酵母菌形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的觀察_第1頁
酵母菌形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的觀察_第2頁
酵母菌形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的觀察_第3頁
酵母菌形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的觀察_第4頁
酵母菌形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的觀察_第5頁
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文檔簡介

酵母菌形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的觀察第一頁,共23頁。目的要求觀察酵母形態(tài),加深理解酵母的形態(tài)特征美藍(lán)染色鑒定酵母的死活學(xué)習(xí)使用目鏡測微尺和鏡臺測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。學(xué)習(xí)使用血球記數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。第二頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)材料顯微鏡、目鏡測微尺、鏡臺測微尺、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、蓋玻片、美藍(lán)、無菌滴管、吸水紙、擦鏡紙、香柏油、擦鏡油。第三頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)程序5-1:測定微生物的大小5-2:測定微生物數(shù)量5-3:酵母的形態(tài)特和美藍(lán)染色鑒定酵母的死活第四頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-1:酵母的形態(tài)特和美藍(lán)染色鑒定酵母的死活

第五頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-1a:Yeasts(unicellularfungi)Division:buddingDonotformfilamentsSomeformfilamentsSomecanmate.第六頁,共23頁。蜉蝣體表面的酵母菌第七頁,共23頁。面包酵母出芽生殖中的啤酒酵母第八頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-1:測定微生物的大小第九頁,共23頁。

測定的工具:目鏡測微尺鏡臺測微尺第十頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-1實(shí)驗(yàn)程序(測定微生物的大?。┠跨R測微尺的校正:在高倍鏡下,看清鏡臺測微尺的刻度后,轉(zhuǎn)動目鏡,使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度平行,移動推動器,使目鏡測微尺的0點(diǎn)與鏡臺測微尺的某一刻度重合,然后,仔細(xì)尋找兩尺第二個(gè)完全重合的刻度。計(jì)算兩刻度間目鏡測微尺的格數(shù)和鏡臺測微尺的格數(shù)。由于鏡臺測微尺的刻度每格長10μm,所以可得:目鏡測微尺每格長度(μm)=(鏡臺測微尺格數(shù)×10)/目鏡測微尺格數(shù)注意:校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件(特定的接物鏡、接目鏡、鏡筒長度等)進(jìn)行,而且只能在這特定的情況下才可重復(fù)使用。菌體大小的測定:取下鏡臺測微尺,將細(xì)菌染色標(biāo)本置于載物臺上,然后在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的長和寬。第十一頁,共23頁。第十二頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-2:測定微生物數(shù)量

第十三頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-2實(shí)驗(yàn)程序(測定微生物數(shù)量)方法:活菌計(jì)數(shù)法——平板菌落計(jì)數(shù)法;總菌計(jì)數(shù)法——血球計(jì)數(shù)板或霍瑟(PeroffHausser)細(xì)菌計(jì)數(shù)板(二者原理和部件相同,只是厚薄不同而已)。

第十四頁,共23頁。第十五頁,共23頁。第十六頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ1(測定微生物數(shù)量)

1.取清潔無油的血球計(jì)數(shù)板,在計(jì)數(shù)室上面加蓋玻片。2.取酵母菌液,搖勻,用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴,使菌液自行滲入,計(jì)數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。3.

靜止5min后,用低倍鏡觀察并將計(jì)數(shù)室移至視野中央。

4.在高倍鏡下計(jì)數(shù):隨機(jī)計(jì)數(shù)五個(gè)中格的平均值,然后求得每個(gè)中格的平均值。乘上16(或25)就得出一大格中的總菌數(shù),最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。第十七頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ2

5.計(jì)算方法:

6.注意事項(xiàng):壓在方格線上的菌體,以壓在底線和右側(cè)線上的菌體計(jì)入本格內(nèi);遇到有芽體的酵母時(shí),若芽體和母體同等大,就按單個(gè)酵母計(jì)數(shù)。

7.計(jì)數(shù)完畢后,血球計(jì)數(shù)板要立即清洗干凈,并用吸水紙吸干,最后用擦鏡紙擦干凈,并放回盒內(nèi)。

(X1+X2+X3+X4+X5)5*25(或16)*10*1000*稀釋倍數(shù)

酵母菌細(xì)胞數(shù)/mL=第十八頁,共23頁。實(shí)驗(yàn)5-3:美藍(lán)染色死活細(xì)胞鑒定美藍(lán)為無毒染料,其氧化型呈藍(lán)色,還原型無色。通過美藍(lán)染色,檢驗(yàn)細(xì)胞的還原能力?;罴?xì)胞還原能力強(qiáng),在特定時(shí)間內(nèi)將美藍(lán)還原為無色。老化、死亡細(xì)胞呈藍(lán)色、淡藍(lán)色。第十九頁,共23頁

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