中藥制劑中各類化學(xué)成分

第六章中藥制劑中各類化學(xué)成分分析

§1生物堿類成分分析概述理化性質(zhì)物理性狀（存在的形態(tài)，升華性，揮發(fā)性，光學(xué)活性）堿性溶解性沉淀反應(yīng)沉淀劑：碘化物復(fù)鹽、重金屬鹽、大分子酸顯色反應(yīng)+酸性染料（磺酸肽類）→有色配合物紫外光譜特征游離—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有機(jī)溶劑生物堿鹽—水溶性增強(qiáng)生物堿類成分的分離溶劑萃取柱層析（氧化鋁、硅藻土、離子交換柱）定性鑒別沉淀反應(yīng)、顯色反應(yīng)多肽、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)等→假陽性反應(yīng)麻黃堿、秋水仙堿等→假陰性反應(yīng)馬錢子散中生物堿成分的鑒別取馬錢子散1g，加濃氨試液數(shù)滴及氯仿10ml，浸泡數(shù)小時(shí)，濾過，取濾液1ml蒸干，殘?jiān)酉←}酸1ml使溶解，加碘化鉍鉀試液1~2滴，即生成黃棕色沉淀。

定性鑒別薄層色譜鑒別吸附劑：氧化鋁、硅膠展開劑：氯仿、苯等顯色劑：改良碘化鉍鉀試劑，碘蒸氣等氣相色譜麻黃堿、苦參堿、顛茄類生物堿的含量測(cè)定液相色譜含量測(cè)定總生物堿含量測(cè)定

化學(xué)分析法

分光光度法

直接測(cè)定

離子對(duì)萃取比色法酸性染料比色法

BH十十In－→（BH十In－）→BH十·In－

苦味酸鹽比色法

雷氏鹽比色法

異羥肟酸鐵比色法（含有酯鍵結(jié)構(gòu)的生物堿）含量測(cè)定單體生物堿含量測(cè)定

薄層色譜法

高效液相色譜法

液—液分配色譜法（以反相為主，如ODS或C18）改進(jìn)流動(dòng)相（硅醇基抑制劑、低濃度的離子對(duì)試劑、季銨鹽試劑、電解質(zhì)緩沖液）固定相改進(jìn)（封尾技術(shù)）液—固吸附色譜法離子交換色譜法（陽離子交換樹脂）檢測(cè)器氣相色譜法

§2黃酮類成分分析概述理化性質(zhì)物理性狀（存在的形態(tài)，顏色，揮發(fā)性，光學(xué)活性）溶解性酸堿性酸性：與酚羥基的數(shù)目和位置有關(guān)7,4‘-二羥基>7-或4‘-羥基>一般酚>5-羥基堿性游離甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等黃酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇理化性質(zhì)顯色反應(yīng)還原反應(yīng)（鹽酸鎂粉反應(yīng)）金屬鹽類試劑的配合反應(yīng)（鋁、鉛、鋯、鎂鹽）紫外光譜特征I帶(300-400nm)→B環(huán)桂皮酰基II帶(240-285nm)→A環(huán)苯甲?；S酮類成分的分離溶劑萃取柱層析（聚酰胺柱）沉淀法定性鑒別顯色反應(yīng)鹽酸-鎂粉反應(yīng)金屬鹽類配合反應(yīng)定性鑒別薄層色譜鑒別硅膠--分離弱極性黃酮

展開系統(tǒng)：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇

聚酰胺--分離含游離酚羥基的黃酮及其苷展開系統(tǒng)：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-水等纖維素--分離多糖苷混合物展開系統(tǒng)：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸含量測(cè)定總黃酮含量測(cè)定

紫外分光光度法比色法高效液相色譜法正相色譜硅膠固定相—沒有羥基或乙酰化黃酮類成分反相色譜（C18或C8）流動(dòng)相：甲醇-水-乙酸（磷酸緩沖液），乙腈-水檢測(cè)器銀杏葉提取物總黃酮醇苷含量測(cè)定[含量測(cè)定]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2500，山柰素酚峰與異鼠李素峰的分離度應(yīng)大于1.5。

對(duì)照品溶液的制備（略）

供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約相當(dāng)于總黃酮醇苷19.2mg的粉末，精密稱定，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，置100ml錐形瓶中，加甲醇10ml、25%鹽酸溶液5ml，搖勻，置水浴中加熱回流30分鐘，迅速冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取濾液，即得。

測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，分別計(jì)算槲皮素、山奈素和異鼠李素的含量，按下式換算成總黃酮苷的含量?？傸S酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+異鼠李素含量）×2.51

§3三萜皂甙類成分分析概述理化性質(zhì)物理性狀（存在的形態(tài)，表面活性，吸濕性）溶解性紫外光譜特征大多無明顯的紫外吸收或僅在200nm附近有末端吸收

皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙—可溶于水，易溶于熱水、含水稀醇等甘草酸人參皂甙(A型)理化性質(zhì)顯色反應(yīng)醋酐-濃硫酸反應(yīng)五氯化銻反應(yīng)三鋁醋酸反應(yīng)冰醋酸-乙酰氯反應(yīng)氯仿-硫酸反應(yīng)金屬鹽類反應(yīng)+鉛、鋇、銅鹽→沉淀酸性皂甙+硫酸銨/醋酸鉛/中性鹽→沉淀中性皂甙+堿式醋酸鉛/氫氧化鋇/堿性鹽→沉淀三萜皂甙類成分的分離溶劑萃取柱層析（大孔樹脂柱）沉淀法定性鑒別泡沫反應(yīng)顯色反應(yīng)定性鑒別薄層色譜鑒別吸附劑：硅膠、氧化鋁、硅藻土展開劑：三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水等極性較大的體系三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等為主要組分顯色劑三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷鉬酸、濃硫酸-醋酸酐、碘蒸氣等含量測(cè)定總皂甙含量測(cè)定

重量法比色法顯色劑：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸等等三萜皂甙類單體成分含量測(cè)定薄層色譜法高效液相色譜甘草酸、遠(yuǎn)志皂甙→紫外檢測(cè)器其他→蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）概述理化性質(zhì)物理性狀（存在的形態(tài)，升華性，光不穩(wěn)定性）溶解性酸堿性酚羥基→酸性游離—溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿等醌甙—可溶于熱水，易溶于甲醇、乙醇丹參醌I(xiàn)IA大黃素

§4醌類成分分析理化性質(zhì)顯色反應(yīng)羥基蒽醌+堿→橙，紅，紫紅，藍(lán)+Pb2+/Mg2+→配合物+對(duì)亞硝基二甲基苯胺→紫，綠，藍(lán)，灰定性鑒別顯色反應(yīng)升華法薄層鑒別吸附劑：硅膠展開劑：多含甲醇或水的混合溶劑系統(tǒng)→分離甙和甙元不含甲醇或水的混合溶劑系統(tǒng)→分離甙元顯色：堿性試劑，醋酸鎂甲醇液、氨熏含量測(cè)定游離蒽醌踏的測(cè)定弱極性溶亞劑提取后匹，加堿比洲色結(jié)合蒽醌需的測(cè)定極性溶劑剝提取，水海解測(cè)甙元先酸水廟解后，凱非極性溶嗎劑提取則甙元后盼測(cè)定醌類單體籮成分含量根測(cè)定薄層色邪譜法高效液雞相色譜牛黃解薄毒片中廈游離蒽號(hào)醌和總姨蒽醌的重測(cè)定—占混合堿血液比色許法對(duì)照品記溶液測(cè)歲定：以1，8革-二羥?；祯珵閷?duì)照品緣瑞，精密稱吸取10m個(gè)g于10徒0mL量勤瓶中，加籃甲醇溶解吼并稀釋至弓刻度（1逮00μg/mL爺）。取1臭mL對(duì)照工品液于1玩0mL量即瓶中，在穩(wěn)水浴上蒸瓜干，加5%氫熊氧化鈉點(diǎn)-2%功氫氧化苦銨混合腳堿溶解并撞稀釋至姐刻度，放置1小擴(kuò)時(shí)，以5%放氫氧化鈉搭-2%氫背氧化銨混艷合堿液為也空白，在510n掃m波長(zhǎng)處測(cè)云定。樣品測(cè)定黨：⑴游離蒽鴉醌的測(cè)定芽：取牛黃讀解毒片1送0片，刮蒸去糖衣，桶精密稱定雖重量，研什細(xì)。稱取摘一片重，果置于具塞膜三角瓶中捎，精密加堡入氯仿100m帽L，稱重繩，水浴上回流4小時(shí)，法取下，加約塞，放冷解，稱重，壇用氯仿補(bǔ)軍充至原重鬼量，濾過面，吸取濾茅液50m痛L于分液茅漏斗中，請(qǐng)用蒸餾水20m堆L洗滌數(shù)次，至音水層無色禍，棄去水求液。氯仿糖層用5%氫氧版化鈉-2藥%氫氧化影銨混合堿音液振搖萃蹈取數(shù)次，直剝至混合堿思液無色，須合并堿液光，用20旦mL氯仿洗齊滌數(shù)次，至苦氯仿層無股色，棄去知氯仿層。脊將混合堿延液在水浴點(diǎn)上加熱數(shù)俊分鐘至灘氯仿?lián)]跪盡，冷卻，叫移入10童0mL量戴瓶中，并婚稀釋至刻匹度，放置擾1小時(shí)，止以5%氫翅氧化鈉-匪2%氫氧帳化銨混合饑堿液為空揭白，在5理10nm席處測(cè)定，釣計(jì)算游離逗蒽醌的含拿量（相當(dāng)葉于1，8朵-二羥基叉蒽醌含量逗）。牛黃解有毒片中云游離蒽吸醌和總留蒽醌的議測(cè)定—廢混合堿頸液比色倍法⑵總蒽糊醌的測(cè)蠢定：精密稱勉取游離哨蒽醌項(xiàng)昂下的牛醫(yī)黃解毒惜片粉一德片置于球150視mL燒倒瓶中，意加2.5片mol出/L硫壁酸30mL直火回流簡(jiǎn)4小時(shí)，放冷谷，加入氯仿20m鉤L，水治浴回流0.皇5小時(shí)，放冷可，吸出期氯仿液職，再加腹氯仿，診反復(fù)操字作至氯哈仿無色拍為止。講合并氯桐仿層液深，用蒸餾水農(nóng)洗滌數(shù)次，至案水層無色駁，棄去水討液。氯仿膚液用5%氫體氧化鈉軍-2%倍氫氧化丹銨混合堿疑液振搖牢萃取數(shù)戚次，至畢堿液無租色，合甚并，用沿20m刻L氯仿狡洗滌數(shù)痛次，至溫氯仿層窯無色，沾棄去氯欺仿液。教將堿液碑置水浴忙上加熱斷至氯仿阿揮盡，針冷卻，窩移入5蝕0mL幟量瓶中致，用混像合堿液群稀釋至爹刻度，木放置1摔小時(shí)，趴以5%撈氫氧化喂鈉-2在%氫氧乖化銨液增為空白塘，在510n乓m處測(cè)定勉，計(jì)算游朽離蒽醌舊的含量灣（相當(dāng)識(shí)于1，潑8-二寺羥基蒽角醌含量惠）。⑶結(jié)合框蒽醌的管計(jì)算：每片含結(jié)抬合蒽醌量=每片含總睬蒽醌量—眠每片含游零離蒽醌量夾。復(fù)方丹鴨參片中叼丹參酮黨ⅡA含惑量測(cè)定朽—高效且液相色兼譜法色譜條陸件與系言統(tǒng)適用溪性試驗(yàn)追：用十八烷洗基硅烷鍵餐合硅膠為薯填充劑；冊(cè)甲醇-水傷（73：努27）為蛙流動(dòng)相；題檢測(cè)波長(zhǎng)愉為270黑nm。對(duì)照品溶慮液的制備頂：精密稱取宮丹參酮Ⅱ訂A對(duì)照品還10mg雷，置50翼mL棕色量妖瓶中，用甲貌醇溶解并墨稀釋至刻肥度，搖勻演，精密量衛(wèi)取5mL岔，置25燭mL棕色商量瓶中，雹加甲醇至允刻度，搖塵勻，即得修（每1m凡L中含丹光參酮ⅡA鉗40μg）供試品施溶液的析制備：取本品1素0片，糖筒衣片除去貿(mào)糖衣，精啄密稱定，視研細(xì)，取描1g，精句密稱定，煤精密加入劇甲醇25饞mL，稱徹定重量，肝超聲處理鉆15分鐘指，放冷，撥再稱定重甩量，用甲擇醇補(bǔ)足減鋸失的重量畜，搖勻，祥濾過，取腿續(xù)濾液，慕即得。測(cè)定法笑：分別精液密吸取鞠對(duì)照品昏溶液與盛供試品乳溶液各澤10μ閑L，注申入液相問色譜儀恩，測(cè)定嫁，即得施。§5姓揮發(fā)性成分分拒析概述理化性剃質(zhì)物理性盼狀（氣長(zhǎng)味，比鐮重，折頸光性）溶解性：鑰易溶于有艘機(jī)溶劑顯色反應(yīng)酚類+三氯普化鐵→藍(lán)，藍(lán)蛛紫，綠羰基+苯肼混、羥胺→結(jié)晶體醛類+硝酸銀勝胺→銀鏡內(nèi)酯類+亞硝酰徹鐵氰化鈉鴨+NaO擠H→紅色并慌逐漸消失奧類+濃硫塌酸→藍(lán)，紫檸檬烯薄荷醇桂皮醛§5囑揮發(fā)性成分分析定性鑒弓別化學(xué)反應(yīng)氧化反應(yīng)江(高錳酸饑鉀，鉻酸奔）香草醛屈硫酸反岔應(yīng)薄層色譜吸附劑卵：硅膠祖、氧化塑鋁展開劑慮：石油超醚，正艦己烷，悶（加少競(jìng)量的乙郊酸乙脂堅(jiān)或苯）顯色劑氣相色程譜法GC-縣MS或雷GC-矛F(xiàn)TI矛R§5巨揮發(fā)性成分分述析含量測(cè)定總揮發(fā)油淺含量測(cè)定揮發(fā)油炒測(cè)定器蒸餾法單一成蒜分含量鴉測(cè)定氣相色售譜薄層色眠譜法高效液要相色譜GC-M潔S或GC愛-FTI愧R聯(lián)用技碗術(shù)§4漂其他類策型成分分析香豆素類顯色反應(yīng)異羥肟找酸鐵反判應(yīng)與酚羥基界反應(yīng)FeCl3Gib養(yǎng)bs試槽劑（2獎(jiǎng),6-娃二氯苯趙醌氯亞譽(yù)胺）反胃應(yīng)→藍(lán)尺色重氮試券劑化反口應(yīng)§4沸其他類蛋型成分分析香豆素巖類定性鑒召別化學(xué)反幼應(yīng)法熒光法薄層色譜缸法七寶美泛髯顆粒捎中補(bǔ)骨悄脂素、緩異補(bǔ)骨怕脂素的闊鑒別取本品稼10g亞，研細(xì)析，加醋獄酸乙酯待20m售l、鹽腔酸0.貫5ml高，超聲武處理20分州鐘，濾過稀，濾液揮楊干，殘?jiān)哟姿嵋疑阴?.5咬ml使溶脾解，作為供試柔品溶液。薄層條詠件：硅墨膠G薄蟲層板，殖展開劑公正已烷僑—醋酸散乙酯（占4:1因），顯色劑為撇10%氫貧氧化鉀甲葬醇溶液，抬紫外光燈豆365n伏m下檢視偽。§4其西他類型成分分析香豆素諸類含量測(cè)乏定分光光佩度法熒光光度旁法薄層色譜密法高效液口相色譜描法氣相色毫譜法§4敵其他類楊型成分分虜析有機(jī)酸概述理化性質(zhì)物理性遲狀（存在厭的形態(tài)護(hù)，溶解木性，揮車發(fā)性）提取分咽離有機(jī)溶劑題提取法離子交換臣法水蒸氣蒸槳餾法§4其昂他類型成分分卻析有機(jī)酸定性鑒刃別吸附色譜分配色丈譜含量測(cè)定酸堿滴定鋤法→總有驗(yàn)機(jī)酸分光光嫂度法高效液相嶼色譜法薄層色往譜法其他方法§4牛其他類藍(lán)型成分分姻析環(huán)烯醚植萜類概述—特怠殊的單萜理化性順質(zhì)物理性咽狀（存在的贏形態(tài)，多且苦味，穩(wěn)就定性）溶解性：易溶于水確、甲醇，叔可溶于乙炮醇、丙酮晝、正丁醇薄層定性筆鑒別吸附劑劃：硅膠、燥聚酰胺顯色劑踏：硫酸乙醇混，茴香醛僑試液，香哥草醛硫酸鍬試液，對(duì)帥二甲氨基掏苯甲醛硫躬酸試液龍膽苦給甙§4癢其他類他型成分分析環(huán)烯醚萜泳類含量測(cè)靠定高效液擺相色譜波法薄層掃描社法熒光分光他光度法分光光瘡度法復(fù)方梔越子沖劑色中梔子等甙的含寇量測(cè)定精密稱徹取本品慶3g，晉置索氏們提取器遷內(nèi)，加絨甲醇回趙流提取蒜6小時(shí)別，回收甲羞醇至干然，加水刮10m每l溶解隙，用水忽飽和正湊丁醇提蒙取，提獻(xiàn)取液蒸干劉，以甲割醇溶解鉛，通過撕已處理晃好的活依性炭-餃中性氧拍化鋁柱傳，用甲醇汗100鋒ml洗挖脫，收自集洗脫熄液，蒸劈燕干，殘壺渣用2債ml甲障醇溶解，作考為供試抽品溶液支。薄層條件耗：硅膠G隙F254薄層板末，展開創(chuàng)劑氯仿紅—甲醇謠—25算%氨水（4:匙1:0.殃1），檢瞞測(cè)波長(zhǎng)2全47nm壇，參比波胞長(zhǎng)370臉nm?！?松其他類糧型成分分析單萜及搬二萜類含芍藥甙團(tuán)中藥制劑耽的分析薄層色吧譜高效液相致色譜含穿心捆蓮內(nèi)酯紐奉中藥制慎劑的分臨析薄層色譜回滴法比色法—隨總內(nèi)酯薄層掃換描或高獎(jiǎng)效液相生色譜法腐—單體月成分穿心蓮內(nèi)段酯§4肢其他類剃型成分分廚析多糖（poly詠sacc憤hari桌des）概述理化性質(zhì)物理性狀（存在形燥式，還原鳴性）溶解性鏈：溶于水，培低濃度的叛酸堿，鹽釀溶液，不卡溶于醇、蘿醚、丙酮提取分莊離水提醇稻沉※防止暮水解，助注意消絞除酶、舟酸、堿結(jié)等的影循響§4懸其他類鐵型成分分析多糖（pol踢ysa碌cch揭ari街des）提取分離金屬鹽本沉淀法季胺氫氧榮化物沉淀柱色譜法（活性炭宮+等量它的硅藻碰土）凝膠色譜倍法（葡聚漢糖凝膠s挖epha精dex，京瓊脂糖凝討膠sep瀉haro皆se，聚爹丙烯酰胺劈燕凝膠Bi頂o-ge假lP）制備型區(qū)睬域電泳§4其松他類型成分分籠析多糖（pol辛ysa虛cch棗ari槍des）定性鑒別薄層色賊譜（硅京膠、纖斑維素、烈硅藻土燒）紙色譜展開劑：另正丁醇、于水混合體截系顯色劑：京苯胺-鄰英苯二甲酸浮的正丁醇模飽和水溶徑液等電泳法濾紙電山泳、玻洪璃纖維方紙電泳保、醋酸師纖維薄勢(shì)膜電泳角、凝膠魂電泳高效液右相色譜趴法氣質(zhì)聯(lián)用酸水解榜→中和肅→柱前莫衍生→嫁GC-嗽MS§4及其他類去型成分分析多糖（pol飯ysa造cch牢ari鍛des）含量測(cè)奪定總多糖劉的測(cè)定3,5-識(shí)二硝基水辟楊酸比色舟法→棕紅駝色（55堆0nm）※半微量羨定量法苯酚-硫雜酸法→藍(lán)療綠色（4戲80-4糠90nm待）蒽酮-硫后酸法→黃巴綠色(6摧20nm士)單體多糖谷的含量測(cè)艙定高效凝長(zhǎng)膠液相并色譜法捆→確定簽分子量高效液藍(lán)相色譜腰法→確廣定組成色譜柱且：氨基效鍵