仿制藥生物等效性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)崔一民

仿制藥生物等效性試驗(yàn)設(shè)計(jì)崔一民北京大學(xué)第一醫(yī)院生物等效性（BE）的概念

生物等效性試驗(yàn)是指用生物利用度研究的方法，以藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為指標(biāo)，比較同一種藥物的相同或者不同劑型的制劑，在相同的試驗(yàn)條件下，其活性成分吸收程度和速度有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的人體試驗(yàn)。生物等效性試驗(yàn)在藥物研究開(kāi)發(fā)的不同階段，其作用可能稍有差別，但究其根本，生物等效性試驗(yàn)的目的都是通過(guò)測(cè)定血藥濃度的方法，來(lái)比較不同的制劑對(duì)藥物吸收的影響，也即藥物不同制劑之間的差異，以此來(lái)推測(cè)其臨床治療效果差異的可接受性，即不同制劑之間的可替換性。BE研究適用范圍改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品的劑型，但不改變給藥途徑的口服制劑或其他有關(guān)制劑（化學(xué)藥）。已有國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的制劑（化學(xué)藥）。改變口服藥物制劑處方或工藝的補(bǔ)充申請(qǐng)其他BE研究方法通常意義的BE研究是指通過(guò)測(cè)量不同時(shí)間點(diǎn)的生物樣本（如血漿或尿液）中藥物濃度，獲得藥物濃度-時(shí)間曲線來(lái)反映藥物從制劑中釋放吸收到體循環(huán)中的動(dòng)態(tài)過(guò)程。并經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)挠?jì)算得到曲線下面積（AUC）、達(dá)峰濃度（Cmax）、達(dá)峰時(shí)間（Tmax）等參數(shù)后，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較判斷兩制劑是否生物等效。

生物樣本中藥物濃度測(cè)定建立生物樣本中藥物濃度定量分析方法是進(jìn)行生物等效性研究的關(guān)鍵之一。開(kāi)始入選受試者前，應(yīng)建立可靠的和可重現(xiàn)的藥物濃度定量分析方法。

方法學(xué)建立和考察的內(nèi)容特異性；標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量范圍；定量下限；精密度與準(zhǔn)確度；樣品穩(wěn)定性；提取回收率。普通制劑隨機(jī)、交叉、單劑量、兩周期試驗(yàn)設(shè)計(jì)控、緩釋制劑隨機(jī)、交叉、單劑量和多劑量、兩周期試驗(yàn)設(shè)計(jì)生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)交叉設(shè)計(jì)是目前應(yīng)用最多最廣的方法。把受試對(duì)象隨機(jī)分為兩組，按一定順序處理，一組受試者先服用受試制劑，后服用參比制劑；另一組受試者先服用參比制劑，后服用受試制劑。兩順序間應(yīng)有足夠長(zhǎng)的間隔時(shí)間，為清洗期。生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)為什么采用一般采用交叉設(shè)計(jì)？對(duì)每位受試者都連續(xù)接受兩次或多次的處理，相當(dāng)于自身對(duì)照，可以將制劑因素對(duì)藥物吸收的影響與其他因素區(qū)分開(kāi)來(lái)，減少了不同試驗(yàn)周期和個(gè)體間差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。

可能出現(xiàn)的其它設(shè)計(jì)方案在進(jìn)行兩種以上劑型比較時(shí)，也可以進(jìn)行多周期試驗(yàn)設(shè)計(jì)。在試驗(yàn)藥物的半衰期過(guò)長(zhǎng)時(shí)，可進(jìn)行平行試驗(yàn)設(shè)計(jì)。生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)單劑量給藥交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)

給藥20天-7天1天3天

研究日

篩查

-1天入院

出院入院

14天給藥出院15天17天隨訪第一周期第二周期A組服試驗(yàn)藥物B組服對(duì)照藥物A組服對(duì)照藥物B組服試驗(yàn)藥物清洗期單劑量給藥平行試驗(yàn)設(shè)計(jì)

給藥8天-7天1天研究日

篩查

-1天入院

出院隨訪PKA組服試驗(yàn)藥物B組服對(duì)照藥物為什么要做血藥濃度達(dá)到穩(wěn)態(tài)時(shí)的生物等效性比較？觀察制劑的控釋或緩釋特性是否一致。

生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)受試者的例數(shù)？

SFDA指導(dǎo)原則：18~24例根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)的把握度進(jìn)行計(jì)算對(duì)某些變異性大的藥物可能需要適當(dāng)增加例數(shù)生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)如果試驗(yàn)藥物是前藥怎么辦？

原則上以原藥為基礎(chǔ)進(jìn)行等效性研究。在原藥代謝很快、藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)變異大導(dǎo)致血液濃度測(cè)定困難或受試者數(shù)目過(guò)大時(shí)可以主要活性代謝產(chǎn)物為基礎(chǔ)進(jìn)行等效性研究。生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)如何確定參比藥物？原則上選擇國(guó)內(nèi)已經(jīng)批準(zhǔn)上市相同劑型藥物中的原創(chuàng)藥。在無(wú)法獲得原創(chuàng)藥時(shí)，可考慮選用上市主導(dǎo)產(chǎn)品作為參比制劑。 生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)如何確定給藥劑量？給藥劑量一般應(yīng)與臨床單次用藥劑量一致，不得超過(guò)臨床推薦的單次最大劑量或已經(jīng)證明的安全劑量。受試制劑和參比制劑一般應(yīng)服用相等劑量。需要使用不相等劑量時(shí)，應(yīng)說(shuō)明理由并提供所用劑量范圍內(nèi)的線性藥代動(dòng)力學(xué)特征依據(jù)，結(jié)果可以劑量校正方式計(jì)算生物利用度。生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)如何確定清洗期

？設(shè)定清洗期是為了消除兩制劑的互相干擾，避免上個(gè)周期內(nèi)的處理影響到隨后一周期的處理中。清洗期一般不應(yīng)短于7個(gè)消除半衰期。生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)如何設(shè)計(jì)取樣點(diǎn)？取樣點(diǎn)的設(shè)計(jì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的可靠性及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算的合理性，均有十分重要的意義。一般應(yīng)兼顧到吸收相、平衡相（峰濃度）和消除相。服藥前應(yīng)先取空白血樣。一般在吸收相部分取2～3個(gè)點(diǎn)，峰濃度附近至少需要3個(gè)點(diǎn)，消除相取3～5個(gè)點(diǎn)。采樣持續(xù)應(yīng)到受試藥原形或其活性代謝物3～5個(gè)半衰期時(shí)，或至血藥濃度為Cmax

的1／10～1／20，AUC0-t/AUC0-∞通常應(yīng)當(dāng)大于80%。受試者入選標(biāo)準(zhǔn)：男性健康受試者，18～40周歲。體重指數(shù)（體重(kg)/身高(m)2）在正常范圍（19～24）內(nèi)。試驗(yàn)前簽署知情同意書(shū)。生物等效性臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)受試者排覽除標(biāo)準(zhǔn)（唇舉例）：通過(guò)直止接提問(wèn)店和體檢問(wèn)，有任拼何顯著蘿的臨床棉疾病者艷。臨床上濕有顯著晴的變態(tài)遺反應(yīng)史課、特別暑是藥物眼過(guò)敏史政者。經(jīng)研究前善全面體檢苗和實(shí)驗(yàn)室仗檢查發(fā)現(xiàn)鈴有任何顯廉著的臨床餐疾病者。正在服巡壽用或在油服第一驚劑研究偏藥物前3周中曾服流用任何處納方藥或非霧處方藥（缺每天3g以內(nèi)撲熱甚息痛除外湯）者。在此研究泰給第一劑何的日期前4個(gè)月內(nèi)販接受過(guò)辭任何試憶驗(yàn)性藥集物者。喝酒每周謙超過(guò)28單位酒薄精（1單位＝285澇ml啤酒或25ml烈酒或1玻璃杯穴葡萄酒傻）者。每天吸煙制超過(guò)10支或相等顫量的煙草獨(dú)者。有證據(jù)表蘇明其為藥徑物濫用者撞。在研究前切一個(gè)月獻(xiàn)鉗過(guò)血，或術(shù)打算在研無(wú)究期間或序研究結(jié)束遙后一個(gè)月牢內(nèi)獻(xiàn)血或盞血液成冬分者。研究者認(rèn)答為受試者模有任何原破因可能不芳會(huì)完成本樹(shù)研究者。生物等效儲(chǔ)性臨床試代驗(yàn)的設(shè)計(jì)為什么朽選擇男握性受試強(qiáng)者？消除性依別間的鋼差異。避免受井女性經(jīng)晚期及妊勾娠的影宴響。生物等冊(cè)效性臨溪床試驗(yàn)記的設(shè)計(jì)藥代動(dòng)力蜻學(xué)參數(shù)的叉計(jì)算在生物等拉效性研究甩中，其主懼要藥代參齊數(shù)Cmax和Tmax均以實(shí)測(cè)爭(zhēng)值表示，AUC0→t以梯形較法計(jì)算榜。一般用非例房室數(shù)學(xué)案模型分析柱方法來(lái)估童算藥代動(dòng)腐力學(xué)參數(shù)賤，為什么挑？用房室模熔型方法估非算藥代參管數(shù)時(shí)，采憶用不同的科方法或軟寒件其值可斥能有較大曾差異。BE研究中常錫用的軟件Win熱Non仰LinDAS研究者可呼根據(jù)具體謎情況選擇早使用，但烤所用軟件秘必須經(jīng)確挨證并應(yīng)在薄研究報(bào)告醋中注明所括用軟件。等效判斷國(guó)標(biāo)準(zhǔn)采用主辱要藥代父參數(shù)經(jīng)擊對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)向換后以翅多因素伶方差分糊析（ANO刮VA）進(jìn)行梅顯著性坐檢驗(yàn)，突然后用掌雙向單青側(cè)t檢驗(yàn)和計(jì)弄算90％置信區(qū)指間的統(tǒng)計(jì)唯分析方法蹲來(lái)評(píng)價(jià)和由判斷藥物仇間的生物貴等效性。等效判伸斷標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于方忽差分析方差檢盤(pán)驗(yàn)是顯體著性檢局驗(yàn)，設(shè)疲定的無(wú)火效假設(shè)品是兩藥擁無(wú)差異怎，檢驗(yàn)深方式為劍是與否檔。在P<0.權(quán)05時(shí)認(rèn)為兩臉者差異有乘統(tǒng)計(jì)意義西，但不一窩定不等效挎；在P>0.春05時(shí)認(rèn)為兩辜藥差異無(wú)仇統(tǒng)計(jì)意義聯(lián)，但并不悄能認(rèn)為兩煩者相等或秤相近。等效判尼斷標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于等姑效檢驗(yàn)雙向單鋸側(cè)t檢驗(yàn)及喜（1~2虜α）%置信區(qū)殼間法是裹目前生共物等效塵檢驗(yàn)的爛唯一標(biāo)受準(zhǔn)。SFDA規(guī)定：一漫般經(jīng)對(duì)數(shù)靠轉(zhuǎn)換后的硬受試制劑后的AUC0→t在參比您制劑的80％～125％范圍筆，受試餃制劑的Cmax在參比撈制劑的70％～143％范圍棒，判斷旨兩藥生伙物等效室。如有必套要時(shí)，饑應(yīng)對(duì)Tmax經(jīng)非參秀數(shù)法檢處驗(yàn)，如語(yǔ)無(wú)差異聚，可以魚(yú)認(rèn)定受球試制劑粉與參比潮制劑生漢物等效婦。各國(guó)等禿效判斷利標(biāo)準(zhǔn)比益較國(guó)家/地區(qū)AUC標(biāo)準(zhǔn)90%可信限Cmax標(biāo)準(zhǔn)90%可信限中國(guó)80~125%70~143%加拿大80~125%None（點(diǎn)估計(jì)）EMEA80~125%75~133%日本80~125%某些藥物更寬WHO80~125%Cmax的可接受范圍可能比AUC寬美國(guó)80~125%80~125%南非80~125%75~133%等效判堆斷標(biāo)準(zhǔn)出現(xiàn)Tmax不等效，Cmax等效，AUC等效或Cmax不等效，AUC等效時(shí)，場(chǎng)怎么看？目前比摟較肯定AUC對(duì)藥物吸齊收程度的奇衡量作用狠，而Cmax、Tmax依賴取樣產(chǎn)時(shí)間的安鏟排，用它輪們衡量吸賀收速率有呀時(shí)是不夠烈準(zhǔn)確的，搜不適合用妙于具有多竄峰現(xiàn)象的彈制劑及個(gè)包體變異大坦的試驗(yàn)。滋故在評(píng)價(jià)咐時(shí)，若出縮慧現(xiàn)某些不河等效特殊長(zhǎng)情況，需談具體問(wèn)題梁加以具體史分析。BE研究的臨腰床試驗(yàn)報(bào)醬告生物等禿效性研達(dá)究臨床田報(bào)告內(nèi)歲容至少紐奉應(yīng)包括償以下內(nèi)辭容（1）實(shí)驗(yàn)愚目的；（2）生物艱樣本分軋析方法龍考察的逐數(shù)據(jù)，名提供必松要的圖枝譜；（3）實(shí)驗(yàn)設(shè)聾計(jì)和操作你方法，包就括全部受飯?jiān)囌叩馁Y扒料、樣本旨例數(shù)、閑參比制劑京、給藥劑芹量、服藥名方法和采絹樣時(shí)間安專排；（4）受試替者各時(shí)薦間點(diǎn)的娃藥物濃善度、藥控代參數(shù)裙和藥時(shí)酬曲線；（5）采用的茶統(tǒng)計(jì)分析熄方法以及待詳細(xì)統(tǒng)計(jì)天過(guò)程和結(jié)駕果；（6）服藥后注的臨床不述良反應(yīng)觀戰(zhàn)察結(jié)果，瞎受試者中錘途退出和秤脫落記錄柴及原因；（7）生物齡利用度僅或生物償?shù)刃粤⒔Y(jié)果分繩析以及缸討論；（8）參考避文獻(xiàn)。化學(xué)藥物梁制劑人體騰生物利用販度和生物等效性組研究技背術(shù)指導(dǎo)匆原則(二○○五梳年三月)主要參考授文獻(xiàn)舉例：A片劑的生物愈等效性修研究XXX制藥有棗限公司油生產(chǎn)與YYY制藥有摟限公司生產(chǎn)A片劑的番開(kāi)放、醬隨機(jī)、橫交叉研些究研究目的在中國(guó)皆男性健盤(pán)康受試屯者中評(píng)瘡價(jià)XXX制藥有德限公司護(hù)生產(chǎn)與YYY制藥有氧限公司襲生產(chǎn)A片劑的生抽物等效性陜。試驗(yàn)設(shè)計(jì)本研究為螞開(kāi)放、單益劑量、雙圾周期隨機(jī)襖交叉設(shè)計(jì)虎；計(jì)劃入組24例，均為浴男性；受試者于烤試驗(yàn)當(dāng)日蛙清晨按試坑驗(yàn)設(shè)計(jì)口孩服試驗(yàn)制蕉劑或參比槐制劑。于1周后交紐奉叉服用導(dǎo)另一制姓劑。試聚驗(yàn)結(jié)束笨后進(jìn)行聰隨訪；每周期分兔別于給藥分前及給藥綁后第0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、16、24小時(shí)采集擱靜脈血測(cè)謠定血漿中A的濃度，蓬計(jì)算藥代隙動(dòng)力學(xué)參贊數(shù)，判定梅兩種制劑仍是否生物金等效。入選標(biāo)提準(zhǔn)年齡在18～40周歲之間勉健康男性,且同一千批入組仿受試者狠年齡相彎差不超燭過(guò)10歲；體重指數(shù)(BMI勸)在19～24之間,體重不刊應(yīng)低于50Kg；自愿參加不本試驗(yàn)并腰簽署書(shū)面帶知情同意漢書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)受試者窗在首次廈服用研勸究藥物蠟前30天內(nèi)患孩有嚴(yán)重湯疾?。ǜ芯空哐勒J(rèn)為沒(méi)否有臨床燙顯著意勉義除外粗）；或門(mén)有胃腸仆肝腎疾方病患者砌；或有幕其他影批響吸收按、分布現(xiàn)、代謝柳和排泄吊等因素寺者；有藥物過(guò)破敏史者；受試者在模篩選試驗(yàn)囑前2年內(nèi)有宇藥物濫開(kāi)用史或測(cè)酗酒史鴉（定義腹飲用酒梁精的量澤：每日但飲用酒嘉精的量鮮約為40g）；飲用過(guò)量作茶、咖啡蔑和/或含有惑咖啡因盼的飲料栽者（＞8杯/天）；乙型肝炎淡病毒表面吐抗原(HBs禮Ag)、丙型汪肝炎病與毒抗體(An江ti-耕HCV胞)、艾滋驚病病毒礎(chǔ)抗體(An已ti-刻HIV提)中有一項(xiàng)佩呈陽(yáng)性者傷；實(shí)驗(yàn)室著檢查異坐常且研劇究者認(rèn)膨?yàn)橛信R蝦床意義認(rèn)的受試容者；收縮壓≤90mm患Hg的受試雨者；臥知位5分鐘和站折立后立即墊測(cè)定的血紙壓值：收嘩縮壓之差僵＞20m涉mHg，舒張倚壓之差燒＞10m月mHg的受試者灶；排除標(biāo)仆準(zhǔn)（續(xù)認(rèn)）受試者在隱首次服用件研究藥物景前2周曾經(jīng)熄吸過(guò)煙比或服用尺過(guò)含有蝴煙堿的漿產(chǎn)品（買(mǎi)包括但都不限定始是香煙援、煙斗翁、雪茄蕩煙、咀大嚼用煙勢(shì)草、煙勇堿片、些煙堿口建香糖）倡，或在嶼首次服臂用研究裁藥物前1周內(nèi)曾經(jīng)波飲酒者；在過(guò)去4周內(nèi)采集亞全血≥200百ml或過(guò)去12周內(nèi)采計(jì)集全血羞≥400慶ml或過(guò)去2周內(nèi)采紙集成分宰血（采橫集血清發(fā)成分或諒血小板屈成分）彩者；3個(gè)月內(nèi)用痰過(guò)已知對(duì)李臟器有損薪害的藥物嫁者；或在敏給予試驗(yàn)悠藥物前2周內(nèi)有用伯藥史者；山或目前正逐在使用藥艦物者；在試驗(yàn)識(shí)開(kāi)始前2個(gè)月內(nèi)槐參加過(guò)是其他試劍驗(yàn)者；不能和炊研究者施很好溝彈通者（尾語(yǔ)言障遍礙、智箭力發(fā)育嬸不良或講腦功能級(jí)受損者憂）；在緊急情描況下不能肢取得聯(lián)系皇者；由研究廳者判斷行為不適虜合參加帆本試驗(yàn)圓的受試獨(dú)者。用法用撕量采用隨膠機(jī)的服目藥順序猜，受試院者在第誰(shuí)一研究拍周期早械晨空腹量單次口掘服試驗(yàn)謀制劑或錄參比制似劑，在晴第二研柔究周期哭交叉服喉用參比牌制劑或銹試驗(yàn)制斗劑，劑罷量均為5mg，兩次斑服藥間謎隔至少1周。生物等毛效性評(píng)炸價(jià)指標(biāo)主要判下定指標(biāo)目：Cmax和AUC0-24丟h；參考指哈標(biāo)：AUC0-∞和Tmax安全性煙評(píng)價(jià)指證標(biāo)不良事件冰（癥狀）蹦；不良事?tīng)考z矩查）；生命體征坑（血壓、帶心率）；嚴(yán)重不姥良事件仆。評(píng)價(jià)方練法藥代動(dòng)璃力學(xué)：戀使用Win尖Non紛Lin摔Ve烘rsi廊on合5.0程序的膊非房室泄模型法匠計(jì)算試型驗(yàn)制劑墓和參比去制劑的隨藥代動(dòng)逐力學(xué)參畜數(shù)Cmax，Tmax，AUC0-2扮4h，AUC0-∞，t1/2。生物等效功性分析：貢藥代動(dòng)力裙學(xué)參數(shù)Cmax，AUC0-2娛4h，AUC0-∞的生物兇等效性糧分析采里用WinN夾onLi世n程序中桑的Bioe姐quiv叼alen鄉(xiāng)豐ceW亞izar窯d模塊；Tmax采用SPS共S軟件Wilc表oxon檢驗(yàn)法進(jìn)類行分析。安全性分飼析：將即試驗(yàn)過(guò)程腳中觀察到相的不良事修件及實(shí)驗(yàn)東室檢查異勺常的研究彈前后的數(shù)弟據(jù)進(jìn)行列大表描述。偉對(duì)生命體論征（血壓般、心率）鼠、實(shí)驗(yàn)室弟檢查值進(jìn)拾行描述性墓統(tǒng)計(jì)和列零表分析，上按給藥組順檢查時(shí)期斬計(jì)算出平雕均值、標(biāo)煮準(zhǔn)差、最吼小值、最壟大值。試驗(yàn)結(jié)真果受試者人母口學(xué)資料受試者年齡（y）身高（m）體重(kg）體重指數(shù)(kg/m2)mean±sd35.0±2.91.68±0.0663.5±6.022.4±1.3范圍28~381.60~1.8151~7619.9~24.0主要藥輕代動(dòng)力通學(xué)參數(shù)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)試驗(yàn)制劑參比制劑Cmax(ng/mL)Tmax*(h)AUC0-24h(ng*h/mL)AUC0-∞(ng*h/mL)t1/2(h)F（%）*Tmax以中位數(shù)（最小值，最大值）表示單次口服熄試驗(yàn)制劑棚和參比制耽劑后平均由血漿濃度(mea濤n±sd福)-時(shí)間曲線乎圖主要藥代目動(dòng)力學(xué)參隸數(shù)方差分切析

參數(shù)變異來(lái)源AUC0–24hAUC0–∞Cmax

F值P值F值P值F值P值制劑間1.120.29940.940.3407