生化儀常用方法有三大類分別為終點(diǎn)法固定時(shí)間法和動(dòng)力學(xué)法

生化分析儀常用分析方法共有三大類，分別為終點(diǎn)法、固定時(shí)間法和動(dòng)力學(xué)法。終點(diǎn)法：指經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的反應(yīng)，反應(yīng)達(dá)到平衡，由于反應(yīng)的平衡常數(shù)很大，可認(rèn)為全部底物(被測(cè)物)轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物，反應(yīng)液的吸光度不再變化，只與被測(cè)物的濃度有關(guān)。這類方法通常稱為“終點(diǎn)”法，更確切地說(shuō)應(yīng)稱“平衡”法。單試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法：t1時(shí)刻加入試劑（體積為V），t2刻加入樣本（體積為S），然后攪拌并反應(yīng)，之后開(kāi)始測(cè)量反應(yīng)液的吸光度，在t3時(shí)刻反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)，t3－t2為測(cè)定時(shí)間。反應(yīng)度R＝At3－At2-1×V/(V＋S)，或R＝At3－ARBLK。其中：Ati為i時(shí)刻的吸光度，ARBLK為試劑空白吸光度。單試劑雙波長(zhǎng)終點(diǎn)法：基本上同“單試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法”，只是對(duì)于每一個(gè)測(cè)定周期，其實(shí)際吸光度等于Aλ1－Aλ2。雙試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法：t1時(shí)刻加入第一試劑(體積為V1)，t2時(shí)刻加入樣本(體積為S)之后立即攪拌，t3時(shí)刻加入第二試劑(體積為V2)并立即攪拌，t4時(shí)刻反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)。t3-t2為孵育時(shí)間,t4-t3為測(cè)定時(shí)間。喘在項(xiàng)目參數(shù)門中，如果反愛(ài)應(yīng)起始時(shí)間極設(shè)為瘋0籌，則反應(yīng)度匪R=A事時(shí)刻吸光度呢-跌雙試劑空白崗吸光度預(yù)。丙往如果反應(yīng)起潑始時(shí)間小于揮0抄，則反應(yīng)度鬧R=At4倡-挑雙試劑空白死吸光度售-t3尊到古t2欄間設(shè)定點(diǎn)的騙吸光度劈×迅（窯V1料＋熊S逗）齊/(V1余＋販S掛＋西V2)爪。支雙試劑雙波推長(zhǎng)終點(diǎn)法：闊基本上同白“砍雙試劑單波渡長(zhǎng)終點(diǎn)法螺”覆，只是對(duì)于索每一個(gè)測(cè)定啊周期，其實(shí)鳥(niǎo)際吸光度等燥于索A挎λ掏1題－輝A喊λ掩2你。威固定時(shí)間法交：扒又稱為一級(jí)箏動(dòng)力學(xué)法、螺二點(diǎn)動(dòng)力學(xué)騾法等，指在爐一定的反應(yīng)姐時(shí)間內(nèi)，反建應(yīng)速度與底湊物濃度的一尚次方成正比稈，即壇v=k[S煩]壺。由于底物叮在不斷的消悲耗，因此整薯個(gè)反應(yīng)速度維在不斷的減伯小，表現(xiàn)為鈴吸光度的變釋化越來(lái)越小綢。這類反應(yīng)照達(dá)到平衡的酷時(shí)間很長(zhǎng)，牌理論上可以趙在任意時(shí)間芽段進(jìn)行監(jiān)測(cè)若，但由于血叼清成份復(fù)雜爹，反應(yīng)剛啟澤動(dòng)時(shí)反應(yīng)較弟復(fù)雜，雜反吐應(yīng)較多，必柜需經(jīng)過(guò)一段鬼延遲時(shí)間才盡能進(jìn)入穩(wěn)定霞反應(yīng)期。霜t1蝶時(shí)刻加入試稠劑豆(集體積為倡V)種，之后測(cè)量好試劑空白的均吸光度，萄t2謹(jǐn)時(shí)刻加入樣數(shù)本練(籃體積為帝S)冷，卸t3陳時(shí)刻反應(yīng)穩(wěn)劈定，賽t4案時(shí)刻停止對(duì)丹反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)屠測(cè)；惰t2歌－扯t3窯為延遲時(shí)間甜，握t3我－醉t4倦為測(cè)定時(shí)間遮。無(wú)游慧落悅旱社城骨眼肅懷伏單波長(zhǎng)反應(yīng)拜度（單雙試夏劑相同）：黎R=At4詠—桐At3銳半羨保番粱朗意巴蔑瘦探鍬皮那雙波長(zhǎng)反應(yīng)斗度：弊R(shí)=撈（哈t4涼時(shí)刻主波長(zhǎng)厲吸光度－奶t4石時(shí)刻次波長(zhǎng)插吸光度）份-睬－（害t3鬼時(shí)刻主波長(zhǎng)等吸光度－角t3諒時(shí)刻次波長(zhǎng)兼吸光度）跑動(dòng)力學(xué)法：霉又稱零級(jí)動(dòng)掩力學(xué)法，指府反應(yīng)速度與百底物濃度的投零次方成正捐比，也就是貝與底物濃度伶無(wú)關(guān)。因此第，在整個(gè)反見(jiàn)應(yīng)過(guò)程中，破反應(yīng)物可以藍(lán)勻速地生成居某個(gè)產(chǎn)物，儉導(dǎo)致被測(cè)定傘溶液在某一熔波長(zhǎng)下吸光攔度均勻地減儉小或增加，臘減小或增加浴的速度諸(繭Δ堅(jiān)A/min系)慌與被測(cè)物的郵活性或濃度根成正比。動(dòng)擇力學(xué)法也被攜稱為連續(xù)監(jiān)罵測(cè)法；主要煎用于酶活性星的測(cè)定。門窮實(shí)際上，由殊于底物濃度斑不可能足夠幕大，隨著反鋸應(yīng)的進(jìn)行，芒底物消耗到染一定程度后念，反應(yīng)速度打不再為零級(jí)錯(cuò)，因此，零啟級(jí)動(dòng)力學(xué)法警是針對(duì)于特迫定時(shí)間段而艷言的；同樣太，由于血清茫成份復(fù)雜，流反應(yīng)剛啟動(dòng)竹時(shí)反應(yīng)較復(fù)劃雜，雜反應(yīng)迎較多，必需萍經(jīng)過(guò)一段延件遲時(shí)間才能甚進(jìn)入穩(wěn)定反卸應(yīng)期，各試爪劑商對(duì)這兩興段時(shí)間有嚴(yán)末格規(guī)定。便t1丙時(shí)刻加入試純劑弟(價(jià)體積為間V)濫，共t2塵時(shí)刻加入樣留本出(腸體積為苦S)浩，蚊t3貌時(shí)刻反應(yīng)穩(wěn)熊定，凱tn概時(shí)刻停止對(duì)蜓反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)堡測(cè)；舒t3-t2鳴為延遲時(shí)間信，虹tn-t3擠為測(cè)定時(shí)間油。朋單波長(zhǎng)反應(yīng)恥度（單雙試計(jì)劑相同）飾R柏＝（恒n獸∑蹄AT份－瞎∑樂(lè)A飯∑春T男）理/碗［攜n鴿∑米T附2熔－（伴∑捕T笑）彎2慨］,其中：芽n異＝省t3極到身tn命間的數(shù)據(jù)個(gè)玻數(shù)偶，因T鎖＝時(shí)間勺，鋼A=滋某一時(shí)間的藥吸光度。雙衰波長(zhǎng)反應(yīng)度辱基本同單波感長(zhǎng)，只是某順一時(shí)間的吸絨光度等于主罪波長(zhǎng)吸光度晨減去次波長(zhǎng)不吸光度。第二章金生化自動(dòng)化掘分析方法概故要繞一、分析方執(zhí)法分類跳（一）終點(diǎn)臂法棄被測(cè)物質(zhì)在有反應(yīng)過(guò)程中吹完全被轉(zhuǎn)變銅為產(chǎn)物，即蕩達(dá)到反應(yīng)終皂點(diǎn)，根據(jù)終句點(diǎn)吸光度的夾大小求出被傻測(cè)物濃度，耗稱為終點(diǎn)法嘗（end圾essay欲）。實(shí)際上漆被測(cè)物并沒(méi)采有完全被轉(zhuǎn)旱變，而只是咬與產(chǎn)物達(dá)到奴一個(gè)動(dòng)態(tài)的羅化學(xué)平衡，拉因此該法稱沈?yàn)槠胶夥ǜr(nóng)為恰當(dāng)。從農(nóng)時(shí)間-吸光灶度曲線來(lái)看擴(kuò)，到達(dá)反應(yīng)鈔終點(diǎn)或平衡繭點(diǎn)時(shí)，吸光摘度將不再變嬸化。分析儀壟通常在反應(yīng)坐終點(diǎn)附近連潑續(xù)選擇兩個(gè)者吸光度值，結(jié)求出其平均不值計(jì)算結(jié)果網(wǎng)，并可根據(jù)嘉兩點(diǎn)的吸光鹽度差來(lái)判斷拼反應(yīng)是否到楚達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)從。終點(diǎn)法參科數(shù)設(shè)置簡(jiǎn)單扭，反應(yīng)時(shí)間啦一般較長(zhǎng)，鵲精密度較好炸。替終點(diǎn)時(shí)間的貨確定：遮①搞根據(jù)時(shí)間-丹吸光度曲線煌來(lái)確定，如償Trind析er反應(yīng)測(cè)凈定尿酸，反盜應(yīng)曲線上3遣～5min挪時(shí)其吸光度萄已趨向穩(wěn)定拍，因而可將回5min作惹為反應(yīng)終點(diǎn)撇。隊(duì)②日根據(jù)被測(cè)物潑反應(yīng)終點(diǎn)，止結(jié)合干擾物湯的反應(yīng)情況牌來(lái)確定，如倍在血清白蛋柳白的溴甲酚常綠法測(cè)定中慢，白蛋白與收溴甲酚綠在溫10s內(nèi)很付快完成反應(yīng)博，之后談α失球蛋白和茅β侮球蛋白與溴您甲酚綠發(fā)生紀(jì)"慢反應(yīng)屯"，使反應(yīng)饒曲線上吸光捐度在10s沫后仍繼續(xù)緩周慢上升，持惱續(xù)約達(dá)10益min，因幟此終點(diǎn)時(shí)間岡應(yīng)采用10該～30s，仇而不應(yīng)選擇多10min獄。掘1．一點(diǎn)終蚊點(diǎn)法：在消反應(yīng)到達(dá)終仇點(diǎn)，即在時(shí)蟻間-吸光度順曲線上吸光蘿度不再改變止時(shí)選擇一個(gè)紫終點(diǎn)吸光度效值，這種方站法稱為一點(diǎn)亦終點(diǎn)法（o載nepo姓inte寺ndes胡say），惱其反應(yīng)曲線鐮見(jiàn)圖7-3昆。其檢測(cè)結(jié)些果的計(jì)算公普式是：待測(cè)獸物濃度CU熱=（待測(cè)吸敏光度AU－立試劑空白吸邀光度AB）繡×農(nóng)K。K為幟校準(zhǔn)系數(shù)，荷詳見(jiàn)第五節(jié)徐二操作方法刑。衡2．兩點(diǎn)終首點(diǎn)法：在犧被測(cè)物反應(yīng)哲或指示反應(yīng)齡尚未開(kāi)始時(shí)敢，選擇第一蛙個(gè)吸光度，假在反應(yīng)到達(dá)泥終點(diǎn)或平衡燈時(shí)選擇第二備個(gè)吸光度，詢此兩點(diǎn)吸光炒度之差用于大計(jì)算結(jié)果，乎稱為兩點(diǎn)終禍點(diǎn)法（tw輸opoi議nten千dess貨ay），其淘反應(yīng)曲線見(jiàn)案圖7-4。塘計(jì)算公式為歡CU=（待厭測(cè)吸光度A赤2－待測(cè)吸剩光度A1）愛(ài)×瀉K。該法能多有效地消除莖溶血（he惰molys刪is）、黃疤疸（ict惱erus）糾和脂濁（l哀ipo-t叮urbid塑）等樣品本墻身光吸收（優(yōu)見(jiàn)圖7-5娛）造成的干釀擾。在單試折劑分析加入圖試劑的初期扇、或雙試劑幅分析中第二玻試劑加入之渡初，若指示戀反應(yīng)吸光度并尚未明顯變礙化，則可在認(rèn)此時(shí)選擇第推一個(gè)吸光度寄，在指示反亭應(yīng)終點(diǎn)時(shí)選閱擇第二個(gè)吸亞光度，從而浸設(shè)置成兩點(diǎn)趨終點(diǎn)法。但被指示反應(yīng)初墨期吸光度無(wú)底明顯變化的取化學(xué)反應(yīng)較卷少，如單試隆劑方式測(cè)定叫總蛋白、白紀(jì)蛋白、鈣、政磷、鎂等的膊終點(diǎn)法分析周項(xiàng)目，及雙為試劑方式測(cè)蹄定葡萄糖、末總膽固醇、辦甘油三酯等促的終點(diǎn)法分衣析項(xiàng)目，因皇反應(yīng)初期吸苦光度已有明確顯變化，因擦而均難以用貴上述方式設(shè)樣置兩點(diǎn)終點(diǎn)鎖法。但在雙律試劑分析中鹿，如果將第致一吸光度選典擇在第二試彩劑加入前，糖此時(shí)指示反兇應(yīng)一般尚未殿開(kāi)始，則能夸容易設(shè)置兩睛點(diǎn)終點(diǎn)法。器在此要注意均必須將兩次旨讀吸光度時(shí)冬不同比色液悠體積進(jìn)行校梳正。目前全故自動(dòng)分析儀廚均具有此自蔽動(dòng)校正功能隸，不必手工城進(jìn)行校正。泳（二）固定村時(shí)間法歐指在時(shí)間-火吸光度曲線就上選擇兩個(gè)據(jù)測(cè)光點(diǎn)，此琴兩點(diǎn)既非反吸應(yīng)初始吸光墊度亦非終點(diǎn)填吸光度，這糾兩點(diǎn)的吸光洽度差值用于元結(jié)果計(jì)算，續(xù)稱為固定時(shí)壇間法（fi確xed-t濱imee森ssay）貌，反應(yīng)曲線亂見(jiàn)圖7-6呼。其計(jì)算公仿式與兩點(diǎn)終測(cè)點(diǎn)法相同，校為CU=(拿A2-A1進(jìn))聲×億K。有時(shí)也濁稱此法為兩搶點(diǎn)法。拘該分析方法赤有助于解決摩某些反應(yīng)的層非特異性問(wèn)乓題。例如：成苦味酸法測(cè)蘇定肌酐，反非應(yīng)的最初3擾0s內(nèi)，血奴清中快反應(yīng)牌干擾物（如寶微生物、丙載酮酸、乙酰牙乙酸等）能鹽與堿性苦味默酸反應(yīng)；在來(lái)第二個(gè)30捆s時(shí)堿性苦所味酸主要與洲肌酐反應(yīng)，園且此段時(shí)間乳－吸光度曲擱線的線性較勇好（故也可孕用連續(xù)監(jiān)測(cè)擋法測(cè)定肌酐待）；在80緞～120s幟及其以后，田堿性苦味可鼓與蛋白質(zhì)以衛(wèi)及其它慢反賞應(yīng)干擾物反遷應(yīng)。這樣選猾用反應(yīng)的第嚴(yán)二個(gè)30s舅為測(cè)定時(shí)間堡，既避免了質(zhì)快反應(yīng)物質(zhì)籌的干擾，也潔避免了慢反蒸應(yīng)物質(zhì)的影挽響，使肌酐殖濃度與吸光熟度變化呈良急好的線性關(guān)掏系，有利于其提高分析的原特異性和準(zhǔn)勇確度。新（三）連續(xù)鉛監(jiān)測(cè)法和連續(xù)監(jiān)測(cè)法淡（cont匙inuou蚊smon桂itori暮nges囑say）又揚(yáng)稱速率法（租rate剃essay嚷），是在測(cè)洽定酶活性或瓜用酶法測(cè)定豪代謝產(chǎn)物時(shí)減，連續(xù)選取斧時(shí)間-吸光冷度曲線中線緣性期的吸光羞度值，并以輩此線性期的鳴單位吸光度兵變化值（速Δ普A/min樸）計(jì)算結(jié)果蚊，見(jiàn)圖7-組7A和B。竭所謂線性期虎就是各點(diǎn)吸辯光度差值相壓等，如圖7樹(shù)-7C所示集，圖中桂δ蹤1及柿δ掃5值偏小，衣而飽δ柏2＝造δ哀3＝專δ炮4，故A1壘點(diǎn)至A4點(diǎn)計(jì)屬線性段。假此線性期對(duì)腎底物來(lái)說(shuō)屬皺零級(jí)反應(yīng)，兩期間的癢Δ鄉(xiāng)A/min樂(lè)即為酶促反沿應(yīng)的初速度也，其大小與坡被測(cè)酶活性馳成正比。連痛續(xù)監(jiān)測(cè)法的棋優(yōu)點(diǎn)即是可鏡以確定線性侄期并計(jì)算載Δ剖A/min席，根據(jù)此值以再準(zhǔn)確地計(jì)賀算酶活性，夏因而使自動(dòng)筋生化分析儀弟在酶活性測(cè)圖定方面顯著倒地優(yōu)于手工門法。連續(xù)監(jiān)督測(cè)法也可用斷于測(cè)定呈線如性反應(yīng)的代質(zhì)謝物濃度，格一般是某些掌基于酶法測(cè)悟定的代謝物撇。酶活性（挨U/L）＝鑄Δ很A/min攀×債理論（或校農(nóng)準(zhǔn)）K值，子代謝物濃度沿CU=凈Δ吳A/min猾×添校準(zhǔn)K值。尋關(guān)于理論K伴值和校準(zhǔn)K奸值敘述如下稍：迷1．理箭論K值：億多用于酶活好性測(cè)定中，籮因酶活性尚催無(wú)公認(rèn)的校窩準(zhǔn)品可用，共因而根據(jù)酶迷活性的國(guó)際習(xí)單位定義得將出酶活性的鏡計(jì)算公式為芽：酶活性垂(U/L)晌=磚Δ忘A/min缸×藝，將此式腳中以K來(lái)獸表示，此K濫值可通過(guò)對(duì)突已知值即指等示物質(zhì)的毫街摩爾消光系喬數(shù)（堪ε蜜）、反應(yīng)液象總?cè)萘浚═管V）、樣品扛容量（SV顆）和比色杯票光徑（d）稠計(jì)算后得出宿，即為理論傻K值，可作席為分析參數(shù)唇輸入到分析紹儀中。第采用理論K擇值的前提應(yīng)要當(dāng)是樣品和靈試劑的加量瘋準(zhǔn)確、比色粘杯光徑準(zhǔn)確潮、溫度控制鉤精確以及波祥長(zhǎng)準(zhǔn)確等。麥但事實(shí)上由睡于各型分析罷儀在注射器紋容積步進(jìn)電寒機(jī)精度、濾此光片帶寬等通方面的差異游，可造成樣腿品和試劑加澡量以及吸光突度檢測(cè)的偏艇差。溫度的向影響有時(shí)也猾非常大，由膨于反應(yīng)盤是性半暴露的，憤因此隨著較私冷試劑的加姿入，反應(yīng)盤么中的溫度會(huì)設(shè)逐漸降低，娛盡管開(kāi)始測(cè)獎(jiǎng)定時(shí)反應(yīng)盤義溫度已升到菊37呆°版C，但在某莫一項(xiàng)目測(cè)定賭過(guò)程的開(kāi)始俱階段，溫度蘆可能達(dá)不到遣37包°蚊C，甚至閘僅35主°法C左右，且得反應(yīng)過(guò)程中涌仍有可能上肺下波動(dòng)，這汽對(duì)于酶學(xué)反旨應(yīng)來(lái)說(shuō)影響驅(qū)是很大的?？s如采用37奮°鄉(xiāng)C時(shí)的理論稼K值，將會(huì)輛使測(cè)定結(jié)果什降低，溫度蘭的波動(dòng)還會(huì)軌使得結(jié)果的懂重復(fù)性降低隔。當(dāng)然，若栗試劑在加入岔反應(yīng)杯前經(jīng)鉆試劑臂內(nèi)加醒熱裝置預(yù)溫凡，則基本不少影響反應(yīng)盤修溫度。炎由于摩爾吸杜光系數(shù)受比謹(jǐn)色杯光徑、糊波長(zhǎng)、帶寬脖以及加樣系郵統(tǒng)的準(zhǔn)確性枝等的影響，庫(kù)書本上或試玻劑廠家提供撿的理論摩爾老吸光系數(shù)可蹦能與實(shí)際所愁用分析儀所閘測(cè)的不同，賴因而有必要島獲得實(shí)際的辯摩爾吸光系皺數(shù)，然后用姓來(lái)計(jì)算的K茂值稱為實(shí)測(cè)坡K值。延（1）NA取DH（NA遙DPH）摩揚(yáng)爾吸光系數(shù)鐮的測(cè)定：N轉(zhuǎn)ADH（N至ADPH）勾沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)純均制品，而且拘配成溶液后跑穩(wěn)定性又較獅差，不能直孟接用NAD呈H或NA險(xiǎn)DPH標(biāo)準(zhǔn)吐液來(lái)校正儀痕器，須通過(guò)蓬有NAD+架(NADP僵+)參與的煙反應(yīng)途徑。鬧用已糖激酶瓜(HK)博或葡萄糖脫憂氫酶(GD誤)方法測(cè)定匠葡萄糖時(shí)，育葡萄糖的消箱耗與NAD森H的生成呈送等摩爾關(guān)系云。葡萄糖有遭標(biāo)準(zhǔn)純制品玩，又有國(guó)家評(píng)批準(zhǔn)文號(hào)的游葡葡糖標(biāo)準(zhǔn)新液。因此，喇根據(jù)公式A霉=艘ε瞎bC，已知盾比色杯光徑奶b和葡萄糖背標(biāo)準(zhǔn)液濃度菠，測(cè)得葡萄鞏糖標(biāo)準(zhǔn)管的棉吸光度A后辮便可計(jì)算出且NADH（罷NADPH蛾）的摩爾吸頑光系數(shù)矮ε紐為A/b驚C。假設(shè)，南葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)似液濃度為1棍Ommo1顆/L(0.趟01mol驢/L)，標(biāo)句準(zhǔn)液加入量怒為3.5蘋μ紫L，酶試劑秒加入量為3餓35運(yùn)μ蘇L，比色杯貍光徑為0.慚7cm，在租340nm限測(cè)得吸光度項(xiàng)為0.46言5，則實(shí)測(cè)鬧NADH摩搬爾吸光系數(shù)何=＝64娃24，即壞在此臺(tái)分析秋儀上340揮nm波長(zhǎng)處倆測(cè)得NAD度H（NAD邊PH）的摩拔爾吸光系數(shù)亭為6424眉，而理論上閣NADH（叛NADPH鴉）的旅ε泡為6220所。槍（2）"色糞素原"酶促山產(chǎn)物在40律5nm波長(zhǎng)者摩爾吸光系故數(shù)的測(cè)定：揭有許多酶底禮物為人工合辨成的"色素雙原"底物，荷其本身無(wú)色朗，經(jīng)酶作用存后釋放出有敏色的反應(yīng)產(chǎn)率物，在40立5nm波長(zhǎng)流具有吸收峰嫂。最常用色司素原底物及嶄其產(chǎn)物為:戶ALP測(cè)財(cái)定以磷酸對(duì)非硝基苯酚猛(4-Ni雪troph讀enyl瀉phosp郵hate，屈4-NPP迎)為底物，銅經(jīng)酶作用后屈釋放出黃色資的對(duì)硝基苯省酚(4-N乘itrop介henol冤，4-NP堆)，GGT正測(cè)定以詢?chǔ)脺p-L-谷氨洪酰對(duì)硝基苯愉胺(槳γ螺-L-Gl墾utamy讓l-p-n兇itroa畢nilid幻e)或漠γ演-L-谷氨吸酰-3-羥陰基-對(duì)硝基膽苯胺(聰γ暗-L-Gl預(yù)utamy湯l-3-c肥arbox暖yl-p-侵nitro疾an)為底儲(chǔ)物，經(jīng)酶作梯用后釋放出撈黃色的對(duì)硝拒基苯胺(p堅(jiān)-Nitr綠oanil置ine，4自-NA)或姨對(duì)硝基-5廚-氨基苯甲何酸(2-a璃mino-耕nitro羽benzo把icaci油d，AN像BA)。對(duì)六硝基苯酚的間摩爾吸光系慚數(shù)為187幻00(40乎5nm)，泡對(duì)硝基苯胺覆的摩爾吸光搏系數(shù)為98嶄70(40憑5nm)，賺對(duì)硝基-5濕-氨基苯甲辰酸的摩爾吸搏光系數(shù)為9繼490(4競(jìng)05nm)甩。下面是對(duì)仆硝基苯酚的幕摩爾吸光系店數(shù)測(cè)定方法毒。疫試劑：盤①孫4-NP礦標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液瞎(1Omm界o1/L)規(guī)。補(bǔ)②遞4-NP裙標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液贊(2.5m板mo1/L廉，以0.8妖4mol/盞LAMP犬緩沖液稀釋搶而成)。納③井底物緩沖星液(l5m校mol/L灶4-NP秀P配于0.絮84mol趙/LAM座P-HCL醬緩沖液中，疾37徒℃芽,pHl鴿0.09土怠0.02)午。洗測(cè)定方法：澇4-NP標(biāo)冬準(zhǔn)液加入量域?yàn)?寶μ頂L，底物緩抬沖液加入量挽為350錫μ獲L，波長(zhǎng)4盛05nm，括光徑0.7養(yǎng)cm，溫度挎37胃℃汁，測(cè)定得吸早光度為A1滲；另用蒸餾狼水代替4-變NP標(biāo)準(zhǔn)液葬，按上述方勢(shì)法測(cè)定其吸傅光度為A2菜，4-NP甲標(biāo)準(zhǔn)液吸光強(qiáng)度厘Δ牙A=A1倦-A2，肺若測(cè)得朱Δ叉A為0.4蔑60，則蠅實(shí)測(cè)4-N碗P摩爾吸光標(biāo)系數(shù)＝＝誼18662替補(bǔ)2．校準(zhǔn)K達(dá)值酶活性階校準(zhǔn)品經(jīng)校揭準(zhǔn)操作后由吹分析儀自動(dòng)敲計(jì)算得出。幕在進(jìn)行酶學(xué)雹測(cè)定時(shí)，如接果分析條件癥的變化如溫姑度、樣品試匙劑加量和吸呢光度檢測(cè)偏詳差可同等程憶度地影響校胳準(zhǔn)物和待測(cè)未樣品，則使柜用校準(zhǔn)品能雖進(jìn)行補(bǔ)償。逃一般來(lái)說(shuō)以抗使用校準(zhǔn)K罩值為好，但沖必須有兩個(gè)斜先決條件：廣①雄必須使用配血套的試劑；套②刻必須使用配艱套的高質(zhì)量至的校準(zhǔn)品，雀該校準(zhǔn)品應(yīng)父具有溯源性律。使用與該埋分析儀配套坦的酶活性校是準(zhǔn)品也可得瓣到較好的酶閑活性測(cè)定結(jié)偶果。關(guān)于酶來(lái)活性標(biāo)準(zhǔn)品程，歐洲標(biāo)準(zhǔn)猜局（BCR授）和美國(guó)國(guó)溪家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)鄙研究院（N瘋IST）均件發(fā)表了人血羞清基質(zhì)的酶筑活性標(biāo)準(zhǔn)物欄，但目前尚頭無(wú)公認(rèn)的標(biāo)耀準(zhǔn)（校準(zhǔn)）桌品問(wèn)世。孩（四）透射話比濁法吩抗原與相應(yīng)裙的抗體結(jié)合逢形成的免疫孟復(fù)合物，在土反應(yīng)液中具貢有一定的濁貝度，可由一使般分光光度汗法進(jìn)行透射題比濁（tr喘ansmi桃ssion長(zhǎng)turb叛idime助try）測(cè)恨定，可用于杏某些蛋白質(zhì)麻和藥物濃度炮等的測(cè)定。淹該法須做多俊點(diǎn)校準(zhǔn)，再島經(jīng)非線性回刺歸，求出抗尖原或抗體的則含量。使用身散射比濁法窗（scat鮮tert撐urbid殲imetr麻y）能更加辱準(zhǔn)確快速地登檢測(cè)抗原抗勝體形成濁度莊的大小或其蓬速度，目前猜專用的特定瓣蛋白分析儀文可做此法檢怕測(cè)。有關(guān)免友疫比濁法原躺理詳見(jiàn)第二啟章。耳二、常用生應(yīng)化檢測(cè)項(xiàng)目慌分析方法舉過(guò)例宴1．終緊點(diǎn)法檢測(cè)劫常用的有總擋膽紅素（氧容化法或重氮堆法）、結(jié)合蘋膽紅素（氧悼化法或重氮截法）、血清后總蛋白（雙漸縮脲法）、送血清白蛋白政（溴甲酚氯全法）、總膽企汁酸（酶法炕）、葡萄糖兩（葡萄糖氧舉化酶法）、錢尿酸（尿酸聽(tīng)酶法）、總殿膽固醇（膽侄固醇氧化酶云法）、甘油保三酯（磷酸獅甘油氧化酶腳酶法）、高傭密度脂蛋白般膽固醇（直韻接測(cè)定法）哲、鈣（偶氮方砷葡Ⅲ硬法）、磷（伴紫外法）、背鎂（二甲苯酒胺藍(lán)法）等借。以上項(xiàng)目宅中，除鈣、維磷和鎂基本押上還使用單稠試劑方式分汪析因而采用樹(shù)一點(diǎn)終點(diǎn)法馬外，其它測(cè)扶定項(xiàng)目都可系使用雙試劑光故能選用兩睬點(diǎn)終點(diǎn)法，昌包括總蛋白慨、白蛋白測(cè)陸定均已有雙萍試劑可用。夠2．固疲定時(shí)間法頃苦味酸法測(cè)牲定肌酐采用都此法。扔3．連示續(xù)監(jiān)測(cè)法恥對(duì)于酶活性啟測(cè)定一般應(yīng)嚇選用連續(xù)監(jiān)宰測(cè)法，如丙鼠氨酸氨基轉(zhuǎn)日移酶、天冬你氨酸氨基轉(zhuǎn)舒移酶、乳酸遲脫氫酶、堿哈性磷酸酶、批γ震谷氨氨酰基護(hù)轉(zhuǎn)移酶、淀銅粉酶和肌酸漿激酶等。一彼些代謝物酶嘆法測(cè)定的項(xiàng)爆目如己糖激崇酶法測(cè)定葡款萄糖、脲酶宜偶聯(lián)法測(cè)定造尿素等，也猛可用連續(xù)監(jiān)縮測(cè)法?？?．透射比劈濁法透射梯比濁法可用和于測(cè)定產(chǎn)生猴濁度反應(yīng)的傘項(xiàng)目，多數(shù)切屬免疫比濁績(jī)法，載脂蛋扎白、免疫球架蛋白、補(bǔ)體掛、抗"O"柿、類風(fēng)濕因盆子，以及血滔清中的其他但蛋白質(zhì)如前蛋白蛋白、結(jié)苗合珠蛋白、圈轉(zhuǎn)鐵蛋白等陜均可用此法猶。第三章呼常用生化檢孕測(cè)項(xiàng)目分析廣方法舉例及卸參數(shù)設(shè)置慣一、常用生奉化檢測(cè)項(xiàng)目蘆分析方法舉寇例暴1筆．終點(diǎn)法檢術(shù)測(cè)常用的體有總膽紅素僅（氧化法或絲重氮法）、亮結(jié)合膽紅素懲（氧化法或者重氮法）、巷血清總蛋白鴨（雙縮脲法烈）、血清白刊蛋白（溴甲劇酚氯法）、閣總膽汁酸（士酶法）、葡寬萄糖（葡萄政糖氧化酶法吸）、尿酸（趣尿酸酶法）煉、總膽固醇恭（膽固醇氧些化酶法）、縱甘油三酯（但磷酸甘油氧恭化酶酶法）息、高密度脂鐵蛋白膽固醇慮（直接測(cè)定斯法）、鈣（慌偶氮砷第Ⅲ虧法）、磷（泉紫外法）、遇鎂（二甲苯混胺藍(lán)法）等反。以上項(xiàng)目密中，除鈣、掙磷和鎂基本者上還使用單蕩試劑方式分跪析因而采用倉(cāng)一點(diǎn)終點(diǎn)法憑外，其它測(cè)載定項(xiàng)目都可項(xiàng)使用雙試劑桶故能選用兩腎點(diǎn)終點(diǎn)法，切包括總蛋白珍、白蛋白測(cè)遺定均已有雙巧試劑可用。云2芳．固定時(shí)間岡法苦味酸紋法測(cè)定肌酐臉采用此法。來(lái)3于．連續(xù)監(jiān)測(cè)濟(jì)法對(duì)于酶很活性測(cè)定一仙般應(yīng)選用連葬續(xù)監(jiān)測(cè)法，榮如丙氨酸氨脹基轉(zhuǎn)移酶、矛天冬氨酸氨油基轉(zhuǎn)移酶、掛乳酸脫氫酶揚(yáng)、堿性磷酸坑酶、幣γ叢谷氨氨酰基大轉(zhuǎn)移酶、淀旨粉酶和肌酸食激酶等。一頃些代謝物酶點(diǎn)法測(cè)定的項(xiàng)無(wú)目如己糖激但酶法測(cè)定葡次萄糖、脲酶幼偶聯(lián)法測(cè)定猜尿素等，也弦可用連續(xù)監(jiān)愉測(cè)法。京4區(qū)．透射比濁血法透射比氣濁法可用于撕測(cè)定產(chǎn)生濁久度反應(yīng)的項(xiàng)盼目，多數(shù)屬摸免疫比濁法姑，載脂蛋白事、免疫球蛋怕白、補(bǔ)體、撕抗嫩"O"冬、類風(fēng)濕因仰子，以及血席清中的其他找蛋白質(zhì)如前召白蛋白、結(jié)戀合珠蛋白、喂轉(zhuǎn)鐵蛋白等徒均可用此法盜。懷二、分析參普數(shù)設(shè)置侍分析儀的一盡些通用操作獵步驟如取樣狠、沖洗、吸晴光度檢測(cè)、棗數(shù)據(jù)處理等技，其程序均游已經(jīng)固化在貸存儲(chǔ)器里，結(jié)用戶不能修葉改。各種測(cè)附定項(xiàng)目的分晃析參數(shù)（墨analy期sis攀param香ete問(wèn)）大部分也托已設(shè)計(jì)好，罪存于磁盤中柏，供用戶使輩用；目前大隊(duì)多數(shù)生化分鄙析儀為開(kāi)放神式，用戶可屬以更改這些汽參數(shù)。生化馬分析儀一般齊另外留一些真檢測(cè)項(xiàng)目的塊空白通道，莖由用戶自己勸設(shè)定分析參趕數(shù)。因此必窗須理解各參酷數(shù)的確切意譽(yù)義。市一、分析參打數(shù)介紹悠（一）必選款分析參數(shù)算這類參數(shù)是千分析儀檢測(cè)至的前提條件者，沒(méi)有這些求參數(shù)無(wú)法進(jìn)羅行檢測(cè)。尖1璃．試驗(yàn)名稱晶試驗(yàn)名稱（益test狂code吸）是指測(cè)定啦項(xiàng)目的標(biāo)示男符，常以項(xiàng)簽?zāi)康挠⑽目s死寫來(lái)表示。飾2誕．方法類型概（也稱反應(yīng)尖模式）少方法類型（丹assay慧）有終點(diǎn)法銳、兩點(diǎn)法、礦連續(xù)監(jiān)測(cè)法叼等，根據(jù)被諸檢物質(zhì)的檢針測(cè)方法原理屠選擇其中一額種反應(yīng)類型錦。權(quán)3聽(tīng)．反應(yīng)溫度陷一般有翠30征℃逐、焦37故℃婚可供選擇，過(guò)通常固定為砍37暢℃董。況4火．主波長(zhǎng)狡主波長(zhǎng)（奇prima印rywa缸velen勾gth懲）是指定一籠個(gè)與被測(cè)物同質(zhì)反應(yīng)產(chǎn)物古的光吸收有玉關(guān)的波長(zhǎng)?；?袍．次波長(zhǎng)闖次波長(zhǎng)（暮secon和dary玩wavel痛ength王）是在使用顫雙波長(zhǎng)時(shí)，觸要指定一個(gè)踩與主波長(zhǎng)、異干擾物質(zhì)光急吸收有關(guān)的騰波長(zhǎng)。膀6稅．反應(yīng)方向拆反應(yīng)方向（揀respo譽(yù)nsed暗irect混ion批）有正向反灣應(yīng)和負(fù)向反燥應(yīng)兩種，吸紛光度增加為欣正向反應(yīng)，依吸光度下降示為負(fù)向反應(yīng)基。驗(yàn)7挺．樣品量刊樣品量（好sampl摩ingv偶o(jì)lum孟）一般是幟2諒μ氏l躺～舌35萍μ箏l肅，以浩0.1撞μ貼l席步進(jìn)，個(gè)別健分析儀最少賽能達(dá)到碰1.6魂μ泳l屢?？稍O(shè)置常駝量、減量和訴增量。怕8槍．羅第一試劑量腿第一試劑量粗（赴first梁rege閑ngtv筋olum擱）一般是古20歉～也300煤μ戒l屑，以損1六μ拍l超步進(jìn)。拾9飲．截第二試劑量桂第二試劑量遲（旬secon守dreg沿engt妻volum羞）一般也是鴉20壺～很300某μ浩l鄰，以慢1售μ勾l廢步進(jìn)。叢10河．總反應(yīng)容降量承總反應(yīng)容量戰(zhàn)（垮total飽reac頸ting叉volum附）在不同的加分析儀有一晃個(gè)不同的規(guī)籠定范圍，一冷般是尤180領(lǐng)～憤350龍μ雕l壁，個(gè)別儀器筆能減少至肢120李μ講l兄?？偡磻?yīng)容屠量太少無(wú)法踐進(jìn)行吸光度閣測(cè)定。銹11飽．孵育時(shí)間黨孵育時(shí)間（音incub渣atet余ime岡）在終點(diǎn)法惜是樣品與試高劑混勻開(kāi)始初至反應(yīng)終點(diǎn)眠為止的時(shí)間遙，在兩點(diǎn)法醬是第一個(gè)吸生光度選擇點(diǎn)辯開(kāi)始至第二休個(gè)吸光度選此擇點(diǎn)為止的逝時(shí)間。就12斑．延遲時(shí)間寬延遲時(shí)間（溝delay典time臣）在連續(xù)監(jiān)掀測(cè)法中樣品秀與反應(yīng)試劑錢（第二試劑臨）混勻開(kāi)始盛至連續(xù)監(jiān)測(cè)棟期第一個(gè)吸纏光度選擇點(diǎn)爬之間的時(shí)間候。撓13幼．連續(xù)監(jiān)測(cè)燈時(shí)間太連續(xù)監(jiān)測(cè)時(shí)銷間（值conti東nuous竄moni鑒torin籮gtim寄e岔）在延遲時(shí)嶺間之后即開(kāi)艘始，一般為該60描～邪120s渣，不少于悼4叢個(gè)吸光度檢循測(cè)點(diǎn)（遍3什個(gè)吸光度變究化值）。槍14穴．校準(zhǔn)液個(gè)庸數(shù)及濃度水校準(zhǔn)曲線線蒼性好并通過(guò)步坐標(biāo)零點(diǎn)的廚，可采用一尺個(gè)校準(zhǔn)液（靈calib葬rator理）；線性好敞但不通過(guò)坐嘴標(biāo)零點(diǎn)，應(yīng)形使用兩個(gè)校擦準(zhǔn)液；對(duì)于默校準(zhǔn)曲線呈山非線性者，堅(jiān)必須使用兩嬸個(gè)以上校準(zhǔn)遠(yuǎn)液。每一個(gè)道校準(zhǔn)液都要版有一個(gè)合適掘的濃度。存15董．校準(zhǔn)勸K爬值或理論贏K怖值垮通過(guò)校準(zhǔn)得爬到的徒K釀值為校準(zhǔn)停K有值（鬧calib嗽rate禮coeff蛛icien囑t仍）或由計(jì)算擾得出的度K何值為理論彈K盾值。盤16信．線性范圍繭即方法的線坡性范圍（貝linea框rity野range叮），超過(guò)此踩范圍應(yīng)增加逼樣品量或減刃少樣品量重結(jié)測(cè)。與試劑散/玉樣品比值有許關(guān)。仿17夾．小數(shù)點(diǎn)位挨數(shù)閱檢測(cè)結(jié)果的庫(kù)小數(shù)點(diǎn)位數(shù)督（碎decim油alpo五intd遮igit量）。硬（二）備選蒙分析參數(shù)富這類分析參歲數(shù)與檢測(cè)結(jié)亡果的準(zhǔn)確性慢有關(guān)，一般哈來(lái)說(shuō)不設(shè)置奏這類分析參胡數(shù)，分析儀扒也能檢測(cè)出息結(jié)果，但若欲樣品中待測(cè)飲物濃度太高領(lǐng)等，檢測(cè)結(jié)淘果可能不準(zhǔn)息確。涂1尚．樣品預(yù)稀戶釋倚設(shè)置樣品量第、稀釋劑量蜂和稀釋后樣危品量三個(gè)數(shù)破值，便可在掏分析前自動(dòng)晝對(duì)樣品進(jìn)行梢高倍稀釋。車2符．底物耗盡享值另底物耗盡值薦（咐subst含rate駐exhau童stli暈mit頸）在負(fù)反應(yīng)搞的酶活性測(cè)靠定中，可設(shè)柏置此參數(shù)，兆以規(guī)定一個(gè)算吸光度下降搬限。若低于肅此限時(shí)底物防已太少，不視足以維持零境級(jí)反應(yīng)而導(dǎo)伴致檢測(cè)結(jié)果嘉不準(zhǔn)確。爸3糕．前區(qū)檢查嘆免疫比濁法兄中應(yīng)用，以勸判斷是否有麗抗原過(guò)剩。貝將終點(diǎn)法最舌后兩個(gè)吸光呼度值的差別筒（健Δ例A勒）設(shè)置一個(gè)上限值，如果可后一點(diǎn)的吸激光度比前一臂點(diǎn)低，表示神已有抗原過(guò)觸剩，應(yīng)稀釋叢樣品后重測(cè)株。兵4揮．試劑空白指吸光度范圍奔超過(guò)此設(shè)定燥范圍表示試舞劑已變質(zhì)，械應(yīng)更換合格康試劑。概5暗．試劑空白妨速率抱連續(xù)監(jiān)測(cè)法抬中使用，是杏試劑本身在那監(jiān)測(cè)過(guò)程中何沒(méi)有化學(xué)反坐應(yīng)時(shí)的變化賊速率。杏6庫(kù)．方法學(xué)補(bǔ)背償系數(shù)廚用于校準(zhǔn)不夾同分析方法咳間測(cè)定結(jié)果肝的一致性，茶有斜率和截犯距兩個(gè)參數(shù)騾。育7緞．參考值范兼圍鹿對(duì)超過(guò)此范雞圍的測(cè)定結(jié)干果，儀器會(huì)服打印出提示執(zhí)。料（三）某些架參數(shù)的特殊毅意義沾1扮．最小樣品坦量述最小樣品量鍬是指分析儀螞進(jìn)樣針能在校規(guī)定的誤差柱范圍內(nèi)吸取槽的最小樣品返量。一般分折析儀的最小頁(yè)樣品量是走2行μ跨l買，目前也有逼小至撫1.6面μ鮮l矮的。在樣品尖含高濃度代投謝產(chǎn)物或高污活性酶濃度鮮的情況下往嶄往需采用分然析儀的最小芒樣品量作為倡減量參數(shù)，帖從而使分析寧儀檢測(cè)范圍只（與線性范梁圍不同）的躬上限得以擴(kuò)渾大。內(nèi)2夕．最大試劑焰量床方法靈敏度芽很高而線性泡上限低的檢鹿測(cè)項(xiàng)目，如士血清白蛋白碰的溴甲酚氯破法測(cè)定，以逼往手工法操歐作時(shí)樣品量宣10傷μ波l愧，試劑量碑4ml秧，這樣試劑沿量委/插樣品量比例虜（衣R/S宅）為貪200第，線性上限肆則為向60g/L葵。此法移植羽到分析儀上農(nóng)后，帝R/S蕩卻很難達(dá)到刺200全，致使線性期上限變低。往因此對(duì)這類污檢測(cè)項(xiàng)目最晨大試劑量非冒常重要。豆3表．彈性速率兆在酶活性測(cè)易定中，當(dāng)酶穴活性太高，矩在連續(xù)監(jiān)測(cè)挺期中已不呈參線性反應(yīng)時(shí)敬，有些儀器枝具有彈性速晃率（庸flexr禮ate蛛）功能，能小自動(dòng)選擇反嶺應(yīng)曲線上連舉續(xù)監(jiān)測(cè)期中押仍呈線性的們吸光度數(shù)據(jù)巧計(jì)算結(jié)果，水使酶活性測(cè)按定的線性范摩圍得以擴(kuò)大伍。如康A(chǔ)ST印可從雷1000U錢/L惠擴(kuò)展至罰4000U尸/L譜，從而減少萍稀釋及重測(cè)鏟次數(shù)、降低派成本。把4紹．試劑空白會(huì)速率堆當(dāng)樣品中存塘在膽紅素時(shí)芝，膽紅素對(duì)茶堿性苦味酸旋速率法或兩湯點(diǎn)法測(cè)定肌皆酐有負(fù)干擾詢。因?yàn)槟懠t叔素在肌酐檢征測(cè)的波長(zhǎng)壞505nm遞有較高光吸糟收，而且膽迫紅素在堿性糠環(huán)境中可被欣氧化轉(zhuǎn)變，偽因而在肌酐國(guó)反應(yīng)過(guò)程中野膽紅素的光捧吸收呈下降刺趨勢(shì)。若在蹤加入第一試圓劑后一段時(shí)廊間內(nèi)設(shè)置試匹劑空白速率兼，因?yàn)榇硕魏曛锌辔端嵘心磁c肌酐反奪應(yīng)，而膽紅賣素在第一試爽劑的堿性環(huán)姥境中已同樣滔被氧化轉(zhuǎn)變駐，因而以第鳳二試劑加入吹后的速率變屑化，減去試?yán)褎┛瞻姿俾拾阕兓憧赡I消除膽紅素魂的負(fù)干擾，懇見(jiàn)圖笨7-8涌。具二、單波長(zhǎng)饑和雙波長(zhǎng)方貓式（一）概念元采用一個(gè)波刊長(zhǎng)檢測(cè)物質(zhì)航的光吸收強(qiáng)咽度的方式稱圍為單波長(zhǎng)負(fù)(mono卵-wave情lengt錢h)壺方式。當(dāng)反靜應(yīng)液中含有頭一種組分，怎或在混合反籠應(yīng)液中待測(cè)覆組分的吸收拐峰與其它共雨存物質(zhì)的吸吹收波長(zhǎng)無(wú)重拴疊時(shí)，可以?shī)蔬x用。在吸伯光度檢測(cè)中啟，使用一個(gè)魚主波長(zhǎng)和一鄰個(gè)次波長(zhǎng)的益稱雙波長(zhǎng)方朵式。當(dāng)反應(yīng)其液中存在干蛋擾物的較大勾吸收、從而皇影響測(cè)定結(jié)汽果的準(zhǔn)確性音時(shí)，采用雙正波長(zhǎng)方式更團(tuán)好。紛（二）雙波裙長(zhǎng)的作用暴雙波長(zhǎng)貢(di-w緊avele勸ngth)薦測(cè)定優(yōu)點(diǎn)是徹①網(wǎng)消除噪音干摟擾彎;挎②耕減少雜散光迅影響般;放③攀減少樣品本狼身光吸收的舅干擾。從光默源，到比色嶺杯、單色器房、檢測(cè)器的腸整個(gè)光路系招統(tǒng)中，均存旁在著隨時(shí)間后發(fā)生變化的算不穩(wěn)定的檢喬測(cè)信號(hào)，即咳噪音，而雙陸波長(zhǎng)檢測(cè)是新同時(shí)進(jìn)行的蛇，兩種波長(zhǎng)秤檢測(cè)產(chǎn)生的箭噪音基本上流相同，因而疼能消除噪音必干擾。當(dāng)樣瀉品中存在非鍵化學(xué)反應(yīng)的并干擾物如甘斜油三酯、血川紅蛋白、膽致紅素等時(shí)，濕會(huì)產(chǎn)生非特雙異性的光吸戰(zhàn)收，而干擾舉測(cè)定結(jié)果的社準(zhǔn)確性。采仙用雙波長(zhǎng)方套式測(cè)定可以幸部分消除這唯類干擾，提幟高檢測(cè)的準(zhǔn)皆確性。輪（三）次波忙長(zhǎng)的確定方念法搶當(dāng)被測(cè)物的豈主波長(zhǎng)確定扣之后，再選設(shè)擇次波長(zhǎng)。雜如根據(jù)甘油凈三酯等干擾要物吸收光譜亡特征，選擇蛇次波長(zhǎng)，使宗干擾物在主吹、次波長(zhǎng)處訴有盡可能相梁同的光吸收羞值，而被測(cè)交物在主、次絕波長(zhǎng)處的光庸吸收值應(yīng)有猴較大的差異側(cè)。一般來(lái)說(shuō)和，次波長(zhǎng)應(yīng)竭大于主波長(zhǎng)訊100nm無(wú)。以主波長(zhǎng)箏與次波長(zhǎng)吸浮光度差來(lái)計(jì)搬算結(jié)果。盞（四）雙波概長(zhǎng)的具體應(yīng)懸用寸對(duì)于某些反監(jiān)應(yīng)速度快且慶無(wú)法設(shè)置為撇兩點(diǎn)終點(diǎn)法怖的分析項(xiàng)目盈，尤其是單違試劑分析中高，可以利用頂雙波長(zhǎng)的方視式來(lái)部分消指除樣品本身經(jīng)的光吸收干未擾。目前用愛(ài)單試劑法測(cè)胳定的項(xiàng)目應(yīng)蔬用雙波長(zhǎng)的難為血清總蛋幟白（雙縮脲廢法）主波長(zhǎng)鋤500nm敘，次波長(zhǎng)嚴(yán)576nm腥；血清白蛋睡白（溴甲酚夢(mèng)氯法）主、威次波長(zhǎng)分別推為蔬600臉和侍700nm呀；鈣（偶氮蛛砷頃Ⅲ替法）主、次虛波長(zhǎng)分別為俯660融、撫770nm朝；磷（紫外透比色法）主守、次波長(zhǎng)為猾340蘿、快405nm燕，鎂（二甲傲苯胺藍(lán)法）材主、次波長(zhǎng)寺為弓505嚴(yán)和簡(jiǎn)600n侍m姑。愛(ài)三、單試劑投和雙試劑方鳥(niǎo)式辭反應(yīng)過(guò)程中孤只加一次試捐劑稱單試劑例方式，加兩齊次試劑便為拼雙試劑方式最。目前的生摘化分析儀大醫(yī)多可用雙試寫劑方式分析爐，其優(yōu)點(diǎn)是構(gòu)：銜①駁可提高試劑抱的穩(wěn)定性，注多數(shù)雙試劑耍混合成單一君工作試劑時(shí)狂，其穩(wěn)定時(shí)努間縮短；放②膜能設(shè)置兩點(diǎn)鉗終點(diǎn)法，來(lái)遷消除來(lái)自樣依品本身的光壤吸收干擾；或③蠻在某些項(xiàng)目表檢測(cè)時(shí)能消蓬除非特異性習(xí)化學(xué)反應(yīng)的壟干擾。如血驢清良ALT講測(cè)定，血清泰中的內(nèi)源性甚丙酮酸及其價(jià)它酮酸也可勵(lì)與試劑中的喜指示酶（乳根酸脫氫酶）泄起反應(yīng)，使報(bào)結(jié)果偏高。窮若先加入缺械乏椒α月-共酮戊二酸的粗第一試劑，仔使其它酮酸勿與指示酶反就應(yīng)之后再加味入含有摘α盛-平酮戊二酸的燥第二試劑，天啟動(dòng)真正的活A(yù)LT宜酶促反應(yīng)生折成丙酮酸，斧而丙酮酸與坦乳酸脫氫酶研的反應(yīng)消耗刻的處NAD考＋能真正反揪映珍ALT未的活性，從皇而消除以上餃副反應(yīng)的影場(chǎng)響。億四、測(cè)定過(guò)鴨程的自動(dòng)監(jiān)河測(cè)堅(jiān)各種自動(dòng)生長(zhǎng)化分析儀或梳多或少都具演有對(duì)測(cè)定過(guò)保程進(jìn)行各種這監(jiān)測(cè)的功能口，以便在沒(méi)社有人掠"恰監(jiān)督淚"勾化學(xué)反應(yīng)的惑情況下提高摘檢測(cè)的準(zhǔn)確欺性。高檔分守析儀的監(jiān)測(cè)銳功能更強(qiáng)。蹤1炕．試劑空白更監(jiān)測(cè)醬每種試劑都錫有一定的空使白吸光度范素圍，試劑空糧白吸光度的扒改變往往提般示著該試劑灣的變質(zhì)：如寸利用燈Trind活er難反應(yīng)為原理來(lái)的檢測(cè)試劑增會(huì)因酚被氧餃化為醌而變辟為紅色；堿賽性磷酸酶、詳γ感－谷氨酰轉(zhuǎn)鮮移酶、淀粉誼酶等檢測(cè)試閣劑會(huì)因基質(zhì)沸分解出硝基餓酚或硝基苯系胺而變黃；看有些試劑久位置后變渾濁野。這些情況鐮均可使空白父吸光度升高充。丙氨酸氨惡基轉(zhuǎn)移酶、寸天冬氨酸氨牌基轉(zhuǎn)移酶等醬負(fù)反應(yīng)檢測(cè)互項(xiàng)目，其試炊劑在放置過(guò)躬程中空白吸誓光度會(huì)因蜜NADH蹄自行氧化為鹽NAD+罩而下降等。耀試劑空白的公測(cè)定方法有坡兩種：壺①縮每瓶試劑在度使用前通過(guò)倆對(duì)試劑空白排校準(zhǔn)來(lái)確定牲試劑空白吸卡光度，這種反方式適用于溪先取樣品后暢加試劑的分普析儀。泄②詢每個(gè)樣品測(cè)甚定前均檢測(cè)更試劑空白吸都光度，適用義于先加試劑嗚后取樣品的待分析儀。貧2然．試劑空白字變化速率監(jiān)級(jí)測(cè)侮一些酶試劑扭在反應(yīng)溫度店下不穩(wěn)定，涼其空白吸光磁度可隨著時(shí)本間逐漸發(fā)生廚變化，這種桿變化的主要壺原因與工具唉酶或輔酶的蹦純度有關(guān)，哲且因試劑的殺組成和生產(chǎn)度廠家的不同牽而不同。這腳種變化會(huì)影尿響測(cè)定結(jié)果嚇的準(zhǔn)確性，患一般使結(jié)果攜偏高。如果升設(shè)置此項(xiàng)監(jiān)秋測(cè)，分析儀搞在結(jié)果計(jì)算遠(yuǎn)時(shí)會(huì)自動(dòng)減盆去試劑空白璃變化速率。北在以監(jiān)測(cè)涌NAD聰（幟P跨）辭H爐減少為指示翼反應(yīng)的酶活晉性測(cè)定中，瘦空白速率可料監(jiān)測(cè)并消除果由芝NADH秀自身氧化所雄造成的吸光銀度下降；在慢色素原為底觸物的酶活性勒測(cè)定中，空榜白速率可監(jiān)疊測(cè)并消除底迷物自身分解貫造成的吸光臟度升高。有炮關(guān)空白速率伶監(jiān)測(cè)在膽紅患素對(duì)堿性苦顧味酸速率法異測(cè)定肌酐負(fù)葉干擾消除中休的作用，已仇如前述。獄3向．樣品信息眾監(jiān)測(cè)功由于樣品的職溶血、脂濁父、黃疸會(huì)對(duì)百測(cè)定結(jié)果產(chǎn)頸生非化學(xué)反辭應(yīng)的干擾。讀根據(jù)溶血、渴脂濁、黃疸顫的光譜吸收留特性，用雙策波長(zhǎng)或多波感長(zhǎng)檢測(cè)其性糠質(zhì)和程度，小一般是測(cè)定輸樣品在做600nm棕／龜570nm騰、羨700nm禽/660n刊m背和愿505nm憶/480n激m祝吸光度比值端的大小來(lái)分陪別判斷樣品掙溶血、脂濁水和黃疸程度咽。然后在結(jié)注果計(jì)算時(shí)自籍動(dòng)減去這部薦分干擾，這葬將有利于提域高分析結(jié)果行的可靠性。盈4西．結(jié)果可靠撈性監(jiān)測(cè)竊（乞1拴）終點(diǎn)監(jiān)測(cè)嫌：終點(diǎn)法測(cè)躺定要判斷所舍選的測(cè)光點(diǎn)召是否到達(dá)終辣點(diǎn)或平衡點(diǎn)呼。一些分析命儀在所選終奏點(diǎn)后再選一禍個(gè)測(cè)光點(diǎn)，星比較這兩點(diǎn)樣吸光度的差熔異來(lái)判斷反差應(yīng)是否到達(dá)肆終點(diǎn)。堵（血2謙）線性期監(jiān)健測(cè)：連續(xù)監(jiān)價(jià)測(cè)法選擇時(shí)徒間－吸光度葵反應(yīng)曲線上叮的線性期來(lái)寄計(jì)算酶活性粉或被測(cè)物濃鞋度，因此儀附器要確定此荒連續(xù)監(jiān)測(cè)期絨是否呈線性跟。其監(jiān)測(cè)方杰法為療①文將連續(xù)監(jiān)測(cè)咱到的各吸光刃度值進(jìn)行線傷性回歸，計(jì)涂算出各點(diǎn)的常方差，根據(jù)徑方差值的大朗小來(lái)判斷是浩否呈線性；爆②蔥取連續(xù)監(jiān)測(cè)暗期開(kāi)始若干裳點(diǎn)的變化速護(hù)率與連續(xù)監(jiān)容測(cè)期最后若肝干點(diǎn)的變化寒速率進(jìn)行比草較，來(lái)判斷炕是否為線性被期。恢5染．底物消耗幣的監(jiān)測(cè)選在連續(xù)監(jiān)測(cè)侍法測(cè)定酶活魔性時(shí)，如果賞在監(jiān)測(cè)期內(nèi)合吸光度上升換或下降超過(guò)鏟其底物耗盡膝值，則說(shuō)明朋該樣品酶活騰性非常高，類底物將被耗抬盡，監(jiān)測(cè)期皂的吸光度將影偏離線性，稼使測(cè)定結(jié)果躲不可靠。此幅時(shí)不打印結(jié)腳果或打印結(jié)泥果同時(shí)也打姨印出底物耗檢盡提示，該夠樣品應(yīng)稀釋垮一定的倍數(shù)默重新測(cè)定。鴨此監(jiān)測(cè)對(duì)于扇采用負(fù)反應(yīng)移分析酶活性獻(xiàn)的方法甚為惡重要。見(jiàn)圖符7-9紀(jì)6容．方法線性觸范圍監(jiān)測(cè)庫(kù)每種待測(cè)物支分析都有一豆個(gè)可測(cè)定的店濃度或活性鉛范圍，樣品斜結(jié)果若超過(guò)動(dòng)此范圍，分滾析儀將顯示旋測(cè)定結(jié)果超稱過(guò)線性范圍槍的提示，多俯數(shù)分析儀會(huì)珍自動(dòng)將樣品拾減量或增量餐重新測(cè)定。第四章將標(biāo)準(zhǔn)品和校明準(zhǔn)品扇傳統(tǒng)的臨床已檢驗(yàn)，要使義檢驗(yàn)結(jié)果可鍛靠或有依據(jù)啄，往往有一索個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品拍(Stan挎dard)需。以臨床化刪學(xué)檢驗(yàn)的比嶺色測(cè)定為例貨，常作三個(gè)瞎檢測(cè)：空白鈔、標(biāo)準(zhǔn)、測(cè)鳳定。用空白鍬液調(diào)整吸光疑度為零，讀糾出測(cè)定比色防液和標(biāo)準(zhǔn)比是色液的吸光街度，分別為孕As州和濫Au馬；已知標(biāo)準(zhǔn)教液濃度為沙Cs累。在一定范討圍內(nèi)，某分餃析物濃度和塵吸光度呈良畫好比例關(guān)系拔。為了克服國(guó)純標(biāo)準(zhǔn)液和請(qǐng)病人樣品間援的基體差異徐，唇20遞年前開(kāi)始引傾用具有與病事人樣品基體荒相似的校準(zhǔn)昂品替代標(biāo)準(zhǔn)寄品，用于日睛常工作。由習(xí)于以往在使浩用標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)醫(yī)不強(qiáng)調(diào)它的扔專用性，國(guó)籃內(nèi)在應(yīng)用校鍋準(zhǔn)品時(shí)忽略倆了它的專用軌性。任何方吸法或儀器、債試劑使用一其個(gè)校準(zhǔn)品，確嚴(yán)重影響檢疾驗(yàn)質(zhì)量。尊一、標(biāo)準(zhǔn)液作的定值初一般而言，玩檢驗(yàn)工作使近用的標(biāo)準(zhǔn)品名屬應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)會(huì)。配制或供茶應(yīng)這類標(biāo)準(zhǔn)銹品的實(shí)驗(yàn)室?；驈S商具有懸符合質(zhì)量標(biāo)飾準(zhǔn)的純品。的稱取一定量蹈的純品，然洋后將其溶解萍，在容量瓶方內(nèi)用溶劑稀疾釋至容積刻綿度，混勻，閘標(biāo)準(zhǔn)液配制資完成。由稱結(jié)量法獲得的革稱量值和容企量法配制的毀容積，計(jì)算用出該標(biāo)準(zhǔn)品衡濃度。檢定戚部門抽樣測(cè)股定，結(jié)果在襪規(guī)定范圍內(nèi)殊屬合格。即零使測(cè)定檢定鏡結(jié)果在范圍蜜的上、下限鬧，也不能將沖實(shí)測(cè)值作為售標(biāo)準(zhǔn)值。因襲為測(cè)定值的寬可靠性取決洞于檢定方法誕，一般的分霧析方法的可逢靠性不如分助析化學(xué)公認(rèn)盞的稱量法和薯容量法。所蠢以標(biāo)準(zhǔn)品的潛定值由稱量橫和容積計(jì)算典確定。檢定齡不合格即報(bào)究廢，決不可具將實(shí)測(cè)值替跌代修正。幕二、校準(zhǔn)品卸的定值罰1番．校準(zhǔn)值隨微方法而異開(kāi)如前述，由喜于純標(biāo)準(zhǔn)液叉和新鮮病人蒼標(biāo)本間的基右體差異，以掌標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)化凈常用方法后兄，常用方法塞檢測(cè)病人標(biāo)燥本的結(jié)果和吼參考方法結(jié)燕果的可比性約很差。票耀為了克服基判體效應(yīng)，推得薦使用校準(zhǔn)嫂品。校準(zhǔn)品慢的大多來(lái)源狀為人的樣品挨混合物，如慣混合血清。盛本身內(nèi)含被稻檢分析物，暖制備時(shí)可添捉加某些分析普物增加含量賭。校準(zhǔn)品中潔被檢分析物精的含量無(wú)法鵲由稱量法和榜容量法確定仿，只能倚賴桐于分析方法艷。校準(zhǔn)品的性校準(zhǔn)值必須離取決于分析犬方法或檢測(cè)粉系列?？?矮．新鮮病人勁標(biāo)本是最佳雞校準(zhǔn)品眨勿由于所有校絲準(zhǔn)品都是處停理過(guò)的樣品釀，和新鮮病錢人標(biāo)本有著鋼基體差異。硬若使用公認(rèn)杰的參考方法擁去標(biāo)化測(cè)定扭校準(zhǔn)品，測(cè)情定程序是嚴(yán)殃密的，測(cè)定篇值是可靠的村。但使用該尤測(cè)定值去校秒準(zhǔn)常規(guī)的檢箭測(cè)系列時(shí)，霧校準(zhǔn)品中被價(jià)檢分析物參嘉與反應(yīng)時(shí)的啄表現(xiàn)明顯不婆同于新鮮病巖人標(biāo)本，不丹能將參考方森法系列的準(zhǔn)量確度通過(guò)校凈準(zhǔn)品傳遞給智病人標(biāo)本。統(tǒng)須明確的，探所有用于檢泉驗(yàn)中的檢測(cè)伍方法、儀器題、試劑等都喪是用來(lái)檢測(cè)妹病人新鮮標(biāo)釘本的，不是遼用來(lái)檢測(cè)校圓準(zhǔn)品這樣的福處理過(guò)樣品樣。如果先用放公認(rèn)的參考爸方法檢測(cè)病圈人標(biāo)本，再鞏以具有參考瓦值的病人標(biāo)搬本去校準(zhǔn)某飲檢測(cè)系列（仔包括方法、房試劑、儀器國(guó)），此時(shí)該妙檢測(cè)系列再踐檢測(cè)其他新電鮮病人標(biāo)本香時(shí)，這些病撓人標(biāo)本結(jié)果趴的溯源性可使上溯至公認(rèn)渣的參考方法美。也即用新狠鮮病人標(biāo)本龍是校準(zhǔn)檢測(cè)池系列的最佳停校準(zhǔn)品。用中這種方式校妻準(zhǔn)，能使同棒一個(gè)檢測(cè)系拆列在不同實(shí)還驗(yàn)室檢測(cè)新抱鮮病人標(biāo)本掙時(shí)，檢驗(yàn)結(jié)登果在實(shí)驗(yàn)室谷間具可比性祥。一些大公助司正是按照炎這樣的認(rèn)識(shí)吸為校準(zhǔn)品定塊值。蝕風(fēng)三悉、原則上，攜以具有參考醬值的新鮮病立人標(biāo)本去校飲準(zhǔn)某檢測(cè)系鹽列（包括方幻法、試劑、層儀器）后，案檢測(cè)系列再典去檢測(cè)候選厘的校準(zhǔn)品（塔處理過(guò)），變得到的檢測(cè)響值為初始校惱準(zhǔn)值。以初肅始校準(zhǔn)值反襲過(guò)來(lái)再校準(zhǔn)廁組合的檢測(cè)捉系列后，該勵(lì)檢測(cè)系列又例去檢測(cè)病人圓的新鮮標(biāo)本票。觀察病人里標(biāo)本的檢測(cè)取值是否和參樓考方法的測(cè)興定值具良好撇的可比性。井實(shí)踐說(shuō)明，把只有不斷地凱調(diào)整校準(zhǔn)值畝，直至用該注校準(zhǔn)值校準(zhǔn)鑰指定的檢測(cè)依系列（加上那具有校準(zhǔn)值報(bào)的校準(zhǔn)品，俱即組合成檢旁測(cè)系統(tǒng)）后內(nèi)，檢測(cè)系統(tǒng)承再檢測(cè)病人鑰標(biāo)本，得到娘的測(cè)定值和德病人標(biāo)本的緒參考方法測(cè)激定值具有滿右意的可比性品（測(cè)定值和菠參考值間的鉆偏倚輝≤傾2%識(shí)）。此時(shí)，蠅校準(zhǔn)品的校恒準(zhǔn)值可以確立認(rèn)。返1哀．校準(zhǔn)值不消是測(cè)定值，遠(yuǎn)是糾正的調(diào)牢整值植(Cor核recte盞dVal釘ue)習(xí)令廠商的校準(zhǔn)廉品定值方案浮極為嚴(yán)密。賭為了便于說(shuō)酸明問(wèn)題，以即某公司的定厘值方案為例江，定值的校孕準(zhǔn)品是人血古清。問(wèn)1鏡）準(zhǔn)備一批訓(xùn)血清樣品，跨內(nèi)含被檢分米析物含量不殊同，可反映仔所需的病人趣結(jié)果可報(bào)告召范圍。將它米們離心、過(guò)講濾，分裝后屠深低溫保存灣。由參考實(shí)在驗(yàn)室用公認(rèn)代的參考方法姥和標(biāo)準(zhǔn)品或斜參考品，對(duì)擁這些血清檢罩測(cè)定值。這褲些血清是公肯司的一級(jí)芬“逗參考品值”絮，參考方法偏對(duì)血清的定絡(luò)值猶如參考萬(wàn)值，是確定答校準(zhǔn)品校準(zhǔn)部值的依據(jù)。孤2畢）制備一大辜批侯選校準(zhǔn)福品。由參考徑實(shí)驗(yàn)室也為乞之定值。邀血請(qǐng)多家具有篇指定的相同撥型號(hào)儀器的手實(shí)驗(yàn)室（包枝括公司的實(shí)杯驗(yàn)室）參與雨工作。指定今使用公司某朽型號(hào)的試劑忌盒（批號(hào)任吉意）及檢測(cè)廟程序。校準(zhǔn)趁目標(biāo)是：公陰司提供的儀怖器、試劑和狗方法系列（爐加上校準(zhǔn)品冤即為檢測(cè)系落統(tǒng)）對(duì)病人職樣品的檢測(cè)艷結(jié)果和參考獎(jiǎng)方法對(duì)病人番樣品檢測(cè)結(jié)慰果具可比性共。首先，用窗侯選校準(zhǔn)品到的定值對(duì)檢攝測(cè)系列校準(zhǔn)知后，檢測(cè)一氏級(jí)參考品的競(jìng)血清。由于伶侯選校準(zhǔn)品介和病人樣品秤間的基體差勉異，以它的薪參考實(shí)驗(yàn)室渾定值對(duì)檢測(cè)糊系統(tǒng)校準(zhǔn)后摔，檢測(cè)系統(tǒng)雷對(duì)病人樣品炸的檢測(cè)結(jié)果碧必然和這些常血清已有的煤參考值有偏潛倚。要使組惑成的檢測(cè)系遠(yuǎn)統(tǒng)實(shí)現(xiàn)校準(zhǔn)靜目標(biāo)，唯一厘方法是調(diào)整輝侯選校準(zhǔn)品守的校準(zhǔn)值。屆經(jīng)反復(fù)檢測(cè)后和調(diào)整、統(tǒng)承計(jì)，最終實(shí)候現(xiàn)校準(zhǔn)目標(biāo)陪時(shí)的校準(zhǔn)值辣，為該校準(zhǔn)賴品的定值。上這個(gè)校準(zhǔn)品吵是公司的一纖級(jí)校準(zhǔn)品，鑒是公司內(nèi)部瞎具有可溯源道性的第一代好的校準(zhǔn)品，仗不外售。雁3滑）以后公司壩在生產(chǎn)供應(yīng)國(guó)給客戶的校捎準(zhǔn)品時(shí)，生蓄產(chǎn)質(zhì)量規(guī)格扁相同于一級(jí)饑校準(zhǔn)品，定漢值方案也相拋同于上述步城驟；但此時(shí)替分發(fā)給各實(shí)猛驗(yàn)室的一級(jí)仿校準(zhǔn)品已具搏有了真正?？粶?zhǔn)該檢測(cè)系闖統(tǒng)的校準(zhǔn)值映。各實(shí)驗(yàn)室仙的檢測(cè)系統(tǒng)噸被一級(jí)校準(zhǔn)泉品校準(zhǔn)后，輔檢測(cè)一級(jí)參察考品血清和花新校準(zhǔn)品。老首先確認(rèn)各盜系統(tǒng)對(duì)一級(jí)育參考品血清疼檢測(cè)結(jié)果和喉原有的血清摩參考值具良皂好的可比性傻，說(shuō)明一級(jí)暗校準(zhǔn)品有效純。再以新校賀準(zhǔn)品的定值些去校準(zhǔn)各系幕統(tǒng)后，各系剖統(tǒng)再檢測(cè)一禾級(jí)參考品血食清和一級(jí)校之準(zhǔn)品，觀察狹檢測(cè)結(jié)果。拖若能實(shí)現(xiàn)校弊準(zhǔn)目標(biāo)，校畫準(zhǔn)確認(rèn)，則畢新校準(zhǔn)品的燒定值為它的屬校準(zhǔn)值。在紛實(shí)踐中血清綁結(jié)果往往仍吐然出現(xiàn)偏倚統(tǒng)，必須對(duì)新呆校準(zhǔn)品的定丘值略作調(diào)整富，反復(fù)檢測(cè)奮，直至實(shí)現(xiàn)江校準(zhǔn)目標(biāo)，軋調(diào)整的最佳魔值為該批校寬準(zhǔn)品的校準(zhǔn)知值。此時(shí)這結(jié)批校準(zhǔn)品可犧供市售。及4塔）為使公司自供應(yīng)的各批惱校準(zhǔn)品間具乎可比性，以虛后對(duì)每批新獻(xiàn)校準(zhǔn)品定值反時(shí)，須使用按已上市的校司準(zhǔn)品、即將挨過(guò)期的校準(zhǔn)飽品、以及即保將上市的?？轀?zhǔn)品當(dāng)作控柱制品，隨同秩一級(jí)校準(zhǔn)品宜和一級(jí)參考趨品血清一起乞被檢測(cè)。它倡們的檢測(cè)結(jié)凝果須和原校加準(zhǔn)值的偏倚女小于某規(guī)定摘的范圍（如挑不大于屑2%敢），方可認(rèn)劉可這批校準(zhǔn)即品的校準(zhǔn)值昌（這即為校批準(zhǔn)認(rèn)可的要灑求）。惹5仔）用這樣的峽程序制備的連校準(zhǔn)品，專坡用于指定的深某公司型號(hào)集的儀器、試袋劑、方法和決檢測(cè)程序組兼成的檢測(cè)系丈統(tǒng)。因此校色準(zhǔn)品只能為痕這樣的系統(tǒng)瓦服務(wù)，起校慰準(zhǔn)作用，不誓能對(duì)其他系討統(tǒng)作校準(zhǔn)。板2嬸．具多個(gè)校塑準(zhǔn)值的校準(zhǔn)蹤品拴據(jù)專門供應(yīng)試林劑盒的廠商島，為了使他架們的試劑盒黨用于各種類毒型、型號(hào)的韻儀器和方法碰，也同時(shí)為萌客戶提供校獻(xiàn)準(zhǔn)品。說(shuō)明犁書告訴客戶貢，使用他們塔的校準(zhǔn)品，亮按公司指定蒜校準(zhǔn)您原系鋪統(tǒng)的校準(zhǔn)值天去校準(zhǔn)系統(tǒng)安，可以使新汁組合的檢測(cè)騙系統(tǒng)（原儀命器、方法、室檢測(cè)程序，毯新試劑和新低校準(zhǔn)品）的挑病人標(biāo)本檢慢測(cè)結(jié)果和原薦配套檢測(cè)系硬統(tǒng)的病人標(biāo)粘本檢測(cè)結(jié)果尋具可比性。停由于各公司叉的原檢測(cè)系槽統(tǒng)，從試劑趙、校準(zhǔn)品、瘋儀器都有各緒自特點(diǎn)，形幣成了各檢測(cè)火系統(tǒng)間的差葛異。而這類知試劑廠商專卻門針對(duì)客戶段不同檢測(cè)系世統(tǒng)，在替用等他們的試劑哭時(shí)強(qiáng)調(diào)了替套換后必須用據(jù)他們的校準(zhǔn)弊品，而且必猾須按校準(zhǔn)品膊說(shuō)明書上原已系統(tǒng)名稱下哀指定的校準(zhǔn)揭值校準(zhǔn)新系吼統(tǒng)，可使新霧系統(tǒng)對(duì)病人弄樣品的檢測(cè)印結(jié)果和原系規(guī)統(tǒng)結(jié)果具可氧比性。同一的個(gè)校準(zhǔn)品適黑用于不同系寺統(tǒng)必須有不羅同的校準(zhǔn)值頸，這樣的做娛法充分說(shuō)明抹校準(zhǔn)值的專短用特性。決胡不能一個(gè)校掛準(zhǔn)品、一個(gè)掉校準(zhǔn)值、一康種試劑盒用毛于各種不同啄的儀器；也鄙不能一個(gè)校立準(zhǔn)品、一個(gè)吧校準(zhǔn)值，用情于不同的、福已具有原試恥劑配套的儀斗器系列；無(wú)規(guī)論哪一種方告式均使病人纏樣品的檢測(cè)汁結(jié)果不可靠霉，也不具有夜溯源性。第五章懼質(zhì)控品尾標(biāo)準(zhǔn)品限校準(zhǔn)品侄校準(zhǔn)品、標(biāo)扔準(zhǔn)品、質(zhì)控習(xí)品三者同為兇參考物質(zhì)。御參考物質(zhì)是筆一種材料或婦者物質(zhì)，某享一種或多種賢特性值只夠既均勻并被良題好確定，用塌于校準(zhǔn)測(cè)量映系統(tǒng)，評(píng)價(jià)螺測(cè)量程序或躲為材料賦值事。但三者并廣