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病毒與噬菌體演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)病毒一、概述二、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)組分三、四類病毒及其繁殖方式核酸(Nucleicacid)蛋白質(zhì)衣殼(Proteincoat)目前二頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)一、概述
病毒是一類由核酸和蛋白質(zhì)等少數(shù)幾種成分組成的超顯微“非細(xì)胞型生物”,其本質(zhì)是一種只含DNA或RNA的遺傳因子,能以感染態(tài)和非感染態(tài)兩種狀態(tài)存在。病毒(virus),拉丁語(yǔ)的原意是“毒素”。病毒和病毒顆粒、病毒粒、病毒體(virijon)是其同義詞。
目前三頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(一)人類對(duì)病毒的發(fā)現(xiàn)和認(rèn)識(shí)過(guò)程1892:俄國(guó)伊萬(wàn)諾夫斯基首次發(fā)現(xiàn)煙草花葉病毒的感染因子能通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器。1898:荷蘭貝哲林克證實(shí)該致病因子可以被乙醇從懸液中沉淀下來(lái)而不失去其感染性但用培養(yǎng)細(xì)菌的方法培養(yǎng)不出來(lái);給這樣的病原體起名叫virus。1935:美國(guó)斯壇萊從煙草花葉病病葉中提取出了病毒結(jié)晶,又證實(shí)了結(jié)晶中含核酸和蛋白質(zhì)兩種成分,而只有核酸具感染和復(fù)制能力。1952:Hershey和Chase證實(shí)噬菌體的遺傳物質(zhì)僅僅是DNA,開創(chuàng)了病毒分子生物學(xué)。1971后:陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了各種亞病毒—類病毒、朊病毒、擬病毒。目前四頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)1、形態(tài)極其微小,必須在電鏡下觀察,一般具過(guò)濾性;2、沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造,其主要成分僅是核酸和蛋白質(zhì)兩種,故稱分子生物;3、每一種病毒只含一種核酸,不是DNA就是RNA;4、既無(wú)產(chǎn)能酶系,也無(wú)蛋白質(zhì)和核酸酶合成系統(tǒng),只能活細(xì)胞內(nèi)專性寄生,5、靠其宿主代謝系統(tǒng)的協(xié)助來(lái)復(fù)制核酸、合成蛋白質(zhì)等組分,然后再進(jìn)行裝配而得以增殖,形成子代;6、在離體條件下,能以無(wú)生命的化學(xué)大分子狀態(tài)存在,并可長(zhǎng)期保持其侵染活力;7、對(duì)一般抗生素不敏感,但對(duì)干擾素敏感。8、有些病毒的核酸還能整合到宿主的基因組中,并誘發(fā)潛伏性感染。
(二)病毒特征目前五頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(三)宿主范圍(分布)及重要性病毒在自然界分布廣、數(shù)量多。幾乎可以感染所有的生物,包括各類微生物、植物、昆蟲、魚類、禽類、哺乳動(dòng)物和人類。根據(jù)宿主可以分為:動(dòng)物病毒植物病毒細(xì)菌病毒(或稱噬菌體)等目前六頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)電子顯微鏡法(利用負(fù)染法)分級(jí)過(guò)濾法超速離心沉降法電泳法X射線晶體衍射(四)研究方法1、病毒大小不同可采用不同的方法進(jìn)行研究
2、病毒(virus)、病毒提純的方法離心、沉淀、吸附、酶處理、抗血清處理、有機(jī)溶劑提取以及電泳、層析等等。目前七頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)二、病毒(virus)的形態(tài)構(gòu)造和化學(xué)成分(一)病毒大?。ǘ┎《镜男螒B(tài)構(gòu)造(三)化學(xué)組成病毒粒子(virusparticle):指成熟的、結(jié)構(gòu)完整的、有感染性的病毒個(gè)體。在電子顯微鏡下呈特定的形態(tài)。目前八頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(一)病毒大小測(cè)定病毒大小的單位是納米(10-9),多數(shù)病毒的直徑在100nm以下:<50nm小型病毒
50nm~150nm中等大小病毒(大多數(shù))
>150nm大型病毒(最大300nm)絕大多數(shù)病毒是能通過(guò)細(xì)菌濾器,須用電鏡才能觀察到其具體形態(tài)和大小。目前九頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)病毒大小牛痘苗病毒傳染性濃泡皮炎病毒腮腺炎病毒T偶數(shù)病毒皰疹病毒大蚊病毒流感病毒煙草花葉病毒腺病毒多瘤病毒脊髓灰質(zhì)炎病毒1微米目前十頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)目前十一頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(二)病毒的形態(tài)多數(shù)病毒呈球形或近似球形,桿狀,絲狀,少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀,噬菌體可呈蝌蚪狀。目前十二頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)1、病毒粒子的基本結(jié)構(gòu)衣殼
核心包膜刺突核衣殼衣殼粒目前十三頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)病毒粒子結(jié)構(gòu)模式圖A結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的病毒粒子;B結(jié)構(gòu)復(fù)雜的病毒粒子目前十四頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)2、病毒的對(duì)稱體制三類典型形態(tài)的病毒:廿面體對(duì)稱的結(jié)構(gòu)(球狀)螺旋對(duì)稱的結(jié)構(gòu)(桿狀)復(fù)合對(duì)稱的結(jié)構(gòu)(蝌蚪狀)大腸桿菌的T偶數(shù)噬菌體是由橢圓形的二十面體頭部和螺旋對(duì)稱的尾部組合而成,是病毒中復(fù)合對(duì)稱的代表。目前十五頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)螺旋對(duì)稱二十面體對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱(A)Filamentous(B)Complex(C)Eicosahedral(D)EnvelopedRNAorDNAProteinCoat(Capsomers)Lipidenvelope病毒粒子的對(duì)稱體制目前十六頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)3、三類典型形態(tài)的病毒及其代表二十面體對(duì)稱的代表-腺病毒復(fù)合對(duì)稱的代表-T偶數(shù)噬菌體螺旋對(duì)稱的代表-煙草花葉病毒(TMV)目前十七頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(1)螺旋對(duì)稱的代表-煙草花葉病毒
(tobacomosaicvirus,TMV)有三種類型:纖維狀、直桿狀和彎曲桿狀。衣殼形似一中空柱,內(nèi)包核酸,衣殼粒和核酸呈螺旋對(duì)稱形排列。由95%衣殼Pr和5%SSRNA組成。蛋白質(zhì)衣殼由衣殼粒(2130個(gè))一個(gè)緊挨一個(gè)地呈螺旋排列而成,ssRNA位于衣殼內(nèi)側(cè)螺旋狀溝中。
目前十八頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(2)二十面體對(duì)稱的代表-腺病毒(Adenovirus)具有20個(gè)面,30條邊和12個(gè)頂角。核衣殼由不同數(shù)量的衣殼粒按一定方式排列成對(duì)稱體。腺病毒粒子共由252個(gè)球形的衣殼粒排列成一個(gè)具有廿面的對(duì)稱體,線狀dsDNA。噬菌體X174只有12個(gè)衣殼粒,最大的廿面體是由1,472個(gè)衣殼粒組成的昆蟲病毒粒子。目前十九頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)絕大多數(shù)噬菌體為蝌蚪形,現(xiàn)以E.coliT4為例,介紹蝌蚪形噬菌體的結(jié)構(gòu):大腸桿菌T4噬菌體構(gòu)造(3)復(fù)合對(duì)稱的代表-T偶數(shù)噬菌體95nm95nm65nm24環(huán)頸環(huán)目前二十頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)
3、病毒的群體形態(tài)包涵體(inclusionbody)噬菌斑(plaque)空斑(plaque)枯斑(lesion)病毒的群體形態(tài)有:目前二十一頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(1)包涵體(inclusionbody)概念:感染病毒的宿主細(xì)胞內(nèi),出現(xiàn)在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)的大小、形態(tài)、數(shù)量不等的小體,稱為包涵體。在宿主細(xì)胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征,不同的病毒其形成的包涵體具有不同的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和特性。包涵體在細(xì)胞中的形成部位:位于細(xì)胞核內(nèi)—如包疹病毒位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)—如狂犬病毒等胞核內(nèi)胞質(zhì)都有—麻疹病毒
目前二十二頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)包涵體(inclusionbody)是病毒的聚集體;是病毒的合成部位;是病毒蛋白和與病毒感染有關(guān)的蛋白質(zhì)非病毒性包涵體,由化學(xué)因子或細(xì)菌感染形成包涵體的實(shí)踐意義—-病毒鑒定、臨床診斷依據(jù)。目前二十三頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(2)噬菌斑(plaque)噬菌斑是指在宿主細(xì)菌的菌苔上,噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。應(yīng)用:1、噬菌體定量計(jì)數(shù)2、噬菌體的鑒定目前二十四頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)空斑和病斑在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物上的與噬菌斑類似的空斑,稱為病斑.因?yàn)槭苣[瘤病毒感染??瞻吆筒“哂糜趧?dòng)物病毒粒子的計(jì)數(shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術(shù)。目前二十五頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)枯斑:植物病毒在植物葉片上形成的群體
稱為枯斑。目前二十六頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(三)化學(xué)組成
病毒的主要成分為核酸(DNA或RNA)和蛋白質(zhì)。有的病毒還含有脂質(zhì)、糖類等其他組分。目前二十七頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)1、病毒的核酸病毒核酸是病毒粒中最重要的成分,是病毒繁殖、遺傳變異與感染性的物質(zhì)基礎(chǔ)。核酸構(gòu)成了病毒的基因組。病毒核酸的種類很多,是病毒分類鑒定中的重要指標(biāo):①是DNA還是RNA;②是單鏈還是雙鏈;③呈線狀還是環(huán)狀;④是閉環(huán)還是開口環(huán);⑤基因組是單分子、雙分子、三分子或多分子;⑥核酸的堿基或堿基對(duì)數(shù);⑦核苷酸序列等。目前二十八頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)◆一種病毒至少含有一種核酸(DNA或RNA)。植物病毒絕大多數(shù)含DNA;少數(shù)含RNA;動(dòng)物病毒一部分含DNA,一部分含RNA;細(xì)菌病毒普遍含DNA,含RNA的極少?!舨《镜暮怂犷愋蜆O為多樣化:病毒的DNA與RNA均有單鏈和雙鏈:
dsDNAssDNAdsRNAssRNA病毒核酸的種類目前二十九頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)病毒DNA分子有線狀和環(huán)狀之分。
目前三十頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)▼有的病毒只有一種蛋白質(zhì),多數(shù)含有為數(shù)不多的幾種蛋白質(zhì)。▼病毒蛋白質(zhì)的氨基酸組成與其他生物一樣,但不同病毒蛋白質(zhì)的氨基酸組成和含量各不相同。▼病毒蛋白質(zhì)主要在構(gòu)成病毒結(jié)構(gòu)、病毒的侵染與增殖過(guò)程中發(fā)揮作用。
3.其他成分一些較復(fù)雜的病毒(如包膜病毒)除含有核酸和蛋白質(zhì)兩種成分外,還含有脂類、多糖等其他成分。2.病毒的蛋白質(zhì)目前三十一頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)三、各類病毒及其繁殖方式原核生物病毒——噬菌體植物病毒人類和脊椎動(dòng)物病毒昆蟲病毒目前三十二頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(一)原核生物的病毒—噬菌體噬菌體:是病毒中的一種,一般把侵染細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌的病毒叫噬菌體,包括噬細(xì)菌體、噬放線菌體、噬藍(lán)細(xì)菌體等。把侵染真菌的病毒叫噬真菌體。噬菌體在自然界廣泛存在,在1995年發(fā)表的ICTV的病毒分類與命名第六次報(bào)告中共報(bào)道了4000余種,分別劃歸為49個(gè)病毒科。噬菌體共有六類形態(tài)。目前三十三頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)噬菌體的六類形態(tài):★T-系噬菌體——T-系噬菌體是研究的最廣泛而又深入的細(xì)菌噬菌體,按發(fā)現(xiàn)的先后順序進(jìn)行從T1---T7編號(hào),后來(lái)發(fā)現(xiàn)其中偶數(shù)者的形態(tài)都相同(蝌蚪形收縮性長(zhǎng)尾),故統(tǒng)稱T偶數(shù)噬菌體。目前三十四頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)噬菌體的類型溫和噬菌體(temperatephrage)——噬菌體感染細(xì)胞后,將其核酸整合(插入)到宿主的核DNA上,并且可以隨宿主DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制,在一般情況下,不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。烈性噬菌體(virulentphage)——感染細(xì)胞后,能在寄主細(xì)胞內(nèi)增殖,產(chǎn)生大量子代噬菌體并引起細(xì)菌裂解的噬菌體。目前三十五頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)噬菌體的繁殖分為:吸附、侵入、增殖(復(fù)制與生物合成)、成熟(裝配)和裂解(釋放)5個(gè)階段。(1)噬菌體的繁殖裂解性周期(增殖性周期):烈性噬菌體的繁殖過(guò)程。目前三十六頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)①
吸附(adsorption)噬菌體對(duì)宿主細(xì)胞的吸附具高度的特異性。吸附的機(jī)理:尾絲尖端與受體發(fā)生共價(jià)結(jié)合。目前三十七頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)影響吸附的因素:噬菌體數(shù)量;陽(yáng)離子濃度;溫度;輔助因子(生物素)等。自外裂解:大量噬菌體吸附在同一細(xì)胞表面并釋放眾多的溶菌酶,最終因外在的原因?qū)е录?xì)胞裂解。目前三十八頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)②侵入(penetration)頭部的核酸通過(guò)中空的尾髓壓入細(xì)胞內(nèi),而蛋白質(zhì)外殼則留在細(xì)胞外。尾鞘的收縮性可明顯提高噬菌體核酸注入的速率。目前三十九頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)③增殖(replication)包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。增殖是通過(guò)噬菌體基因表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。核酸的復(fù)制與病毒蛋白質(zhì)的合成是分開進(jìn)行的。目前四十頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)病毒核酸鏈接入寄主核酸鏈
病毒核酸復(fù)制病毒核酸的復(fù)制目前四十一頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)④成熟(裝配)已合成的各部件進(jìn)行自行裝配成新的噬菌體的過(guò)程。T偶數(shù)噬菌體裝配過(guò)程模式圖目前四十二頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)被感染細(xì)胞裂解,成熟的子代噬菌體轉(zhuǎn)移到外界。開始新的生活史。
⑤裂解(釋放)
裂解量:平均每一宿主細(xì)胞裂解后所產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)。目前四十三頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)
有囊膜病毒以“出芽”方式釋放目前四十四頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)2、噬菌體效價(jià)的測(cè)定效價(jià)(噬菌斑形成單位數(shù)、感染中心數(shù)):每ml樣品中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)。測(cè)定方法:
斑點(diǎn)試驗(yàn)法、液體稀釋管法、單層平板法、雙層平板法、快速玻片法目前四十五頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)瓊脂平板菌液+噬菌體試樣+瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)10余小時(shí)計(jì)數(shù)噬菌斑噬菌斑數(shù)=試樣中噬菌體數(shù)雙層平板法目前四十六頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(1)一步生長(zhǎng)曲線的基本實(shí)驗(yàn)步驟離心術(shù)抗病毒血清培養(yǎng)定時(shí)取樣測(cè)噬菌斑數(shù)以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以噬菌斑數(shù)為縱坐標(biāo),繪出的曲線為一步生長(zhǎng)曲線。3、噬菌體增殖規(guī)律的描述方法—一步生長(zhǎng)曲線定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。目前四十七頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(2)一步生長(zhǎng)曲線的三個(gè)階段:潛伏期、裂解期、平穩(wěn)期
1)潛伏期噬菌體的核酸侵入宿主細(xì)胞至第一個(gè)成熟噬菌體粒子裝配前的一段時(shí)間。可分為兩個(gè)階段:隱晦期、胞內(nèi)累積期。2)裂解期緊接在潛伏期后的宿主細(xì)胞迅速裂解、溶液中噬菌體粒子急劇增多的一段時(shí)間。3)平穩(wěn)期感染后的宿主細(xì)胞已全部裂解,溶液中噬菌體效價(jià)達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)期。目前四十八頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)溫和噬菌體特點(diǎn)游離態(tài)溫和整合態(tài)(原噬菌體)營(yíng)養(yǎng)態(tài)具有整合能力;具有同步復(fù)制能力;都是dsDNA;4、溶源性溶源性:溫和噬菌體侵入宿主細(xì)菌細(xì)胞后,由于其核酸整合到宿主核基因組上,并隨宿主核酸同步復(fù)制,并不引起宿主細(xì)胞裂解的特性。子代均具有溶源性。溫和噬菌體存在形式目前四十九頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)溶源性與溶源性細(xì)菌溶源性細(xì)菌:含有原噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌(lysogenicbacteria)或溶源化細(xì)胞(lysogeniccell)。溶源菌是一類能和溫和噬菌體長(zhǎng)期共存,一般不會(huì)出現(xiàn)有害影響的細(xì)胞。溶源性(溶源現(xiàn)象):是溫和噬菌體侵入宿主細(xì)菌細(xì)胞后,由于其核酸整合到宿主核基因組上,并隨宿主核酸同步復(fù)制,并不引起宿主細(xì)胞裂解的特性。凡能引起溶源性的噬菌體即為溫和噬菌體。目前五十頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)溶源性廣泛存在于各種細(xì)菌中,如大腸桿菌、假單胞菌、沙門氏菌、鏈球菌、芽孢桿菌、棒桿菌、弧菌和極毛桿菌等。溶源性菌株命名:在敏感菌株的名稱后面加一括號(hào),其中寫上溶源性噬菌體,例如E.coli
K12(λ)。目前五十一頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)溶源性細(xì)菌的測(cè)定
1)將少量溶源菌與大量敏感性的指示菌相混合;2)與瓊脂培養(yǎng)基混勻后倒平板;3)經(jīng)培養(yǎng)后溶源菌長(zhǎng)出如圖菌落。目前五十二頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)噬菌體的應(yīng)用噬菌體會(huì)給人類造成損失,利用微生物進(jìn)行發(fā)酵的工業(yè)常深受其害。但是,由于噬菌體的某些生物學(xué)特性,使其在人類的生產(chǎn)實(shí)踐和生物學(xué)基礎(chǔ)理論研究中都有一定價(jià)值??筛爬橐韵聨追矫?。目前五十三頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)1)用于鑒定未知細(xì)菌在醫(yī)學(xué)上,有些難鑒別的病原菌,利用噬菌體對(duì)宿主細(xì)胞的高度專化性的敏感性,不僅可鑒定到菌種,而且可鑒定到菌型。2)用于臨床治療某些傳染性疾病。如果將噬菌體制劑與抗生素或者磺胺藥物配合應(yīng)用,則效果更好。3)檢驗(yàn)植物病原菌利用噬菌體可以檢驗(yàn)由種子攜帶的植物病原菌。4)測(cè)定輻射劑量某些噬菌體(如T2)對(duì)輻射劑量的反應(yīng)敏感而精確。5)噬菌體在分子生物學(xué)研究中的作用噬菌體現(xiàn)已成為進(jìn)行分子生物學(xué)研究的較為理想的重要材料。
目前五十四頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)(二)植物病毒已知的植物病毒多達(dá)700種(1989年),多數(shù)是ssRNA病毒。形態(tài):桿、絲、球狀,一般無(wú)包膜。1619年荷蘭畫師描畫的有病郁金香的畫像。目前五十五頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)花葉、黃化或紅化等癥狀植株發(fā)生矮化,叢枝或畸形等形成枯斑或壞死等癥狀植物黃萎病植物感染病毒后的主要癥狀目前五十六頁(yè)\總數(shù)六十一頁(yè)\編于三點(diǎn)借昆蟲刺吸式口器進(jìn)入、通過(guò)傷口或嫁接進(jìn)入,再通過(guò)胞間連絲或輸導(dǎo)組織迅速向其它部位擴(kuò)散引起普遍感染。1、“侵入”方式3
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