飼料中總磷的測定

水產(chǎn)動物

營養(yǎng)與飼料飼料中總磷的測定一、適用范圍：本方法適用于配合飼料、濃縮飼料、預(yù)混合飼料和單一飼料（磷酸鹽除外）。二、方法原理將試樣中的有機(jī)物破壞，使磷游離出來，在酸性溶液中，用釩鉬酸銨處理，生成黃色的(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO3，在波長420nm下進(jìn)行比色測定。三、試劑：本標(biāo)準(zhǔn)中所用試劑，除為特殊說明外，均為分析純。實驗室用水為蒸餾水或同等純度的水。鹽酸：1+1水溶液硝酸釩鉬酸銨顯色劑磷標(biāo)準(zhǔn)液：將磷酸二氫鉀在105℃干燥1h，在干燥器中冷卻后稱取0.2195g溶解于水，定量轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用稀釋至刻度，搖勻，即為50μg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)液。四、儀器設(shè)備1.

實驗室用樣品粉碎機(jī)或研缽2.分樣篩：孔徑0.45mm（40目）3.分析天平：感量0.0001g4.分光光度計：有10mm比色池，可在420nm測定吸光度5.高溫爐：可控溫度在550℃±20℃6.瓷坩堝：50ml7.容量瓶：50ml、100ml、1000ml8.刻度移液管：1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10ml9.可調(diào)溫電爐：1000W分析天平:感量0.0001g分光光度計:有10mm比色池，可在420nm測定吸光度高溫爐:可控溫度在550℃±20℃可調(diào)溫電爐瓷坩堝:50ml容量瓶移液管試樣制備：取有代表性試樣，粉碎至0.44mm（40目），用四分法將試樣縮分至200g裝入密封容器，防止試樣成分變化或變質(zhì)。五、測定步驟（一）坩堝的洗滌、烘干、冷卻干法：[不適用含Ca(H2PO4)2的飼料]：坩堝的洗滌干凈、烘干（溫度1050C）1小時，冷卻至室溫。（二）試樣的稱取、炭化、灰化1.稱取風(fēng)干樣品：（1）天平預(yù)熱（20分鐘）、水平、靈敏度和零點的調(diào)。（2）稱量空坩堝質(zhì)量，準(zhǔn)確至0.0002g。記錄空坩堝質(zhì)量（m0）。1.稱取風(fēng)干樣品：（3）樣品約重：粗天平稱取2克左右風(fēng)干樣品。（4）將2g左右風(fēng)干樣品于坩堝內(nèi)，稱量稱準(zhǔn)至0.0002g。記錄坩堝風(fēng)干樣品重（m1）。計算風(fēng)干樣品重（m）＝（坩堝風(fēng)干樣品重）－空稱樣皿重=m1-m0

2.樣品的炭化（1）將帶有樣品的坩堝置于電爐上，蓋打開少許。

（2）調(diào)整電爐的溫度為低溫，小火加熱（白煙）至無煙（禁止高溫，忌有黑煙，），待煙冒完后，然后升溫灼燒至樣品無煙，即為炭化完畢

3.樣品的灰化：（1）坩堝微開蓋將其放入高溫電爐中（2）調(diào)整高溫電爐的溫度550℃。（3）灰化550℃左右，進(jìn)行灰化3-4小時，直至呈灰白色，無碳粒。（4）切斷電源，關(guān)閉高溫電爐，待溫度降到2000C以下，借助坩堝鉗取出，空氣中冷卻1分鐘，干燥器冷卻30分鐘。（三）試樣分解液制備容量瓶和漏斗洗滌干凈、編號。玻棒洗滌干凈。在盛灰分的坩堝中加入10ml鹽酸溶液（10ml刻度吸管移?。?。加數(shù)滴濃硝酸，在電爐上小火煮沸。將此溶液借助漏斗無損轉(zhuǎn)移到250ml容量瓶中，用蒸餾水沖洗坩堝幾次，洗液轉(zhuǎn)入容量瓶中，冷卻到室溫，用蒸餾水定容，搖勻即為樣品分解液。（四）磷標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：準(zhǔn)確移取磷酸標(biāo)準(zhǔn)液0ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻。（四）磷標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制常溫下放置10min以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長下，用分光光度計測定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（五）試樣的測定：準(zhǔn)確稱取試樣分解液1~10ml（含磷量50~750μg）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長下，用分光光度計測定各溶液的吸光度。用標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含磷量（X值）。測定結(jié)果的計算：樣品中總磷的含量（P%）按下式計算：

XV1P=——————×——×100％

m×106V2式中：X—由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液總磷含量（μg）m——試樣的質(zhì)量（g）V1——試樣分解液定容的體積（ml）V2——測定時移取的試樣分解液體積（ml）★重復(fù)性：試樣取兩個平行樣其算術(shù)平均值為結(jié)果總磷含量低于0.5%，允許相對偏差不超過10%總磷含量大于或等于0.5%，允許相對偏差不超過3%相對偏差=│測定值-平均值│/平均值磷測定記錄表樣品名稱魚粉樣品號12坩堝號坩堝重（克）坩堝+樣品重（克）樣品重（M，克）試樣分解