濾：這一步可以省去。5．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6．加塞7．包扎操作步驟第55頁/共70頁8．滅菌:

將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。將培養(yǎng)基用舊報(bào)紙包裹，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下滅菌2h。第56頁/共70頁倒平板技術(shù)1.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手撥出棉塞。1234第57頁/共70頁倒平板技術(shù)2.右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰。1234第58頁/共70頁倒平板技術(shù)12343.用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~

20mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。第59頁/共70頁倒平板技術(shù)12344.等待平板冷卻凝固，大約需5~10min。然后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上。第60頁/共70頁

9．倒平板:

待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）2d后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種.10．無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。第61頁/共70頁1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？問題討論第62頁/共70頁1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。問題討論第63頁/共70頁2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？第64頁/共70頁2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。第65頁/共70頁3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？第66頁/共70頁3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，